FISIOLOGÍA VEGETAL. TEMA 19. AUXINAS: INTRODUCCIÓN.

El descubrimiento de las auxinas surgió como algo colateral a otro tipo de investigaciones. Las observaciones sobre los tropismos contribuyeron al descubrimiento de las hormonas vegetales. Julius von Sachs, a finales del siglo XIX, postula la existencia de sustancias morfogenéticas, algunas sustancias químicas que eran responsables de los efectos morfogenéticos. Charles Darwin se interesa en la capacidad de movimiento que poseen las plantas y principalmente sobre el fototropismo (movimiento de las plantas hacia un estímulo luminoso) en coleoptilos de gramíneas. Boysen-Jensen provoca la curvatura en un coleoptilo decapitado, tras restituir el ápice.

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Las semillas de gramíneas, al germinar, primero emiten la radícula. Tras esto desarrollan el coleoptilo, que tiene como misión proteger a la hoja primaria. Hasta que la semilla germinada no vence la barrera del suelo, el coleoptilo protege al meristemo contenido en la hoja primaria. Una vez que la semilla sobresale, el coleoptilo se rompe, y la hoja primaria sale al exterior, se desenrolla y comienza a captar la luz (autotrofía). Alguna sustancia debía sintetizarse para regular todo este proceso. Darwin, trabajando con coleoptilos de avena, utilizó una fuente de luz lateral y vio como los coleoptilos se orientaban hacia el lado de donde provenía el foco luminoso. Cuando cortó el ápice del coleoptilo, éste no crecía hacia la luz. Lo cubrió con un material opaco, y tampoco había respuesta fototrópica hacia la luz. Sin embargo, cuando lo cubrió con un material transparente que permitía el paso de la luz, sí hubo respuesta hacia la luz. También cubrió el resto del coleoptilo, dejando libre el ápice, con un material opaco y sí había respuesta. Esto indicaba que había algo en el ápice del coleoptilo, que en presencia de luz, era responsable del movimiento dirigido hacia la luz. Boysen-Jensen cortó el ápice del coleoptilo, pero lo mantuvo interconectado al resto de la planta con agar, sí había respuesta. Hizo lo mismo pero interponiendo una lámina de mica (impermeable) entre el ápice y el resto del coleoptilo, y no había respuesta. Esto quería decir que un compuesto sintetizado por el ápice difundía al resto del coleoptilo y producía el fototropismo.

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después se vio que eran las auxinas. lo que produce la curvatura. Ácido 4-cloro-indolacético (en guisante). W. Es un derivado clorado. Igual al AIA. Haagen-Smit y Erxleben. Ácido indolbutírico (IBA). Otras auxinas naturales importantes. en 1928. el primer bioensayo que permitía establecer una relación entre la cantidad de estímulo aplicado y la respuesta fisiológica observada.V. y K. son: Ácido fenilacético (detectado en tallos de tomate y girasol). con una cadena lateral de Acetato. puso sólo el bloque sin ápice sobre el coleoptilo decapitado. 2 . AIA es la más importante porque está distribuida ampliamente por todo el Reino vegetal. Went elaboró. in vivo. éste se alargaba hacia arriba uniformemente. provocaba una diferencia de concentración y se producía la curvatura. Se detectó la presencia de AIA endógeno en el endospermo inmaduro de semillas de maíz. comúnmente llamado ácido indolacético o AIA. La distribución de auxinas es diferente en la zona enfrentada a la luz y en la que está de cara a la oscuridad. usando extractos de cultivos del hongo Rhizopus Consiguieron obtener una sustancia a la que se denominó auxina. El compuesto presenta un núcleo indólico. si situaba el bloque de agar de forma que cubriera todo el coleoptilo decapitado. Tras un tiempo. en ausencia de luz. el AIA se aisló por primera vez de plantas. Si lo situaba sobre un lado u otro de manera desigual. dos grupos: Kijgl. F. Thimann. En 1946. partiendo de orina humana. derivado del Trp.Ellos no sabían qué compuesto era. ya que las células con más auxinas (zona oscura) se elongan más. pero la cadena lateral es un Butirato. Went decapitó un ápice de coleoptilo y lo situó sobre un bloque de agar y una fuente luminosa. entre 1934 y 1935. del griego “hacer crecer” o “incrementar” y cuya estructura química resultó ser la del ácido indolil 3-acético. En ausencia de luz pero con las sustancias que habían difundido al agar. En las plantas existen otras hormonas con efectos similares al AIA. y esta diferencia de concentración de auxinas en las células produce el fototropismo. pero no se curvaba porque la sustancia difundía por igual en los dos lados del coleoptilo. Tras varios intentos.

