FISIOLOGÍA VEGETAL. TEMA 19. AUXINAS: INTRODUCCIÓN.

El descubrimiento de las auxinas surgió como algo colateral a otro tipo de investigaciones. Las observaciones sobre los tropismos contribuyeron al descubrimiento de las hormonas vegetales. Julius von Sachs, a finales del siglo XIX, postula la existencia de sustancias morfogenéticas, algunas sustancias químicas que eran responsables de los efectos morfogenéticos. Charles Darwin se interesa en la capacidad de movimiento que poseen las plantas y principalmente sobre el fototropismo (movimiento de las plantas hacia un estímulo luminoso) en coleoptilos de gramíneas. Boysen-Jensen provoca la curvatura en un coleoptilo decapitado, tras restituir el ápice.

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Las semillas de gramíneas, al germinar, primero emiten la radícula. Tras esto desarrollan el coleoptilo, que tiene como misión proteger a la hoja primaria. Hasta que la semilla germinada no vence la barrera del suelo, el coleoptilo protege al meristemo contenido en la hoja primaria. Una vez que la semilla sobresale, el coleoptilo se rompe, y la hoja primaria sale al exterior, se desenrolla y comienza a captar la luz (autotrofía). Alguna sustancia debía sintetizarse para regular todo este proceso. Darwin, trabajando con coleoptilos de avena, utilizó una fuente de luz lateral y vio como los coleoptilos se orientaban hacia el lado de donde provenía el foco luminoso. Cuando cortó el ápice del coleoptilo, éste no crecía hacia la luz. Lo cubrió con un material opaco, y tampoco había respuesta fototrópica hacia la luz. Sin embargo, cuando lo cubrió con un material transparente que permitía el paso de la luz, sí hubo respuesta hacia la luz. También cubrió el resto del coleoptilo, dejando libre el ápice, con un material opaco y sí había respuesta. Esto indicaba que había algo en el ápice del coleoptilo, que en presencia de luz, era responsable del movimiento dirigido hacia la luz. Boysen-Jensen cortó el ápice del coleoptilo, pero lo mantuvo interconectado al resto de la planta con agar, sí había respuesta. Hizo lo mismo pero interponiendo una lámina de mica (impermeable) entre el ápice y el resto del coleoptilo, y no había respuesta. Esto quería decir que un compuesto sintetizado por el ápice difundía al resto del coleoptilo y producía el fototropismo.

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Igual al AIA. En 1946. en 1928. Tras un tiempo. después se vio que eran las auxinas. La distribución de auxinas es diferente en la zona enfrentada a la luz y en la que está de cara a la oscuridad. entre 1934 y 1935. éste se alargaba hacia arriba uniformemente. derivado del Trp. usando extractos de cultivos del hongo Rhizopus Consiguieron obtener una sustancia a la que se denominó auxina. son: Ácido fenilacético (detectado en tallos de tomate y girasol).Ellos no sabían qué compuesto era. 2 . partiendo de orina humana. Went decapitó un ápice de coleoptilo y lo situó sobre un bloque de agar y una fuente luminosa. Thimann. Es un derivado clorado. Otras auxinas naturales importantes. con una cadena lateral de Acetato. W. AIA es la más importante porque está distribuida ampliamente por todo el Reino vegetal.V. el primer bioensayo que permitía establecer una relación entre la cantidad de estímulo aplicado y la respuesta fisiológica observada. lo que produce la curvatura. F. pero no se curvaba porque la sustancia difundía por igual en los dos lados del coleoptilo. El compuesto presenta un núcleo indólico. puso sólo el bloque sin ápice sobre el coleoptilo decapitado. si situaba el bloque de agar de forma que cubriera todo el coleoptilo decapitado. Ácido 4-cloro-indolacético (en guisante). Haagen-Smit y Erxleben. y K. Tras varios intentos. provocaba una diferencia de concentración y se producía la curvatura. en ausencia de luz. En las plantas existen otras hormonas con efectos similares al AIA. En ausencia de luz pero con las sustancias que habían difundido al agar. del griego “hacer crecer” o “incrementar” y cuya estructura química resultó ser la del ácido indolil 3-acético. pero la cadena lateral es un Butirato. comúnmente llamado ácido indolacético o AIA. ya que las células con más auxinas (zona oscura) se elongan más. Si lo situaba sobre un lado u otro de manera desigual. Se detectó la presencia de AIA endógeno en el endospermo inmaduro de semillas de maíz. Ácido indolbutírico (IBA). el AIA se aisló por primera vez de plantas. in vivo. Went elaboró. dos grupos: Kijgl. y esta diferencia de concentración de auxinas en las células produce el fototropismo.

