Cuáles son las precauciones que se deben tomar en el uso de los distintos reactivos tratados en la

práctica para evitar riesgos nocivos en el laboratorio ?

o Conocerla reactividad de los productos empleados y las posibles reacciones.

o Asegurarse de disponer el material necesario y adecuado antes de iniciar un
experimento.
o Instalar un montaje experimental en una vitrina cerrada.
o Utilizar la cantidad mínima de reactivos.
o Llevar prendas y accesorios de protección individual.
o Tener uno o varios extintores al alcance de la mano (agua pulverizada, dióxido de
carbono, compuesto halogenado, polvo, según el caso).
o Prevenir a todo el personal de laboratorio, así como al responsable de seguridad

Investigue y explique el modo de preparación de al menos cinco (5) reactivos tratados en la

práctica.

Reactivo de Biuret

El Reactivo de Biuret indica la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos
o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida. Está hecho de hidróxido
potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC 4O6·4H2O). El
reactivo cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con
polipéptidos de cadena corta. El hidróxido de potasio no participa en la reacción, pero proporciona
el medio alcalino necesario para que tenga lugar.

Preparación del Reactivo de Biuret:

Se pesa 1,5 g de CuSO4·5H2O y 6,0 g. de tartrato de sodio y potasio. Se disuelve en 500 ml de agua
destilada y se adiciona 300 ml de una solución de NaOH al 10%. Se afora a 1000 ml con agua
destilada. Finalmente el reactivo de Biuret se guarda en un frasco ámbar y se conserva en
refrigeración.

Reactivo de Bial

Es un reactivo utilizado para detectar la presencia de pentosas. Este reactivo está compuesto por
0,4 g de orcinol, 200 ml de ácido clorhídrico concentrado y 0,5 ml de una solución de cloruro
férrico. Si una pentosa está presente, se deshidratará para formar furfural que luego reacciona con
el orcinol para generar un compuesto coloreado. La solución se volverá azulada y se puede formar
un precipitado. El reactivo de Bial se usa para distinguir pentosas de hexosas; esta distinción se
basa en el color que se desarrolla en presencia de orcinol y cloruro de hierro (III). El furfural de las
pentosas da color azul o verde, mientras que el furfural relacionado con las hexosas puede dar una
solución color marrón, amarillo o gris, por eso es fácil de distinguir del color verde de las pentosas.
Preparación del reactivo de Bial:

Se añaden 300 ml de HCl concentrado en 250 ml de agua destilada, (nunca hacer en sentido
inverso). Añadir 1.5 g de orcinol y 8 gotas de cloruro férrico al 1%.

Reactivo de Seliwanoff

El reactivo consiste en resorcinol y ácido clorhídrico. Éste reactivo se utiliza para diferenciar
cetosas de aldosas; aunque ambas dan positivas a la reacción, las cetosas la dan rápidamente y las
aldosas lentamente. La hidrólisis ácida de polisacáridos y oligosacáridos da azúcares simples,
donde la cetosa deshidratada reacciona con el resorcinol. Está reacción basada en la formación de
furfural o en un derivado de este y su posterior condensación con el resorcinol, dando la
formación de un complejo de color rojo para cetosas y de color rosa para aldosas.

Preparación del reactivo de Seliwanoff:

Se disuelven 0.5 g de resorcinol en 100 ml de agua destilada. A 3 ml de esta disolución le añadimos

12 ml de HCl concentrado. Una vez mezclado le añadimos agua destilada c.s.p 35 ml.

Reactivo de Hopkins-Cole

Esta prueba es específica para la identificación de triptófano libre o presente en proteínas. Este
reactivo es una disolución de ácido glioxílico en agua, aunque el ácido acético glacial expuesto a la
luz contiene también ácido glioxílico y se puede emplear en la prueba. Cuando una solución de
triptófano o de proteína se trata con el reactivo de Hopkins-Cole y luego se adiciona ácido
sulfúrico, en la zona de interfase se genera un anillo purpura o rojo violeta resultante de la
condensación del grupo carbonilo del ácido glioxílico y al anillo indol del triptófano.

Preparación del reactivo de Hopkins-Cole:

Colocar 10 gramo de polvo de magnesio en un matraz Er lenmeyer de 1 litro, y añadir agua

destilada hasta que cubra completamente el magnesio. Enseguida, agregar lentamente 250 ml de
una solución saturada en frio de acido oxálico y agitar bien el conjunto, enfriando si es necesario.
Luego filtre y acidifique el filtrado con acido acético glacial y diluyendo a un litro con agua
destilada.

Reactivo de Millon

Sirve para caracterizar los aminoácidos con grupos fenólicos de las proteínas. Si en la proteína hay
tirosina la reacción da positiva. Este reactivo consiste en una solución de nitrato de mercurio (II)
(Hg(NO3)2), en solución de ácido nítrico-nitroso (HNO 3/HNO2), siendo esta la reacción que da lugar
con la tirosina ocasionando la mercuración y nitración del grupo fenólico de los aminoácidos,
generando un coagulo o precipitado blanco que por calentamiento se torna de color rosado o rojo
ladrillo identificando los restos de tirosina.

Preparación del reactivo de Millon:

Disolver 10 gramos de mercurio en 20 ml de acido nítrico frio. Cuando la disolución sea completa y
haya cesado de desprenderse humos pardos, adicione 60 ml de agua. Después de varia horas,
decante el sobrenadante y guárdelo en frasco oscuro.