Está en la página 1de 4

PRÁCTICAS # 5

“CROMATINA X DE MUCOSA BUCAL”

OBJETIVO

 Observar y diferenciar entre hombres y mujeres la aparición de corpúsculos de BAAR a partir de muestras de
mucosa bucal y de esta manera identificar los cromosomas X inactivos en las mujeres.

INTRODUCCIÓN

En el ser humano el sexo femenino está dado por el complemento 46 XX y el masculino por el 46 XY. El
corpúsculo de Barr o cromatina "X" es un cromosoma inactivo que puede verse en algunas células en interfase
como una masa de heterocromatina adherida a la membrana nuclear. En los leucocitos polimorfonucleares este
cromosoma inactivo se observa en forma de "palillo de tambor" que emerge de uno de los lóbulos del núcleo. En
algunas alteraciones cromosómicas se ve afectado el cuerpo de Barr, como por ejemplo, en el síndrome de Turner
(45 X0) se tiene individuos con fenotipo femenino y sin corpúsculo de Barr; y en cambio, en el síndrome de
Klinefelter (47 XXY) son individuos con fenotipo masculino y con cromatina "X". En la actividad experimental, por
medio de un método fácil y rápido se estudia la "cromatina sexual" efectuando un frotis de la mucosa bucal,
haciendo un squash de células y recurriendo a su tinción con colorantes básicos. Por otro lado, se obtiene sangre
capilar con una lanceta y se realiza un frotis que se tiñe con colorantes específicos para muestras de sangre,
observando después al microscopio para localizar la cromatina X.1

Cromosomas sexuales

En todos los mamíferos la hembra es homogamética y sus cromosomas sexuales (XX) son idénticos y se
comportan como homólogos. En cambio, el macho es heterogamético y sus cromosomas sexuales (XY) son
diferentes en tamaño, morfología y contenido génetico.

La evolución ha influenciado el proceso de diferenciación cromosómica ya que originalmente ambos cromosomas


eran homólogos. El dimorfismo se estableció a expensas de un solo miembro del par que acumuló los factores
necesarios para el desarrollo del sexo heterogamético (cromosoma Y en mamíferos).

En los últimos años se han reconocido genes en el cromosoma Y que participan en crecimiento, maduración ósea,
desarrollo testicular y espermatogénesis. Sin embargo, el hallazgo más trascendente es la localización del gene
responsable de la diferenciación testicular (SRY) en la porción distal del brazo corto de este cromosoma. Se ha
demostrado en humanos que ambos cromosomas comparten una región homóloga en el extremo distal de sus
brazos cortos denominada región pseudoautosómica.

En el cromosoma no se han observado cambios filogenéticos importantes y se ha preservado en las diferentes


especies. Sin embargo, uno de los fenómenos más importantes en genética evolutiva es la inactivación de uno de
los cromosomas X en individuos femeninos (XX), proceso que mantiene el equilibrio génico en ambos sexos al
igualar el contenido de ADN cromosómico activo. La inactivación del cromosoma X resulta en la formación del
corpúsculo de Barr o cromatina X que se observa en los núcleos de células femeninas en interfase.

En 1961, Lyon postuló una hipótesis en la que sugiere que tempranamente en la embriogénesis uno de los
cromosomas X en la mujer se inactiva haciendo que la relación autosomas-sexocromosomas sea igual que en el
hombre. En las células somáticas, el proceso de inactivación ocurre al azar y es clonal pudiendo inactivarse el X
materno o paterno. No obstante, una vez que se establece este evento, todas las células descendientes tendrán el
mismo cromosoma X inactivo. Además del mecanismo de compensación génica entre individuos XX y XY, el
proceso de inactivación ocurre sobre los cromosomas X supernumerarios generados por errores mitóticos o
meióticos.

En años recientes se han reconocido los factores básicos que determinan la inactivación del X en el embrión
femenino. Inmediatamente después de la fertilización ambos cromosomas X son eucromáticos y la primera
inactivación del X, que ocurre en el trofoectodermo, es no al azar y afecta preferentemente al X paterno. Este
mecanismo de inactivación, no al azar, se mantiene hasta el estadio embrionario de blastocisto tardío cuando se
inicia la inactivación al azar. Sin embargo, la inactivación no es al azar cuando uno de los X es estructuralmente
anormal y en estas circunstancias se preserva el X normal activo en la recién nacida.

Es importante señalar que durante la meiosis se requiere que ambos cromosomas X estén activos para asegurar
la diferenciación ovárica y la gametogénesis, lo que implica la reactivación del cromosoma X que previamente
había sido inactivado en las células germinales. En cambio, la inactivación del único X presente en el
espermatocito primario es necesaria para la espermatogénesis normal ya que la presencia de un cromosoma X
activo parecería interferir con la meiosis.2

1
Corpúsculos de Barr

Corpúsculo de Barr: Masa de cromatina intensamente teñida que aparece en la periferia de los núcleos de las
células somáticas femeninas durante la interfase. Representa el cromosoma X inactivado y condensado Y.3

En el año de 1944 Barr observó un pequeño cuerpo de cromatina en las células de gato hembra, este corpúsculo
no se observaba en las células del macho de la misma especie. A partir de este hecho se formuló la pregunta del
porqué de esta diferencia, extendió su estudio a otro tipo de células y de otras especies.