3 . La sensibilidad de un tejido u órgano puede variar con la edad y con las condiciones ambientales. Modulado por muchos factores ambientales.4-diclorofenoxiacético (2. Sensibilidad frente a las auxinas. La efectividad de la unión receptor-hormona. el óptimo está en 10-3 g/L. La concentración óptima de AIA para el crecimiento en la raíz es de 10-7 g/L. más allá de esta cifra se inhibe el crecimiento. para abastecer a la Agricultura. En la raíz se estimulará más y los tallos menos. así como del tipo de órgano tratado. por encima de esa cifra se inhibe el crecimiento. y éstas más sensibles que los tallos. como son: Ácido naftalenacético (ANA). estimular o inhibir el crecimiento (como herbicidas). Esto implica que podemos utilizar las auxinas con dos finalidades. pero superado ese óptimo (en cualquier órgano) producen un efecto contrario e inhiben la elongación. Las respuestas que se producen tras la aplicación de auxinas a las plantas dependen de la concentración de hormona. Cada órgano presenta una sensibilidad diferente frente a la auxina. en función de si se trata de raíz.Los laboratorios han sintetizado compuestos químicos sintéticos similares.4-D). Por ejemplo. Concentración hormonal. Ácido 2. Las raíces son más sensibles que las yemas. y tendrá diferentes efectos en órganos distintos. la misma concentración estimulará más o menos el crecimiento. Para estimular el crecimiento del tallo. Las auxinas actúan en un rango de concentraciones hasta que llegan a un óptimo. Factores que afectan a la actividad auxínica. tallo o brote. La sensibilidad va a depender de: La concentración de receptores hormonales. El AIA tiene diferentes efectos a diferentes concentraciones.

Métodos físico-químicos: HPLC. También veremos el transporte. y los comparamos con la recta de calibrado. Parece ser que la ruta mayoritaria para el AIA. Primero se hace una recta de calibrado. Test de la curvatura del coleoptilo de avena. Después. Bioensayo. o cromatografía líquida de alta presión (detectores: fluorimétrico. que se da en la mayoría de las especies. que sólo difunda a un lado del coleoptilo. el 4 . El grado de curvatura producido en el coleoptilo va a ser proporcional a la cantidad de AIA. es la de la parte central de la figura. Esas secciones de coleoptilo. Inmunoensayo. colocamos bloques de agar que contenga auxina sobre la zona decapitada del coleoptilo en posición distorsionada. al cabo de 24h. Con esto realizamos una recta de calibrado. electroquímico y masas). Se hacen secciones de coleoptilo de avena. Luego hacemos un extracto de la planta que queremos estudiar.Métodos para cuantificar las auxinas. Bioensayos. Con esto realizamos una recta de calibrado. Al decapitar el coleoptilo. Ahora midiendo el grado de curvatura en cualquier coleoptilo y comparando con la recta. la conjugación y el catabolismo. regulando homeostáticamente. eliminamos el lugar donde se sintetiza la hormona. Para producir la curvatura. La concentración de AIA que se corresponda a ese incremento en el crecimiento será la concentración de AIA presente en el extracto. mediante descarboxilación. En la actualidad existen otros métodos. Bioensayo. es decir. por un proceso de transaminacion se convierte en Ácido Indol-3-pirúvico. Incubamos secciones de coleoptilo en ese extracto y observamos el incremento de tamaño de las secciones. Biosíntesis de AIA. Tanto el metabolismo como el transporte van a determinar. Todas parten del Trp. podemos determinar el grado de AIA endógeno. Metabolismo y transporte de AIA. la ruta del ácido indolpirúvico parte de Trp y. habrán crecido más o menos. Hasta hace pocos años los bioensayos eran el único método para cuantificar estas hormonas. Se van incubando secciones en distintas concentraciones de AIA. aunque no pertenece a la ruta metabólica. Crecimiento de segmentos de coleoptilo de avena. En la mayoría de las plantas. GC. cromatografía de gases (detector: masas). que la planta tenga las cantidades de AIA necesarias para el crecimiento vegetal adecuado a cada momento y cada lugar. Vamos a analizar la biosíntesis. Se mide el grado de curvatura que induce la auxina al estar en contacto con un coleoptilo decapitado.

