PRCTICA No.

1 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE GLUCOSA EN SUERO

INTRODUCCIN La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el 1 pncreas. La glucosa es un azcar que es utilizado por los tejidos como forma de energa al combinarlo con el oxgeno de la respiracin. Cuando comemos el azcar en la sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por el pncreas (islotes pancreticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea utilizada en forma de glucgeno, aminocidos, y cidos grasos. Cuando la glucosa en sangre est muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagn que hace lo contrario y mantiene los 2 niveles de glucosa en sangre. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situacin se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos rganos. Esta es la razn principal por la que se produce aumento 1 de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que tambin la provocan. El tejido ms sensible a los cambios de la glucemia es el cerebro, en concentraciones muy bajas o muy altas 2 aparecen sntomas de confusin mental e inconsciencia. El mantenimiento de la glucemia, o concentracin plasmtica de glucosa, en los organismos superiores es fundamental para el funcionamiento de todos los rganos, al ser la glucosa un metabolito energtico principal. La coordinacin de los procesos metablicos implicados en este cometido se lleva a cabo por la relacin insulina/glucagn. La ingestin de glucosa o sustancias que la produzcan (almidn, fructosa, galactosa, protenas, pero no grasas) va seguida, en las personas sanas, por un aumento de la glucosa en sangre. Este aumento origina la puesta en marcha del mecanismo regulador: aumento de la utilizacin de glucosa (por gluclisis, entre otras), aceleracin de la glucogenognesis y disminucin de la glucogenlisis; todo ello ocurre principalmente mediante la secrecin de insulina, una hormona pancretica de tipo polipeptdico. En el caso de que la produccin de insulina est disminuida, la glucosa no puede ser utilizada por las clulas, lo cual ocasiona niveles elevados de glucosa en sangre (hiperglucemia); as ocurre en las personas que sufren diabetes del tipo denominado "dependiente de insulina" o "tipo 1". El diagnstico de la diabetes dependiente de insulina es sencillo y se basa en antecedentes, sntomas clnicos y comprobacin de una hiperglucemia significativa. Las determinaciones de glucemia basal permiten el diagnstico de la diabetes, pero constituyen valores puntuales y aislados en el tiempo que no reflejan los niveles medios de glucemia ni la duracin de la misma. Por lo tanto, es necesario disponer de pruebas que indiquen el grado del control metablico de la enfermedad a corto y medio plazo. Estas pruebas estn basadas en el fenmeno de unin de la glucosa a diversas protenas. Esta glucosilacin tiene lugar por una reaccin no enzimtica y afecta tanto a protenas de vida media corta (albmina, hemoglobina, etc.) como de vida media larga (colgeno, mielina, etc.). La intensidad de la glucosilacin depende de varios factores, siendo los ms importantes los niveles medios de glucemia, la duracin de la hiperglucemia, la vida media de las protenas y la concentracin de stas. Como consecuencia, la medida de la glucosilacin proteica constituye un buen marcador bioqumico del grado de compensacin del enfermo diabtico.

Anlisis de glucosa en sangre El anlisis de la glucosa Mide la cantidad (concentracin) de glucosa presente en la sangre y sobre todo se realiza para estudiar la posible presencia de una diabetes mellitus o sacarina. Como es una enfermedad muy compleja y con grandes repercusiones de salud es un anlisis muy discriminativo y til que se realiza de forma bastante rutinaria. Como se ha indicado, la diabetes dependiente de insulina cursa con un aumento de la concentracin de glucosa en sangre (glucemia), que se produce de manera repentina y la hiperglucemia es severa. Una hiperglucemia superior a 140 mg/dL detectada en ms de una ocasin en ayunas es un ndice de posible diabetes, diagnstico que debe confirmarse con otras pruebas. La determinacin de glucosa