En la actualidad se conoce que en la especie humana las células de una hembra normal contienen un cuerpo
situado junto a la membrana nuclear, que se tiñe de oscuro, llamado cuerpo de Barr o cromatina sexual, que en
este caso representa a uno de los dos cromosomas sexuales X de la mujer. La cromatina del cuerpo de Barr no
existe en las células de los machos normales, aunque se ha observado que las células de individuos con
constituciones anormales de cromosomas sexuales. Por ejemplo, un individuo con cromosomas sexuales XXY,
presenta un cuerpo de Barr de cromatina sexual, una hembra X0, no tiene ningún cuerpo de Barr, pero una
hembra XXX presenta dos cuerpos.4

MATERIAL

 6 portaobjetos  Solución de aceto-orceína


 6 cubreobjetos  Alcohol al 95%
 Torundas de algodón  Hipoclorito de sodio al 10%
 12 Hisopos  Microscopio

PROCEDIMIENTO

1) Los portaobjetos limpios, colocados en alcohol al 95% se marcan con el código del paciente y se marcan con las
letras D o I indicando al lado al que pertenecen.
2) Se enjuaga la boca varias veces con agua
3) Con el hisopo se hace un raspado suave de la mucosa bucal y se desecha este primer material obtenido.
4) Se practica un segundo raspado suave sin lesionar la mucosa y se extiende sobre el portaobjeto procurando
que el frotis no quede demasiado delgado. Rápidamente, para evitar que se seque la preparación, se procede a la
fijación y a la tinción.
5) Sobre el portaobjetos que contiene el frotis de la mucosa bucal se deja caer 1 gota de solución de aceto-orceína
en el centro de la preparación y se coloca un cubreobjeto.
6) Se coloca un papel filtro y sosteniendo este con la mano izquierda, se hace una ligera presión con el
pulgar derecho de un extremo al otro del portaobjeto. Esta maniobra logra el aplastamiento de las células y la
eliminación del exceso de colorante.
7) La observación de la preparación debe hacerse de inmediato.

RESULTADOS

En mujeres se observaron claramente los corpúsculos de BAAR los cuales son la expresión del cromosoma
inactivo X de la mujer (ya que como ya sabemos la mujer tiene 2 cromosomas sexuales XX uno activo y uno
inactivo), mientras que en el hombre no se observó ninguno ya que este sujeto no presenta cromosoma X inactivo
y por lo tanto solo contiene sus respectivos cromosoma sexuales XY:

2
DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Se observaron tanto en un hombre como en 2 mujeres la presencia o ausencia de los corpúsculos de Barr en los
cuales en el hombre como normalmente debe ser no se observaron estos corpúsculos debido a que no posee el
cromosoma x inactivo o en su defecto no posee un cromosoma X adicional por lo que se podría decir que es un
sujeto XY normal ya que si poseyera un cromosoma X adicional (si se hubiesen observado en el sujeto
corpúsculos de barr), presentaría el síndrome de Klinefelter (47 XXY) lo cual indica a individuos con fenotipo
masculino y con cromatina "X, pero en este caso como ya se mencionó no fue así.

En las mujeres si se observaron estos corpúsculos lo cual expresa la inactivación de uno de sus cromosomas X ya
que la cromatina X o corpúsculo de Baar es un cromosoma inactivo que puede verse en algunas células en
interfase como una masa de heterocromatina adherida a la membrana nuclear y se observa como un pequeño
punto adicional.

CONCLUSIONES

Uno de los fenómenos más importantes en genética evolutiva es la inactivación de uno de los cromosomas X en
individuos femeninos (XX), proceso que mantiene el equilibrio génico en ambos sexos al igualar el contenido de
ADN cromosómico activo. La inactivación del cromosoma X resulta en la formación del corpúsculo de Barr o
cromatina X que se observa en los núcleos de células femeninas en interfase y este cromosoma X en la mujer se
inactiva haciendo que la relación autosomas-sexocromosomas sea igual que en el hombre. En las células
somáticas, el proceso de inactivación es clonal. No obstante, una vez que se establece este evento, todas las
células descendientes tendrán el mismo cromosoma X inactivo. Además del mecanismo de compensación génica
entre individuos XX y XY, el proceso de inactivación ocurre sobre los cromosomas X supernumerarios generados
por errores mitóticos o meióticos lo cual se reconoce como síndromes cromosómicos sexuales supernumerarios si
es que hay cromosomas sexuales adicionales.

REFERENCIAS

3
1
http://www.ccs.net.mx/detalle.php?cve=565
2
http://www.drscope.com/pac/mg/b1/mgb1_p21.htm
3
http://www.sitiosespana.com/diccionarios/genetica/c.htm
4
www.ucol.mx/acerca/coordinaciones/cgd/DGEMS/archivos/mbiologia1.doc