Informe de laboratorio 4

Reconocimiento de Proteínas

Fecha 07/10/2022
Carrera: Ingeniería Biotecnológica
Asignatura: Bioquímica 1620311 Grupo C
Hora: viernes 10:00-12:00 am
NOMBRE CODIGO NOTA CORREO INSTITUCIONAL
María Juliana Cagua Gutiérrez 1611797 mariajulianacagu@ufps.edu.c
o
Jaider José Mendoza Ochoa 1611805 jaiderjosemo@ufps.edu.co

Camila Andrea Quintero 1611798 camilaandreaqa@ufps.edu.co

Angarita

OBJETIVO
 Identificar proteínas a partir de la clara de huevo
 Realizar pruebas cualitativas en la identificación y reconocimiento de las
proteínas
INTRODUCCION
Las proteínas son moléculas formadas por aminoácidos que están unidos por un tipo
de enlaces conocidos como enlaces peptídicos. El orden y la disposición de los
aminoácidos dependen del código genético de cada persona. Todas las proteínas
están compuestas por carbono, hidrogeno, oxígeno y nitrógeno, la mayoría contiene
además azufre y fosforo.
Las proteínas suponen aproximadamente la mitad del peso de los tejidos del
organismo, y están presentes en todas las células del cuerpo, además de participar en
prácticamente todos los procesos biológicos que se producen.
Hidrolisis de las proteínas. los enlaces peptídicos pueden hidrolizarse para
producir aminoácidos individuales. Este proceso tiene lugar en el estómago,
cuando enzimas como pepsina o tripsina catalizan la hidrólisis de proteínas para
producir aminoácidos. Esta hidrólisis interrumpe la estructura primaria al romper
los enlaces amida covalentes que unen los aminoácidos. En la digestión de
proteínas, los aminoácidos se absorben a través de las paredes intestinales y se
transportan a las células, donde pueden usarse para sintetizar nuevas proteínas.

Desnaturalización proteica. La desnaturalización de una proteína ocurre cuando

hay una alteración de las interacciones entre los grupos R que estabilizan la
estructura secundaria, terciaria o cuaternaria. Sin embargo, los enlaces amida
covalentes de la estructura primaria
no son afectados. La pérdida de las
estructuras secundaria y terciaria
ocurre cuando cambian las
condiciones, como aumentar la
temperatura o hacer el pH muy
ácido o básico. Si el pH cambia, los
grupos R básicos y ácidos pierden
sus cargas iónicas y no pueden
formar puentes salinos, lo que
produce un cambio en la forma de la proteína. La desnaturalización también puede
ocurrir cuando se agregan ciertos compuestos orgánicos o iones de metales
pesados, o mediante agitación mecánica. Cuando hay una alteración en las
interacciones entre los grupos R de una proteína globular, ésta se despliega como
una pieza holgada de espagueti cocido. Con la pérdida de su forma global
(estructura terciaria), la proteína ya no es biológicamente activa.
REACCIONES DE COLORACIÓN
PRUEBA DE BIURET El Reactivo de Biuret indica la presencia de
proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces
peptídicos en sustancias de composición desconocida.
Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto
con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O6·4H2O). El reactivo cambia a violeta en
presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de
cadena corta. El hidróxido de potasio no participa en la reacción, pero proporciona
el medio alcalino necesario para que tenga lugar.
Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite
determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante, presenta color
violeta siendo resultado positivo para proteínas.
REACCION XANTOPROTEICA La reacción xantoproteica Es un método que se
puede utilizar para determinar la presencia de proteínas solubles en una solución,
empleando ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas
proteínas con aminoácidos portadores de grupos aromáticos, especialmente en
presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali, se
vuelve color amarillo oscuro.
La reacción xantoproteica se puede considerar como una sustitución electrofílica
aromática de los residuos de tirosina de las proteínas por el ácido nítrico dando un
compuesto coloreado amarillo a pH básico.
PRUEBA DE MILLON El reactivo de Millon es un reactivo analítico que se utiliza
para detectar la presencia de proteínas solubles. Se agregan algunas gotas del
reactivo a la solución de prueba, que luego se calienta suavemente. Una
coloración o un precipitado marrón rojizo indica la presencia
de residuos de tirosina que se encuentran en casi todas las proteínas.  La prueba
fue desarrollada por el químico francés Auguste Nicolas Eugene Millon (1812-
1867).
El reactivo se elabora disolviendo mercurio metálico en ácido nítrico y diluyéndolo
con agua. En la prueba, el grupo fenol en la cadena lateral de la tirosina se nitra y
ese producto luego se compleja con los iones Hg (I) o Hg (II) para dar una
coloración roja o un precipitado.
REACCIONES DE COAGULACION

COAGULACION POR CALOR

COAGOLACION ALCOHOLICA
PRUEBA DE HELLER La prueba de Heller es una prueba química que muestra
que los ácidos fuertes provocan la desnaturalización de las proteínas precipitadas.
Se agrega ácido nítrico concentrado a una solución de proteína desde el costado
del tubo de ensayo para formar dos capas. Aparece un anillo blanco entre las dos
capas si la prueba es positiva. La prueba de Heller se usa comúnmente para
evaluar la presencia de proteínas en la orina. Esta prueba fue descubierta por el
químico austríaco Johann Florian Heller (1813-1871).

