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Práctica #1 - GLUCOSA EN AYUNO Y POSTPRANDIAL

Práctica #1 - GLUCOSA EN AYUNO Y POSTPRANDIAL

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GLUCOSA EN AYUNO Y POSTPRANDIAL

Práctica Núm. 1 Introducción.

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situación se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos órganos. Esta es la razón principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que también la provocan. Por tanto, la determinación de glucosa en sangre (glucemia) es útil para el diagnóstico de numerosas enfermedades metabólicas, fundamentalmente de la diabetes mellitus. También es necesaria esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se debe administrar para tratarla. la diabetes mellitus es una enfermedad que incapacita al cuerpo para metabolizar o usar eficazmente los carbohidratos, las proteínas y las grasas. Cuando comemos, los alimentos (especialmente carbohidratos y frutas) se convierten en glucosa. Todas las células del cuerpo necesitan glucosa para vivir, pero la glucosa no puede penetrar en las células sin la intervención de la insulina, esto es debido a su falta de producción o la poca producción de insulina la cual se lleva a cabo en las células Beta, que están ubicadas en el extremo del páncreas. Cuanta más cantidad de glucosa haya en la sangre, más se eliminará por la orina. La determinación en orina es menos exacta y menos útil que la determinación en sangre.

CASO CLINICO
Paciente masculino de 54años de edad, acude a consulta por presentar mucosa oral seca, nicturia y pérdida de peso. AHF: Madre con hipertensión arterial sistémica. Padre falleció secundaria a una neumonía, hermana menor con lupus eritematoso sistémico. APNP: No refiere actividades deportivas alguna, rutina de trabajo. APP: Tabaquismo positivo desde hace 25a, 10 cigarros por día, cada fin de semana 8-10 cervezas, sin llegar a embriagarse; toxicomanías: Cocaína ocasional (cada 15 días). Dislipidemia desde hace seis meses, tomó tratamiento un mes, suspendiéndolo sin recomendación medica. Fracturas, trasfusiones, cirugías y hospitalizaciones negadas. PA: Poliuria: presenta aumento en la frecuencia y volumen de la orina durante el día 7-8 durante el día; de dos meses de evolución. Polifagia: incremento en el apetito, se refiere tener necesidad de bocadillos entre comidas. Nicturia: de igual tiempo de evolución refiriendo una frecuencia de 6 micciones durante la noche. Disminución de peso en el ultimo mes, aproximadamente 8 kilogramos, a pesar del aumento en la ingesta diaria. Disuria: durante las últimas 2 semanas, ocasional; y no en todas las micciones, esta es la primera ocasión que la presenta. Exploración física: Paciente masculino de edad aparente mayor a la cronológica; alerta, posición libremente escogida, cooperador, sonriente, marcha adecuada, constitución robusta, conformación brevilinea con perdida de la turgencia de la piel con evidente perdida de tejido adiposo; en general la piel y tegumentos irregularmente hidratados, con acantosis nigricans localizada en cara posterior de cuello, axilas y región inguinoescrotal. Cabeza: Ojos: pupilas reactivas, fondo de ojo sin alteraciones; con leve disminución de la agudeza visual; amígdalas hiperemicas e hipertróficas, obstrucción II/IV; membranas timpánicas opacas. Tórax: Presenta coloración de la piel homogénea, con escaso vello en tórax en cara anterior y amplexación sin alteraciones; se escucha claro pulmonar; vibraciones vocales palpables; con murmullo vesicular presente en cara anterior y en el espacio interescapulovertebral. Precordio hiperdinamico, con choque de la punta palpable, ruidos cardiacos bien audibles, taquicardia leve, 90/minuto, 2do ruido levemente reforzado. No se escuchan soplos. Abdomen: globoso a expensas de panículo adiposo, con cicatriz umbilical central, sin cicatrices visibles, vello central escaso; Se auscultan peristalsis bien audible; a la palpación se encuentra blando, depresible, sin despertar dolor, por percucuion se detecta hepatomegalia 3-2-2 cm por abajo del reborde costal; resto al parecer sin alteraciones.

Se le solicita smac, cardiaco con PSA y lab. Reporta: Glucosa = 326 mg/dL en ayunas leucocitos 11,000 TGO = 240 U/L Triglicéridos = 867 mg/dL plaquetas de 287,000 TGP = 456 U/L LDL = 428 mg/dL HDL = 42 mg/dL PSA = 3.0 EGO: glucosa positiva (++++), estereasa leucocitaria positiva y leucocitos de 10-15 por campo.

