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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO LAB-FCS-BQ

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE


MEDICINA
INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

I. Datos generales
Informe de práctica n° 7
Periodo académico mayo - octubre 2020
Horario de la práctica Lunes 07H00 a 10H00
Fecha de realización 10 de agosto del 2020
de la práctica
Fecha de entrega del 9 de septiembre del 2020
informe de la práctica
Nombre de la docente Dra. María Angélica Barba Maggi, Mgs
Curso Primero
Paralelo A
Grupo n° 3
Nombres y firma de Apellidos y Cédula Firma
los estudiantes nombres
participantes Estrada Estrada 060543001
Jonathan Apolo
Haro Orozco Liseth 0603915448
Veronica

Insuasti Parra Maria 0604886580


Belen
Layedra Castañeda 0604208173
Katy Cecibel
Llango Lopez 0603951385
Vanessa Lisseth
Llerena Pazmiño 0604935635
Henry David
Llerena Vargas 0802758672
Sheyla Leonela
Observaciones
Calificación
Lugar de práctica Aula Virtual Bioquímica II
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Zoom Pro
Microsoft Teams
Laboratorio de Bioquímica Facultad Ciencias de la
Salud/ LAB-FCS-BQ
Unidad sílabo N°5Carbohidratos y lípidos
Resultado de Identifica las estructuras, propiedades y reacciones
aprendizaje características de carbohidratos y lípidos, para
establecer su participación en varios procesos
metabólicos
II. Desarrollo
1. Título de la práctica Reacciones cualitativas de identificación de
carbohidratos y lípidos.
2. Objetivos
2.1. Objetivo general Aplicar reacciones químicas cualitativas para
identificar carbohidratos y lípidos e interpretar
resultados
2.2. Objetivos 2.2.1. Aplicar las pruebas cualitativas de Barfoed,
específicos Molish, Benedict, Fehling, Seliwanoff y Lugol para la
identificación de Glúcidos o Carbohidratos y
relacionar con sus grupos funcionales y/ó estructura,
para interpretar resultados
2.2.2. Utilizar las reacciones cualitativas de lugol en
muestras de alimentos para identificar la presencia
de almidón.
2.2.3. Aplicar reacciones químicas cualitativas de
Salkowsky, Lieberman Buchard y Saponificación,
para la identificación de Lípidos y relacionar con sus
grupos funcionales y/ó estructura, para interpretar
resultados
2.2.4. Establecer la solubilidad de lípidos en diversos
solventes e interpretar resultados.
3. Materiales – Reactivos – Equipos
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A retirar en laboratorio
 44 tubos de ensayo grandes de aprox. 10 ml
 4 gradillas
 5 pipetas de vidrio de 5 ml
 1 pipeta semiautomática de 100 - 1000 ul
 1 pipeta semiautomática de 10 - 100 ul
 2 vasos de precipitación de 250 ml
 1 varilla de agitación
 1 malla metálica
 1 pinza para tubo de ensayo
 1 cronómetro
 1 pera de succión
 1 mortero con pistilo
 1 espátula
 1 reverbero
 1 vórtex
 1 centrífuga
 Papel para pesaje

Dispensados en tubos de ensayo rotulados


 Ácido sulfúrico concentrado
 Anhidrido Acético
 Reactivo de Barfoed
 Reactivo de Molish
 Reactivo de Seliwanoff
 Reactivo de Benedict
 Reactivo Fehling A
 Reactivo Fehling B
 Cloroformo
 Anhídrido acético
 Etanol
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 Butanol
 Benceno
 Lugol
 Hidróxido de sodio al 20%
 Solución de glucosa al 5 %
 Solución de sacarosa al 5 %
 Solución de sacarina al 5 %
 Solución de lactosa al 5 %
 Solución de almidón al 5 %
 Aceite de ricino al 5 %
 Acido esteárico al 5 %

Material para traer en el grupo que no se retira en laboratorio

Grupales:
 2 Franelas de 40 cm cada una
 1 frasco de cloro
 1 frasco de agua destilada de 500 ml
 1 frasco estéril
 Torundas de algodón
 1 frasco de alcohol
 10 gasas estériles
 1 frasco de jabón líquido
 1 dermográfico
 2 cepillos para lavar tubos de ensayo
 1 par de guantes de uso doméstico
 1 frasco con detergente
 puntas azules
 puntas amarillas
 10 jeringuillas de 5 ml
 Tiras multipeg
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 1 lavacara pequeña
 1 paquetes de toallas desechables
 1 cuchillo pequeño
 Traer los tubos de ensayo
 Suero (recolectar en el laboratorio la muestra de sangre y obtener el
suero/2 Tubos de tapa roja grandes)
 Orina (traer 1 muestra de orina en un recipiente estéril 3/4 partes de una
sola persona de cada grupo de práctica)
 10 vasos desechables pequeños transparentes
 Aceite vegetal de cualquier marca (10 ml)
 Aceite de oliva de cualquier marca (10 ml)
 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de pan blanco)
 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de arroz)
 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de pasta o fideo)
 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de carne de res)
 1 pequeña cantidad (aproximadamente 10 g de pechuga de pollo)
 1 manzana
 1 patata