sangunea es una prueba muy frecuente en bioqumica y se puede llevar a cabo tanto por mtodos qumicos como enzimticos, siendo estos ltimos los ms especficos. Hay dos tipos de mtodos qumicos: a) Reductimtricos, que se basan en la capacidad reductora de la glucosa. Debido a la presencia en la muestra de otros compuestos reductores, estos mtodos dan cifras superiores a las correspondientes a la glucosa verdadera. b) Furfurlicos: se basan en la capacidad de la glucosa para formar furfural al sufrir deshidratacin en un medio cido. Un ejemplo es el mtodo que emplea o-toluidina. En cuanto a los mtodos enzimticos: a) Mtodo de la hexoquinasa: emplea las enzimas hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. Por cada molcula de glucosa se forma una de NADPH, que puede medirse espectrofotomtricamente a 340 nm. Es el mtodo de referencia recomendado por las organizaciones internacionales. b) Mtodo de glucosa oxidasa y peroxidasa (GOD-POD): es el que se utiliza en esta prctica para medir los 3 niveles de glucosa sangunea de ratas diabticas y controles. Tcnica Para realizar este anlisis se precisa estar en ayunas al menos las 6 horas previas. Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clnica, hospital) pero en ocasiones se realiza en el propio domicilio del paciente. Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en la flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra utilizar guantes sanitarios, una aguja (con una jeringa o tubo de extraccin) . Le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas retengan ms sangre y aparezcan ms visibles y accesibles. Limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin localizar la vena apropiada y acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor. Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizar una aspiracin (mediante la jeringa o mediante la aplicacin de un tubo con vaco). Al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodn o similar para favorecer la coagulacin y se le indicar que flexione el brazo y mantenga la zona presionada con un esparadrapo durante unas horas. Problemas y riesgos: 1. 2. 3. La obtencin mediante un pinchazo de la vena puede producir cierto dolor. La posible dificultad en encontrar la vena apropiada puede dar lugar a varios pinchazos Aparicin de un hematoma (moratn o cardenal) en la zona de extraccin, suele deberse a que la vena no se ha cerrado bien tras la presin posterior y ha seguido saliendo sangre produciendo este problema. Puede aplicarse una pomada en la zona. Inflamacin de la vena (flebitis), a veces la vena se ve alterada, bien sea por una causa meramente fsica o por que se ha infectado. Se deber mantener la zona relajada unos das y se puede aplicar una pomada en la zona. Si el problema persiste o aparece fiebre deber consultarlo con su mdico.

4.

Valores normales de glucosa en la sangre: Los valores normales son entre 70 y 105 mg por decilitro. En los nios pequeos se aceptan valores de 40 a 100 mg/dl. Los valores ms bajos de 40-50 mg/dl se consideran bajos (hipoglucemia). 2 Los valores ms altos de 128 mg/dl se consideran altos (hiperglucemia). Factores que intervienen: Muchas formas de estrs (traumatismos, infartos, anestesia general,..) pueden aumentar los niveles de glucosa en sangre de forma pasajera. La cafena tambin puede aumentarlos

Frmacos: algunos pueden aumentar los niveles de glucosa en sangre u orina, otros pueden disminuir los niveles en sangre y otros pueden interferir en los resultados obtenidos con las tiras reactivas para medir la 1 glucosuria (antidepresivos, antihipertensivos, hormonas femeninas, etc...) El alcohol y analgsicos pueden disminuirla Los tratamientos con sueros en vena, ya que contienen dextrosa (azcar) Embarazo Patologas relacionadas: Puede aparecer la glucemia aumentada (hiperglucemia) en: Diabetes mellitus Enfermedades renales Feocromocitoma Hipertiroidismo Glucagonoma Puede aparecer la glucemia disminuida (hipoglucemia) en: Dietas excesivas Enfermedades hepticas Enfermedad de Addison Exceso de insulina en diabticos

Pancreatitis aguda Sndrome de Cushing Tumores de pncreas Otras situaciones antes explicadas (estrs, sueros, embarazo, medicamentos)

