DETERMINACION DE COLESTEROL TOTAL

OBJETIVOS
-Determinar la concentración de colesterol total en suero sanguíneo
-Explicar cómo el colesterol contribuye a la formación de ateromas

INTRODUCCION
El colesterol es un esterol que se halla en tejidos corporales y plasma sanguíneo. Se presenta
en concentraciones altas en hígado, medula espinal, páncreas y cerebro. Pese a ser perjudicial
en altas concentraciones, es esencial para la formación de la membrana plasmática, la cual
regula la entrada y salida de sustancias que atraviesan al medio intracelular, es a su vez,
precursor de hormonas, vitaminas y sales biliares que cumplen la función de emulsificar las
grasas.
Como prueba diagnóstica, la determinación aislada de colesterol es limitada. No obstante, su
concentración varía más o menos predecible en un gran número de condiciones clínicas. Se
ha observado que el colesterol es uno de los factores que contribuyen a la formación de
ateromas, los cuales son lesiones de la capa interna de las arterias que se caracteriza
por el depósito de grasa en forma de manchas amarillentas, también llamados
¨quistes sebáceos¨.
El colesterol, por su naturaleza lipídica, es insoluble en agua, el colesterol plasmico
solo existen en complejos moleculares llamados ¨lipoproteínas¨, principalmente LDL
y VLDL, que tienen la capacidad de fijar y transportar grandes cantidades de
colesterol. En la actualidad se reconoce el papel del colesterol presente en las
lipoproteínas de baja densidad, de forma causal, en la patogenia de aterosclerosis.
De esta manera, la existencia sostenida de niveles elevados de colesterol LDL,
sobre los valores normales y recomendados incrementa el riesgo de sufrir
patologías cardiovasculares hasta diez años después de su determinación, como
fue presentado en el estudio de Frammingham, iniciado en 1948. Pero,
curiosamente, el colesterol presente en las lipoproteínas de alta densidad (HDL)
ejercería un control protector del sistema cardiovascular, por lo que, se le conoce
como ¨colesterol bueno¨. De esta manera, el colesterol tiene un impacto dual y
complejo sobre la fisiopatología de la aterosclerosis, por lo que la estimación del
riesgo cardiovascular basado netamente en niveles totales de colesterol plasmico,
es insuficiente.
FUNDAMENTOS DEL METODO

La secuencia de la reacción es la siguiente:

CHE
Ésteres del colesterol colesterol + ácidos grasos

CHOD

Colesterol + O2 Colesten-3-ona + H2O2

POD
H2O2 + 4-AF + aceptor quinonimina roja

MATERIALES Y METODO

PROCEDIMIENTO
En tres tubos marcados B (Blanco) S (Standard) y D (Desconocido) colocar:

B S D

Standard -- 10 ul --
Muestra -- -- 10 ul
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml

Incubar 5 minutos en baño de agua a 37oC o 25 minutos a 15-25oC. Luego leer en

espectrofotómetro a 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco.

CALCULO DE LOS RESULTADOS

Colesterol (g/L) = D x 2,0 g/L

VALORES DE REFERENCIA

Deseable: < 2,00 g/L

Moderadamente alto: 2,00 - 2,39 g/L
Elevado: ≥ 2,40 g/L
RESULTADOS
Colesterol: 5.79 g/L

DISCUSION
Según los resultados, el sujeto de muestra presentó un nivel de colesterol de 5.79 g/L, lo
cual a contraste con los valores de referencia se encuentra en un rango elevado.
Las LDL se forman a partir de las VLDL y están constituidas básicamente por colesterol
esterificado, siendo la apolipoproteina B-100 su principal apolipoproteína. Estas
lipoproteínas transportan el mayor porcentaje de colesterol en el organismo y existen varios
tipos los que difieren por su diverso contenido en lípidos y proteínas, constituyendo su
elevada presencia en sangre un factor de riesgo positivo para aterosclerosis. Gracias a la
presencia de la apolipoproteina B- 100 la LDI, es captada por órganos como el hígado que
posee receptores de apolipoproteina B/E, así como, por el intestino y los órganos que
sintetizan hormonas esteroides y sexuales.
El proceso de transformación de estas lipoproteínas, puede observarse que el transporte de
los lípidos sintetizados por el hígado, o que llegan a él a través de los quilomicrones
remanentes, han sido redistribuidos a los tejidos extra hepáticos a través del sistema VLDL-
IDL-LDL: las VLDL les proporcionan a estos tejidos grasas neutras, las IDL son
lipoproteínas de transición TAG/colesterol y las LDL aportan colesterol proveniente del
principal órgano de síntesis (el hígado) a aquellos tejidos extra hepáticos que puedan
requerirlo, independientemente de que posean capacidad de síntesis de colesterol o no.
Los niveles elevados de colesterol es sangre (hipercolesterolemia) que resultan de una
sobreproducción y/o subutilización de LDL son causados por dos irregularidades
metabólicas: la enfermedad de hipercolesterolemia familiar (HF: deficiencia de síntesis de
receptores para LDL funcionales, estos organismos homocigóticos no pueden absorber ni
IDL ni LDL por endocitosis mediada por los receptores. Existen también organismos
heterocigóticos que son más comunes que los anteriores y tienen alrededor del 50% del
número normal de receptores, por tanto, la cantidad de receptores para LDL y sus niveles
de LDL-colesterol en sangre son el doble que el valor promedio) o bien, del alto consumo
de colesterol en la dieta. Los efectos de una dieta rica en colesterol tienen un efecto similar,
pero no es tan extremo; este colesterol ingresa al hígado en forma de quilomicrones y
suprime la síntesis de receptores para LDL, la consecuencia de esto es semejante a la de la
FH.
La señal de que una célula necesita colesterol es expresada a través de la presencia de los
receptores de LDL en su superficie: la síntesis de receptores de LDL es inhibida por altas
concentraciones intracelulares de Colesterol. La deficiencia de receptores para LDL
(genética o inducida por la dieta), eleva los niveles de LDL por dos mecanismos:
incrementando la producción de LDL (decreciendo la absorción IDL) y reduciendo la
absorción de LDL.
CONCLUSIONES
-Finalmente, se determinó la concentración de colesterol total en suero sanguíneo, dando
como resultado del sujeto de estudio, un valor de 5.79 g/L, usando métodos de
espectrofotometría, siendo este un valor elevado respecto a los valores referenciales.
-Se explicó la formación de ateromas, siendo estos taponamientos por cúmulos de masa
adiposa en las paredes de los vasos sanguíneos.

BIBLIOGRAFÍA