Individuales:
 1 mascarilla
 1 par de guantes de manejo de látex
 1 cobertor de cabello
 1 mascarilla
 1 par de gafas para laboratorio
 1 mandil con el nombre del estudiante y sello de la universidad - Carrera
de Medicina
 1 toalla de mano para uso personal
 Los materiales individuales y grupales no se quedan en el laboratorio,
son de uso permanente en cada jornada de práctica que los estudiantes
deberán traer.
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4. Herramientas didácticas
Materiales, reactivos, equipos de laboratorio, muestras y/ó especímenes
biológicos, aula virtual, recursos multimedia imágenes, videos, texto en guía de
práctica, registros de datos de práctica, formato de informe.
5. Fundamento teórico
CARBOHIDRATOS
Sin duda alguna se puede decir que los carbohidratos son las biomoléculas más
importantes y abundantes de la naturaleza, los cuales se forman durante el
proceso de las fotosíntesis, además cabe destacar que la mayoría de ellos
contienen dentro de su estructura los siguiente elementos característicos:
carbono, oxigeno e hidrogeno por tal razón suelen responder a la siguiente
formula: Cn(H2O)n de allí proviene generalmente su nombre o denominación
pues se los considera como carbonos hidratados, del mismo modo estos
cumplen diversas funciones dentro de nuestro organismo siendo estas: fuente
de energía (glucosa), elementos estructurales (celulosa) y también son
precursores en la producción de otras moléculas de vital importancia dentro de
nuestro organismo (aminoácidos, purinas pirimidinas, etc.). (Carbohidratos, n.d.)
Los Carbohidratos, también llamados hidratos de carbono, glúcidos o azúcares
son la fuente más abundante y económica de energía alimentaria de nuestra
dieta. Están integrados por carbono, hidrógeno y oxígeno. Sin duda alguna los
carbohidratos son los más presisante de consumirlos es nuestra dieta
alimenticia diaria pero claro todo en una cierta cantidad adecuada, donde no nos
provoque alguna patología como en el caso de los niños que puede ocasionar la
caries, y en adultos la diabetes por el exceso de azúcar en la sangre. En estos
podemos encontrar lo que son los polisacáridos en menor proporción los
monosacáridos o disacáridos, donde los primeros se encuentran presentes en
diferentes alimentos como; en la leche, las frutas y el azúcar. Como en cereales,
las legumbres y los tubérculos, mientras que los segundos se encuentran
excepto los monosacáridos (y algunos disacáridos que serán hidrolizados por
una disacaridasa del interior del enterocito) que no precisan ser digerídos
previamente.
Los carbohidratos se clasifican en:
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- Carbohidratos Simples: estos son los azúcares que son absorvidos de


manera rápida debido a su tamaño empiezan a ser digeridos desde la saliva;
estos producen la secreción inmediata de insulina.
- Carbohidratos Complejos: son carbohidratos de absorción más lenta, los
cuales actúan como energía de reserva.
Existen cuatro tipos, en función de su estructura química: los monosacáridos,
los disacáridos, los oligosacáridos y los polisacáridos.
Monosacáridos
Son los más simples, ya que están formados por una sola molécula. Esto los
convierte en la principal fuente de combustible para el organismo y hace posible
que sean usados como una fuente de energía y también en biosíntesis o
anabolismo, el conjunto de procesos del metabolismo destinados a formar los
componentes celulares. También hay algunos tipos de monosacáridos, como la
ribosa o la desoxirribosa, que forman parte del material genético del ADN.
Cuando estos monosacáridos no son necesarios en ninguna de las funciones
que les son propias, se convierten en otra forma diferente como por ejemplo los
polisacáridos.
Disacáridos
Son otro tipo de hidratos de carbono que, como indica su nombre, están
formados por dos moléculas de monosacáridos. Estas pueden hidrolizarse y dar
lugar a dos monosacáridos libres. Entre los disacáridos más comunes están la
sacarosa (el más abundante, que constituye la principal forma de transporte de
los glúcidos en las plantas y organismos vegetales), la lactosa o azúcar de la
leche, la maltosa (que proviene del hidrólisis del almidón) y la celobiosa
(obtenida del hidrólisis de la celulosa).
Oligosacáridos
La estructura de estos carbohidratos es variable y pueden estar formados por
entre tres y nueve moléculas de monosacáridos, unidas por enlaces y que se
liberan cuando se lleva a cabo un proceso de hidrólisis, al igual que ocurre con
los disacáridos. En muchos casos, los oligosacáridos pueden aparecer unidos a
proteínas, dando lugar a lo que se conoce como glucoproteínas.
Polisacáridos
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Son cadenas de más de diez monosacáridos cuya función en el organismo se


relaciona normalmente con labores de estructura o de almacenamiento.
Ejemplos de polisacáridos comunes son el almidón, la amilosa, el glucógeno, la
celulosa y la quitina.
El componente básico de todos los hidratos de carbono es una molécula de
azúcar, una simple unión de carbono, hidrógeno y oxígeno.
Existen diferentes tipos de carbohidratos o hidratos de carbono se agrupan en
dos categorías principales. Los carbohidratos simples son de absorción rápida;
la comida la digiere más rápido y se produce lo que se llama un pico de glucosa
incluyen azúcares, tales como el azúcar de la fruta (fructuosa), el azúcar del
maíz o el azúcar de uva (dextrosa o glucosa), y el azúcar de mesa (sacarosa),
mermeladas estos entre más procesos más manipulación han sufrido se van
volviendo más simples y l cuerpo tardara menos es des componerlos. Los
carbohidratos complejos son de absorción lenta se da cuando los alimentos se
tardan más tiempo en descomponerse y conseguir glucosa que el cuerpo
necesita para funcionar, el sistema nervioso principalmente e cerebro lo extrae
de los hidratos de carbono y va consiguiendo glucosa de a pocos y de una
manera estable también incluyen todo lo hecho de tres o más azúcares unidos.
los carbohidratos en la dieta son alimentos que contienen en mayor o menor
medida azucares tanto simples como compuestos y se pueden encontrar:
azùcares simples como la fructuosa que son las frutas, la galactosa en
productos lácteos azùcares dobles como la lactosa productos lácteos, maltosa
en verduras y cerveza, sacarosa que es el azúcar de mesa.
Función de los carbohidratos
Aunque su función principal es la energética, también hay ciertos hidratos de
carbono cuya función está relacionada con la estructura de las células o
aparatos del organismo, sobre todo en el caso de los polisacáridos. Estos
pueden dar lugar a estructuras esqueléticas muy resistentes y también pueden
formar parte de la estructura propia de otras biomoléculas como proteínas,
grasas y ácidos nucleicos. Gracias a su resistencia, es posible sintetizarlos en el
exterior del cuerpo y utilizarlos para fabricar diversos tejidos, plásticos y otros
productos artificiales.
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Importancia Biológica
1. Aporta con 4 Kcal/Gramo de energía, y es la primera fuente que todo
organismo vivo consume
2. Es un buen desintoxicante metabólico
3. Puede almacenarse como fuente de energía en el hígado y en los músculos
como glucógeno en los anilmales y como celulosa y almidón en las plantas.
Cabe destacar que lo primero que decide consumir el metabolismo son los
carbohidratos, así haya exceso de grasa.
Reacciones cualitativas para la identificación de carbohidratos
Prueba de Barfoed
Esta prueba permite diferenciar entre monosacáridos y disacáridos
reductores, esto a través de la reducción del ion cúprico a óxido cuproso, dicha
reducción sucede más rápidamente con los monosacáridos que con los
disacáridos. (RECONOCIMIENTO Y DIFERENCIACIÓN DE
CARBOHIDRATOS, n.d.)