Hipopitituarismo Hipotiroidismo Insulinoma2

Principio del Mtodo de Determinacin cuantitativa de glucosa IVD (Spinreact) La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidacin de glucosa a acido glucnico. El perxido de hidrogeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor cromo gnico de oxigeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD): Reaccin: -D-Glucosa + O2 + H2O H2O2 + Fenol + Ampirona Fundamento: En el mtodo GOD-POD, en un primer paso la glucosa oxidasa cataliza la oxidacin de la Dglucosa a cido D-glucnico con formacin de perxido de hidrgeno. ste es utilizado por la peroxidasa para oxidar a la 4aminofenazona y al fenol, dando lugar a una quinonaimina coloreada. La intensidad de color ser proporcional a la concentracin de glucosa presente inicialmente. (En ocasiones se utilizan otros sustratos en lugar de 4aminofenazona+fenol, tales como o-dianisidina, guayacol y ABTS.) 3 Esquema de la reaccin: Significado Clnico La glucosa es la mayor fuente de energa para las clulas del organismo, la insulina facilita la entrada de glucosa en las clulas. La diabetes mellitus es una enfermedad que cursa con una hiperglucemia, causada por un dficit de insulina. El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clnicos y de laboratorio
GOD

Acido glucnico + H2O2 Quinona + H2O

POD

MATERIAL: 4 sistemas vacutainer (aguja y jeringa) 4 ligaduras 4 tubos vacutainer con heparina 4 tubos vacutainer sin heparina 1 gradilla 4 tubos de ensaye (13x100ml) Equipo: Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 505nm. Cubetas de 1,0 cm de paso de luz Muestras: Suero libre de hemlisis (El suero debe separarse lo antes posible del coagulo) *Estabilidad: La glucosa en suero o plasma es estable 3 das a 2-8C Reactivos: R1 Tampn R2 Enzimas GLUCOSE CAL Conservacin y estabilidad: Todos los componentes del Kit. son estables , hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8 C ,protegidos de la luz y se evita la contaminacin durante el uso No usar reactivos fuera de la fecha indicada . Indicadores de deterioro de los reactivos: Presencia de partculas y turbidez Absorbancia (A) del blanco a 505nm 0,10 Preparacin: Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( ) el contenido de un vial de R2 Enzimas en un frasco de R1 Tampn. Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido (evitar la formacin de espuma). *Estabilidad: 1 mes en nevera (2-8C) o 7 das de temperatura ambiente (15-25C). PROCEDIMIENTO 1. Condiciones del ensayo: Longitud de ondas505nm (490-550) Cubeta 1cm paso de luz Temperatura37C/15-25C 2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta: Blanco Patrn Muestra RT(ml) 1,0 1,0 1,0 Patrn (L) -10 -Muestra( L) --10 4. Mezclar e incubar 10 minutos a 37 C o 15-20 minutos temperatura ambiente (15-25C). 5. Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al Blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 30 minutos. Clculos: TRIS pH 7,4 Fenol Glucosa oxidasa (GOD) Peroxidasa (POD ) 4-Aminofenazona (4.AF) Patrn primario acuoso de Glucosa 92 mmol/L 0,3mmol/L 15000U/L 1000U/L 2,6 mmol/L 100mg/dL Palillos 2 pipetas Pasteur con bulbo 1 pipeta de 100L 3 pipetas de 1ml

( A) Muestra 100(Conc. patrn) = mg / dL ( A) Patrn

Factor de conversin: mg/dL x 0,0555= mmol/L Control de Calidad:

