UNIDAD 7:

Aplicación de técnicas de
identificación de hongos y
parásitos

MICROBIOLOGÍA CLÍNICA
Docente: CRISTINA LÁZARO GARCÍA
 CONTENIDOS DE LA UNIDAD

01 02 03
MICOSIS DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES
MOHOS Y LEVADURAS
FÚNGICAS

04 05
IDENTIFICACIÓN DE IDENTIFICACIÓN DE
PARÁSITOS VIRUS
01 MOHOS Y LEVADURAS: EL REINO FUNGI
Aspectos diferenciales Aspectos comunes

UNICELULARES PLURICELULARES QUITINA

MOHOS
Crecen sobre materia
orgánica
descomponiéndola

LEVADURAS
HONGOS
Descomponen en Descomponedores
materia sencilla formadores
mediante la del fruto aéreo seta
fermentación HETERÓTROFOS
 MOHOS Y HONGOS: ESTRUCTURA
01
El micelio es una estructura altamente ramificada formada por las hifas.

Las hifas son una red de células envueltas por quitina.

Se clasifican según:

ESTRUCTURA FUNCIÓN

HONGO
PARASITO
 01 FILOS DE IMPORTANCIA CLÍNICA

Zygomycota Asexual: Ascomycota

Acantosis nigricans
esporangiosporas
Sexual: Los esporangios son tipo asco
Rhizopus nigricans zygosporas
Micelio de hifas NO Asexual: Sexual:
septadas conidiosporas ascosporas

Basidiomycota Micelio de hifas

septadas con poro
Forman las setas

Asexual: Aspergillus flavus: aflatoxinas

basidiosporas
Candida albicans: condidasis
vaginal u oral
Micelio de hifas
septadas y Microporum: infecciones
profundas dermatológicas (tiña)
01 HONGOS BENEFICIOSOS

CLÍNICA MEDIOAMBIENTAL ALIMENTARIO

 01 TRABAJO DE LABORATORIO

La muestra
Estudio
Tejidos sólidos
macroscópico Cultivo Tejido

Estudio microscópico: Glicerol + KOH +

fijador clarificar

Giemsa Argéntica Schiff

Cultivo
Agar Sabouraud: morfológia.
● Agar Cerebro-Corazón: micosis sistémicas endémicas.
● Agar Mycosel: aislar hongos patógenos.
Tejidos líquidos ● Agar Czapeck: Candida albicans.
MICOSIS
 1,2,3
responda otra vez
 02 MICOSIS

Profundas o sistémicas Oportunistas

Tejidos internos Diseminable Localizadas Inmunodeprimidos

Inmunocompetentes

Inmunodeprimidos

Paracoccidiomicosis Peniciliosis Histoplasmosis Aspergillosis Mucormicosis

 Profundas o sistémicas
02 MICOSIS

Paracoccidiomicosis AGENTE CLÍNICA

Adultos

Localizada:
respiración
Paraccodioides
brasiliensis

TRANSMISIÓN

Niños

Localizada:
diseminada
Inhalación de
esporas de la tierra
 Profundas o sistémicas
02 MICOSIS

Peniciliosis CLÍNICA
AGENTE

Fiebre

P. marneffei
Inmunodeprimidos

TRANSMISIÓN Hepatomegalia

Contaminación de heridas Abscesos cutáneos

mediante heces
 Profundas o sistémicas
02 MICOSIS

AGENTE
Histoplasmosis CLÍNICA

Enfermedad Histoplasma capsulatum

de Darling

TRANSMISIÓN Afecciones Lesiones cutáneas

pulmonares

Enfermedad
Inflamación de Lesiones óseas
de Duncan
Inhalación de esporas ganglios
02 MICOSIS Oportunistas

CLÍNICA
Aspergillosis
TRANSMISIÓN

AGENTE Inhalación o contacto de esporas

Aspergillus Aspergillus flavus

fumigatus

TOXINA:
PACIENTES
AFLATOXINA
INMUNODEPRIMIDOS
 02 MICOSIS Oportunistas

Mucormicosis
Rinoorbital.
Pacientes diabéticos
Progresión paranasal →
Gastrointestinal cefalea→parálisis
Pacientes
neutropénicos o
malnutridos
Infartos o
problemas SNC

Cutánea
Pacientes Pulmonar
transplantados Pacientes neutropénicos
Colonización por Neumonía
contacto dérmico