https://sites.google.com/site/bioquia9/prueba-de-barfoed
Prueba de Molish
Esta prueba está destinada para el reconocimiento general de carbohidratos en
el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico
concentrado hasta monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-
hidroximetil furfural los cuales reaccionan con α-naftol formando un color
púrpura violeta. (RECONOCIMIENTO Y DIFERENCIACIÓN DE
CARBOHIDRATOS, n.d.)
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https://sites.google.com/site/bioquia9/reaccion-de-molish
Prueba de Benedict (da positiva con todos los glúcidos reductores)
Se fundamenta en la presencia del grupo aldehído de la glucosa, que le
convierte en un azúcar reductor.
Si se observa un precipitado rojo ladrillo, amarillo o verdoso, de acuerdo a la
proporción, es positivo para azúcares reductores cualitativamente y
cuantitativamente se relaciona con el siguiente esquema.
COLOR RESULTADO
Azul Negativo
Azul verdoso Ligeros Vestigios
Verde ± 0.5 %
Pardo verdusco ± 1.0 %
Amarillo ± 1.5 %
Rojo Ladrillo ± 2.0 % o más
Esta prueba permite el reconocimiento de carbohidratos reductores, al igual que
el reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cúprico en medio alcalino que
se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilo
hemiacetálico libre. (RECONOCIMIENTO Y DIFERENCIACIÓN DE
CARBOHIDRATOS, n.d.)
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https://actuaciencia.blogspot.com/2018/05/test-de-benedict.html
Prueba de Seliwanoff
Esta prueba es específica para cetosas y se basa en la conversión de la cetosa
en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol
formando así complejos coloreados.

https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/carbohidratos/reaccion-de-
seliwanof
Prueba de Fehling (da positiva con todos los glúcidos reductores):
El catión cúprico (Cu++) del reactivo de Fehling reacciona con los glúcidos
reductores pasando a óxido cuproso, que es un precipitado de color rojo ladrillo.
Esta es una reacción que resulta positiva sólo si el glúcido es reductor. Los
glúcidos reductores se manifiestan en medio alcalino, pero el Cu++ en ese
medio tiende a precipitar espontáneamente como óxido cúprico (que en esa
forma no reacciona), de manera que es necesaria la presencia de tartrato doble
de sodio y potasio en el reactivo para "secuestrar" al catión Cu++, a fin de evitar
la formación del óxido cúprico, y permitir que reaccione con los glúcidos
reductores.
La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo y será negativa si
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queda azul o cambia a un tono azul-verdoso.


Prueba de Lugol
El almidón es un polisacárido, que se forma de la amilosa y amilopectina, a
través de un enlace sacárido.
El lugol contiene yodo y yoduro de potasio, el cual se adsorbe o se fija a la
superficie de la amilosa, lo cual sólo ocurre en frío.
El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro permite
reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una
coloración azul-violeta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de
coloración roja.

https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/prueba-del-almidon

LÍPIDOS
Los lípidos son un grupo de principios inmediatos muy heterogéneo desde un
punto de vista molecular pero que mantienen una característica común: la
solubilidad en disolventes orgánicos y la insolubilidad en medio acuoso.
Participan en funciones orgánicas diversas como la estructural (membranas),
depósitos energéticos, y hormonal o señalización celular. Atendiendo a su
composición se clasifican en lípidos simples y lípidos complejos. (Argüeso
Armesto et al., 2011)
Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por carbono e
hidrógeno y generalmente, en menor proporción, también oxígeno. Además,
ocasionalmente pueden contener también fósforo, nitrógeno y azufre.
Es un grupo de sustancias muy heterogéneas que sólo tienen en común estas
dos características:
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- Son insolubles en agua