De glucosa en la muestra

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. (1002120 y 1002210).Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador. Cada laboratorio debe de disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles. Valores de referencia Suero o plasma: 60 - 110 mg/dL =3,33-6.10mmol/L LCR: 60-80 % del valor de sangre *Estos valores son orientativos .Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia. CARACTERISTICAS DEL METODO Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0,04 mg/dL hasta el lmite de linealidad de 500 mg/dL. Si la concentracin es superior al lmite de linealidad, diluir la muestra 1:2 con NaCl 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2 Precisin: Interserie (n=20) Interserie (n=20) 98.4 248 Media (mg/dl) 96.8 241 1.55 3.73 SD 0.81 1.43 1.58 1.50 CV (%) 0.83 0.59 Sensibilidad analtica: 1mg/dL = 0,0036 A Exactitud: Los reactivos de SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x). Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron las siguientes: Coeficiente de correlacin (r):0,99. Ecuacin de la recta de regresin: y = 1,0x + 0,12. Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado. Interferencias: No se han observado interferencias con: hemoglobina hasta 4 g/L, bilirrubina hasta 20 mg /L, creatinina hasta 100 mg /L, galactosa hasta 1 g /L. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinacin de la glucosa. Notas: 1. GLUCOSE CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad. 2. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores sistemticos en mtodos automticos .En este caso, se recomienda utilizar calibradores sricos. 3. Usar puntas de pipetas desechables limpias para su dispensacin. 4. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de este reactivo en distintos analizadores. RESULTADOS Y DISCUSIONES Datos: Muestra del sujeto 6: 0.820 (A) Patrn: 0.868 (A) Clculos:

0.820 100(conc. patrn ) = 94.47 mg / dl 0.868

5

Tabla de determinaciones en glucosa (total de resultados): Glucosa (mg/dl) 70.33 79.39 96.33 405.198 76.45 94.47 101.73 131.9854286 121.0310373 91.70030252
Determinacin cuantitativa de glucosa
140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 SILVIA MIRNA ITZEL JOSUE Sujeto PACO BRAULIO DIANA

Sujeto SILVIA MIRNA ITZEL JOSUE PACO BRAULIO DIANA Media Desviacin estndar Coeficiente de variacin

Glucosa (mg/dl)

Serie1

Lnea de tendencia

Con estos datos el coeficiente de variacin es muy alto, lo que indica que los valores son muy dispersos y la linealidad de la recta se pierden con estos datos debido a que uno de los datos se sale de los parmetros, incluso realizando la grfica de Levey-Jennings por lo cual se eliminar este dato y realizar de nuevo los parmetros estadsticos.
Grfica de Levey Jennings para determinacin de glucosa
547.86 UCL 447.86 495.079

347.86

247.86 Concentracin mg/dl

147.86

CL

131.985

47.86

-52.14

-152.14 LCL -252.14 -231.108

-352.14 1 2 3 4 sujetos 5 6 7

Tabla de determinaciones en glucosa (resultados con eliminacin de un dato): Sujeto SILVIA MIRNA ITZEL Glucosa (mg/dl) 70.33 79.39 96.33

DETERMINACIN CUANTITATIVA DE GLUCOSA

105 100 95 G o a (m l) luc s g/d 90 85 80 75 70 SILVIA MIRNA ITZEL Suje to Determinacin cuantitativa de glucosa (corregido) Lnea de tendencia PACO BRAULIO DIANA

PACO BRAULIO DIANA Media Desviacin estndar Coeficiente de variacin Grados de libertad (n -1) x+ x- 2 x - 2 x + 2 3 x + 3 x - 3 Intervalo de confianza para 2

76.45 94.47 101.73 86.45 12.68945389 14.6783735 5 99.13945389 73.76054611 25.37890778 61.07109222 111.8289078 38.06836167 124.5183617 48.38163833 61.08 - 111.83 (mg/dl)

Al haber eliminado el dato que se sala de los parmetros, el coeficiente de variacin disminuy en un 84%, dndonos un resultado del 14.68% y si tomamos 2 como valor de referencia al 95% de confianza en nuestros valores entonces los valores de confianza para nuestros datos sern de 61.08 111.83 14.68%. Para observar el comportamiento de nuestros datos se realiz el grfico de Levey-Jennings en el cual los datos se observan de la siguiente manera:
Determinacin cuantitativa de glucosa; Grfica de Levey Jennings
135.65 125.65 115.65 105.65 Concentraciones mg/dl 95.65 85.65 75.65 65.65 55.65 LCL 45.65 35.65 1 2 3 Sujetos 4 5 6 48.38 CL 86.45 UCL 124.52

Aplicando las reglas de Schewart: 1.- Acepte la corrida cuando las observaciones estn dentro de los lmites de X +/- 2s. Reporte resultados de pacientes. 2.- Rechace cuando un control exceda X +/- 3s. No reporte. 3.- Rechace cuando dos observaciones de control excedan la misma X+2s o X-2s. No reporte. 4.- Rechace cuando una observacin exceda un lmite de X+2s y la otra X-2s. No reporte. 5.- Rechace cuando las 4 lecturas excedan el mismo X+1s o X-1s. No reporte.

