UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS BIOQUÍMICAS Y

BIOTECNOLÓGICAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA BIOTECNOLÓGICA

PRÁCTICA 05

“DEGRADACIÓN DE AMINOÁCIDOS: TRANSAMINACIÓN”

ELABORADO POR:

- Flores Zevallos, Gianeyra Yamilet

- Puma Quito, Marjorie Lizbeth

CURSO:

Prácticas de Bioquímica Aplicada

DOCENTE:

Edilberto Vicente Medina Cabrera

GRUPO 01

IV SEMESTRE

AREQUIPA – PERÚ

2020
 PRÁCTICA 05

DEGRADACIÓN DE AMINOÁCIDOS: TRANSAMINACIÓN

INTRODUCCIÓN
La transaminación es la pérdida indirecta del grupo amino del aminoácido en degradación,
donde no lo libero sino lo transfiero al cetoácido correspondiente. Estas reacciones son
reversibles, pero necesitan ciertos requerimientos. No es de menos recalcar que la mayoría de
aminoácidos, ceden su grupo por transaminación.
Para que la transaminación sea posible es necesario que el piridoxal fosfato (PLP) este presente,
ya que esta posee un grupo aldehído el cual se encarga de recibir el grupo amino de los
aminoácidos hacia el cetoácido.
Las enzimas que se usan son específicas para cada aminoácido. Aunque casi todas usan el par
glutamato si es que se quiere donar el grupo amino o alfa-cetoglutarato si es quiero aceptar el
grupo amino.
Las aminotransferasas importantes son:
- Aspartato Aminotransferasa (AST) antes conocida como Transaminasa Glutamino
Oxalacética (TGO).
- Alanina Aminotransferasa (ALT) antes conocida como Transaminasa Glutámico
Pirúvica (TGP).
Las transaminasas anteriores mencionadas son de interés clínico, debido a que sus niveles en
suero tienen un importante significado. Estas son abundantes en el hígado y corazón, se liberan
cuando los tejidos sufren una lesión, por lo tanto, sus niveles altos en suero puede ser indicativo
de infarto de miocardio, hepatitis infecciosa u otros daños orgánicos.
Las aminotransferasas existen para todos los aminoácidos excepto treonina, serina y lisina.
(Paredes, 2020)

CUESTIONARIO

1. ¿Qué es Rf?
Llamado “Ratio of Front” o Factor de Retención o Relación de Frentes. Es una relación
de distancias, y se expresa como el cociente entre la distancia recorrida por la sustancia
y la distancia recorrida por el disolvente hasta el frente del eluyente.

𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑜

𝑅𝑓 =
𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒

El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra, como el

tipo de adsorbente, eluyente; así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor
de saturación, etc (Facultad de Química de la UNAM, 2018).
 ▪ Sistema1: Hay una transaminación
porque se encuentra el glutamato y
la alanina.
▪ Sistema2: Hay una transaminación
de la alanina y alfa cetoglutarato ya
que el piruvato se convierte en
alanina.
▪ Sistema 3: Se encuentra una
mancha de aspartato y glutamato .
▪ Sistema 4: Se ve que hay una
desnaturalización.

2. ¿Cuáles son las reacciones catalizadas por TGO y TGP?

- TGO transfiere el grupo amino del aspartato al alfa-cetoglutarato transformándolo
en glutamato y el grupo ceto transforma el aspartato en oxalacetato.
- TGP quita a la alanina su grupo amino y se lo transfiere al alfa cetoglutarato.

(Medina, 2020)

3. ¿Cuál es el objeto del sistema 2?

En el sistema II se demuestra que la reacción reversible no se da, debido a que las
condiciones no son adecuadas (Medina, 2020).

4. Explique el mecanismo que permite la separación de sustancias por cromatografía

en capa fina
El mecanismo de separación de mezclas de moléculas mediante la cromatografía de
capa fina se basa en el principio del reparto entre dos fases.
Según (Cromatografía en Capa Fina, 2020):

En general, una cromatografía se realiza permitiendo que la mezcla de moléculas

que se desea separar (muestra) interaccione con un medio o matriz de soporte que
se denomina fase estacionaria. Un segundo medio (la fase móvil) que es inmiscible
con la fase estacionaria se hace fluir a través de ésta para "lavar" (eluír) a las
moléculas en la muestra. Debido a que las distintas moléculas en la muestra
presentan diferente coeficiente de reparto, la fase móvil "lavará" a los distintos
componentes con diferente eficiencia, de modo que aquellos que "prefieren
disolverse" en la fase móvil serán eluídos más rápido que los que sean
preferencialmente solubles en la fase estacionaria.