- Son solubles en disolventes orgánicos, como éter, cloroformo, benceno, etc.
Tipos de lípidos y su composición
Existen dos tipos de lípidos principales:
Colesterol, ya que forman parte de membranas orgánicas.
Fosfolípidos, principal componente de las membranas biológicas.
Además, los lípidos están formados por ácidos grasos, que se clasifican en
ácidos grasos saturados y ácidos grasos insaturados.
Ácidos grasos saturados
Son aquellos cuyos enlaces son sencillos, dentro de los cuales es posible
encontrar los siguientes ácidos grasos:
- Láurico
- mirístico
- palmítico
- esteárico
- araquídonico.
Ácidos grasos insaturados
Son aquellos cuyos enlaces son dobles, dentro de los cuales se pueden
mencionar los ácidos grasos:
- palmitoleico
- oleico
- linoleico
- linolénico
- araquidonico
Dentro de esta clasificación se encuentran los ácidos grasos esenciales, es
decir los que no pueden ser sintetizados por el organismo del hombre.
Teniendo en cuenta esta definición de lípidos, es importante tener presente que
los lípidos son importantes y deben formar parte de la dieta, ya que a través de
ella tienes acceso a diferentes tipos de ácidos grasos, los cuales, consumidos
en su justa medida, pueden ser beneficiosos para la salud.
Funciones de los lípidos
Aunque a lo largo del presente tema se han ido analizando las funciones
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características de los distintos grupos de lípidos es conveniente finalizar con una


breve recapitulación acerca de las funciones biológicas de los lípidos.
Los lípidos en los seres vivos desempeñan tres tipos de funciones: energéticas,
estructurales y dinámicas.
1. Función energética: Aunque debido a su insolubilidad en agua, con la
consiguiente dificultad para ser transportados en medio acuoso, los lípidos no
pueden ser utilizados como combustible metabólico para un uso inmediato,
constituyen (sobre todo los triacilglicéridos) un excelente almacén de
combustible metabólico a largo plazo.
2. Funciones estructurales: Algunos tipos de lípidos (fosfoglicéridos,
esfingolípidos y colesterol) son componentes esenciales de las membranas
celulares. Otros como las ceras desempeñan funciones de protección y
revestimiento de determinadas superficies, o de aislamiento térmico del
organismo, como los triacilglicéridos almacenados en el tejido adiposo.
3. Funciones dinámicas: Los lípidos más abundantes desempeñan en las
células papeles relativamente "pasivos" como servir de combustible o formar
parte de las membranas. Sin embargo, otros lípidos más escasos realizan
importantes funciones de control y regulación del metabolismo celular. Así,
algunas vitaminas y coenzimas son de naturaleza lipídica, como lo son también
algunas hormonas, pigmentos fotosintéticos y otras biomoléculas de especial
relevancia para la vida de las células.
Lípidos más comunes y su importancia biológica
Los Lípidos más comunes son las grasas, los aceites, los fosfolípidos, las ceras,
los esfingolípidos, los glicolípidos, los terpenos y los esteroides. La importancia
biológica: Forman las membranas celulares conjuntamente con proteínas y
polisacáridos. Almacenan energía que el organismo puede disponer fácilmente
si la necesita. Cuando se ingiere más alimento del necesario el exceso se
transforma en grasas que se deposita en el tejido adiposo distribuido en todo el
cuerpo. Protegen diferentes partes del cuerpo de los seres vivos, el tejido
adiposo protege del frío por ser un buen aislante. Las ceras recubren algunos
órganos vegetales como las hojas, evitando la pérdida de agua. Intervienen en
diversos procesos químicos intracelulares. Las grasas se obtienen a partir de los
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alimentos ingeridos. Constituyen algunas de las vitaminas A1, E y K son


terpenos. Forman ciertas hormonas (progesterona, estradiol, testosterona,
hidrocortisona, aldosterona) son esteroides. Son constituyentes de algunos
pigmentos, que están formados algunos por terpenos.
Reacciones cualitativas para la identificación de lípidos y sus propiedades
Prueba de Salkowsky
Los ácidos grasos pueden ser saturados o no saturados. Los no saturados se
caracterizan por tener en su molécula uno o más dobles enlaces. Como
consecuencia de ello pueden adicionar oxígeno, hidrógeno, cloro, bromo, yodo;
utilizándose la cantidad de sustancia fijada para determinar su grado de
insaturación. El ácido graso insaturado que se halla con mayor frecuencia es el
ácido oleico, cuya fórmula es C18H34O2 con doble enlace en C9.
La formación de un anillo coloreado en la interfase es positiva la presencia de
ácidos grasos.
Se basa en la presencia o no de ácidos grasos en a la estructura de los lípidos,
es así como al adicionar en un lípido una solución de cloroformo y ácido
sulfúrico concentrado, este adquirirá una coloración violeta-azul, para finalmente
dar ligar a un anillo colorado de color verde que indica positivo para ácidos
grasos.
Prueba de Lieberman Burchard (caracterización de colesterol)
El colesterol es una molécula compleja que da positiva la prueba.
Se empela en este caso anhidrido acético y ácido sulfúrico para que genere una
reacción con el grupo hidroxilo del colesterol. Basado en una reacción coloreada
(verde) que dan aquellas sustancias que tienen como núcleo el ciclo
pentanoperhidrofenantreno. (PRUEBAS CUALITATIVAS PARA LA
IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS, n.d.)
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https://www.slideshare.net/iltaitDes/determinacion-de-colesterol-en-la-yema-de-huevo
Saponificación
Es una prueba para identificar ácidos grasos, por lo tanto, general para los
lípidos que los contengan. Los jabones se definen químicamente como, las
sales metálicas de los ácidos grasos superiores. (PRUEBAS CUALITATIVAS
PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS, n.d.)

https://grasas-y-aceites-vegetales.webnode.com.co/aplicaciones/saponificacion/
Solubilidad de los lípidos
Los lípidos son un conjunto muy heterogéneo de biomoléculas cuya
característica distintiva, aunque no exclusiva ni general es la insolubilidad en
agua, siendo, por el contrario, solubles en disolventes orgánicos (benceno,
cloroformo, éter, hexano, etc.). (Lípidos. Aspectos Generales, n.d.)
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https://botanica.cnba.uba.ar/Pakete/3er/LosCompuestosOrganicos/1111/Lipidos.htm
6. Métodos
Cualitativos
7. Procedimiento – Fundamento
Extraer la sangre dos tubos de tapa roja, una vez que coagulen centrifugar 10
minutos a 3000 r.pm.
Separar el suero a un tubo de ensayo completamente limpio y seco.
Preparar muestras de carbohidratos y lípidos.
A. Carbohidratos
A.1. Reacciones cualitativas para identificación de biomoléculas:
Glúcidos o carbohidratos
1. Rotular tubos de ensayo para cada prueba
2. A cada tubo añadir 1 ml de: agua y las muestras de glucosa, sacarosa,
sacarina, lactosa, almidón, orina y suero sanguíneo indistintamente (en el caso
del suero sanguíneo, para cada prueba medir 50 µl)
3. Agregar los reactivos para las pruebas conforme se indica en cada caso.
(NOTA: Para las pruebas en suero sanguíneo añadir 1 gota de los reactivos)
N° Muestras Pruebas cualitativas
A B C D E F