REACCIONES DE PRECIPITACION
SALES DE METALES PESADOS
REACTIVO ALCALOIDAL
SALES NEUTRAS
 MATERIALES REACTIVOS
agitador de vidrio Acetato de plomo 1%
Espátula Ácido nítrico concentrado
Gotero Acido tánico al 5%
Gradilla Alcohol etílico
Pinza para tubo de ensayo Amoniaco
Pipeta graduada Cloruro de sodio solido
Tubo de ensayo Cloruro férrico al 1%
Mechero Nitrato de plata al 1%
Reactivo de millón
Solución CuSO4 al 1%
Solución de albumina
Solución NaOH 10%
Sulfato de amonio

PROCEDIMIENTO
Para realizar las diferentes pruebas de reconocimiento de proteínas se utilizara
una solución de clara de huevo.
1. PRUEBA DE BIURET: En un tubo de ensayo agregue 1ml de solución de
proteína, añada 2.5 ml de solución de NaOH al 10% y 2 gotas de CuSO 4 al
1%. Agite bien el contenido del tubo y anote cualquier cambio de color.

2. REACCION XANTOPROTEICA: en un tubo de ensayo agregue 1 ml de

solución de proteína y agregue de 5 a 10 gotas de HNO 3 caliente suavemente.
Observe el color luego cuidadosamente haga la solución alcalina con NH 3 y
anotamos el cambio de color.

3. REACTIVO ALCALOIDAL: En un tubo de ensayo agregue 3 gotas de una

solución de ácido tánico al 5% a 2 ml de la solución de proteína.

RESULTADOS

PRUEBA DE BIURET:
Este resultado se obtuvo al agregar las soluciones de NAOH CuSo4
correspondiente a la prueba de Biuret, como se observa adquiere un color violeta
lo cual significa que es positiva en la identificación de proteínas
PRUEBA XANTOPROTEICA:
Esta reacción dio positivo por su distintivo color amarillo lo cual significa que logro
identificar los aminoácidos que contienen grupo bencénico y que hacen parte de la
proteína

PRUEBA DE MILLON:
En esta prueba tuvimos un resultado positivo lo cual significo la presencia de
tirosina en la proteína que utilizamos por el color rojo carne que se logra apreciar
en la muestra.
COAGULACIÓN POR CALOR:
En esta prueba gracias a la exposición al calor se pueden observar pequeños
coágulos que representan la desnaturalización de la proteína

COAGULACIÓN ALCOHÓLICA:
Se puede apreciar como la proteína flocula y pierde su composición natural, se
desnaturaliza y eso explica su color blanco y su pequeña división en la parte
posterior del tubo de ensayo

PRUEBA DE HÉLLER:
En esta prueba para que diera positiva tenía que mostrar un anillo color blanco
que divide en 2 capas la muestra lo cual a simple vista no podemos apreciar
porque no se añadió como se debía la solución sin embargo si se logró la
desnaturalización.
PRUEBA DE SALES DE METALES PESADOS :
En este resultado el cambio de color se debe a la combinación de las cargas de la
proteína que estamos trabajando y se forman proteinatos insolubles acompañados
de la desnaturalización de la proteína

REACCIÓN ALCALOIDAL:
El objetivo de esta reacción es precipitar la proteína hasta convertirla en inerte y
por eso la solución presenta el cambio de color que se observa en la imagen.

SALES NEUTRAS:
En la imagen podemos apreciar por el color blanco la desnaturalización de la
proteína debido a la menor solubilidad de agua de la proteína desnaturalizada
CONCLUSIONES

 Se ha podido mirar que la proteína de la clara de huevo se desnaturaliza al

instante antes de reacción con los compuestos utilizados en el laboratorio:
(FeCl3) cloroFérrico ,y (AgNO3) Nitrato de Plata
 Podemos estimar que, en la prueba de Heller, la proteína utilizada (clara de
huevo)reaccionar positivamente hasta convertirse en algo similar a un
tonovo hervido y/o cocido
 La desnaturalización se puede producir por cambios de temperatura,
variaciones de pH en algunos casos si las condiciones se restablecen una
proteína desnaturalizada puede volver a su anterior plegamiento o
conformación proceso que se llama re naturalización.

BIBLIOGRAFIA
 https://cuidateplus.marca.com/alimentacion/diccionario/proteinas.html
 https://uruguayeduca.anep.edu.uy/sites/default/files/inline-files/7%20Hidr
%C3%B3lisis%20y%20desnaturalizaci%C3%B3n%20de%20las%20prote
%C3%ADnas.pdf
 https://es.wikipedia.org/wiki/Biuret
 https://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_xantoproteica
 https://hmn.wiki/es/Millon%27s_reagent
 https://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_de_Heller