más allá de esta cifra se inhibe el crecimiento. y éstas más sensibles que los tallos. Las auxinas actúan en un rango de concentraciones hasta que llegan a un óptimo. Modulado por muchos factores ambientales. Ácido 2. La sensibilidad de un tejido u órgano puede variar con la edad y con las condiciones ambientales. Factores que afectan a la actividad auxínica. En la raíz se estimulará más y los tallos menos. Las respuestas que se producen tras la aplicación de auxinas a las plantas dependen de la concentración de hormona. Las raíces son más sensibles que las yemas. Por ejemplo. El AIA tiene diferentes efectos a diferentes concentraciones. tallo o brote. Cada órgano presenta una sensibilidad diferente frente a la auxina.4-D). La sensibilidad va a depender de: La concentración de receptores hormonales. la misma concentración estimulará más o menos el crecimiento. Concentración hormonal. Sensibilidad frente a las auxinas. La concentración óptima de AIA para el crecimiento en la raíz es de 10-7 g/L. por encima de esa cifra se inhibe el crecimiento. pero superado ese óptimo (en cualquier órgano) producen un efecto contrario e inhiben la elongación. así como del tipo de órgano tratado. el óptimo está en 10-3 g/L. Para estimular el crecimiento del tallo. Esto implica que podemos utilizar las auxinas con dos finalidades. estimular o inhibir el crecimiento (como herbicidas).Los laboratorios han sintetizado compuestos químicos sintéticos similares. para abastecer a la Agricultura.4-diclorofenoxiacético (2. y tendrá diferentes efectos en órganos distintos. en función de si se trata de raíz. como son: Ácido naftalenacético (ANA). 3 . La efectividad de la unión receptor-hormona.

Inmunoensayo. Tanto el metabolismo como el transporte van a determinar. mediante descarboxilación. También veremos el transporte. Luego hacemos un extracto de la planta que queremos estudiar. Bioensayos. Todas parten del Trp. Metabolismo y transporte de AIA.Métodos para cuantificar las auxinas. GC. Se mide el grado de curvatura que induce la auxina al estar en contacto con un coleoptilo decapitado. Después. la ruta del ácido indolpirúvico parte de Trp y. o cromatografía líquida de alta presión (detectores: fluorimétrico. es la de la parte central de la figura. Ahora midiendo el grado de curvatura en cualquier coleoptilo y comparando con la recta. La concentración de AIA que se corresponda a ese incremento en el crecimiento será la concentración de AIA presente en el extracto. Hasta hace pocos años los bioensayos eran el único método para cuantificar estas hormonas. Bioensayo. Vamos a analizar la biosíntesis. En la actualidad existen otros métodos. Para producir la curvatura. al cabo de 24h. Métodos físico-químicos: HPLC. habrán crecido más o menos. que se da en la mayoría de las especies. podemos determinar el grado de AIA endógeno. En la mayoría de las plantas. la conjugación y el catabolismo. Con esto realizamos una recta de calibrado. y los comparamos con la recta de calibrado. Biosíntesis de AIA. colocamos bloques de agar que contenga auxina sobre la zona decapitada del coleoptilo en posición distorsionada. el 4 . que sólo difunda a un lado del coleoptilo. que la planta tenga las cantidades de AIA necesarias para el crecimiento vegetal adecuado a cada momento y cada lugar. Crecimiento de segmentos de coleoptilo de avena. Primero se hace una recta de calibrado. Parece ser que la ruta mayoritaria para el AIA. Con esto realizamos una recta de calibrado. es decir. cromatografía de gases (detector: masas). por un proceso de transaminacion se convierte en Ácido Indol-3-pirúvico. Incubamos secciones de coleoptilo en ese extracto y observamos el incremento de tamaño de las secciones. eliminamos el lugar donde se sintetiza la hormona. Al decapitar el coleoptilo. Se hacen secciones de coleoptilo de avena. Test de la curvatura del coleoptilo de avena. electroquímico y masas). regulando homeostáticamente. El grado de curvatura producido en el coleoptilo va a ser proporcional a la cantidad de AIA. Bioensayo. Esas secciones de coleoptilo. aunque no pertenece a la ruta metabólica. Se van incubando secciones en distintas concentraciones de AIA.

