FISIOLOGÍA VEGETAL. TEMA 19. AUXINAS: INTRODUCCIÓN.

El descubrimiento de las auxinas surgió como algo colateral a otro tipo de investigaciones. Las observaciones sobre los tropismos contribuyeron al descubrimiento de las hormonas vegetales. Julius von Sachs, a finales del siglo XIX, postula la existencia de sustancias morfogenéticas, algunas sustancias químicas que eran responsables de los efectos morfogenéticos. Charles Darwin se interesa en la capacidad de movimiento que poseen las plantas y principalmente sobre el fototropismo (movimiento de las plantas hacia un estímulo luminoso) en coleoptilos de gramíneas. Boysen-Jensen provoca la curvatura en un coleoptilo decapitado, tras restituir el ápice.

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Las semillas de gramíneas, al germinar, primero emiten la radícula. Tras esto desarrollan el coleoptilo, que tiene como misión proteger a la hoja primaria. Hasta que la semilla germinada no vence la barrera del suelo, el coleoptilo protege al meristemo contenido en la hoja primaria. Una vez que la semilla sobresale, el coleoptilo se rompe, y la hoja primaria sale al exterior, se desenrolla y comienza a captar la luz (autotrofía). Alguna sustancia debía sintetizarse para regular todo este proceso. Darwin, trabajando con coleoptilos de avena, utilizó una fuente de luz lateral y vio como los coleoptilos se orientaban hacia el lado de donde provenía el foco luminoso. Cuando cortó el ápice del coleoptilo, éste no crecía hacia la luz. Lo cubrió con un material opaco, y tampoco había respuesta fototrópica hacia la luz. Sin embargo, cuando lo cubrió con un material transparente que permitía el paso de la luz, sí hubo respuesta hacia la luz. También cubrió el resto del coleoptilo, dejando libre el ápice, con un material opaco y sí había respuesta. Esto indicaba que había algo en el ápice del coleoptilo, que en presencia de luz, era responsable del movimiento dirigido hacia la luz. Boysen-Jensen cortó el ápice del coleoptilo, pero lo mantuvo interconectado al resto de la planta con agar, sí había respuesta. Hizo lo mismo pero interponiendo una lámina de mica (impermeable) entre el ápice y el resto del coleoptilo, y no había respuesta. Esto quería decir que un compuesto sintetizado por el ápice difundía al resto del coleoptilo y producía el fototropismo.

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dos grupos: Kijgl. Tras varios intentos. en 1928. F. del griego “hacer crecer” o “incrementar” y cuya estructura química resultó ser la del ácido indolil 3-acético. Thimann. Igual al AIA. éste se alargaba hacia arriba uniformemente. después se vio que eran las auxinas. Otras auxinas naturales importantes. El compuesto presenta un núcleo indólico. Ácido 4-cloro-indolacético (en guisante). son: Ácido fenilacético (detectado en tallos de tomate y girasol). En ausencia de luz pero con las sustancias que habían difundido al agar. el AIA se aisló por primera vez de plantas. Went elaboró. con una cadena lateral de Acetato. 2 . En las plantas existen otras hormonas con efectos similares al AIA. ya que las células con más auxinas (zona oscura) se elongan más. y esta diferencia de concentración de auxinas en las células produce el fototropismo. partiendo de orina humana. Haagen-Smit y Erxleben. comúnmente llamado ácido indolacético o AIA. si situaba el bloque de agar de forma que cubriera todo el coleoptilo decapitado. AIA es la más importante porque está distribuida ampliamente por todo el Reino vegetal. in vivo. entre 1934 y 1935. La distribución de auxinas es diferente en la zona enfrentada a la luz y en la que está de cara a la oscuridad. pero la cadena lateral es un Butirato. el primer bioensayo que permitía establecer una relación entre la cantidad de estímulo aplicado y la respuesta fisiológica observada. Ácido indolbutírico (IBA). usando extractos de cultivos del hongo Rhizopus Consiguieron obtener una sustancia a la que se denominó auxina. W.V. Es un derivado clorado.Ellos no sabían qué compuesto era. derivado del Trp. Tras un tiempo. En 1946. en ausencia de luz. puso sólo el bloque sin ápice sobre el coleoptilo decapitado. provocaba una diferencia de concentración y se producía la curvatura. Si lo situaba sobre un lado u otro de manera desigual. pero no se curvaba porque la sustancia difundía por igual en los dos lados del coleoptilo. Se detectó la presencia de AIA endógeno en el endospermo inmaduro de semillas de maíz. lo que produce la curvatura. Went decapitó un ápice de coleoptilo y lo situó sobre un bloque de agar y una fuente luminosa. y K.