Objetivo: Que el alumno determine las concentraciones de glucosa en suero en condiciones de ayuno y postprandial con el método de la glucosa oxidasa, para explicar los resultados obtenidos con los valores normales de referencia de la técnica para poder sugerir una posibilidad diagnostica. FUNDAMENTO La glucosa oxidasa convierte la glucosa en peróxido de hidrógeno y ácido D-glucónico. La peróxidasa cataliza la oxidación del peróxido de hidrógeno a 4-aminofenazona con la subsecuente unión con el phidroxibencensulfonato. El producto final es un c hidroquinoleína el cual absorbe a 500 nm. La intensidad del color es directamente proporcional a la concentración de la glucosa. GLUCOSA POSPRANDIAL: En la persona no diabética, los valores de glucosa posprandial no exceden de 145 mg/dl, por el método de glucosa oxidasa o hexocinasa; los niveles aumentan moderadamente en personas mayores de 50 años. Preguntas exploratorias 1.- ¿Qué interpretación clínica le da a los resultados que se proprocionan en el caso clínico? R: Con respecto a los datos ofrecidos en el caso clinico, la interpretación es de Diabetes Mellitus Tipo 1. 2.- Menciona 3 complicaciones de la Diabetes: R: Hipertension, Ateroesclerosis, Enfermedad vascular periferica, Retinopatias etc. 3.- Explica la diferencia entre Diabetes Mellitus tipo 1 y 2. R: Diabetes tipo I.- generalmente se diagnostica en la infancia, pero muchos pacientes son diagnosticados cuando tienen más de 20

años. En esta enfermedad, el cuerpo no produce o produce poca insulina y se necesitan inyecciones diarias de esta hormona. Dibetes tipo II.- Es mas común que el tipo 1 y corresponde a la mayoría de todos los casos de diabetes. Generalmente se presenta en la edad adulta, aunque se está diagnosticando cada vez más en personas jóvenes. El páncreas no produce suficiente insulina para mantener los niveles de glucemia normales, a menudo, debido a que el cuerpo no responde bien a la insulina. 4.- Escriba los nombres de los cuerpos cetónicos más importantes. R.-Cetona, Acenocetona y Oxinitrato. 5.- De acuerdo a tus conocimientos que otro examen de laboratorio solicitarías para dar seguimiento del control de la alteración del metabolismo de la glucosa. R: la Pospandrial o la curva de tolerancia a la glucosa.

6.- Explique en que consiste la glucogénesis y en donde ocurre. R: es la formación glucógeno a partir de la glucosa de los alimentos. El glucógeno se forma por un mecanismo con la siguiente secuencia, llevado acabo en el higado. 7.- Explique la diferencia entre glucólisis y glicógenolisis R:La glucolisis es la formacion de 2 moleculas de piruvato y ATP, apartir de la glucosa , y la glicogenolisis es la liberacion de glucosa apartir del glucogeno. 8.- ¿Cuál es la indicación que se da al paciente para la prueba de glucosa postprandial? R: El desayunar 2 hrs antes de la obtención de la muestra de sangre.

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA.
MATERIAL POR EQUIPO
1 Gradilla 8 Tubos de ensayo de 13 x 100 mm 1 Pipeta automática de 1.0 ml 1 Pipeta automática de 10 ul 1 Pipetor 1 Reloj o cronómetro 2 jeringas de 5 ml. desechables Puntas para pipeta de 1.0 ml desechables

REACTIVO POR GRUPO
Reactivo de glucosa Calibrador de glucosa 100 mg/dL Patrón de Glucosa 200 mg/dl EL ALUMNO TRAERA EL DIA DE LA PRACTICA (equipo) 1 paciente en ayunas o suero

Puntas para pipeta de 10 ul desechables Torundas con alcohol y secas Ligadura de látex Gasas y papel absorbente

1 paciente que tome alimentos 2 hrs. antes de venir al lab.

MATERIAL POR GRUPO
1 centrífuga 1 Espectrofotómetro 1 Termoblock

TOMA DE MUESTRA. 1.- Identificación del paciente. Tubos de recolección de muestra (limpio y seco) etiquetado. 2.- Comprobar que el paciente acude a la toma de muestra en condiciones requeridas 3.- Informar al paciente sobre el procedimiento a realizar para eliminar en lo posible su tensión 4.- Pedir al paciente que se siente 5.- Preparar el material de recolección de muestra con su identificación, torniquete, material de asepsia, jeringa (aguja estéril y dispositivo para fijar aguja en caso de extracción al vacío). 6.- Pedir al paciente cierre el puño para tener venas más palpables. Seleccionar la vena adecuada para la punción. Realizar asepsia con torunda con alcohol en espiral hacia fuera. 7.- Aplicar torniquete a 5 Cm por arriba de la zona de punción. Fijar la vena por encima y debajo de la zona de punción con ayuda de los dedos pulgar y medio o índice y pulgar. 8.- Introducir la aguja con suavidad y rapidez en un ángulo aprox. de 15° con el bisel hacia arriba siguiendo la dirección de la vena con la aguja. Si utiliza jeringa, tirar hacia atrás del émbolo con tensión lenta y uniforme a medida que la sangre fluye (si lo hace rápido puede hemolizar la muestra o colapsar la vena). Si usa tubo de vacío sujete la aguja en su lugar y encaje suavemente el tubo en el dispositivo, una vez lleno retire suavemente. 9.- Cuando la sangre empieza a fluir, suelte el torniquete. Una vez hecha la extracción indicar al Paciente que relaje el puño. Colocar suavemente sobre el punto de punción una torunda de algodón estéril y seco. Extraer la aguja de un solo movimiento e indicar al

