DETERMINACIN DE CREATININA SRICA

I.

INTRODUCCIN

La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del organismo casi exclusivamente por filtracin renal. Su determinacin en suero, as como el clearance de creatinina endgena constituyen parmetros importantes para el diagnstico de diversas afecciones renales. Sin embargo, debido a los problemas prcticos inherentes a la determinacin del clearance (recoleccin de orina en nios, etc.), la determinacin de creatinina srica es ms utilizada como ndice de funcionalismo renal. Aunque es una sustancia de desecho, la creatinina es una prueba diagnstica esencial, ya que se ha observado que su concentracin en sangre indica con bastante fiabilidad el estado de la funcin renal. Si los riones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo tanto sta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina puede avisar de una posible disfuncin o insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten sntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los anlisis de sangre que se realizan comnmente. Los valores normales de creatinina en la sangre son aproximadamente 0,6 a 1,2 miligramos (mg) por decilitro (dL) en los varones adultos y 0,5 a 1,1 miligramos por decilitro en las mujeres adultas. Los adultos con mucha masa muscular pueden tener ms creatinina en la sangre que la poblacin normal. Las personas ancianas, por otro lado, pueden tener menos creatinina en la sangre de lo normal.

Algunos frmacos pueden producir una elevacin anormal de las concentraciones de creatinina en sangre. Una concentracin muy elevada de creatinina en la sangre puede indicar la necesidad de someterse a dilisis para eliminar las sustancias de deshecho de la sangre.

II. -

OBJETIVOS Luego de la obtencin de una muestra sangunea, el objetivo principal es ser capaz de cuantificar la concentracin de creatinina en personas adultas con el fin de determinar su normalidad.

III.

Correlacionar los resultados como utilidad clnica patgena en sus valores.

REACTIVO, MUESTRA Y MTODO Reactivos provistos Standard: solucin de creatinina 2 mg/dl. Acido Pcrico: solucin de cido pcrico 26 mMol/L Hidrxido de sodio: 1,6 mMol/L

Preparacin del reactivo: Diluir NaOH con agua destilada en proporcin 1:4. Almacenar en frasco de plstico. Para preparar el reactivo de trabajo mezcle Acido pcrico y NaOH diluido en proporcin 1:1. Almacenar frasco de plstico. MUESTRA Suero u orina a) Recoleccin: obtener suero de la manera usual. En el caso de orina, obtener orina de 2 hs o de 24 hs empleando un recipiente perfectamente limpio y manteniendo en el refrigerador (2-10C) durante la recoleccin. Medir la diuresis, tomar una alcuota y efectuar una dilucin 1:50 de la misma. En caso que la diuresis sea de 2 hs, multiplicar el volumen medido por 12 para calcular la cantidad de creatinina eliminada durante 24 hs. b) Aditivos: no se requieren. c) Sustancias interferentes conocidas: sueros con concentraciones de bilirrubina mayores a 50 mg/l producen valores errneos. No interfieren: hemlisis ligera o moderada, hiperlipemia, disproteinemia ni cromgenos no-creatinina (tales como glucosa, cido ascrbico, cetocidos, glutatin o ergotionina). d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la creatinina en suero es estable hasta 24 horas y en orina hasta 4 das, en refrigerador sin agregado de conservadores.

IV.

DETERMINACIN DE CREATININA SRICA Fundamentacin: La creatinina y otros compuestos de la muestra reaccionan con el cido pcrico en medio alcalino dando un complejo color rojo que se cuantifica mediante lectura fotomtrica. La determinacin de creatinina puede llevarse a cabo por medio de una tcnica de punto final, o por una tcnica cintica eliminndose en ambas el color que se debe a los cromgenos no creatinina. En el primer caso, la adicin de cido al medio, destruye el picrato de creatinina pero no el color formado por los dems compuestos. Por lo tanto la diferencia entre la lectura fotomtrica antes y despus del agregado de cido, permite cuantificar la creatinina en forma especfica. En la tcnica cintica, los cromgenos no creatinina, reaccionan dentro de los primeros 30 segundos de iniciada la reaccin, que se comporta como cintica de primer orden para la creatinina. De manera que entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reaccin, el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina.

V.

PROCEDIMIENTO

CREATININA + ACIDO PCRICO ------------------------------ COMPLEJO CREATININA PICRATO

COMPONENTES Estndar Muestra Reactivo de trabajo

St 0.1Ml

0.1ml 1ml 1ml

Mezclar e inicie el cronometro. Servir en la cubeta de lectura y leer a los 30 segundos la absorbancia A1. Lea la absorbancia A2 a los 2 minutos. A2-A1 : A. muestra / A. estndar. Hacer todas las lecturas en espectrofotmetro a 505nm, llevado el aparato a cero con el reactivo de trabajo.

Calculos: Suero: creatinina mg/dl: 2 x A.muestra A.standar VALORES NORMALES: HOMBRES: 0,6 1.1 MUJERES: 0,5 0,9

RESULTADOS: MUESTRA: a) A1: 0.099 b) A2: 0.079 STANDARD a) A1: 0.051 b) A2: 0.004

Creatinina srica: 2 x ( 0.020 ) / (0.047 ) Creatinina srica: 2 x (0.42) Creatinina srica: 0.85 mg/dl.

Interpretacin: Segn los valores normales, se evidencia que el resultado obtenido en laboratorio est dentro de los valores normales en un varn y tambin en mujeres, ya que no se especific si la muestra era de un hombre o mujer. Esto nos da indicativos sobre la funcin renal, dicindonos que esta se encuentra normal, es decir no hay dao de este gran importante rgano. Adems nos permite descartar un valor elevado como en el caso de IRA o IRC, obstruccin de las vas urinarias, etc. O disminuida como consecuencia de hepatopata grave, dieta hipo proteica, disminucin de la masa muscular.