para abastecer a la Agricultura. Las raíces son más sensibles que las yemas. Concentración hormonal. más allá de esta cifra se inhibe el crecimiento. pero superado ese óptimo (en cualquier órgano) producen un efecto contrario e inhiben la elongación. como son: Ácido naftalenacético (ANA). en función de si se trata de raíz. Por ejemplo.4-diclorofenoxiacético (2. Para estimular el crecimiento del tallo. Factores que afectan a la actividad auxínica. Esto implica que podemos utilizar las auxinas con dos finalidades. La sensibilidad de un tejido u órgano puede variar con la edad y con las condiciones ambientales. Sensibilidad frente a las auxinas. y tendrá diferentes efectos en órganos distintos. por encima de esa cifra se inhibe el crecimiento. y éstas más sensibles que los tallos. la misma concentración estimulará más o menos el crecimiento. La sensibilidad va a depender de: La concentración de receptores hormonales. La concentración óptima de AIA para el crecimiento en la raíz es de 10-7 g/L.4-D). Las respuestas que se producen tras la aplicación de auxinas a las plantas dependen de la concentración de hormona. tallo o brote. En la raíz se estimulará más y los tallos menos. La efectividad de la unión receptor-hormona. Modulado por muchos factores ambientales.Los laboratorios han sintetizado compuestos químicos sintéticos similares. estimular o inhibir el crecimiento (como herbicidas). El AIA tiene diferentes efectos a diferentes concentraciones. 3 . así como del tipo de órgano tratado. Cada órgano presenta una sensibilidad diferente frente a la auxina. el óptimo está en 10-3 g/L. Las auxinas actúan en un rango de concentraciones hasta que llegan a un óptimo. Ácido 2.

La concentración de AIA que se corresponda a ese incremento en el crecimiento será la concentración de AIA presente en el extracto. colocamos bloques de agar que contenga auxina sobre la zona decapitada del coleoptilo en posición distorsionada. Bioensayo. es la de la parte central de la figura. o cromatografía líquida de alta presión (detectores: fluorimétrico. Esas secciones de coleoptilo. Tanto el metabolismo como el transporte van a determinar. es decir. Se hacen secciones de coleoptilo de avena. y los comparamos con la recta de calibrado. Con esto realizamos una recta de calibrado. Biosíntesis de AIA. Se van incubando secciones en distintas concentraciones de AIA. la conjugación y el catabolismo. También veremos el transporte. la ruta del ácido indolpirúvico parte de Trp y. Con esto realizamos una recta de calibrado. Métodos físico-químicos: HPLC. cromatografía de gases (detector: masas). Metabolismo y transporte de AIA. Luego hacemos un extracto de la planta que queremos estudiar. Se mide el grado de curvatura que induce la auxina al estar en contacto con un coleoptilo decapitado. Al decapitar el coleoptilo. regulando homeostáticamente. al cabo de 24h. que se da en la mayoría de las especies.Métodos para cuantificar las auxinas. habrán crecido más o menos. eliminamos el lugar donde se sintetiza la hormona. Hasta hace pocos años los bioensayos eran el único método para cuantificar estas hormonas. por un proceso de transaminacion se convierte en Ácido Indol-3-pirúvico. Test de la curvatura del coleoptilo de avena. Inmunoensayo. GC. que la planta tenga las cantidades de AIA necesarias para el crecimiento vegetal adecuado a cada momento y cada lugar. Todas parten del Trp. podemos determinar el grado de AIA endógeno. Incubamos secciones de coleoptilo en ese extracto y observamos el incremento de tamaño de las secciones. Parece ser que la ruta mayoritaria para el AIA. que sólo difunda a un lado del coleoptilo. Vamos a analizar la biosíntesis. mediante descarboxilación. En la actualidad existen otros métodos. Para producir la curvatura. Bioensayo. Bioensayos. electroquímico y masas). Ahora midiendo el grado de curvatura en cualquier coleoptilo y comparando con la recta. aunque no pertenece a la ruta metabólica. Crecimiento de segmentos de coleoptilo de avena. En la mayoría de las plantas. Primero se hace una recta de calibrado. Después. El grado de curvatura producido en el coleoptilo va a ser proporcional a la cantidad de AIA. el 4 .