5. ¿Se desprende amoniaco libre en el medio durante una reacción de

transaminación? Fundamente su respuesta
Cuando ocurre la transaminación lo que se desamina es el glutamato formando el α-
cetoglutarato y ese amino que se pierde puede ingresar al ciclo de la urea y realizar
dicho proceso.
 6. Pronostique el efecto de una deficiencia de vitamina B6 sobre la degradación de
los aminoácidos. ¿La degradación de los 20 aminoácidos sería afectada?
Lo que pasaría es que pueda afectar la degradación de aminoácidos, porque la enzima
TGP y TGO usan como cofactor a esta vitamina B6.

9. ¿Cuál será la distribución celular de la TGO y TGP?

• TGO: Se encuentra en isoenzimas citosólicos y mitocondriales del
hígado, musculo esquelético y cardiaco, riñón, páncreas, pulmones, leucocitos,
y glóbulos rojos.
• TGP: Se encuentra en enzima citosólica que se encuentra en altas
concentraciones en el hígado.

14. Si se administra glucosa con C14 a un animal, los carbonos marcados se

incorporarán en una proteína. Señale algunas secuencias de reacciones que
permitan explicar este fenómeno.
Sabemos que la glucosa parte del ácido pirúvico, por lo tanto, si introducimos glucosa
al C14 lo que pasara es que la insulina que se encuentra en exceso pasa a la sangre
("DEGRADACIÓN DE AMINOÁCIDOS: TRANSAMINACIÓN", 2018).

15. Si se utilizara leucina y α-ceto glutarato para estudiar la transaminación; ¿qué

productos se podría identificar? ¿Qué nombre propondría para la enzima
involucrada?
Leucina + α- cetoglutarato α- cetometilbutarato + glutamato

16. ¿Es factible la identificación de cetoácidos mediante cromatografía? ¿De qué

manera?
Nos ayuda a identificar si hay cetoácidos, siempre y cuando los Rf corresponden al
estándar ("DEGRADACIÓN DE AMINOÁCIDOS: TRANSAMINACIÓN", 2018).

INTERROGANTES BIOQUÍMICAS

1. ¿Qué papel desempeña el piridoxal fosfato en las reacciones de transaminación?

¿Cuál es el grupo funcional del cofactor? Explique su mecanismo
El piridoxal fosfato (PLP) trabaja como una coenzima (Bioquímica-2º F., 2010). El
grupo α-amino del aminoácido sustrato desplaza al grupo ε-amino de la lisina ubicada
en el sitio activo en un proceso conocido como "transaldiminación" (Carbonero, s.f.).

2. ¿Participan las reacciones transaminación en la biosíntesis de aminoácidos? Cite

algunos ejemplos.
Si, ya que es la transferencia de un grupo amino desde un aminoácido donador a un
cetoácido ("DEGRADACIÓN DE AMINOÁCIDOS: TRANSAMINACIÓN", 2018).
 3. ¿Qué otro método, además del que se usó en esta práctica, podría emplear para
detectar los productos de la reacción de transaminación?
• HPLC
• Cromatografía en capa fina
• Espectrofotometría

7. ¿Qué pensaría de un ensayo en el cual una muestra biológica como el suero se

mezclará con aspartato, alfa-cetoglutarato, NADH y un exceso de malato
deshidrogenasa? ¿Qué idearía para determinar la actividad de TGP por un
método similar?
El Aspartato cataliza la transferencia del grupo amino desde el L –aspartato a la α-
cetoglutarato dando oxalacetato y el L-glutamato.

BIBLIOGRAFÍA

1. Bioquímica-2º F. (2010). México. Retrieved from

http://www3.uah.es/quimica/bioTejedor/bioquimica_quimica/R-T20-1-Rgenerales.pdf
2. Carbonero, P. Metabolismo de aminoácidos (3rd ed.). Retrieved 21 November 2020,
from: http://oa.upm.es/54762/1/METABOLISMO.pdf
3. Cromatografía en Capa Fina. Depa.fquim.unam.mx. (2020). Retrieved 21 November
2020, from http://depa.fquim.unam.mx/proteinas/estructura/ChrTLC.html.
4. DEGRADACIÓN DE AMINOÁCIDOS:TRANSAMINACIÓN. (2018). Retrieved 24
November 2020, from https://www.studocu.com/pe/document/universidad-catolica-
de-santa-maria/bioquimica/informe/practica-no-3/10160332/view

5. Facultad de Química de la UNAM. (2018). Manual de prácticas. Retrieved from

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/6.-CROMATOGRAFIA_26249.pdf
6. Medina Cabrera, E., 2020. Guía De Prácticas De Bioquímica Aplicada. Arequipa.
7. Paredes Fuentes, J. (2020). Catabolismo de aminoácidos. Presentation, Microsoft
Teams.