FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

Escuela Académico Profesional de Tecnología Médica en Laboratorio Clínico

y Anatomía Patológico

TEMA – PRÁCTICA N° 4

“Métodos de Siembra”

PROFESORA
Dra. HAYDEE ANA GUADALUPE GOMEZ

CURSO

BACTERIOLOGIA - PRÁCTICA

Grupo – Integrantes
- Huaman Monares, Roxana.
- Mendoza Limache, Yaquelin.
- Ávila Leon, Jhon.
- Saccsa Rojas, Alondra.
- Ramos Salcedo, Diana.
- Siesquen Coronado, Ruperto.
- Arana Choque, Eskarlet.
- Dávila García, Brayan

Lima, 2021
Cuestionario
1. Cite un ejemplo del uso de cada técnica de siembra

SIEMBRA POR ESTRIAS

Es el método más usado para obtener cultivos axénicos, con un asa de siembra se
toma una muestra de la población mixta y a continuación se hacen estrías sobre la
superficie de un medio sólido preparado en una placa Petri ,se van haciendo
estrías en zigzag con el asa, cada vez se van depositando en la superficie del
medio menos microorganismos, se flamea el asa, se toca en la región donde se
han realizado las últimas estrías y se continúa la siembra con la misma técnica, en
la superficie de medio sin sembrar aún. Se inocula la muestra sobre un extremo de
la placa con asa y se extiende formando estrías sobre la superficie en varios
sentidos, cada célula aislada se multiplicará formando una colonia independiente,
cada colonia representa un cultivo puro.

Repitiendo este proceso varias veces se logra separar células individuales, las
placas se incuban en un lugar adecuado, permitiendo que las células aisladas
formen colonias visibles. Aunque cada colonia representa un clon derivado de una
sola célula, no podemos asegurarlo. Quizás, dos células quedaron depositadas
tan juntas que han originado una única colonia mixta.

Técnicas para la siembra en estrías, el objeto es obtener colonias aisladas

• Técnica 1

Consiste en cargar el ansa con la muestra y hacer estrías

paralelas en la cuarta parte de la superficie de la placa, se
quema el ansa, se enfría, se gira la placa a 90° y se vuelve a
estriar tocando 3 o 4 veces el área sembrada inicialmente y
cubriendo otro cuarto de la placa. Por último, sin quemar el
ansa, se estría el resto de la superficie sin sembrar.
• Técnica 2

Con el ansa cargada se hacen 3 o 4 estrías; se quema el

ansa, se hacen 3 o 4 estrías perpendiculares a las
anteriores, se quema el ansa y se repite el procedimiento
hasta agotar la superficie de la placa

Referencias Bibliográficas

1. CBTis 12. Técnicas y tipos de sembrado en placa y tubo [internet]. [actualizado 2021;
citado 22 de setiembre del 2021]. Disponible en:
https://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/t-cnicas-y-tipos-de-sembrado
 SIEMBRA POR AGOTAMIENTO

Técnica del agotamiento de asa

Tomar el tubo con el cultivo mixto, agitar para homogeneizar su contenido.
Flamear el asa bacteriológica y tomar una muestra del cultivo. Flamear la boca del
tubo tanto al abrirlo como antes de cerrarlo.
En una placa con agar nutritivo y tocando con suavidad la superficie del medio,
extender la muestra siguiendo el esquema de la figura. El recorrido del asa debe
ser lo más largo posible con el fin de conseguir al final del mismo células aisladas
que darán lugar a colonias. Al destapar la placa de Petri mantener la tapa en la
mano, abriéndola sólo lo necesario para realizar la siembra. Después de sembrar
cerrar la placa y dejar en posición invertida para llevar a incubar a 37ºC. (1)

Tras 24 horas de incubación podemos observar las colonias formadas por los
distintos tipos de microorganismos del cultivo mixto con sus diferentes
características Se observa una mayor densidad de crecimiento al principio del
agotamiento sin poder diferenciar colonias, sin embargo, al final de éste las
colonias están mejor aisladas y se aprecian las diferencias entre ellas como son el
tamaño, color y forma.(1)
Crecimiento de colonias bacterianas mediante la técnica del agotamiento de asa.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. UMH. Prácticas de microbiología: Agotamiento de asa. [internet]. España.
2019 [actualizado 2019; citado 21 de setiembre del 2021]. Disponible en:
https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-
microbiologia/indice/tecnicas-de-aislamiento/Agotamiento-de-asa-1

SIEMBRA POR PUNTURA

En esta siembra también llamada por picadura o punción, aplicará la utilización de
medios de cultivo sólidos o en gran parte de los casos, semisólidos. Para su
realización se necesitará usar la aguja de cultivo. Su objetivo es estudiar las
características bioquímicas, morfológicas. (1)
Como ejemplo de esta técnica, es la identificación de enterobacterias a través de
la prueba de TSI (agar tres azúcares hierro), esta prueba determina la capacidad
que tiene un microorganismo para fermentar la glucosa, lactosa y sacarosa
(prueba bioquímica). El TSI es un medio nutriente y diferencial que permite
estudiar la capacidad de producción de ácido y gas por fermentación de los
carbohidratos, evidenciándose en el cambio de color de rojo (por el rojo fenol) a
amarillo y observarse burbujas por la producción de gas. (1,2) Por otro lado, para
realizar la siembra en este medio se debe tomar todo el material que se quiere
sembrar y con la aguja de cultivo se lo introduce en el tubo, con medio semisólido.
Introduciéndose hasta antes de tocar el fondo, formando un canal de punción,
trayecto por el cual la retirará luego. (1)
En la imagen se puede observar los pasos para realizar esta siembra que inicia
desde flamear la aguja de cultivo sobre la llama del mechero Bunsen, dejando que
se enfríe; se debe destapar el tubo que contiene la muestra y flamear ligeramente
la boca del tubo. Luego, se tomará una asada de la muestra y se tapa nuevamente
el tubo que contiene la muestra. Se destapa el tubo que va a ser inoculado y en un
medio semisólido se inocula con la aguja de puntura hasta antes de tocar el fondo
del tubo. Sin embargo, en medios que tienen una parte inclinada y fondo como la
del agar TSI, se tocará con la punta de la aguja de cultivo una colonia y luego se
inoculará primero el fondo del tubo y luego estriar la superficie del medio. (1,3)
Referencias Bibliográficas
2. Jimenez, A. Métodos de siembra [internet]. Blogspot, 2013 [actualizado 2013;
citado 22 de setiembre del 2021]. Disponible en:
http://microbiologiauasd.blogspot.com/p/metodos-de-siembra.html
3. Sanabria, J, [et al]. Curso de microbiología ambiental [internet]. Colombia:
2001 [citado 22 de setiembre del 2021]. Disponible en:
http://www.etpcba.com.ar/DocumentosDconsulta/ALIMENTOS-PROCESOS%20Y
%20QU%C3%8DMICA/Manual-de-Microbiolog%C3%ADa.pdf
4. CBTis 128. Técnicas y tipos de sembrado en placa y tubo [internet]. Wixsite
[actualizado 2021; citado 22 de setiembre del 2021]. Disponible en:
https://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/t-cnicas-y-tipos-de-sembrado