UVM México Escuela de Ciencias de la Salud

Universidad del Valle de México

Práctica número 6. Determinación de Proteínas con el reactivo de

Buiret.
Ariadna Cristina Bautista Hernández
Asignatura: Bioquímica.
Licenciatura QFBT.
Periodo: 2024-1.
Fecha de Entrega: 25 de Abril de 2024.
Docente: Bióloga Sampablo Ángel Xochitl

Resumen
Se realizó una prueba para determinar el contenido de proteínas en tres muestras problema:
leche, huevo y jugo de mango, al agregar el reactivo el único que no reaccionó fue el jugo;
cuando se les agregó el vinagre nuevamente el único sin reaccionar fue el jugo, ya para
finalizar al agregar la solución salina todos presentaron un ligero cambio.

Palabras claves: proteínas, Buiret, coloración violeta, leche, pipetas.

Introducción
Las proteínas son moléculas grandes y
complejas que desempeñan muchas funciones
críticas en el cuerpo. Realizan la mayor parte
del trabajo en las células y son necesarias para
la estructura, función y regulación de los
tejidos y órganos del cuerpo. Las proteinas
determinan la forma y la estructura de las
células y dirigen casi todos los procesos
vitales.
Todas las proteinas realizan su función de la
misma manera: por unión selectiva a
moléculas.
Nuestros cuerpos están formados por miles de
proteínas diferentes, cada una con una
función específica. Forman los componentes
estructurales de nuestras células y tejidos, así
como muchas enzimas, hormonas y proteínas
activas secretadas de las células inmunes.
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Antes de la Práctica. Después de la Práctica.

¿Quién inventó el reactivo de Biuret? ¿Qué uso se le puede dar al reactivo de Biuret
Gustaw Piotrowski en la industria?
¿Qué sustancias se pueden identificar con este Este detecta la presencia de proteínas,
reactivo? péptidos cortos y otros compuestos con
Se usa en la detección y estimación de dos o más enlaces peptídicos en
las proteínas y péptidos que tienen más sustancias de composición desconocida.
de dos aminoácidos. ¿Qué otras técnicas existen para la
¿Cómo se prepara el reactivo de Biuret? cuantificación de proteínas?
El reactivo de Biuret se prepara del Se utilizaran tres métodos para la
siguiente modo: Disolver 3,8 g de cuantificación de proteínas: Biuret,
CuSO4. 5H2O y 6,7 g NaEDTA en Bradford y BCA. Para cada uno de los
700 ml de H2O. Mientras se agita métodos se realizaran: una curva
añadir 200 ml de NaOH 5N y luego 1g estándar, el cálculo del coeficiente de
de KI como estabilizante. extinción y el rango de sensibilidad.
Anota la reacción que se lleva a cabo entre el
reactivo de Biuret y las proteínas, en caso de que
exista la reacción.
Una reacción que se caracteriza por un
color violeta tras la adición de sulfato de
cobre a todos los componentes que
tengan dos enlaces peptídicos unidos
directamente o a través de un átomo de
carbono intermedio.
Una vez preparado el reactivo de Biuret, ¿Bajo
qué condiciones se mantiene a resguardo y por
qué?
Conservar entre 15°-30°
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Planteamiento del problema. Se agita asegurando que este bien

Conocer o aprender a reconocer la presencia mezclado.
de proteínas en diferentes alimentos o Mantener los tubos a temperatura
soluciones. ambiente y observar resultados.
Justificación. Reacción de los aminoácidos azufrados.
Aprender en que alimentos es más probable Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 mL
encontrar una mayor concentración de de albúmina de huevo (clara de huevo).
proteínas así como en cuales se encuentran Añadir 2 mL de solución de hidróxido
en una menor cantidad o no posee sódico al 20%.
proteínas. Añadir 10 gotas de solución de acetato
Objetivos. de plomo al 5%.
Elaborar el reactivo de Biuret. Calentar el tubo hasta ebullición.
Usar reactivo de Biuret para determinar Si se forma un precipitado de color
proteínas de manera cualitativa. negruzco nos indica que se ha formado
Identificar la reacción que se lleva a sulfuro de plomo, utilizándose el azufre
cabo con el reactivo de Biuret y las de los aminoácidos, lo que nos sirve para
proteínas. identificar proteínas que tienen en su
Materiales. composición aminoácidos con azufre.
Tubo de ensayo
Tripié
Tela metálica con asbesto
Vaso de precipitados de 250 ml
Pipetas de 10 ml.
Gradilla
Varilla de vidrio
Hipótesis.
La mezcla entre el aceite y el hidróxido de
sodio con alcohol debe de condensarse y
obtener un nivel de densidad mayor, a la vez
que una vez que se deje enfriar deberá
solidificarse.
Metodología.
Reactivo de Biuret:
Se vierte en tubos de ensayo 2 mL de
cada una de las muestras solicitadas, las
soluciones de las muestras que están a
manera de sal se preparan al 3% en
solución acuosa.
A cada tubo se vierte 2 mL de reactivo
de Biuret.
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Fotografías tomadas durante la práctica

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Resultados.
Observaciones.
El jugo no presentó cambios muy notables
con respecto al reactivo, al vinagre,
solamente presentó un ligero cambio con la
solución salina. Sin embrago, la leche y el
huevo si reaccionaron al reactivo con la
tonalidad esperada, tornándose de un color
lila traslúcido en el huevo y un lila claro en
la leche.
Conclusión.
Se obtuvieron los resultados deseados del
reactivo con la leche y el huevo.
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