José Juan García Ponce, Damian Macías Reyes, Sharon Naomi Gonzales Peña,

Astrid Ximena Galán Cano, Desiree Blancas Alcazar Universidad del Valle de
México. Ciencias de la Salud. Nutrición. 2do Semestre

Blvd. Villas del Mesón Nº 1000, Provincia Juriquilla, Querétaro, Qro.

PRÁCTICA NO.5 MÉTODO DE BIURET

Resumen

En esta práctica se pudo evaluar un método para determinar las proteínas totales en
una solución acuosa de CuSO4 en medio alcalino NaOH. En este reactivo da
positivo con los enlaces peptídicos entre aminoácidos, cuando la soluciónqueda de
color violetabasado en la reacción del biuret. La reacción o prueba de Biuret es un
método que detecta la presencia de compuestos de tres o más enlaces peptídicos y,
por tanto, sirve para todas las proteínas y péptidos cortos, se usa normalmente en el
ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite determinar la concentración
de proteínas de una muestra

Introducción

El método de biuret es una técnica bioquímica utilizada para la cuantificación de

proteínas en una muestra. Esta técnica se basa en la formación de un complejo
entre los grupos amino de las proteínas y el reactivo de biuret, que contiene iones
de cobre. La formación de este complejo produce un cambio en la absorbancia de la
solución, que puede ser medida espectrofotométricamente en una longitud de onda
específica. El método de biuret es ampliamente utilizado en la investigación y en la
industria alimentaria para determinar la cantidad de proteína en alimentos y
productos relacionados con la alimentación, y es un método preciso y confiable para
estas aplicaciones.

Planteamiento del problema

¿Cuál es la diferencia del método de biuret en relación al método de lowry?

Justificación

La intensidad de coloración es directamente proporcional a la cantidad de proteínas

(enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas
sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda
para la cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados.

Hipótesis

Es que se puede cuantificar la cantidad de proteína presente en una muestra

mediante la formación de un complejo entre los grupos amino de las proteínas y el
reactivo de biuret, que contiene iones de cobre. Al medir la absorbancia de la
solución a una longitud de onda específica después de la formación del complejo, se
puede determinar la cantidad de proteína presente en la muestra.

Objetivos

● Manejar en el laboratorio el método de biuret para determinar proteínas.

● Observar y determinar experimentalmente el efecto de pH sobre las proteínas
de la leche.

Metodología

1-DETERMINACIÓN DEL PUNTO ISOELÉCTRICO.

2- PREPARACIÓN DE LA LECHE

3- PUNTO ISOELÉCTRICO

4- DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS CON EL MÉTODO DE BIURET

Resultados

El método de Biuret nos permitirá cuantificar la cantidad de proteínas en las

muestras ya realizadas ya que dejamos las muestras reposar por 30 minutos habrá
un cambio de color y así pudimos sacar el PH de las proteínas en la leche.

Discusión de resultados

Se discutió que un aumento en la temperatura provoca la energía cinética de las

moléculas, lo cual produce un desorden de la envoltura acuosa de las proteínas,
esta desorganización produce finalmente la desnaturalización de la proteína. Con
Biuret se colorea de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y a rosa
cuando se combina con polipéptidos de cadena corta. Esta reacción colorea a llas
proteínas debido a que rompen los enlaces peptídicos para comprobar la presencia
de proteína.

Conclusión

El método evaluado en el presente trabajo se basa en la reacción de biuret. Sí se

cumplió con el objetivo, se observó que la intensidad del color del complejo
proteína-biuret daba un color violeta dando a entender que da positivo con los
enlaces peptídicos entre aminoácidos, esto indica la presencia de las proteínas

Referencias

● Celio, A. V. (2016). Identificación de proteínas.

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● Alba Gutiérrez R., Eufrosina, Olivia Rodríguez Zavala, Catalina Carmona T..
(2004).La química en tus manos. Ciudad de México: Dirección General de
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