UNIDAD 3:

Preparación de
medios para el cultivo
de microorganismos

MICROBIOLOGÍA CLÍNICA
Doncente: Indra Herrero
CONTENIDOS DE LA UNIDAD

01 02

Componentes de un Tipos de medio

medio de cultivo

03 04

Preparación de medios Medios de cultivo

de cultivo habituales
 MEDIO DE CULTIVO
Solución que contiene los nutrientes para permitir el
crecimiento de microorganismos, en condiciones
favorables de pH y temperatura.
 01 Componentes de un medio de cultivo

Macroelementos Factores de crecimiento Minerales

Fuente de C, N, S Vitaminas, aminoácidos Ca, Mg, Fe, P, Zn, Co, etc.

Fluidos Tampones y
Extractos corporales Solidificantes Peptonas Amortiguadores

Sustancias selectivas
 02 Tipos de medios

Según su estado físico

Líquidos Sólidos

Ej. Agua de peptona Semisólidos Ej. Agar nutritivo

Ej. Agar MIO ✓ Aislamiento, identificación y
✓ Identificación bioquímica recuento colonias
✓ Aislamiento por dilución ✓ Movilidad ✓ Pruebas bioquímicas
✓ Mantenimiento de cepas ✓ Mantenimiento de cepas
 02 Tipos de medios

Según su función

Básicos Enriquecidos Selectivos Diferenciales

NO Especificidad de Inhibe microorganismos Permite distinguir

selectivos nutriente indeseados colonias

Peptona
Extracto de carne
Cloruro sódico
Agua

Medios anaerobios
 02 Tipos de medios

Enriquecimiento reduce el crecimiento de bacterias no deseadas

Ej. Caldo de selenito Salmonella E. coli

No confundir…
Enriquecido Selectivo
Favorece el Inhibe el
crecimiento de crecimiento de
ciertos ciertos
microorganismos microorganismos
Ej. Agar sangre Ej. Agar Gardnerella
 Líquidos
03 Preparación de medios de cultivo Sólidos
Semisólidos
 04 Medios de cultivo habituales

Agar Columbia

Medio para cultivo primario

Polipeptona.17.0 g/l
Peptona pancreática de corazón
3.0 g/l
Extracto de levadura 3.0 g/l
Almidón de maíz 1.0 g/l
Cloruro sódico5.0 g/l
Agar bacteriológico 13.5 g/l

Permite el crecimiento de Brucella abortus, Yersinia pestis y Clostridium perfringens

04 Medios de cultivo habituales

Agar sangre

Medio básico + sangre Hidrólisis

Hidrólisis
total
parcial
• Medio enriquecido con sangre
desfibrilada (5-10%) a un
medio estéril.

• Favorece el crecimiento de un
patógeno determinado (ej.
estreptococos).

No hay
hidrólisis
04 Medios de cultivo habituales

Agar chocolate

agar- sangre a 80º C durante

15 min.

→ Con factor X y factor V

Ej. para crecimiento de Haemophilus

 04 Medios de cultivo habituales

Agar Mckonkey

Para aislamiento de Gram negativas Ej. Enterobacterias

Peptona de gelatina
17,0 g/l
Peptona de caseína y carne
3,0 g/l
Lactosa 10.0 g/l
Sales biliares 1,5 g/l
Cloruro de sodio 5,0 g/l Lac+
Violeta de cristal 0,001 g/l
Rojo neutro 0,03 g/l Lac-
Agar 15.0 g/l
04 Medios de cultivo habituales

Agar Sabouraud

Medio para hongos

Glucosa 40 g/L
Pluripeptona 10 g/L
Agar 15 g/L
Antibióticos:
Ej. Cloranfenicol 0,05 g/L

estufa a 30º C
04 Medios de cultivo habituales

Agar Müeller Hinton

Para antibiograma

Agar 17.0 g/L

Infusión de carne de
vacuno, 2.0 g/L
Hidrolizado de caseína, 17,5
g/L
Almidón, 1,5 g/L
04 Medios de cultivo habituales

Agar manitol salado (MSA)

Para crecimiento de Gram positivas

Coagulasa + Coagulasa -
Extracto de carne bovina 1,0 g/L
Digerido pancreático de caseína 5 g/L
Digerido péptico de tejido animal 5 g/L
Cloruro sódico 75 g/L
D-manitol 10 g/L
Rojo fenol 0,025 g/L
Agar 15 g/L

Sal : Selectivo Staphylococcus

Rojo de fenol: prueba coagulasa

04 Medios de cultivo habituales

Agar Granada
Para Streptococcus del grupo B (especialmente Streptococcus agalactiae).

Proteosa peptona Nº 3,
Fosfato disódico de hidrógeno
Almidón de maíz
Cristal violeta
Glucosa
Sal sódica de ácido pirúvico
Agar
Hidrocloruro de cisteína
Sulfato de magnesio
MOPS (ácido 3-
morfolinpropanosulfónico)
Sal hemisódica
04 Medios de cultivo habituales

Brain Heart Infusion (BHI): infusión de cerebro y corazón

En agar o caldo

Extracto cerebro-corazón
17,5 /l
Peptona pancreática de
gelatina 10 g/l
Cloruro sódico 5 g/l
Fosfato disódico 2,5 g/l
Glucosa 2,0 g/l
04 Medios de cultivo habituales

Caldo Tioglicolato (TG)

Favorece el crecimiento de microorganismos anaerobios

Ej. Clostridium

L-cistina 0,5 g/l

Cloruro de sódio 2,5 g/l
Glucosa 5,5 g/l
Extracto de levadura 5 g/l
Digerido pancreático de caseína
15 g/l
Tioglicolato de sódio 0,5 g/l

Ideal para muestras de LCR y exudados

 04 Medios de cultivo habituales

Caldo de selenito

Peptona .5 g/l
Lactosa. 4 g/l
Fosfato de sodio 10 g/l
Selenito de sodio 4 g/l

Evita el crecimiento de las Gram positivas y la

mayoría de la flora entérica excepto Salmonella spp

Para muestras sólidas y líquidas.

 04 Medios de cultivo habituales

Otros…

Agar Mycosel Agar Sturart

(Para hongos dermatófitos) (Para gonococos)

Agar Hektoen
Caldo Roiron
(Para Trichomonas vaginalis)
 RECUERDA:
Existen medio líquidos, sólidos o semisólidos.

Base de un medio de cultivo: fuente de energía, factores de crecimiento y minerales

Tipos: básicos, selectivos, diferenciales, enriquecidos, etc.

Slidesgo