6.- Rechace cuando las ltimas 10 observaciones de control caigan en el mismo lado de la X. No reporte. *13s y R4s por lo regular son errores aleatorios. *22s, 41s y 10X son errores sistemticos. Como se pude observar en el grfico de Levey-Jennings realizado con nuestros datos y aplicando las reglas de Schewart, de los 6 datos solo 2 caen debajo de 1; es decir, quedan en el lmite de 2, lo cual nos indica que tenemos un buen intervalo de confianza en nuestros datos. Aunque con un coeficiente de variacin muy alto, esto posiblemente a que las determinaciones fueron muy pocas (slo 6), cuando para mtodos enzimticos como el utilizado se acepta un CV de 10%, sin embargo como nuestros valores cayeron dentro del rango de 2, nuestros resultados entonces son aceptables ya que no violan ninguna de las reglas de Schewart . Pruebas de hiptesis: Una hiptesis estadstica es una proposicin o supuesto sobre los parmetros de una o ms poblaciones. Los procedimientos de prueba de hiptesis dependen del empleo de la informacin contenida en la muestra aleatoria de la poblacin de inters. Si esta informacin es consistente con la hiptesis, se concluye que sta es verdadera; sin embargo si esta informacin es inconsistente con la hiptesis, se concluye que esta es falsa. La hiptesis nula, representada por Ho, es la afirmacin sobre una o ms caractersticas de poblaciones que al inicio se supone cierta (es decir, la "creencia a priori"). La hiptesis alternativa, representada por H1, es la afirmacin contradictoria a Ho, y sta es la hiptesis 4 del investigador. La hiptesis nula se rechaza en favor de la hiptesis alternativa, slo si la evidencia muestral sugiere que Ho es falsa. Si la muestra no contradice decididamente a Ho, se contina creyendo en la validez de la hiptesis nula. Entonces, las dos conclusiones posibles de un anlisis por prueba de hiptesis son rechazar Ho o no rechazar Ho H0 = 60 110mg/dl H1 = 61.08 111.83 14.68%

Hiptesis Nula: H0 = H1 Hiptesis Alterna: H0 H1

Para determinar si la hiptesis nula es igual a los resultados de nuestros datos, se utilizar la frmula de la t de student T de student Sus aplicaciones en la inferencia estadstica son para estimar y probar una media y una diferencia de medias (independiente y pareada). Caractersticas: 1. 2. Al igual que la distribucin Z, es una distribucin continua La distribucin t tiene una media de cero, es simtrica respecto de la media y se extiende de - a +

la varianza de t 2 para > 2. Cuando los grados de libertad son suficientemente grandes la varianza de la distribucin t tiende a 1. 3. Tiene forma acampanada y simtrica 4. No hay una distribucin t, sino una "familia" de distribuciones t. todas con la misma media cero, pero con su respectiva desviacin estndar diferente de acuerdo con el tamao de la muestra n. Existe una distribucin t para una muestra de 20, otra para una muestra de 22, y as sucesivamente. 5. La distribucin t es ms ancha y ms plana en el centro que la distribucin normal estndar como resultado de ello se tiene una mayor variabilidad en las medias de muestra calculadas a partir de muestras ms pequeas. Sin embargo, a medida que aumenta el tamao de la muestra, la distribucin t se aproxima a la distribucin normal estndar. Formalmente una variable T con distribucin t de Student o simplemente distribucin t se define de la forma 2 siguiente: Sea Z una variable aleatoria normal estndar y sea c una variable Chi cuadrada con n grados de 5 libertad, entonces:

Z=

Donde: Al sustituir en la frmula

X

2 =

S 2 (n 1)

t= n S 2 (n 1)

n S

n ( X )