Otra ruta minoritaria que sólo se da en las Crucíferas (Brasicaceae). el Trp sufre una descarboxilación oxidativa y se forma la Indol-3-acetaldoxima. 5 . mediante oxidación. Algunas plantas presentan la ruta de la Triptamina. Y ahora. La Triptamina. pasa a Ácido Indol-3-acético. el Indol-3acetaldehido pasa a Ácido Indol 3-acético. El Trp sufre una descarboxilación. o llegar a lo mismo mediante etapas intermedias. Éste compuesto puede pasar directamente a Indol-3-acetonitrilo por pérdida de una molécula de H2O. mediante desaminación oxidativa.Ácido Indol-3-pirúvico pasa a Indol-3-acetaldehido. que va a generar Triptamina. Este Indol-3-acetonitrilo. se transforma en Indol3-acetaldehido. mediante una nitrilasa.

6 . que implica la pérdida de la actividad biológica de la hormona. hay enzimas que pueden hidrolizar de nuevo el AIA cuando la planta requiera niveles de AIA libre. Estas dos rutas son irreversibles. Catabolismo de AIA.Conjugación de AIA. proteínas. glucosa. liberando AIA fisiológicamente activo. para dar compuestos como el indolacetilglucósido (AIAglu). La unión con azúcares se produce mediante enlaces éster. pero pierde su actividad biológica. Este nuevo compuesto no tiene actividad biológica. Aunque estos compuestos son inactivos fisiológicamente hablando. hidroliza los conjugados. La oxidación del AIA es un proceso catabólico irreversible. es decir. etc. - Estos conjugados se dan como forma de almacenamiento de AIA. La unión de AIA con aminoácidos se produce mediante enlaces amida. Es frecuente la conjugación con aminoácidos. como hemos dicho. y se detectan en semillas u otros órganos de almacenamiento (reserva). la mayor parte del AIA se encuentra en forma de conjugados. oligosacáridos. En algunos tejidos. Se utiliza esta terminología para determinar todos los compuestos que se forman mediante enlaces covalentes entre el AIA y otras moléculas. El AIA cuando se conjuga con otras proteínas conserva su estructura. ya que a niveles elevados podían inhibir el crecimiento. como proteger el AIA de la oxidación por peroxidasa. Cuando la célula detecta que necesita AIA libre para una etapa fisiológica determinada. péptidos. Estas estructuras conjugadas tienen otras funciones importantes. las estructuras conjugadas pueden actuar como un mecanismo de detoxificación para eliminar el exceso de auxina. y los productos resultantes carecen de actividad biológica. Auxina ligada y auxina conjugada son sinónimas. Además. La oxidación puede ser descarboxilativa o no descarboxilativa. actúan como formas de protección del AIA frente al ataque peroxidativo. que forman compuestos como el ácido indolacetilaspártico (AIAasp).