Este Indol-3-acetonitrilo. Algunas plantas presentan la ruta de la Triptamina. Éste compuesto puede pasar directamente a Indol-3-acetonitrilo por pérdida de una molécula de H2O. mediante una nitrilasa. mediante desaminación oxidativa. el Trp sufre una descarboxilación oxidativa y se forma la Indol-3-acetaldoxima. pasa a Ácido Indol-3-acético. mediante oxidación. El Trp sufre una descarboxilación. La Triptamina. 5 . se transforma en Indol3-acetaldehido. Otra ruta minoritaria que sólo se da en las Crucíferas (Brasicaceae). o llegar a lo mismo mediante etapas intermedias. que va a generar Triptamina.Ácido Indol-3-pirúvico pasa a Indol-3-acetaldehido. el Indol-3acetaldehido pasa a Ácido Indol 3-acético. Y ahora.

En algunos tejidos. oligosacáridos. péptidos. Catabolismo de AIA. como hemos dicho. ya que a niveles elevados podían inhibir el crecimiento. hidroliza los conjugados. liberando AIA fisiológicamente activo. hay enzimas que pueden hidrolizar de nuevo el AIA cuando la planta requiera niveles de AIA libre. que implica la pérdida de la actividad biológica de la hormona. la mayor parte del AIA se encuentra en forma de conjugados. Auxina ligada y auxina conjugada son sinónimas. Se utiliza esta terminología para determinar todos los compuestos que se forman mediante enlaces covalentes entre el AIA y otras moléculas.Conjugación de AIA. Este nuevo compuesto no tiene actividad biológica. Es frecuente la conjugación con aminoácidos. y se detectan en semillas u otros órganos de almacenamiento (reserva). Aunque estos compuestos son inactivos fisiológicamente hablando. como proteger el AIA de la oxidación por peroxidasa. El AIA cuando se conjuga con otras proteínas conserva su estructura. La unión con azúcares se produce mediante enlaces éster. etc. actúan como formas de protección del AIA frente al ataque peroxidativo. es decir. 6 . proteínas. que forman compuestos como el ácido indolacetilaspártico (AIAasp). Además. La oxidación del AIA es un proceso catabólico irreversible. y los productos resultantes carecen de actividad biológica. las estructuras conjugadas pueden actuar como un mecanismo de detoxificación para eliminar el exceso de auxina. Estas dos rutas son irreversibles. - Estos conjugados se dan como forma de almacenamiento de AIA. Estas estructuras conjugadas tienen otras funciones importantes. La unión de AIA con aminoácidos se produce mediante enlaces amida. glucosa. Cuando la célula detecta que necesita AIA libre para una etapa fisiológica determinada. para dar compuestos como el indolacetilglucósido (AIAglu). La oxidación puede ser descarboxilativa o no descarboxilativa. pero pierde su actividad biológica.

