Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional De Ciencias Biológicas

Laboratorio De Bioquímica
PRÁCTICA REACCIÓN DE TRANSAMINACIÓN Y SU
REACONOCIMIENTO POR MEDIO CROMATOGRÁFIA
EN PAPEL
Axel Jair García Sánchez
Ariel Emanuel Flores Escoto
3IM1 Sección II

Objetivos

• Cuantificar la actividad de la transaminasa

presente en un extracto crudo de hígado. Reactivo Función
• Calcular la actividad de la enzima en
unidades de transaminasa. Regulador de Provee el pH a la
fosfatos solución porque esta
ocurre en un medio
alcalino
Tablas
Alanina Es el donador del
grupo alfa amino

Ácido alfa - Es el receptor del

Tubo Frente del Frente de Rf cetoglutarato grupo alfa amino
solvente muestra
Alcohol Detiene la reacción
1 42.5 18 0.4235 porque cambia la
constante dieléctrica
2 42.7 17 0.3981
Ninhidrina Hace aparecer las
3 42.3 17.5 0.4137 manchas en la
cromatografía
4 42.2 17.2 0.4075

5 41.9 17.2 0.4105

Micromoles acido glutámico
Alanina 39 25.2 0.6461

Testigo 39.8 25.3 0.6356

Problema 40.9 18.7 0.4572

 Concentración acido glutámico problema y
testigo

Curva tipo
 Discusiones
Cálculos para obtener los valores en el
testigo y el problema Se llevo a cabo una reacción de transaminación
donde se comprobó la reacción de la alanina α-
glutarato bajo la acción de la enzima alanina
a transaminasa, de esta forma de obteniendo
0.14 como productor glutámico y piruvato.
0.12 y = 0.2197x + 0.0021
R² = 0.9882
0.1 Para comprobar la presencia de estos se realizo
0.08 la cromatografía en la cual pudimos comprobar
0.06
Para revelar el cromatograma se utilizó como
0.04
0.02
revelador el solvente ninhidrina en etanol, el
0 cual arrojo unas manchas de color morado y asi
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 pudimos observar la presencia de glutámico
debido a que el corrimiento se encontraba a la
misma altura y en el caso del problema
podemos observar la separación de la alanina
debido a la altura del corrimiento de las
manchas que se comparan con las del
glutámico en diferentes concentraciones; en el
caso del testigo se observó una mancha de
glutámico muy débil o tenue esto se debe a su
baja concentración que se le aplico.

Con la elaboración de la curva tipo, con este

podemos llevar a cabo el cálculo de la actividad de
la enzima transaminasa en UAT para corroborar que
nuestra reacción se llevó a cabo correctamente.
También pudimos observar que la concentración de
glutámico presente en el problema es casi menor a
la del tubo que contiene 25 µL de glutámico,
mientras que el tubo testigo contiene la misma
cantidad en µmoles de glutámico que el tubo con 10
µL de glutámico.

Conclusiones
• Estas reacciones requieren la coenzima
piridoxal-s´ fosfato que procede de la
piridoxina.
• El mecanismo de la reacción consiste en
que el primer sustrato debe abandonar el
sitio activo antes de que el segundo pueda
entrar.
• El glutamato toma la función del donador
del grupo amino
• Los grupo alfa amino se transfieres a un
alfaaminoacido lo cual es la base de todo lo
que sucede en la practica

Bibliografía

• E. Conn Eric, “Bioquímica fundamental”

Universidad de California, Editorial
Limusa, 2001, México D.F.
• Mathews C. 1992. Bioquímica, 2da edición,
Ed. McGraw-Hill

• Nelson D.L., Cox M.M., “Lehninger.

Principios de Bioquímica” 3a. Ed.
Omega

• Donald Voet, Judith g. Voet

fundamentos de Bioquimica, ed. medica
panamericana