Barfoe Molish Benedic Fehling Seliwanoff Lugol


d t
1 Agua 1. 1. Añadir 1. Añadir 5 2. Añadir 1. Añadir 5 1. Añadir 5
destilada Añadir 5 5 gotas gotas de 5 gotas gotas de gotas de
2 Glucosa gotas de reactivo a de reactivo a reactivo a
3 Sacarosa de reactivo a cada tubo Fehling A cada tubo cada tubo.
4 Sacarina reactivo cada tubo 2. Mezclar y 5 gotas 2. Mezclar 2. Mezclar
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5 Lactosa a cada 2. 3. Someter de 3. Someter a 3. Dejar en


6 Almidón tubo Mezclar a ebullición Fehling B ebullición 1 reposo 1
7 Orina 2. 3. 1 minuto a cada minuto en minuto a
8 Suero Mezclar Someter en baño tubo baño térmico temperatur
sanguíneo 3. a térmico 2. Mezclar 4. Registrar a
Somete ebullición 4. 3. observacione ambiente.
ra 1 minuto Registrar Someter a s– 4.
ebullició en baño observacio ebullición resultados Registrar
n1 térmico nes - 1 minuto observacio
minuto 4. resultados en baño nes –
en baño Registrar térmico resultados
térmico observaci 4.
4. ones - Registrar
Registra resultado observaci
r s ones –
observa resultados
ciones –
resultad
os
A.2. Reacción de Lugol en muestras de alimentos
1. En vasos desechables pequeños transparentes se trocean las siguientes
muestras y se añade el reactivo:
Vasos Muestra Reactivo
1 Añadir 5 ml de agua destilada BLANCO Añadir 10 gotas de lugol
2 Trocear aproximadamente 5 g pan blanco, colocar en 1 Añadir 10 gotas de lugol
vaso desechable transparente, añadir 5 ml de agua
destilada, mezclar.
3 Trocear aproximadamente 5 g de arroz colocar en 1 Añadir 10 gotas de lugol
vaso desechable transparente, añadir 5 ml de agua
destilada, mezclar.
4 Trocear aproximadamente 5 g pasta (fideo crudo), Añadir 10 gotas de lugol
colocar en 1 vaso desechable transparente, añadir 5 ml
de agua destilada, mezclar.
5 Trocear aproximadamente 5 g patata, colocar en 1 Añadir 10 gotas de lugol
vaso desechable transparente, añadir 5 ml de agua
destilada, mezclar.
6 Trocear aproximadamente 5 g de una manzana, Añadir 10 gotas de lugol
colocar en 1 vaso desechable transparente, añadir 5 ml
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de agua destilada, mezclar.

7 Trocear aproximadamente 5 g de una pera, colocar en Añadir 10 gotas de lugol


1 vaso desechable transparente, añadir 5 ml de agua
destilada, mezclar.
8 Trocear aproximadamente 5 g de uvas, colocar en 1 Añadir 10 gotas de lugol
vaso desechable transparente, añadir 5 ml de agua
destilada, mezclar.
9 Trocear aproximadamente 5 g de carne de res, colocar Añadir 10 gotas de lugol
en 1 vaso desechable transparente, añadir 5 ml de
agua destilada, mezclar.
10 Trocear aproximadamente 5 g de carne de pollo, Añadir 10 gotas de lugol
colocar en 1 vaso desechable transparente, añadir 5 ml
de agua destilada, mezclar.
2. Mezclar, dejar en reposo 1 minuto. Observar, registrar los resultados,
establecer conclusiones.

A continuación, se trabajará con aceites. Se solicita hacer las mediciones con


jeringuillas.

B. Lípidos
B.1. Reacciones cualitativas para identificación de lípidos
1. Rotular tubos de ensayo para cada prueba
2. A cada tubo añadir 1 ml de: agua, aceite comestible, aceite de oliva, aceite de
ricino, ácido esteárico orina y suero sanguíneo indistintamente (en el caso del
suero sanguíneo, para cada prueba medir 50 µl). Medir los aceites con
jeringuillas.
4. Agregar los reactivos para las pruebas conforme se indica en cada caso.
(NOTA: Para las pruebas en suero sanguíneo añadir 1 gota de los reactivos)
N° Muestras Pruebas cualitativas
A B C
Salkowsky Lieberman Burchard Saponificación
1 Agua 1. Añadir 0,5 ml de 1. Añadir 0,5 ml 1. Añadir 1 ml de
destilada cloroformo anhidrido acético Hidróxido de sodio al 20
2 Aceite 2. Dejar caer 2. Dejar caer %
comestible lentamente por las lentamente por las 2. Mezclar
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3 Aceite de paredes del tubo 3 paredes del tubo 3 vigorosamente


oliva gotas de ácido sulfúrico gotas de ácido 3. Incubar 30 minutos a
4 Aceite de concentrado sulfúrico concentrado 70 °C
ricino 3. Dejar que los líquidos 3. Dejar que los 4. Registrar
5 Ácido entren en contacto sin líquidos entren en observaciones –
esteárico agitación contacto sin agitación resultados
6 Orina 4. Registrar 4. Registrar
7 Suero observaciones – observaciones -
sanguíneo resultados resultados

