UNIVERSIDAD TECNOLOGÍCA DE IZÚCAR DE MATAMOROS

TSU EN AGROBIOTECNOLOGÍA – AREA VEGETAL

BIOQUIMICA
PRÁCTICA 3: DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS POR EL MÉTODO DE
BIURET
INTRODUCCIÓN.
Las proteínas son moléculas formadas por cadenas de aminoácidos que están
unidos por un tipo de enlace conocido como enlace peptídico. Por sus
propiedades físicoquímicas, las proteínas se pueden clasificar en proteínas
simples, formadas sólo por aminoácidos o sus derivados; proteínas conjugadas,
formadas por aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y proteínas
derivadas sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las
anteriores.
La reacción o prueba de Biuret es un método que detecta la presencia de
compuestos de tres o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las
proteínas y péptidos cortos. El reactivo de Biuret consiste en una solución acuosa
de sulfato cúprico (CuSO4) en medio alcalino (NaOH). Este reactivo da un ensayo
positivo con los enlaces peptídicos entre aminoácidos, cuando la solución queda
de color violeta. Esto se debe a que el cobre tiene la propiedad de formar iones
complejos, especialmente entre los enlaces peptídicos.
Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite
determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante
espectroscopía ultravioleta-visible a una longitud de onda de 540 nm (para
detectar el ion Cu2+).
OBJETIVO.
Determinar cualitativamente proteínas en alimentos por el método de Biuret.
Materiales y Reactivos.
 Agua destilada
 Reactivo de Biuret.
 Alimentos de origen vegetal con contenido proteico (granos molidos de
soja, girasol, etc., procesados de origen vegetal como tofu o leche vegetal).
 Alimentos de origen animal con contenido proteico (clara de huevo, leche,
leche en Polvo, embutidos, carne cruda.) líquidos, triturados o machacados.
 Rejilla
 5 tubos de Ensaye 10 mL.
 Gotero.
Metodología.
1. Colocar los tubos de ensaye en la rejilla y añadir las muestras ocupando 1/3
de la capacidad de los tubos.
2. Enumerar 5 tubos de ensaye
3. Añadir 10 gotas del reactivo de Biuret y mezclar bien agitando el tubo.
4. Observar y anotar la aparición de color (tipo de color, intensidad y tiempo
de aparición) para cada uno de los compuestos.

Cuestionario:
1. ¿Qué importancia tiene identificar proteínas en una muestra biológica?
2. ¿Cuáles son los compuestos y su concentración que conforman el reactivo
de Biuret?
3. ¿Qué es un enlace peptídico y donde se encuentra?
4. Esquematiza la reacción que sucede entre los enlaces peptídicos y el
reactivo de Biuret.
Referencias Bibliográficas.
Alba Gutiérrez R., Eufrosina, Olivia Rodríguez Zavala, Catalina Carmona T. (2004). La
química en tus manos. Ciudad de México: Dirección General de Publicaciones y Fomento
Editorial.
Macarulla J. M, Marino A., Macarulla A. 2001. BIOQUÍMICA
CUANTITATIVA. Editorial Reverté. Madrid. Pág. 77
https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/FQpractica4.pdf