Algunas plantas presentan la ruta de la Triptamina. Éste compuesto puede pasar directamente a Indol-3-acetonitrilo por pérdida de una molécula de H2O. pasa a Ácido Indol-3-acético. el Indol-3acetaldehido pasa a Ácido Indol 3-acético. mediante una nitrilasa. o llegar a lo mismo mediante etapas intermedias. mediante oxidación. 5 . Este Indol-3-acetonitrilo. Y ahora. se transforma en Indol3-acetaldehido. El Trp sufre una descarboxilación. La Triptamina.Ácido Indol-3-pirúvico pasa a Indol-3-acetaldehido. mediante desaminación oxidativa. el Trp sufre una descarboxilación oxidativa y se forma la Indol-3-acetaldoxima. Otra ruta minoritaria que sólo se da en las Crucíferas (Brasicaceae). que va a generar Triptamina.

péptidos. El AIA cuando se conjuga con otras proteínas conserva su estructura. Además. oligosacáridos. La unión con azúcares se produce mediante enlaces éster. En algunos tejidos. hay enzimas que pueden hidrolizar de nuevo el AIA cuando la planta requiera niveles de AIA libre. que forman compuestos como el ácido indolacetilaspártico (AIAasp). - Estos conjugados se dan como forma de almacenamiento de AIA. para dar compuestos como el indolacetilglucósido (AIAglu). Aunque estos compuestos son inactivos fisiológicamente hablando. como proteger el AIA de la oxidación por peroxidasa. proteínas. actúan como formas de protección del AIA frente al ataque peroxidativo. la mayor parte del AIA se encuentra en forma de conjugados. Catabolismo de AIA. y los productos resultantes carecen de actividad biológica. Se utiliza esta terminología para determinar todos los compuestos que se forman mediante enlaces covalentes entre el AIA y otras moléculas. La unión de AIA con aminoácidos se produce mediante enlaces amida. hidroliza los conjugados. La oxidación puede ser descarboxilativa o no descarboxilativa. etc. glucosa. que implica la pérdida de la actividad biológica de la hormona. pero pierde su actividad biológica.Conjugación de AIA. Estas dos rutas son irreversibles. ya que a niveles elevados podían inhibir el crecimiento. Es frecuente la conjugación con aminoácidos. Cuando la célula detecta que necesita AIA libre para una etapa fisiológica determinada. Estas estructuras conjugadas tienen otras funciones importantes. La oxidación del AIA es un proceso catabólico irreversible. las estructuras conjugadas pueden actuar como un mecanismo de detoxificación para eliminar el exceso de auxina. 6 . es decir. Auxina ligada y auxina conjugada son sinónimas. como hemos dicho. y se detectan en semillas u otros órganos de almacenamiento (reserva). Este nuevo compuesto no tiene actividad biológica. liberando AIA fisiológicamente activo.