Estos compuestos fenólicos más complejos protegen al AIA de la AIA oxidasa. Los compuestos que activan la reacción son. modulando la actividad de la AIA oxidasa. Oxidación descarboxilativa. los monofenoles. en la ruta de la oxidación descarboxilativa. respectivamente. Esto es importante. el H2O2. Resumiendo. o en el núcleo indólico.y polifenoles (Flavonoides). Los productos iniciales de la reacción son indol-3-metanol y oxindol-3-metanol. hay una oxidación.Catabolismo de AIA. como los di. ya que algunos metabolitos secundarios como son los fenoles modulan el crecimiento. La descarboxilación siempre se produce en la cadena lateral. la descarboxilación se da en la cadena lateral. En ambos casos es un proceso descarboxilativo. que puede ser en la propia cadena lateral. de forma indirecta. dependiendo de que la oxidación se produzca en la cadena lateral o el núcleo indólico. y algunos iones metálicos como el Mn . Además. que tiene actividad peroxidasa. activándola o inhibiéndola. 2+ 7 . Aceleran la degradación del AIA. La oxidación descarboxilativa está catalizada por la AIA oxidasa. Otros compuestos inhiben a la enzima. dando como primer producto indol-3-metanol. dando como primer producto oxindol-3-metanol. Hay compuestos que pueden modular la actividad catabólica de esta hormona.

y ninguna otra hormona lo presenta. es decir. donde se movilizan por difusión. Transporte de AIA. Las principales características del transporte polar de auxinas son: La dirección del transporte está polarizada. La reacción da lugar al ácido 2-oxindol-3-acético y. al ácido 7hidroxi-2-oxindol-3-acético. por xilema o floema. Es específico de auxinas. Se movilizan por los tejidos parenquimáticos. y un bloque de agar receptor en la base. transcurrido un tiempo. Esta vía de transporte polar con gasto de energía se denomina transporte polar activo. - 8 . es decir. sólo que sería acrópeto. es decir. A diferencia de la oxidación descarboxilativa. ya que no se produce en ausencia de O2 ni en presencia de inhibidores de la síntesis de ATP. desde la base de la raíz hacia el ápice.Catabolismo de AIA. células asociadas a floema). Las mismas conclusiones sacaríamos en la raíz. Si invertimos el tallo. y en la raíz la dirección es preferentemente acrópeta. El movimiento del AIA requiere energía metabólica. la oxidación no descarboxilativa sólo se ha podido comprobar en ciertas especies. También pueden llegar a los diferentes órganos a través de los tejidos vasculares. todo el AIA radioactivo se encuentra en la base. Oxidación no descarboxilativa. asociados a los elementos conductores (células del cambium. Colocamos bloques de agar con AIA radioactivo en la sección que daba al ápice. tienen un mecanismo propio que las diferencia del resto. células no vasculares. La oxidación no descarboxilativa se produce en el anillo indólico de AIA sin pérdida del grupo carboxilo. Diseccionamos un trozo de tallo. Se ve que. Todas las hormonas vegetales pueden recorrer distancias cortas entre células próximas. siempre va desde el ápice al tallo. Esto indica que el transporte está polarizado. posteriormente. Las auxinas no se movilizan a largas distancias como el resto de hormonas. se produce desde el ápice hacia la base del tallo (transporte basípeto). se observa que el transporte está bloqueado.