B.2. Solubilidad de lípidos


1. Dispensar en tubos de ensayo debidamente rotulados la muestra y añadir con
cuidado los reactivos, según el siguiente detalle:
Tubos Muestra Reactivo
G1 1 ml de aceite comestible 1 ml de agua destilada
G2 1 ml de aceite comestible 1 ml de etanol (alcohol antiséptico)
G3 1 ml de aceite comestible 1 ml de butanol
G4 1 ml de aceite comestible 1 ml de benceno
2. Mezclar, observar, registrar los resultados, establecer conclusiones
8. Registro de datos de la práctica:
A. Carbohidratos
A.1. Reacciones cualitativas para identificación de biomoléculas:
Glúcidos o carbohidratos
N° Muestra Pruebas cualitativas
A B C D E F
Barfoed Molish Benedict Fehling Seliwanoff Lugol
1 Agua Incoloro Incoloro Ligerame Ligerame Incoloro Ligerament
destilada nte nte azul e amarillo
celeste
2 Glucosa Rojo Púrpura Rojo Rojo Incoloro Ligerament
ladrillo ladrillo e amarillo
3 Sacarosa Rojo Púrpura Rojo Rojo Anaranjado Ligerament
ladrillo ladrillo e amarillo
4 Sacarina Incoloro Incoloro Ligerame Ligerame Incoloro Ligerament
nte nte azul e amarillo
celeste
5 Lactosa Rojo Púrpura Rojo Rojo Incoloro Ligerament
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ladrillo ladrillo e amarillo


6 Almidón Incoloro Incoloro Ligerame Ligerame Incoloro Negro
nte nte azul
celeste
7 Orina Rojo Púrpura Rojo Rojo Incoloro Ligerament
ladrillo ladrillo e amarillo
8 Suero Rojo Púrpura Rojo Rojo Anaranjado Ligeramente
sanguíneo ladrillo ladrillo amarillo
A.2. Reacción de Lugol en muestras de alimentos
Vasos Muestra Resultado
1 Agua destilada Ligeramente amarillento
2 Pan blanco Negro
3 Arroz Negro
4 Pasta (fideo crudo) Negro
5 Patata Negro
6 Manzana Ligeramente amarillento
7 Pera Ligeramente amarillento
8 Uvas Ligeramente amarillento
9 Carne de res Ligeramente amarillento
10 Carne de pollo Ligeramente amarillento

B. Lípidos
B.1 Reacciones cualitativas para identificación de lípidos
N° Muestra Pruebas cualitativas
A B C
Salkowsky Lieberman Burchard Saponificación
1 Agua Incoloro Incoloro Incoloro
destilada
2 Aceite Azul verdoso Incoloro Precipitado blanco
comestible
3 Aceite de Azul verdoso Incoloro Precipitado blanco
oliva
4 Aceite de Azul verdoso Incoloro Precipitado blanco
ricino
5 Ácido Incoloro Incoloro Precipitado blanco
esteárico
6 Orina Incoloro Incoloro Incoloro
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7 Suero Azul verdoso Verde Precipitado blanco


sanguíneo
B.2. Solubilidad de lípidos
1. Dispensar en tubos de ensayo debidamente rotulados la muestra y añadir con
cuidado los reactivos, según el siguiente detalle:
Tubos Muestra Resultado
G1 Aceite comestible más agua Dos capas claramente definidas de líquidos
inmiscibles
G2 Aceite comestible más etanol Una sale fase de los líquidos
G3 Aceite comestible más butanol Una sale fase de los líquidos
G4 Aceite comestible más benceno Una sale fase de los líquidos

Firma de la Docente

………………………………………………
Dra. María Angélica Barba Maggi, Mgs
9. Cálculos e interpretación de resultados

Reacciones cualitativas para identificación de biomoléculas: glúcidos o


carbohidratos
N° Muestras Interpretación de resultados
A B C D E F
Barfoed Molish Benedict Fehling Seliwanoff Lugol
1 Agua Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo ya
destilada ya que no ya que no ya que no ya que no ya que no que no
existe la existe existe es un existe existe la
presencia presencia presencia glúcido presencia presencia de
de de de reductor de cetosas almidón
monosac carbohidr azucares
áridos atos reductora
s
2 Glucosa Positivo Positivo Positivo Positivo Negativo Negativo ya
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ya que la ya que la ya que si que si es ya que no que no se


glucosa glucosa si existe un glúcido es una es trata de
como tal es un presencia reductor una cetosa almidón
es un carbohidr del grupo
monosac ato aldehído
árido en su
estructura
3 Sacarosa Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo ya Negativo ya
ya que ya que la ya que si que si es que dentro que no se
esta sacarosa existe un glúcido de su trata de
pertenec si es un presencia reductor estructura almidón
e al carbohidr del grupo existe una
grupo de ato aldehído cetosa
los en su
monosac estructura
áridos
4 Sacarina Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo ya
ya que ya que la ya que no ya que no ya que no que no se
esta en sacarina nos es un es una es trata de
primera no es un encontra glúcido una cetosa almidón
instancia carbohidr mos reductor
es un ato por su frente a
edulcoran composici una
te ón azúcar
sintético, química reductora
y
químicam
ente
pertenec
e al
grupo de
las
amidas
5 Lactosa Positivo Positivo Positivo Positivo Negativo Negativo ya
ya que ya que la ya que si ya que si ya que no que no se
esta lactosa si existe es un es una es trata de
pertenec es un presencia glúcido una cetosa almidón
e al carbohidr del grupo reductor
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grupo de ato aldehído