paciente que flexione el brazo para que siga presionando el punto de punción con el algodón. 10.- Deslice la muestra por las paredes del tubo de ensayo con cuidado. Colocar el tubo sobre la gradilla y dejar coagular, centrifugar y separar el suero. Evitar la Hemólisis. 11.- Observar el suero. Las muestras turbias o ictéricas requieren de un blanco de muestra para determinar su concentración de glucosa. (al final del método se dan instrucciones de su preparación).

DETERMINACION DE GLUCOSA EN AYUNAS Y POSPRANDIAL 1.- Etiquetar o numerar 5 tubos como se indica y agregar: BLANCO (Tubo 1) Reactivo de color 2.0 ml. PROBLEMAS 4) CALIBRADOR** ESTANDAR** (Tubo (Tubo 2) (Tubo 3) (Tubo5) 2.0 ml. 2.0 ml. 2.0 ml.

2 .- Precaliente en baño Maria a 37º C por 5 minutos. Pasado este tiempo agregue a cada tubo lo siguiente. Agua destilada Calibrador Estándar Suero problema 20 ul. ------------20 ul. ------20 ul. ---------20 ul.

3.-. Mezcle bien e incube los tubos a 37º C por 10 minutos 4.- Coloque a cero el espectrofotómetro a 500 nm. con el blanco de reactivo 5.- Leer y registrar las absorbancias en orden: Calibrador, estándar (control) y muestras. Escurrir la celda bien, (de preferencia enjuague con agua dest.) después de cada lectura. El producto final de la reacción se mantiene estable 30 minutos después de desarrollado el color, lea en este lapso. 6.- Cálculos de la concentración de glucosa Abs. Probl. ÷ Abs. Calibrador x 100 mg/dL = ______ mg/dl

VALORES DE REFERENCIA:

Suero/plasma:

70 – 110 mg/dl

PREPARACION DE BLANCO DE MUESTRA: 1. En un tubo de ensayo agregue 1.0 ml. de cloruro de sodio al 0.9% y 10 ul de muestra 2. Coloque a cero el espectrofotómetro con solución salina a 500 nm. 3. Leer y registrar la absorbancia del blanco de muestra 4. Reste la absorbancia del blanco de muestra a la absorbancia de la muestra medida en el paso 5. Use este valor para el cálculo de la concentración. NOTAS: *Los volúmenes indicados en la metodología varían, es determinante el volumen que requiere la celdade lectura de la absorbancia. **Deben preguntar al docente si incluirán calibrador y patrón o sólo uno de ello en todas las prácticas que realizarán a lo largo de este semestre. Para una mejor valoración del paciente se incluyen patrones altos y bajos. RESULTADOS (mapa cognitivo) A término de la práctica entregará para acreditar su trabajo individual
Reporte en forma ordenada. Incluya cálculos. Si los resultados no son los esperados debe revisar los datos clínicos del paciente para buscar que pudo interferir en el desarrollo de la reacción sobre todo de glucosa postprandial. P1= .351-.042 / .603 X 100mg/dl= 51.24 mg/dl P2= .556-.042 / .603 X 100mg/dl= 85.24 mg/dl ESTANDAR= .673-.042 / .603 X 100mg/dl= 104.64mg/dl

DISCUSION DE RESULTADOS. (considera lo que investigaste del caso clínico, lo que sabes de teoría y correlaciona con los resultados obtenidos en esta práctica aplicando criterio médico para sugerir un diagnóstico) Los pacientes que colaboraron en esta practica no presentaban sintomas de señal de diabetes o de alteraciones en la glucosa como por ejemplo: poliuria, polifagia, polidipsia, etc. Asi como también por la elevación de la glucosa o los bajos niveles de la misma. Los resultados obtenidos en las pruebas fueron normales.

CONCLUSIÓN Es muy imporante conocer como obtenemos nuestra fuente de energia, ya que es base para nuestra vida, y como medicos es de suma importancia no nomas conocer esto, sino mas afondo para asi poder tratar con patologias referentes a estas vias como lo son la diabetes mellitus, que hoy en dia son muy frecuentes y que se esperan que sigan siendo pronunciadas en un futuro. Con respecto a las pruebas realizadas en el laboratorio es necesario conocer el procedimiento de ellas axial como sus valores normales para poder detectar una anomalia en ellas y solucionarla.

BIBLIOGRAFIA CONSULTADA. BIOQUIMICA Robert Roskoski, Jr McGrawl-Hill Interamericana. Medline. http://vsearch.nlm.nih.gov/vivisimo/cgi-bin/query-meta?v %3Aproject=medlineplus&query=glucosa

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