1. - Enfermedad de Darling
- Micosis sistémica
- Hipersensibilidad cutánea
2. - Blastomicosis
sudamericana
- Granjeros y campesinos
- Hepatoesplenomegalia
3. - Penicillium marneffei
- Infección diseminada
- Hepatoesplenomegalia
4. - Aspergillus fumigatus
- Neutropenia prolongada
- Infiltrados pulmonares
Cuéntame
8. - Rata del bambú
- Inmunodeprimidos
- Abscesos cutáneos
5. - Hongos mucorales
- Mucormicosis rinoorbitaria
9. - Toxina cancerígena
- Diabetes - Aflatoxina
12. - Oportunista
- Epidemias hospitalarias
6. - Zonas endémicas de África - Inmunodepresión
- Esporas inhaladas - Aspergillosis
10. - Hongos mucorales
- Inflamación de ganglios - Mucormicosis
13. – Respiración
- Trasplante
7. - Infecciones crónicas del - Sistémica
pulmón - Esporas
11. – Heces
- Lesiones mucosas - Hepatomegalia
- Insuficiencia suprarrenal 14. – Malnutrido
- Asia
- Oportunista
- Micosis
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO

HISTOPLASMOSIS

TÉCNICA TINCIÓN DE GRAM

MUESTRA 1 ESPUTO O RASPADO

CUTÁNEO
MEDIO DE CULTIVO AGAR SANGRE O
SABOURAUD
OBSERVACIÓN LEVADURA OVAL
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO

PARACOCCIDIOMICOSIS

TÉCNICA TINCIÓN DE GRAM

MUESTRA ESPUTO, ABCESO O

SECRECIÓN
MEDIO DE CULTIVO AGAR SABOURAUD
COLONIA RUGOSA
OBSERVACIÓN “RUEDA DE TIMÓN”
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO

PENICILIOSIS

TÉCNICA TINCIÓN DE GRAM

MUESTRA ABSCESO O RASPADO

MEDIO DE CULTIVO AGAR SABOURAUD

COLONIA BLANCA ATERCIOPELADA
ROJIZA RUGOSA
OBSERVACIÓN LEVADURA OVAL (SEPTO)
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO

ASPERGILOSIS

TÉCNICA TINCIÓN DE GRAM

MUESTRA ESPUTO, O SECRECIÓN

MEDIO DE CULTIVO AGAR SABOURAUD

COLONIA - A. fumigatus: algodonosa azulada
- A.flavus: algodonosa verdosa
OBSERVACIÓN - A. fumigatus: abanico
- A.flavus: diente de león
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO

MUCORMICOSIS

TÉCNICA HEMATOXILINA EOSINA

MUESTRA BIOPSIA

MEDIO DE CULTIVO AGAR SABOURAUD

COLONIA TEJIDO DIRECTO
OBSERVACIÓN HIFAS NO SEPTADAS
 CÓMO IDENTIFICAS
LOS HONGOS

https://interacty.me/projects/19ea9addba6ee21e
04 IDENTIFICACIÓN DE PARÁSITOS
Un parásito es un organismo que reside en un organismo huésped, ya sea en su superficie o
en su interior, alimentándose de él. Pueden ser unicelulares o pluricelulares, y su presencia
puede dar lugar a diversas patologías en el ser humano.

PROTOZOOS HELMINTOS ARTRÓPODOS

Unicelular Pluricelular Pluricelular

Trofocito-quíste Ciclo huevo-larva Grupo numeroso

Órgano motil Platelmintos o Nematodos Vectores biológicos

(Anopheles)
Gardia lambia Taenia Ixodoidea
solium
04 IDENTIFICACIÓN DE PARÁSITOS
Muestra biológica

Localización del Fase del ciclo del

parásito parásito

SANGRE HECES OTRAS

Parásitos Parásito Intestinal Vello
sanguíneos
Recogida en días alternos Exudado
Adición de vaginal
anticoagulantes Conservación en
formalina Orina

Estudio directo Estudio indirecto

 Estudio directo Estudio indirecto

Visualización microscopio Técnicas inmunológicas

Inmuno
ELISA
cromatografía

Aglutinación Inmuno
por Latex fluorescencia

Artrópodos o
Morfología
Helmintos

PCR

Especificidad Protozoos
 Estudio indirecto

Técnicas inmunológicas

Aglutinación
por Latex ELISA

Leishmania
 Estudio indirecto

Técnicas inmunológicas

Inmuno
cromatografía

Plasmodium
 INVESTIGA
1. **Entamoeba histolytica** 8. **Taenia solium**

2. **Trichuris trichiura** 9. **Anopheles mosquito**

3. **Sarcoptes scabiei** 10. **Cryptosporidium parvum**

4. **Plasmodium falciparum** 11. **Fasciola hepatica**

Tipo de parásito
5. **Toxocara canis** 12. **Ixodes ricinus**
Muestra biológica
6. **Pediculus humanus** 13. **Entamoeba coli** Enfermedad

7. **Giardia lamblia** 14. **Demodex folliculorum** Técnica inmunológica

05 IDENTIFICACIÓN DE VIRUS
Los virus

Parásitos obligados,
no pueden realizar
las funciones básicas
por su propia cuenta

Virus satélites Viroides Priones Proteínas

mal plegadas

Material libre
infectivo de plantas
Necesitan otro virus
 05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Orthomyxoviridae ● Influenza A: causante de la gripe A cuyo
reservorio son aves, ganado porcino,
felinos, caballos, murciélagos y el hombre.