los en su
disacárid estructura
os y si
serán
detectado
s por
dicha
prueba
6 Almidón Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Positivo
ya que a ya que ya que ya que no ya que no puesto que
pesar de cabe existe la es un es una es se aplicó la
ser un destacar presencia glúcido una cetosa reacción en
carbohidr que el del grupo reductor el mismo
ato este almidón si aldehído
al ser un es un en su
polisacári carbohidr estructura
do no ato, pero
puede al ser un
ser polisacári
detectado do es
por la difícil de
reacción hidrolizar
aplicada dando un
resultado
negativo
7 Orina Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo ya Negativo ya
ya que en ya que ya que si ya que si que si que no
la orina dentro de existe la existe la existe la existe la
existen la orina presencia presencia presencia presencia de
tanto la existe de de de cetosas almidón
presencia presencia azucares glúcidos
de de reductora reductore
monosac carbohidr s s en su
áridos atos composici
como de ón
disacárid
os dentro
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de su
composic
ión
8 Suero Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo ya Negativo ya
sanguíneo ya que ya que ya que si que si que si que no existe
dentro de dentro de existe la existe la existe la la presencia
la la sangre presencia presencia presencia de almidón
composic existe de de de cetosas
ión de la presencia azucares glúcidos
sangre de reductora reductore
existen carbohidr s s en su
presencia atos composici
de ón
algunos
carbohidr
atos
especial
mente
monosac
áridos
como la
glucosa

Reacción de Lugol en muestras de alimentos


Vasos Muestra Resultado Interpretación
1 Agua destilada Ligeramente amarillento Negativo ya que no existe la presencia
de almidón
2 Pan blanco Negro Positivo ya que si existe la presencia
de almidón
3 Arroz Negro Positivo ya que si existe la presencia
de almidón
4 Pasta (fideo crudo) Negro Positivo ya que si existe la presencia
de almidón
5 Patata Negro Positivo ya que si existe la presencia
de almidón
6 Manzana Ligeramente amarillento Negativo ya que no existe la presencia
de almidón
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7 Pera Ligeramente amarillento Negativo ya que no existe la presencia


de almidón
8 Uvas Ligeramente amarillento Negativo ya que no existe la presencia
de almidón
9 Carne de res Ligeramente amarillento Negativo ya que no existe la presencia
de almidón
10 Carne de pollo Ligeramente amarillento Negativo ya que no existe la presencia
de almidón

Reacciones cualitativas para identificación de lípidos


N° Muestra Pruebas cualitativas
A B C
Salkowsky Lieberman Burchard Saponificación
1 Agua Incoloro, Negativo ya Incoloro, Negativo ya Incoloro, Negativo ya que
destilada que no existe la que no existe la no existe la presencia de
presencia de ácidos presencia de colesterol triglicéridos
grasos
2 Aceite Azul verdoso Incoloro, Negativo ya Precipitado blanco, Positivo
comestible que no existe la ya que si existe la
presencia de colesterol presencia de triglicéridos en
en su composición su composición
3 Aceite de Azul verdoso, Positivo Incoloro, Negativo ya Precipitado blanco, Positivo
oliva ya que si existe la que no existe la ya que si existe la
presencia de ácidos presencia de colesterol presencia de triglicéridos en
grasos en su en su composición su composición
composición
4 Aceite de Azul verdoso, Positivo Incoloro, Negativo ya Precipitado blanco, Positivo
ricino ya que si existe la que no existe la ya que si existe la
presencia de ácidos presencia de colesterol presencia de triglicéridos en
grasos en su en su composición su composición
composición
5 Ácido Incoloro, Negativo ya Incoloro, Negativo ya Precipitado blanco, Positivo
esteárico que no existe la que no existe la ya que si existe la
presencia de ácidos presencia de colesterol presencia de triglicéridos en
grasos en su en su composición su composición
composición
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6 Orina Incoloro, Negativo ya Incoloro, Negativo ya Incoloro, Negativo ya que


que no existe la que no existe la no existe la presencia de
presencia de ácidos presencia de colesterol triglicéridos en su
grasos en su en su composición composición
composición
7 Suero Azul verdoso, Positivo Verde, Positivo ya que Precipitado blanco, Positivo
sanguíneo ya que si existe la si existe la presencia ya que si existe la
presencia de ácidos de colesterol en la presencia de triglicéridos en
grasos en su sangre su composición
composición

Solubilidad de lípidos
Tubos Muestra Resultado Interpretación
G1 Aceite comestible más agua Dos capas claramente Los lípidos son insolubles
definidas de líquidos en solventes inorgánicos
inmiscibles
G2 Aceite comestible más etanol Una sale fase de los El etanol es un solvente
líquidos orgánico
G3 Aceite comestible más butanol Una sale fase de los El butanol es un solvente
líquidos orgánico
G4 Aceite comestible más benceno Una sale fase de los El benceno es un solvente
líquidos orgánico
10. Cuestionario / tareas / preguntas
11. Gráficos

Gráfico1: Carbohidratos. Recuperado de https://youtu.be/0TUhTL8RKw4


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Gráfico 2: Lípidos. Recuperado de https://youtu.be/EFyZMAnapDg

Gráfico 3: Análisis cualitativo de carbohidratos. Recuperado de https://youtu.be/ojhdTFmkY1c

Gráfico 4: Prueba de Barfoed - Prueba cualitativa en carbohidratos, Recuperado de


https://youtu.be/yQfMqvOxPrc
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Gráfico 5: Prueba de Seliwanoff: prueba cualitativa de carbohidratos. Recuperado de


https://youtu.be/88hWF1-RrTQ

Gráfico 6: Prueba de Molisch - Prueba cualitativa en carbohidratos. Recuperado de


https://youtu.be/etE8LCWvb-U

Gráfico 7: Reacción de Lugol. Recuperado de https://youtu.be/NIxsxbphsKE


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Gráfico 8: Lugol. Prueba del Yodo. Detección del Almidón. Recuperado de


https://youtu.be/x4pV4DswjBA

Gráfico 9: Prueba de Salkowski: Parte 2 (Identificación del colesterol). Recuperado de


https://youtu.be/uHDOzBzcDu8

Gráfico 10: Prueba de Libermann-Burchard: Parte 2 (Identificación del colesterol). Recuperado


de https://youtu.be/hc7cauZHNK8
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Gráfico 11: PRÁCTICA DE SAPONIFICACIÓN (saponificación) práctica de laboratorio.