2
(n 1)

n (X ) s
X s n

t=
Por lo tanto:

con n = n-1 grados de libertad

Si se observa la tabla, el rea sombreada de la curva es de la cola derecha, es por esto que se tiene que hacer la resta de 1 - . La manera de encontrar el valor de t es buscar el valor de en el primer rengln de la tabla y luego buscar los grados de libertad en la primer columna y donde se intercepten y se obtendr el 6 valor de t. Aplicacin:

= 86.45 =n1=61=5 = 12.69

del inserto () = 85

t=

86.45 85 = 0.203504758 12.69 5

Por lo tanto para la probabilidad acumulada es de 0.600, es decir: El valor t con = 5 grados de libertad que deja un rea de 0.6 a la derecha, y por tanto un rea de 0.4 a la derecha, es t -0.4 = t 0.6 = 0.2035 (t crtica) Con nivel = 0.6 As que: H1 (61.08 111.83 14.68%) = 60 110mg/dl, es decir, se acepta la hiptesis nula. Por lo tanto habra una probabilidad del 0.6 para 5 grados de libertad por lo tanto se acepta la hiptesis nula con un margen de error del 5% (ya que se esta trabajando en un nivel de 2 al 95% de confianza) aunque teniendo un coeficiente de variacin muy alto, considerando ciertos factores como que las lecturas no se realizaron en una sola persona (errores sistemticos), el stress que pudiese haber habido en los sujetos de estudio, adems de la alimentacin y constitucin de los sujetos, razones por las cuales las lecturas pueden variar (errores aleatorios).

CONCLUSIN Por medio de esta prctica, se lograron determinar en distintos individuos cuantitativa e individualmente la glucosa en suero por medio del Kit. spinreact especializado para esta finalidad con la tcnica de espectrofotometra, en donde se realiz una reaccin en la cual la glucosa del suero de la sangre fue oxidada a acido glucnico por medio del catalizador contenido en el reactivo R2 del kit que contena glucosa oxidasa; esta reaccin adems de darnos como producto al acido glucnico, tambin nos dio perxido de hidrgeno el cual fue el reactivo que fue determinado en nuestra tcnica (su produccin) mediante el aceptor cromognico de oxigeno, fenol-ampirona (contenido en el R1) en presencia de peroxidasa (enzima contenida en el R2) dndonos un color rojizo en la solucin el cual era proporcional a la concentracin de glucosa presente en el suero. En base a los a los datos obtenidos de las muestras de los sujetos a prueba y con los valores de referencia obtenidos, se puede decir que el 100% de nuestros sujetos de prueba (excepto el valor de 405.98 que fue eliminado para los fines de obtener nuestros valores de referencia; este valor pudo haber sido un error de tipo sistmico o aleatorio, o en su defecto algn problema de glicemia en el sujeto, por lo que para asegurarse de esto sera recomendable un nuevo anlisis de la muestra del sujeto en cuestin), entran dentro de nuestros valores de referencia por lo que se puede decir que son sujetos sanos y que no tienen ningn problema de glicemia. REFERENCIAS

1 2

http://www.saludalia.com/docs/Salud/web_saludalia/pruebas_diagnosticas/doc/doc_glucosa.htm http://www.tuotromedico.com/temas/glucosa_en_sangre.htm Kaplan A. glucose. Kaplan A et al. Clin Chem The C.v. Mosby Co. St. Louis Toronto. Princeton 1984; 1032-1036 Trinder P. Ann Clin Biochem 1969; 6:24-33 Young DS. Effects on drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995 Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of clinical chemistry, 3er ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to laboratory Tests, 3er ed AACC 1995 3 http://www2.uah.es/ana_garcia/Hbs-glicosiladas.pdf
4 5
6

http://www.itchihuahua.edu.mx/academic/industrial/estadistica1/cap02.html http://www.itchihuahuaii.edu.mx/academico/CB/MEG/documentos/1.8.htm http://www.itch.edu.mx/academic/industrial/estadistica1/cap03.html

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