INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL
BITÁCORA DE LA PRÁCTICA:” REACCIÓN DE TRANSAMINACIÓN”

Castillo Briones Horus Emanuel

Escobar Ortega Jacobo Eduardo
Grupo: 3IV1

catalizadas por tales enzimas son

INTRODUCCIÓN.
Una reacción de transaminación es la
primera etapa de la desasimilación de
los aminoácidos, y sirve para encauzar
los grupos amino hacia el α-
cetoglutarato, para transformarlo en
glutamato que posteriormente será
sometido a una reacción de
desaminación oxidativa, catalizada por
el glutamato deshidrogenasa,
formándose un ion amonio que será
utilizado para generar urea.
fácilmente reversibles (su constante
de equilibrio, de hecho, está muy
cercana a 1).
Una reacción de transaminación es la
primera etapa de la desasimilación de
los aminoácidos, y sirve para encauzar
los grupos amino hacia el α-
cetoglutarato, para transformarlo en
glutamato que posteriormente será
sometido a una reacción de
desaminación oxidativa, catalizada por
el glutamato deshidrogenasa,
formándose un ion amonio que será
utilizado para generar urea

La reacción catalizada por las OBJETIVOS.

transaminasas es la siguiente:

Cuantificar la actividad de la
Aminoácido (1) + α-cetoácido (1) <----- transaminasa ALAT/TGP presente en
---> α-cetoácido (2) + aminoácido (2) un extracto crudo de hígado
empleando, un método cromatográfico
y otro espectrofotométrico.
En las células existen muchos tipos de
transaminasas que utilizan el α-
cetoglutarato como aceptor del grupo
amino, pero se diferencian entre ellas
por la especificidad respecto al
aminoácido utilizado. Las reacciones
Parte Experimental.

Resultados
TUBO ABS CONCENTRACION

5 0.025 0.0912
10 0.115 0.2554
15 0.126 0.2755
20 0.186 0.3850
525 0.285 0.5656

GRAFICANDO
 X=(Y+0.0691)/0.548
UAT=4.5803
Discusión
Está práctica se enfocó en la
cuantificación de la actividad
enzimática de TGP (Transaminasa
Glutámico Pirúvica), ya que el
aminoácido (Alanina), reacciono
cediendo su grupo amino al cetoácido
empleando: ácido α-cetoglutárico,
dando como productos: Ácido
Glutámico y Piruvato, esto se demostró
gracias a que al adicionar a todos los
tubos regulador de fosfatos
Se usó Alanina y ácido α-cetoglutárico
como reactivos, y extracto crudo de
hígado de rata que contenia TGP como
cofactor y fosfato de piridoxal,
incubandolo a 37°C, todo esto para
imitar las condiciones biológicas, y se
detuvo la reacción con Alcohol 96°; la
eliminación de los grupos α-amino son
catalizadas por las enzimas
transaminasas
En lla cromatografía se adicionaron
muestras de 5, 10, 15, 20 y 25 μmoles de
una preparación de ácido glutámico,
que al ser nuestro producto esperado
se utilizó para hacer la curva tipo y
calcular la cantidad de glutamato
producida por la enzima.
La cromatografía nos mostró el
comportamiento de corrimiento de
cada muestra dependiendo de la
cantidad de Glutamato, que el diluyente
es capaz de desplazar, así como de
utilizar las posteriores manchas de
azul de Ruhemann, producto del
revelado del cromatograma con
ninhidrina en etanol (de nuevo este
reactivo por su fácil volatilización) y la
lectura en el espectrofotómetro de
cada muestra para la curva tipo y la
determinación molar de Glutamato en
el tubo testigo y problema.
El Rf aumentaba a medida que
aumentaba la concentración de
glutamato en las muestras de
concentración conocida, y el Rf del
problema era mayor que el del testigo,
se esperaba que en la producción de
glutamato en el testigo fuera nula
debido a la falta del otro reactivo, se
sabe que en el extracto crudo de hígado
están contenidas muchas más
enzimas, compuestos orgánicos y
materia biológica, lo cual pudo
favorecer la reacción, es gracias a esto
que para la obtención de μmoles reales
producidos por la actividad de
transaminasa se restan los μmoles del
tubo testigo con los μmoles del tubo
problema.
Se comprobó el efecto sobre la Alanina
y el acido α-cetoglutarico. Sabiendo
que la transferasa en la alanina
transfiere su grupo α-amino, al
carbono α de la α-cetoglutarato con la
intervención del piridoxal fosfato como
coenzima, formando así el glutamato y
el α-cetoalaninato.
El tubo problema determinara la
actividad enzimática con los sustratos
, el testigo nos dirá la concentración de
alanina que reacciono y que no
reacciono, no existen gran diferencia
entre la alanina y el testigo.
Panamericana; España; 2007;
pp. 508-509
Viejar. 2005. Prácticas de
Bioquímica Descriptiva. 2da
Edición. Editorial UNISON,
Méxicol. 152-153 pp.

Las muestras del papel Whatman, se

fragmentan para cuantificar la
concentración de los analitos por el Mckee T. Mckee J. 2006.
método espectrofotométrico. “Bioquímica: las bases
moleculares de la vida.
Editorial. McGrawHill, 5ta
edición. 259-260 pp
Pregunta Extra
La GPT y la GOT son otras Jan Koolman, Klaus-Heinrich
transaminasas las cuales tienen una Röhm. 2005. Bioquímica: texto y
gran importancia clínica ya que ayudan atlas, Editorial Médica
a indicar la causa de ciertas Panamericana, 488 pp.
enfermedades

Conclusiones
La transferasa, transfiere un grupo
amino de un aminoácido a un α-
cetoglutárico aceptor, dando como
resultado la formación de un nuevo
aminoácido y un cetoácido.
El hígado de rata empleado posee una
gran actividad enzimática que se
refleja gracias a las Unidades
Arbitrarias de Transaminasa

BIBLIOGRAFIA

Voet, D; Voet, J.G; Pratt, W.C;

Gismondi, M.I; Fundamentos de
bioquímica/fundamental of
biochemistry, 2ª ed; Medica