placa

Si un componente está la mayor parte soporte, a este conjunto se le llama

del tiempo en la fase móvil el producto un material depositado sobre un
se mueve rápidamente, mientras que si estacionaria es una capa delgada de
se encuentra la mayor parte en la fase tipo de cromatografía donde la fase
estacionaria, el producto queda retenido La cromatografía de capa fina, es un
y su salida es mucho más lenta.
fina
Cromatografía en capa
estacionaria. Es una técnica de separación
hay dos fases una móvil y otra extraordinariamente versátil que
En toda separación cromatografiar presenta distintas variantes
I. INTRODUCCION
II. OBJETIVOS

Conocer y aplicar la técnica de

cromatografía en capa fina, sus
características y los factores que
en ella intervienen.
Deducir, a través del Rf la
relación que existe entre la
polaridad de las sustancias que
se analizan y la de los eluyentes
utilizados.

Aplicar la técnica de c.c.f. como

criterio de pureza e
identificación de las sustancias.
 III.MARCO TEORICO

A. La primera dimensión se
desarrolla hacia arriba, y la
2da hacia la derecha

Al igual que otras cromatografías, consiste

La cromatografía de capa de una fase estacionaria y una fase móvil y
el principio es el mismo: la sustancia de
fina es un procedimiento interés se adherirá a la fase estacionaria o
que se utiliza para se moverá con la fase móvil, viajando una
separar moléculas distancia que es inversamente proporcional
relativamente pequeñas. a la afinidad por la fase estacionaria.
 • Fase estacionaria
• La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de
celulosa o de un gel de silicato unido a una superficie sólida (una
placa de vidrio, aluminio, plástico o papel). Esta superficie sólida
puede ser rígida o flexible. El tipo de fase estacionaria que se utilice
en un experimento dependerá del tipo de moléculas que se quieran
separar.
 •Fase Móvil
• Es la fase que se mueve en una dirección definida.
Puede ser un líquido, un gas o un fluido
supercrítico. La fase móvil consiste en la muestra
que está siendo separada/analizada y el disolvente,
que se mueven por el interior de la columna.
 • Proceso de Adsorción:
Los adsorbentes más utilizados en
la Cromatografía de Capa Fina son:
Sílica gel (se utiliza en el 80% de
las separaciones)
Óxido de Aluminio ó Alúmina
(ácida, neutra ó básica)
Tierra Silícea ó Kieselguhr
Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
Poliamidas

La muestra aplicada en la capa es

adsorbida en la superficie del material
por la acción de fuerzas electrostáticas
(fuerzas de Van der Waals, puentes de
Hidrógeno, efectos inductivos, etc.).
 3.1 Obtención del cromatograma
Se debe preparar la cubeta en la que se
va a realizar la cromatografía. Esta
cubeta es un simple recipiente de vidrio
en donde se añade el eluyente que se
va a utilizar, siempre en un nivel inferior
a la línea base que se ha dibujado en la
placa.
Cuando el nivel se encuentra casi en el
borde superior, se extrae la placa y se
dibuja una nueva línea en este nivel.
El disolvente al ser volátil se evapora en
poco tiempo dejando la placa seca.
En la cubeta se introduce una tira de
papel de filtro para que el vapor del
eluyente esté por toda la cubeta.
En este momento se introduce con
cuidado la placa en la cubeta y se tapa,
esperando a que el nivel del eluyente
ascienda por la placa.
Ahora se debe buscar un método para
visualizar el resultado del
cromatograma y ver la separación de
los componentes pinchados en la placa.
En el caso de que la sustancia sea
coloreada no habría ningún problema
ya que se verían los componentes.
 3.2 Interpretación: factor de retención R f

• El factor Rf es el cociente de la distancia recorrida

por el compuesto (dc) entre la distancia recorrida
por el eluyente (de). Obviamente el Rf toma valores
entre 0.0 y 1.0. Siempre ha de indicarse el eluyente
y el soporte en el que se ha determinado.

dc
Rf 
de
 3.3 FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SEPARACIÓN POR
CROMATOGRAFÍA

Polaridad
• El motivo principal es su diferente polaridad. Moléculas
más polares quedan más retenidas en la fase
estacionaria, es decir "corren menos", mientras que las
moléculas menos polares se ven menos retenidas y
avanzan a mayor velocidad arrastradas por eluyente.

Elección del eluyente

• La polaridad de la mezcla de disolventes - eluyente -
utilizado es clave para obtener una buena separación.
 3.4 Aparatos y materiales.
Instrumentos que mas se utilizan en la cromatografía de
capa fina:
• Cubeta cromatográfica
• - Placas de cromatografía
• - Pipetas de microlitro
• - Recipiente de vidrio con pulverizador
• - Probeta o matraz Erlenmeyer con
• - Secador
• - Plantilla para TLC o regla
• - En caso necesario: lámpara UV para comprobar la
fluorescencia o la disminución de la misma.
 3.5 Cromatografía bidimensional en capa fina
• Para mejorar una separación incompleta, se
combinan dos pasos de cromatografía mono
dimensional de la manera siguiente:
1º paso 2º paso

• Cargar la muestra • Girar 90º la placa

en una esquina de
la placa y
desarrollarla en
sentido ascendente.
desarrollada y seca,
de manera que la
mezcla ya separada
parcialmente se
encuentre en el
borde inferior.
 IV. CONCLUSIONES
En este informe se logró conocer y como aplicar la
cromatografía por capa fina, sus características y los
factores que influyen en la separación por cromatografía
 
Se aprendió a como calcular los valores del factor de
retención de las sustancias para poder deducir la relación
que existe entre la polaridad de las sustancias que se
analizan con la de los eluyentes que se utilizan con ellas y
así mismo poder aplicar un criterio para identificar la
pureza de sustancias de acuerdo con la pigmentación (es)
que estas presenten al realizar la cromatografía.