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IDENTIFICACION DE PROTEINAS MEDIANTE LA

REACCION DE BIURET
Desnaturalizando protenas

Nombres:
Mateo Barrios
Fabio Anbal
Leonardo Lora
Alberto Varela

Grado: 11 A

I.D.D.I
Nueva Granada

2014

IDENTIFICACION DE PROTEINAS MEDIANTE LA REACCION DE


BIURET
Objetivo:
Identificar la existencia de enlaces peptdicos (protenas) en algunos alimentos
Introduccin
La presencia de protenas en una mezcla se puede determinar mediante la
reaccin de biuret.
El reactivo de biuret contiene CuSO4 en solucin acuosa alcalina (gracias a la
presencia de NaOH o KOH). La reaccin se basa en la formacin de un
compuesto de color violeta, debido a la formacin de un complejo de
coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos
del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos.
Reactivo de Biuret
El reactivo de biuret est hecho de hidrxido de potasio y sulfato de cobre
hidratado, junto con tartrato de sodio y potasio.
Aparecer una coloracin violeta- roscea caracterstica esto debido a la
presencia de enlaces peptdicos (-CO-NH) que se destruyen al liberarse los
aminocidos. El reactivo de color azul cambia a violeta en presencia de
protenas, y vira a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El
hidrxido de potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el medio
alcalino necesario para que tenga lugar. Se usa normalmente en el ensayo de
Biuret, un mtodo colorimtrico que permite determinar la concentracin de
protenas de una muestra mediante espectroscopio ultra violeta visible a una
longitud de onda de 560nm ( para detectar el ion Cu2+).
Reactivos
-

Una clara de huevo


Una botella de alcohol
Gelatina
Reactivo de biuret

Materiales
-

Un tubo de ensayo
Mechero

Pinzas

Procedimiento
Experimento no 1
1.
2.
3.
4.
5.

Coger un tubo de ensayo y poner 3ml de albumina de huevo


Aadir 3ml de solucin de hidrxido sdico al 20%
A continuacin 4 o 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%
Agitar para que se mezcle bien y observa resultados
Repite la experiencia utilizando gelatina o cualquiera otra solucin que
consideras que tenga protena.
Cuestionario

1. cmo podamos saber que una sustancia desconocida es una


protena?
Para saber si una sustancia desconocida es una protena, Podemos usar el
reactivo de Biuret ya que este detecta la presencia de protenas, pptidos
cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos.
2. Qu coloracin da la reaccin de biuret?
Da un color violeta indicando que presenta protenas.
3. Una protena coagulada podra dar la reaccin del biuret?
Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua
soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar en cogulos al ser
calentadas a temperaturas mayores de 70C o al ser tratadas con cidos,
alcohol, etc.
Si, podra dar una protena coagulada porque el reactivo de Biuret reacciona
con cualquier protenas liquida o slida. Por ejemplo cuando hacer una
cuantificacin de las protenas presentes en el suero (liquida) o cuando
haces una prueba cualitativa en huevos, carnes, etc.
4. Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo y
de la casena?
La clara de huevo pasa de ser transparente y liquida a pasar a ser
blanca y slida.
En el caso de la casena pasa de estar liquida y disuelta a formar grumos
en la leche.
5. Si se realiza la reaccin de Biuret sobre un aminocido como la
glicina?Es positiva o negativa?

La glicina no reaccionara con el reactivo de Biuret porque esta forma


libre y no hay enlaces peptdicos con los que pueda reaccionar el
reactivo por lo que la prueba dar negativa.
-

Conclusiones
Las protenas constituyen una de las molculas ms importante en el
organismo ya que cumplen con diversas funciones.
Todas las protenas presentan aminocidos y hay varios mtodos para
reconocer esos aminocidos como la reaccin de biuret.
Anexos

Desnaturalizando protenas
Material necesario
-

La clara de huevo
Un vaso con alcohol

Procedimiento
Echa la clara del huevo en el interior del vaso con alcohol
Tapa el vaso y espera al menos media hora
A medida que pasa el tiempo observa lo que sucede en el vaso
Tapa el vaso y vuelve a observarlo al da siguiente

Que ha sucedido?
Las cadenas de protenas que hay en la clara de huevo se encuentran
enrolladas adoptando una forma especfica. Se denominan protenas
globulares. Al frer o cocer un huevo, el calor hace que las cadenas de
protenas se desenrollen y se formen enlaces que unen unas cadenas
con otras. Este cambio de estructura a la clara de huevo la consistencia
y color que se observa en un huevo cocinado. Este proceso que se
conoce con el nombre de desnaturalizacin se puede producir de
distintas maneras:
Calentando: cocer o frer
Batiendo las claras(mayonesa)
Por medio de agentes qumicos como alcohol, acetona, etc.

Experimento 2
Material necesario
Dos vasos con fondo de leche a temperatura ambiente
Un poco de vinagre
Medio limn

Procedimiento
Aade el vinagre a uno de los vasos
Exprime el limn en el otro
Agita ambos vasos para que se mezclen sus contenidos
Espera unos minutos
Observa lo que sucede en cada uno de los vasos.

Qu ha sucedido?
De forma similar a lo que ocurre con el huevo, el cido presente en el
vinagre(cido actico) o en el limn(cido ctrico) es capaz de producir la
desnaturalizacin de la protenas denominada casena que hay en la leche.
Anexos

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