los monofenoles. respectivamente. de forma indirecta. Aceleran la degradación del AIA. ya que algunos metabolitos secundarios como son los fenoles modulan el crecimiento.y polifenoles (Flavonoides). activándola o inhibiéndola. Los productos iniciales de la reacción son indol-3-metanol y oxindol-3-metanol. en la ruta de la oxidación descarboxilativa. Resumiendo. Además. el H2O2. La descarboxilación siempre se produce en la cadena lateral. hay una oxidación. modulando la actividad de la AIA oxidasa. y algunos iones metálicos como el Mn . Oxidación descarboxilativa. o en el núcleo indólico. dependiendo de que la oxidación se produzca en la cadena lateral o el núcleo indólico. dando como primer producto oxindol-3-metanol. que tiene actividad peroxidasa. Hay compuestos que pueden modular la actividad catabólica de esta hormona.Catabolismo de AIA. como los di. que puede ser en la propia cadena lateral. Estos compuestos fenólicos más complejos protegen al AIA de la AIA oxidasa. dando como primer producto indol-3-metanol. En ambos casos es un proceso descarboxilativo. Los compuestos que activan la reacción son. La oxidación descarboxilativa está catalizada por la AIA oxidasa. Esto es importante. Otros compuestos inhiben a la enzima. la descarboxilación se da en la cadena lateral. 2+ 7 .

sólo que sería acrópeto. siempre va desde el ápice al tallo. Las mismas conclusiones sacaríamos en la raíz. Oxidación no descarboxilativa. es decir. todo el AIA radioactivo se encuentra en la base. Transporte de AIA. la oxidación no descarboxilativa sólo se ha podido comprobar en ciertas especies. Las principales características del transporte polar de auxinas son: La dirección del transporte está polarizada. posteriormente. transcurrido un tiempo. y un bloque de agar receptor en la base. - 8 . tienen un mecanismo propio que las diferencia del resto. También pueden llegar a los diferentes órganos a través de los tejidos vasculares. células asociadas a floema). donde se movilizan por difusión. Es específico de auxinas. Se ve que. Esta vía de transporte polar con gasto de energía se denomina transporte polar activo. y en la raíz la dirección es preferentemente acrópeta. células no vasculares. Si invertimos el tallo. desde la base de la raíz hacia el ápice. asociados a los elementos conductores (células del cambium. ya que no se produce en ausencia de O2 ni en presencia de inhibidores de la síntesis de ATP. se produce desde el ápice hacia la base del tallo (transporte basípeto). es decir. al ácido 7hidroxi-2-oxindol-3-acético.Catabolismo de AIA. La oxidación no descarboxilativa se produce en el anillo indólico de AIA sin pérdida del grupo carboxilo. Las auxinas no se movilizan a largas distancias como el resto de hormonas. El movimiento del AIA requiere energía metabólica. Esto indica que el transporte está polarizado. se observa que el transporte está bloqueado. Se movilizan por los tejidos parenquimáticos. Colocamos bloques de agar con AIA radioactivo en la sección que daba al ápice. La reacción da lugar al ácido 2-oxindol-3-acético y. Todas las hormonas vegetales pueden recorrer distancias cortas entre células próximas. Diseccionamos un trozo de tallo. por xilema o floema. es decir. A diferencia de la oxidación descarboxilativa. y ninguna otra hormona lo presenta.