el H2O2. Los compuestos que activan la reacción son. respectivamente. activándola o inhibiéndola. de forma indirecta. los monofenoles. Hay compuestos que pueden modular la actividad catabólica de esta hormona. La descarboxilación siempre se produce en la cadena lateral. ya que algunos metabolitos secundarios como son los fenoles modulan el crecimiento. Estos compuestos fenólicos más complejos protegen al AIA de la AIA oxidasa. La oxidación descarboxilativa está catalizada por la AIA oxidasa. Otros compuestos inhiben a la enzima.y polifenoles (Flavonoides). o en el núcleo indólico. Resumiendo. Esto es importante. que tiene actividad peroxidasa. Además. En ambos casos es un proceso descarboxilativo. 2+ 7 . como los di. y algunos iones metálicos como el Mn . en la ruta de la oxidación descarboxilativa. Oxidación descarboxilativa. dependiendo de que la oxidación se produzca en la cadena lateral o el núcleo indólico. dando como primer producto oxindol-3-metanol. Los productos iniciales de la reacción son indol-3-metanol y oxindol-3-metanol. dando como primer producto indol-3-metanol.Catabolismo de AIA. hay una oxidación. que puede ser en la propia cadena lateral. la descarboxilación se da en la cadena lateral. modulando la actividad de la AIA oxidasa. Aceleran la degradación del AIA.

asociados a los elementos conductores (células del cambium. Esta vía de transporte polar con gasto de energía se denomina transporte polar activo. Todas las hormonas vegetales pueden recorrer distancias cortas entre células próximas. posteriormente. Esto indica que el transporte está polarizado. tienen un mecanismo propio que las diferencia del resto. es decir. Oxidación no descarboxilativa. sólo que sería acrópeto. - 8 . Colocamos bloques de agar con AIA radioactivo en la sección que daba al ápice. y un bloque de agar receptor en la base. es decir. También pueden llegar a los diferentes órganos a través de los tejidos vasculares. A diferencia de la oxidación descarboxilativa. Diseccionamos un trozo de tallo. ya que no se produce en ausencia de O2 ni en presencia de inhibidores de la síntesis de ATP. Si invertimos el tallo. Se movilizan por los tejidos parenquimáticos. Transporte de AIA. Las principales características del transporte polar de auxinas son: La dirección del transporte está polarizada. por xilema o floema. y ninguna otra hormona lo presenta. se observa que el transporte está bloqueado. células asociadas a floema). desde la base de la raíz hacia el ápice. La reacción da lugar al ácido 2-oxindol-3-acético y. es decir. al ácido 7hidroxi-2-oxindol-3-acético.Catabolismo de AIA. siempre va desde el ápice al tallo. transcurrido un tiempo. Se ve que. se produce desde el ápice hacia la base del tallo (transporte basípeto). Es específico de auxinas. donde se movilizan por difusión. Las mismas conclusiones sacaríamos en la raíz. Las auxinas no se movilizan a largas distancias como el resto de hormonas. células no vasculares. La oxidación no descarboxilativa se produce en el anillo indólico de AIA sin pérdida del grupo carboxilo. todo el AIA radioactivo se encuentra en la base. la oxidación no descarboxilativa sólo se ha podido comprobar en ciertas especies. y en la raíz la dirección es preferentemente acrópeta. El movimiento del AIA requiere energía metabólica.