La energía se necesita para mantener el gradiente de pH entre la pared celular y el interior de la célula (bombeo de protones) y para el transporte del AIA. La entrada de AIA a las células transportadoras se produciría por toda la superficie celular. La hipótesis quimiosmótica presupone el movimiento de AIA de una célula a la inmediatamente inferior a lo largo de una columna de células transportadoras. en la base de las células transportadoras. de esta forma.5). Para que el AIA entre de forma no disociada debe existir un pH que facilite que esté en forma protonada. a nivel celular. Este gradiente de pH sería generado por bombas protónicas (H+/ATPasas de la membrana plasmática) que mantendrían un pH más bajo en la pared celular (pH = 5) que en el citoplasma (pH entre 7 y 7. La difusión estaría favorecida por el gradiente de pH existente a ambos lados de la membrana plasmática. La polaridad del transporte vendría dada por la distribución asimétrica de estos transportadores de salida que estarían localizados. se ha demostrado con la hipótesis quimiosmótica. se disociaría en AIA. permeable al AIA no disociado (AIAH).+ H+ debido al mayor pH. el bajo pH de la pared regeneraría la molécula de AIA (AIAH) que. exclusivamente. De esta manera entraría sin gasto de energía en la membrana plasmática. bien mediante transportadores de entrada (difusión facilitada). permitiría la entrada de la molécula que. Fuera de la célula. bien por difusión simple del AIA no disociado (AIAH).Esto. 9 .por el plasmalesma basal mediado por transportadores. una vez en el interior de la célula. que sólo podría salir de la célula mediante transportadores específicos. entraría en la célula siguiente. La membrana plasmática. La membrana es impermeable al anión AIA-.

el alargamiento de raíces y de tallos. etc. La dominancia apical. - 10 . Estos compuestos pueden bloquear el transporte de forma total o parcial. ya que las raíces tienen mayor afinidad por ellas. crecimiento y diferenciación de las células. cambian los niveles óptimos. Efectos fisiológicos mediados por auxinas. El transporte polar puede intervenir en procesos como: El crecimiento del tallo. la diferenciación vascular. dependiendo de su concentración y el número de transportadores que bloqueen. los flavonoides como Genisteína o Quercetina. Pero no van a necesitar la misma concentración de auxinas. Las auxinas están implicadas en muchos procesos del desarrollo vegetal porque afectan a la división. La diferenciación vascular. u otros compuestos sintéticos. La planta modula la velocidad e intensidad del transporte para que se sincronice con los niveles de auxinas necesarios en cada lugar de la planta y en cada momento. Se ha visto que controlan: Alargamiento o elongación de las células y. El transporte polar desempeña un importante papel en el modo de acción de las auxinas. Por ejemplo.Otros experimentos que avalan esta hipótesis son el uso de compuestos que pueden acoplarse con los transportadores de salida de AIA e inhibir el transporte polar. Van a inhibir el crecimiento al impedir que las auxinas lleguen al lugar donde son necesarias. A una rama se le corta el meristemo apical. la formación de raíces adventicias. División celular del cambium. A continuación se hace una hendidura que afecta a los elementos conductores (el xilema). El enraizamiento de esquejes. En una yema se aplicó AIA exógeno y se vio que el xilema se diferenciaba. la zona de síntesis de la auxina ha sido eliminada. por tanto.

se inhibe la producción de yemas axilares y vuelve a haber dominancia apical. Los tallos presentan fototropismo positivo y las raíces fototropismo negativo. Al poco tiempo. desarrollando un fruto sin semillas.- - - Formación de raíces adventicias. Esto se produce por transporte lateral de auxinas desde la zona iluminada a la no iluminada. se denomina gravitropismo o geotropismo. hay mayor nivel de auxinas en el lado que no recibe luz y. las citokininas las yemas laterales. se vio que los amiloplastos no se disponían de forma uniforme y. Se usa en invernaderos para enraizar más rápido claveles y otras plantas ornamentales Estimulan la partenocarpia de los frutos. crecen más y se produce curvatura hacia el lado iluminado. con lo cual. por eso. Se hicieron estudios microscópicos. En las raíces obligadas a estar horizontales frente al suelo. en la zona de la cofia había una serie de amiloplastos (plastos donde se acumula el almidón) dispuestos de forma uniforme sobre el RE. no había una presión uniforme sobre el RE. la planta pierde la dominancia apical. Están controlados por auxinas. Al eliminar el ápice de una planta. - Tropismos. Se vio que en las raíces verticales. Movimientos para alejarse o acercarse a un estímulo. o Geotropismo. colocamos auxina exógena en el ápice amputado. En el tallo. comienzan a crecer yemas laterales. Este desequilibrio de la presión sobre el RE es una señal diferencial que hace que la auxina se distribuya de forma 11 . se conoce como fototropismo. Un fruto partenocárpico se ha desarrollado sin tener semillas en su interior. A veces. ejerciendo una presión. en el ovario de la flor se concentran altos niveles de auxinas y giberelinas y lo toma como señal de que ha sido fecundado. Las auxinas favorecen la formación de raíces adventicias. Si tras esto. Si es la gravedad. Las auxinas favorecen la dominancia apical. Si el estímulo es la luz. Dominancia apical. la zona de síntesis de auxinas.