entraría en la célula siguiente.5). a nivel celular. se ha demostrado con la hipótesis quimiosmótica.Esto. La hipótesis quimiosmótica presupone el movimiento de AIA de una célula a la inmediatamente inferior a lo largo de una columna de células transportadoras. La membrana es impermeable al anión AIA-. permitiría la entrada de la molécula que.por el plasmalesma basal mediado por transportadores. La energía se necesita para mantener el gradiente de pH entre la pared celular y el interior de la célula (bombeo de protones) y para el transporte del AIA. en la base de las células transportadoras. Este gradiente de pH sería generado por bombas protónicas (H+/ATPasas de la membrana plasmática) que mantendrían un pH más bajo en la pared celular (pH = 5) que en el citoplasma (pH entre 7 y 7.+ H+ debido al mayor pH. que sólo podría salir de la célula mediante transportadores específicos. exclusivamente. La membrana plasmática. La polaridad del transporte vendría dada por la distribución asimétrica de estos transportadores de salida que estarían localizados. La difusión estaría favorecida por el gradiente de pH existente a ambos lados de la membrana plasmática. Para que el AIA entre de forma no disociada debe existir un pH que facilite que esté en forma protonada. el bajo pH de la pared regeneraría la molécula de AIA (AIAH) que. La entrada de AIA a las células transportadoras se produciría por toda la superficie celular. se disociaría en AIA. De esta manera entraría sin gasto de energía en la membrana plasmática. de esta forma. 9 . Fuera de la célula. bien mediante transportadores de entrada (difusión facilitada). una vez en el interior de la célula. permeable al AIA no disociado (AIAH). bien por difusión simple del AIA no disociado (AIAH).

El transporte polar desempeña un importante papel en el modo de acción de las auxinas. Efectos fisiológicos mediados por auxinas. La dominancia apical. Por ejemplo. Estos compuestos pueden bloquear el transporte de forma total o parcial.Otros experimentos que avalan esta hipótesis son el uso de compuestos que pueden acoplarse con los transportadores de salida de AIA e inhibir el transporte polar. la zona de síntesis de la auxina ha sido eliminada. los flavonoides como Genisteína o Quercetina. A continuación se hace una hendidura que afecta a los elementos conductores (el xilema). Van a inhibir el crecimiento al impedir que las auxinas lleguen al lugar donde son necesarias. - 10 . u otros compuestos sintéticos. División celular del cambium. En una yema se aplicó AIA exógeno y se vio que el xilema se diferenciaba. por tanto. etc. A una rama se le corta el meristemo apical. ya que las raíces tienen mayor afinidad por ellas. Las auxinas están implicadas en muchos procesos del desarrollo vegetal porque afectan a la división. Se ha visto que controlan: Alargamiento o elongación de las células y. El transporte polar puede intervenir en procesos como: El crecimiento del tallo. El enraizamiento de esquejes. La diferenciación vascular. Pero no van a necesitar la misma concentración de auxinas. dependiendo de su concentración y el número de transportadores que bloqueen. La planta modula la velocidad e intensidad del transporte para que se sincronice con los niveles de auxinas necesarios en cada lugar de la planta y en cada momento. el alargamiento de raíces y de tallos. crecimiento y diferenciación de las células. cambian los niveles óptimos. la diferenciación vascular. la formación de raíces adventicias.

en el ovario de la flor se concentran altos niveles de auxinas y giberelinas y lo toma como señal de que ha sido fecundado. En el tallo. Están controlados por auxinas. - Tropismos. Se vio que en las raíces verticales.- - - Formación de raíces adventicias. Las auxinas favorecen la dominancia apical. Esto se produce por transporte lateral de auxinas desde la zona iluminada a la no iluminada. Movimientos para alejarse o acercarse a un estímulo. ejerciendo una presión. se inhibe la producción de yemas axilares y vuelve a haber dominancia apical. Si el estímulo es la luz. Un fruto partenocárpico se ha desarrollado sin tener semillas en su interior. no había una presión uniforme sobre el RE. Este desequilibrio de la presión sobre el RE es una señal diferencial que hace que la auxina se distribuya de forma 11 . con lo cual. comienzan a crecer yemas laterales. se denomina gravitropismo o geotropismo. En las raíces obligadas a estar horizontales frente al suelo. por eso. desarrollando un fruto sin semillas. Las auxinas favorecen la formación de raíces adventicias. hay mayor nivel de auxinas en el lado que no recibe luz y. Si es la gravedad. se conoce como fototropismo. Al poco tiempo. la zona de síntesis de auxinas. las citokininas las yemas laterales. la planta pierde la dominancia apical. se vio que los amiloplastos no se disponían de forma uniforme y. colocamos auxina exógena en el ápice amputado. Si tras esto. A veces. en la zona de la cofia había una serie de amiloplastos (plastos donde se acumula el almidón) dispuestos de forma uniforme sobre el RE. Dominancia apical. Los tallos presentan fototropismo positivo y las raíces fototropismo negativo. crecen más y se produce curvatura hacia el lado iluminado. Se hicieron estudios microscópicos. Al eliminar el ápice de una planta. Se usa en invernaderos para enraizar más rápido claveles y otras plantas ornamentales Estimulan la partenocarpia de los frutos. o Geotropismo.