Fuera de la célula.por el plasmalesma basal mediado por transportadores.5). se ha demostrado con la hipótesis quimiosmótica. en la base de las células transportadoras. a nivel celular. permitiría la entrada de la molécula que. una vez en el interior de la célula. Este gradiente de pH sería generado por bombas protónicas (H+/ATPasas de la membrana plasmática) que mantendrían un pH más bajo en la pared celular (pH = 5) que en el citoplasma (pH entre 7 y 7. entraría en la célula siguiente. Para que el AIA entre de forma no disociada debe existir un pH que facilite que esté en forma protonada. bien por difusión simple del AIA no disociado (AIAH). se disociaría en AIA. La entrada de AIA a las células transportadoras se produciría por toda la superficie celular. La polaridad del transporte vendría dada por la distribución asimétrica de estos transportadores de salida que estarían localizados. el bajo pH de la pared regeneraría la molécula de AIA (AIAH) que. permeable al AIA no disociado (AIAH). de esta forma.Esto. exclusivamente. bien mediante transportadores de entrada (difusión facilitada).+ H+ debido al mayor pH. 9 . La difusión estaría favorecida por el gradiente de pH existente a ambos lados de la membrana plasmática. La membrana es impermeable al anión AIA-. La membrana plasmática. La energía se necesita para mantener el gradiente de pH entre la pared celular y el interior de la célula (bombeo de protones) y para el transporte del AIA. que sólo podría salir de la célula mediante transportadores específicos. La hipótesis quimiosmótica presupone el movimiento de AIA de una célula a la inmediatamente inferior a lo largo de una columna de células transportadoras. De esta manera entraría sin gasto de energía en la membrana plasmática.

etc. Por ejemplo. la formación de raíces adventicias. Estos compuestos pueden bloquear el transporte de forma total o parcial. A continuación se hace una hendidura que afecta a los elementos conductores (el xilema). Se ha visto que controlan: Alargamiento o elongación de las células y. dependiendo de su concentración y el número de transportadores que bloqueen. la diferenciación vascular. La dominancia apical. La planta modula la velocidad e intensidad del transporte para que se sincronice con los niveles de auxinas necesarios en cada lugar de la planta y en cada momento. El transporte polar puede intervenir en procesos como: El crecimiento del tallo. la zona de síntesis de la auxina ha sido eliminada. Pero no van a necesitar la misma concentración de auxinas. Van a inhibir el crecimiento al impedir que las auxinas lleguen al lugar donde son necesarias. La diferenciación vascular. División celular del cambium. Las auxinas están implicadas en muchos procesos del desarrollo vegetal porque afectan a la división. El enraizamiento de esquejes. los flavonoides como Genisteína o Quercetina. Efectos fisiológicos mediados por auxinas. ya que las raíces tienen mayor afinidad por ellas. A una rama se le corta el meristemo apical. - 10 . el alargamiento de raíces y de tallos. crecimiento y diferenciación de las células. cambian los niveles óptimos. por tanto.Otros experimentos que avalan esta hipótesis son el uso de compuestos que pueden acoplarse con los transportadores de salida de AIA e inhibir el transporte polar. El transporte polar desempeña un importante papel en el modo de acción de las auxinas. En una yema se aplicó AIA exógeno y se vio que el xilema se diferenciaba. u otros compuestos sintéticos.

las citokininas las yemas laterales. o Geotropismo. en la zona de la cofia había una serie de amiloplastos (plastos donde se acumula el almidón) dispuestos de forma uniforme sobre el RE. hay mayor nivel de auxinas en el lado que no recibe luz y. con lo cual. Al eliminar el ápice de una planta. Se usa en invernaderos para enraizar más rápido claveles y otras plantas ornamentales Estimulan la partenocarpia de los frutos. Un fruto partenocárpico se ha desarrollado sin tener semillas en su interior. comienzan a crecer yemas laterales. Si el estímulo es la luz. - Tropismos. Se vio que en las raíces verticales. la planta pierde la dominancia apical. colocamos auxina exógena en el ápice amputado. se conoce como fototropismo. Dominancia apical. crecen más y se produce curvatura hacia el lado iluminado. En las raíces obligadas a estar horizontales frente al suelo. Si es la gravedad. Movimientos para alejarse o acercarse a un estímulo. En el tallo. Esto se produce por transporte lateral de auxinas desde la zona iluminada a la no iluminada. se vio que los amiloplastos no se disponían de forma uniforme y. Este desequilibrio de la presión sobre el RE es una señal diferencial que hace que la auxina se distribuya de forma 11 . se inhibe la producción de yemas axilares y vuelve a haber dominancia apical. no había una presión uniforme sobre el RE.- - - Formación de raíces adventicias. la zona de síntesis de auxinas. Están controlados por auxinas. ejerciendo una presión. A veces. Al poco tiempo. Las auxinas favorecen la formación de raíces adventicias. Las auxinas favorecen la dominancia apical. en el ovario de la flor se concentran altos niveles de auxinas y giberelinas y lo toma como señal de que ha sido fecundado. Se hicieron estudios microscópicos. Los tallos presentan fototropismo positivo y las raíces fototropismo negativo. por eso. se denomina gravitropismo o geotropismo. Si tras esto. desarrollando un fruto sin semillas.