La pared celular es un entramado de fibras de celulosa unidas a hemicelulosas. creciendo más la mitad superior. que se distribuye a mucha mayor concentración en la mitad inferior que en la mitad superior. se produce una distribución desigual de los amiloplastos sobre el RE y se produce una diferencia de presión. Cuando la distribución de los amiloplastos en el RE es simétrica. Niveles tan altos inhiben el crecimiento en la mitad inferior de la célula de la raíz. Mecanismo de acción de las auxinas. el AIA que llega a la raíz se distribuye homogéneamente en ambas mitades de la raíz y crecen de manera sincrónica. Si obligamos a la raíz a estar paralela al suelo. en la que existe una estrecha relación entre los amiloplastos y el RE. Esto va a provocar una distribución diferente de AIA. sustancias pécticas y algunas proteínas estructurales.diferente en el espacio de la raíz. El crecimiento implica una ruptura en algunos de 12 . El desequilibrio en la presión ejercida sobre el RE puede originar una señal diferencial correspondiente a la gravipercepción.

La incubación de los tejidos en medios ácidos ejerce un efecto similar al de la auxina. En el caso de las monocotiledóneas parece existir una degradación en ciertos glucanos de la pared. mientras que en las dicotiledóneas probablemente tenga lugar una despolimerización en los xiloglucanos. mediada por las proteínas llamadas expansinas. mientras que la incubación en disoluciones reguladoras neutras contrarresta el efecto de las auxinas. la pared primaria debe perder parte de su rigidez para que la célula pueda elongarse. podría ser otro mecanismo importante.estos enlaces para permitir la expansión celular. La auxina provoca la excreción de protones en las células que crecen (crecimiento primario). se deforma y permite el alargamiento. La vacuola presiona a la membrana plasmática. y ésta a la pared celular. Es decir. Como la pared celular ya no tiene tanta rigidez. 13 . También se produce una entrada masiva de H2O en la célula. aumenta el volumen de la vacuola y la presión de turgencia. Hipótesis ácida del crecimiento. La ruptura de puentes de hidrógeno entre microfibrillas de celulosa. Para que este mecanismo tenga lugar debe producirse la unión entre la auxina y su receptor.

así como una alta afinidad. por el momento. La acción de la auxina es doble. Activa el bombeo de protones desde el citosol a la pared celular. Cuando la auxina se acopla con el receptor (que no se sabe si es soluble o de membrana) hay una mayor tasa de liberación de protones del citosol a la pared. es una ABP-1 (auxin binding protein 1) aislada en coleoptilos de maíz y consistente en un dímero con dos subunidades de 22 kDa cada una. Una proteína se considera receptor auxínico cuando presenta una elevada especificidad para estas sustancias (naturales o sintéticas). es decir. Es decir. 14 . y se activan las enzimas hidrolíticas que van a despolimerizar a la pared. la auxina provoca que la entrada de agua pueda alargar a la célula debilitando la pared primaria. El pH en la pared baja. El AIA también puede activar segundos mensajeros que activarían la síntesis de mRNA para ATPasas. activa las ATPasas. La fuerza impulsora del crecimiento es la entrada de agua.Receptores auxínicos. El receptor más aceptado. estimulan la actividad y la síntesis de novo de las ATPasas. La unión debe ser reversible.

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