Cuando la distribución de los amiloplastos en el RE es simétrica. se produce una distribución desigual de los amiloplastos sobre el RE y se produce una diferencia de presión. Esto va a provocar una distribución diferente de AIA. Niveles tan altos inhiben el crecimiento en la mitad inferior de la célula de la raíz. El desequilibrio en la presión ejercida sobre el RE puede originar una señal diferencial correspondiente a la gravipercepción. La pared celular es un entramado de fibras de celulosa unidas a hemicelulosas. Mecanismo de acción de las auxinas. el AIA que llega a la raíz se distribuye homogéneamente en ambas mitades de la raíz y crecen de manera sincrónica. que se distribuye a mucha mayor concentración en la mitad inferior que en la mitad superior.diferente en el espacio de la raíz. creciendo más la mitad superior. en la que existe una estrecha relación entre los amiloplastos y el RE. Si obligamos a la raíz a estar paralela al suelo. El crecimiento implica una ruptura en algunos de 12 . sustancias pécticas y algunas proteínas estructurales.

mientras que la incubación en disoluciones reguladoras neutras contrarresta el efecto de las auxinas. La incubación de los tejidos en medios ácidos ejerce un efecto similar al de la auxina. podría ser otro mecanismo importante. mediada por las proteínas llamadas expansinas. y ésta a la pared celular. La auxina provoca la excreción de protones en las células que crecen (crecimiento primario). Es decir. aumenta el volumen de la vacuola y la presión de turgencia.estos enlaces para permitir la expansión celular. La vacuola presiona a la membrana plasmática. mientras que en las dicotiledóneas probablemente tenga lugar una despolimerización en los xiloglucanos. También se produce una entrada masiva de H2O en la célula. En el caso de las monocotiledóneas parece existir una degradación en ciertos glucanos de la pared. Hipótesis ácida del crecimiento. La ruptura de puentes de hidrógeno entre microfibrillas de celulosa. Para que este mecanismo tenga lugar debe producirse la unión entre la auxina y su receptor. 13 . la pared primaria debe perder parte de su rigidez para que la célula pueda elongarse. Como la pared celular ya no tiene tanta rigidez. se deforma y permite el alargamiento.

la auxina provoca que la entrada de agua pueda alargar a la célula debilitando la pared primaria. Es decir.Receptores auxínicos. estimulan la actividad y la síntesis de novo de las ATPasas. 14 . es una ABP-1 (auxin binding protein 1) aislada en coleoptilos de maíz y consistente en un dímero con dos subunidades de 22 kDa cada una. El AIA también puede activar segundos mensajeros que activarían la síntesis de mRNA para ATPasas. La acción de la auxina es doble. Una proteína se considera receptor auxínico cuando presenta una elevada especificidad para estas sustancias (naturales o sintéticas). y se activan las enzimas hidrolíticas que van a despolimerizar a la pared. por el momento. Cuando la auxina se acopla con el receptor (que no se sabe si es soluble o de membrana) hay una mayor tasa de liberación de protones del citosol a la pared. La unión debe ser reversible. Activa el bombeo de protones desde el citosol a la pared celular. activa las ATPasas. El receptor más aceptado. La fuerza impulsora del crecimiento es la entrada de agua. así como una alta afinidad. El pH en la pared baja. es decir.

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