La pared celular es un entramado de fibras de celulosa unidas a hemicelulosas.diferente en el espacio de la raíz. Niveles tan altos inhiben el crecimiento en la mitad inferior de la célula de la raíz. Mecanismo de acción de las auxinas. Cuando la distribución de los amiloplastos en el RE es simétrica. que se distribuye a mucha mayor concentración en la mitad inferior que en la mitad superior. Si obligamos a la raíz a estar paralela al suelo. El desequilibrio en la presión ejercida sobre el RE puede originar una señal diferencial correspondiente a la gravipercepción. Esto va a provocar una distribución diferente de AIA. sustancias pécticas y algunas proteínas estructurales. se produce una distribución desigual de los amiloplastos sobre el RE y se produce una diferencia de presión. el AIA que llega a la raíz se distribuye homogéneamente en ambas mitades de la raíz y crecen de manera sincrónica. en la que existe una estrecha relación entre los amiloplastos y el RE. creciendo más la mitad superior. El crecimiento implica una ruptura en algunos de 12 .

estos enlaces para permitir la expansión celular. Como la pared celular ya no tiene tanta rigidez. aumenta el volumen de la vacuola y la presión de turgencia. podría ser otro mecanismo importante. mientras que en las dicotiledóneas probablemente tenga lugar una despolimerización en los xiloglucanos. Para que este mecanismo tenga lugar debe producirse la unión entre la auxina y su receptor. 13 . mientras que la incubación en disoluciones reguladoras neutras contrarresta el efecto de las auxinas. La ruptura de puentes de hidrógeno entre microfibrillas de celulosa. La incubación de los tejidos en medios ácidos ejerce un efecto similar al de la auxina. En el caso de las monocotiledóneas parece existir una degradación en ciertos glucanos de la pared. Hipótesis ácida del crecimiento. La auxina provoca la excreción de protones en las células que crecen (crecimiento primario). y ésta a la pared celular. la pared primaria debe perder parte de su rigidez para que la célula pueda elongarse. mediada por las proteínas llamadas expansinas. se deforma y permite el alargamiento. También se produce una entrada masiva de H2O en la célula. Es decir. La vacuola presiona a la membrana plasmática.

y se activan las enzimas hidrolíticas que van a despolimerizar a la pared. Cuando la auxina se acopla con el receptor (que no se sabe si es soluble o de membrana) hay una mayor tasa de liberación de protones del citosol a la pared. La fuerza impulsora del crecimiento es la entrada de agua. La acción de la auxina es doble.Receptores auxínicos. es una ABP-1 (auxin binding protein 1) aislada en coleoptilos de maíz y consistente en un dímero con dos subunidades de 22 kDa cada una. así como una alta afinidad. Activa el bombeo de protones desde el citosol a la pared celular. estimulan la actividad y la síntesis de novo de las ATPasas. la auxina provoca que la entrada de agua pueda alargar a la célula debilitando la pared primaria. El receptor más aceptado. Una proteína se considera receptor auxínico cuando presenta una elevada especificidad para estas sustancias (naturales o sintéticas). El pH en la pared baja. por el momento. 14 . es decir. La unión debe ser reversible. El AIA también puede activar segundos mensajeros que activarían la síntesis de mRNA para ATPasas. activa las ATPasas. Es decir.

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