Recuperado de https://youtu.be/TBDR0HSOJQU

Gráfico 12: Solubilidad de Lípidos. Recuperado de https://youtu.be/bO1NRNtPUGk


12. Observaciones
1. Durante las pruebas cualitativas para la identificación de glúcidos, en la
prueba de Barfoed se presentaba la formación de un complejo de color rojizo-
ladrillo en aquellas sustancias que poseían monosacáridos y disacáridos.
En la prueba de Molish se presentó una tinción purpura en aquellas muestras
que poseían carbohidratos que eran fáciles de hidrolizar por tal motivo el almidón
no presento dicha coloración.
En la prueba de Benedict se pudo observar la formación de una coloración azul
en aquellas muestras que no contenían azucares reductoras mientras que en las
muestras que si las contenían la coloración era rojo ladrillo.
En la prueba de Fehling del mismo modo hubo una tinción azulada en muestras
que no poseían azucares reductoras mientras que en las que si las contenían la
coloración era roja.
En la prueba de Seliwanoff aquellas muestras que contenían cetosas se teñían
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de un color anaranjado mientras que las que no se mantenían incoloras.


En la prueba de Lugol solo las muestras que contenían almidón tomaban un tono
negruzco mientras que las demás presentaron un color amarillento.
2. En las reacciones cualitativas para la identificación de lípidos se pudo
observar que en la prueba de Salkowsky las muestras de agua destilada, orina,
suero sanguíneo, y acido esteárico, no se presentó alguna coloración al aplicar
el reactivo, mientras que en los aceites si hubo formación de una coloración azul
verdosa.
En la prueba de Liberman Burchard al aplicar el reactivo únicamente hubo la
formación de una tinción colorimétrica en el suero sanguíneo, dicha coloración
fue de un color verde intenso.
En la reacción de saponificación se observó la formación de un precipitado
blanquecino que tenía una consistencia algo espesa, excepto en las muestras de
orina y agua destilada en las cuales no hubo formación alguna de dicho
precipitado.
13. Conclusiones
- Se concluyó que existen alimentos que tiene alta cantidad de almidón en su
estructura como es el caso del fideo, las papas y el pan, y a su vez existen
alimentos que carecen de este componente como es el caso de las frutas y la
carne.
- Se determinó que debido a la estructura de los carbohidratos estos pueden ser
metabolizados con más facilidad.
- Los lípidos y los carbohidratos son de gran importancia pues son una fuente
primaria de energía.
- Se concluyó que los lípidos y los carbohidratos son de suma importancia para
nuestro metabolismo, y sin estos pereceríamos.
14. Sugerencias
- Tener en cuenta los parámetros y valores adecuados con los que se debe
trabajar en las reacciones mencionadas para evitar problemas al momento de
obtener resultados.
15. Terminología
Almidón: Sustancia blanca, inodora, insípida, granulada o en polvo, que abunda
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en otras feculentas, como la papa o los cereales; se emplea en la industria


alimentaria, textil y papelera.
Celulosa: La celulosa es un biopolímero compuesto exclusivamente de
moléculas de β-glucosa (desde cientos hasta varios miles de unidades), pues es
un homopolisacárido. La celulosa es la biomolécula orgánica más abundante ya
que forma la mayor parte de la biomasa terrestre
Cetosa: Una cetosa es un monosacárido con un grupo cetona por molécula.
Con tres átomos de carbono, la dihidroxiacetona es la más simple de todas las
cetosas, y es el único que no tiene actividad óptica. Las cetosas pueden
isomerizar en aldosas cuando el grupo carbonilo se encuentra al final de la
molécula.
Cloroformo: El triclorometano, cloroformo (nombre aceptado por la IUPAC) o
tricloruro de metilo, es un compuesto químico de fórmula química CHCl3. Puede
obtenerse por cloración como derivado del metano o del alcohol etílico o, más
habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y ácido sobre
tetracloruro de carbono.
Furfural: El compuesto químico furfural es un aldehído industrial derivado de
varios subproductos de la agricultura, maíz, avena, trigo, aleurona, aserrín. El
nombre furfural es por la palabra latina furfur, "salvado", en referencia a su
fuente común de obtención. Es un aldehído aromático, con una estructura en
anillo.
Hidrolisis: Formación de un ácido y una base a partir de una sal por interacción
con el agua o descomposición de sustancias orgánicas por acción del agua.
Lípidos: Los lípidos son un grupo muy heterogéneo de compuestos orgánicos,
constituidos por carbono, hidrógeno y oxígeno principalmente, y en ocasiones
por azufre, nitrógeno y fósforo. En los alimentos existen fundamentalmente tres
tipos de lípidos: Grasas o aceites (también llamados triglicéridos o
triacilglicéridos).
Resorcinol: El resorcinol o benceno-1,3-diol es un sólido incoloro, soluble en
agua con reacción ligeramente ácida.
Saponificación: Transformación de un cuerpo graso en jabón o reacción de un
éster y un hidróxido alcalino obteniéndose la sal alcalina del ácido orgánico (el
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jabón) y un alcohol.
Solubilidad: Capacidad de una sustancia o un cuerpo para disolverse al
mezclarse con un líquido.
16. Bibliografía
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