● Influenza B: causante de la gripe B cuyo

reservorio es el hombre.

La Gripe Diagnosis
● Inmunocromatografía

●PCR
 05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Herpesviridae
Virus de la Varicela Zoster
(VVZ)
Infección 1º: Varicela
Reinfección: Herpes Zoster
Latente en ganglios
Contagio 48h antes de los
síntomas hasta la aparición de
costra
Citomegalovirus (CMV)
Se contagia por contacto
Latente en linfocitos, epitelio y
endotelio vascular.
Clínica similar a la
mononucleosis
Virus de Epstein-Barr (VEB)
1º Contagio: asintomático
2º Contagio: mononucleosis
Puede haber complicaciones
asociadas.
Afecta a linfocitos B
 05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Herpesviridae
Virus herpes simple 2 (VHS 2):

Virus herpes simple 1 (VHS 1):

ETS
Transmisión entre personas por contacto directo

Primaria: seronegativo en VHS. Manifestación

ulcerosa, fiebre y cefalea

No Primaria: seropositivo VHS1

Asintomáticas Picazón Dolor Recurrente: reactivación del herpes seropositivo

05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO

Papovaviridae

El genoma es ADN bicatenario circular.

La cápside del virus es icosaédrica y está envuelto.

Papiloma Humano Diagnosis

ETS
Verrugas genitales → cáncer de útero o ano Técnicas de
hibridación
PCR
 05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Retroviridae: Existen 3 subfamilias: Oncovirinae (HTLV-1 y HTLV-2), Lentivirinae (VIH) y Spumavirinae.

Oncovirinae:
Virus linfotrópicos de células T oncogénicos
Periodo de latencia de 30 años

Lentivirinae:
Virus de la Inmunodeficiencia humana (VIH)→
SIDA
• VIH1.: procede del simio
• VIH2.: procede del primate, pero es menos
prevalente

Spumavirinae
La variante humana es una variante del simio
 05 DIAGNÓSTICO VIRAL
.El cultivo de los virus:
.Diploides
3-7 días después Células primarias.
de los síntomas Hasta 50 pases
.Primarios
Reducen su calidad
con los pases

.Neoplásicos
Aguantan infinitos pases

.Los virus necesitan células

para mantener su ciclo “vital”
Cómo hacer un cultivo celular
05 DIAGNÓSTICO VIRAL
.Detección del antígeno viral

ELISA INDIRECTO ELISA DIRECTO TEST DE AGLUTINACIÓN

 05 DIAGNÓSTICO VIRAL
.Diagnóstico serológico

Nos informa del estado

de la infección

• Si IgM>IgG enfermedad activa

• Si IgG>IgM recuperación

¿Quién había pasado

el COVID ?
 05 DIAGNÓSTICO VIRAL
Procesamiento de las muestras

Trabajar inmediatamente Medio de transporte Antimicrobiano

SFB 10%
Tampón
Proteínas
Rojo Fenol
Hay
PCR -70ºC RECOGIDA DE LAS MUESTRAS

Líquido amniótico: Enfermedades congénitas o

Sangre: libre de inhibidores Rubeola, Zoster, CMV
Líquido
de DNA polimerasas (HB).
CR:
VEB Aspirado nasofaríngeo:
- Suero (6h) Enterovirus Exudado genital
CMV Enfermedades
- Leucocitos CMV ETS
respiratorias como VRS
 LOS VIRUS tienen
orden
1. Recogida y envío de muestras al laboratorio, preferiblemente entre los 3 y 7 días del inicio de la
enfermedad.
2. Realización de un cultivo de virus
3. Diagnóstico serológico para conocer el estado de la infección.
4. Una vez se obtienen las muestras, se realiza su procesamiento, almacenándolas en nevera o
congelador según el tiempo de espera.
5. En el procesamiento de muestras sanguíneas, es crucial la separación de leucocitos para
detectar reactivaciones víricas.
6. Detección de antígenos mediante técnicas como la Inmunofluorescencia Directa.
Slidesgo