MEDIOS DE CULTIVO: TIPOS Y CLASIFICACIN

Jorge Luis Guilln Len Bloque A

Qu es un medio de cultivo?

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio.

Agar

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l.

Clasificacin segn sus cualidades fsicas

De acuerdo a su consistencia, los medios de cultivo pueden clasificarse en: Lquidos: Son los que se presentan en este estado, denominndose por esta razn caldos. El medio lquido ms utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente de extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la obtencin de una suspensin bacteriana de una

Semislidos: Contienen 0.5% de agar en su formulacin. Se utilizan para estudiar la movilidad de las bacterias (presencia o ausencia de flagelo).

Slidos: Contienen de 1.5 a 2% de agar en su formulacin. Estos medios inmovilizan a las clulas, permitindoles crecer y formar masas aisladas visibles llamadas colonias. Las colonias permiten al microbilogo reconocer la pureza del cultivo; las placas que contengan ms de un tipo de colonia no provienen de un cultivo puro. Las placas de agar tambin se utilizan para la determinacin de clulas viables (recuento en placas).

Clasificacin segn sus cualidades qumicas

Medios

sintticos o qumicamente definidos: Llevan fuente de carbono, fuente de nitrgeno, sales que suplan iones (P, K, Mg, Fe, Ca), otros elementos como son estimuladores del crecimiento pero siempre a concentraciones conocidas. Medios complejos o de composicin indefinida: Estos medios llevan ingredientes como extracto de levadura, peptona, infusin de cerebro, extracto de carne, etc. que contienen nutrientes en abundancia pero sin saber con exactitud la composicin cualitativa ni cuantitativa de estos nutrientes.

Clasificacin segn su uso en el laboratorio

Medios

de enriquecimiento. Son medios complejos (normalmente) con aditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados microorganismos. Medios selectivos. Son aquellos que favorecen por su diseo el crecimiento especfico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una poblacin microbiana mixta.

 Medios

diferenciales: Son aquellos destinados a facilitar la discriminacin de microorganismos de una mezcla por sus propiedades diferenciales de crecimiento en dichos medios. Medios de mantenimiento. Suelen ser distintos a los de crecimiento ptimo ya que el crecimiento rpido y prolfico suele ocasionar la muerte rpida de las clulas.

Composicin de los medios de cultivo

Los constituyentes mas utilizados en la composicin de los medios de cultivo son:

Agar Peptona Extracto de carne Extracto de levadura Sangre

Plasma Suero Bilis Sales biliares Gelatina Carbohidratos Indicadores

Medios de uso comn en el laboratorio

Agar sangre

El AS al 5% con base de Tripticasa-Soya es un medio de uso general que permite el crecimiento tanto de microorganismos exigentes como no exigentes, que incluyen bacterias aerobias y anaerobias, aunque no es medio de eleccin para anaerobios. Permite visualizar reacciones hemolticas que producen muchas especies bacterianas. Permite el crecimiento de algunos grmenes exigentes como estreptococos, pneumococos, Brucella, Erysipelothrix y Pasteurella.

Agar gelosa chocolate

Este medio utiliza la misma base que el Agar Sangre. Antiguamente se aadan los hemates a la base fundida y se elevaba la temperatura para lisarlos parcialmente y que soltasen al medio sus componentes. Esto daba al medio su habitual color pardo chocolate. El Agar chocolate es un medio destinado principalmente al aislamiento de gonococos y meningococos, pero en el que pueden crecer muchos otros microorganismos exigentes. Est particularmente indicado para aislamiento de las Neisserias

Agar McConkey

MacConkey o Agar MacConkey es un medio de cultivo especfico para bacterias gram negativas y cepas que fermenten la lactosa. La diferenciacin de organismos entricos se lleva a cabo con la combinacin de Lactosa con el indicador Rojo neutro. Se producen colonias rosas a rojas si el aislado es capaz de fermentar la Lactosa y colonias sin color en caso contrario.

Colonias lactosa (-): incoloras (= no hay fermentacin de la Lactosa). Salmonella, Shigella, Pseudomonas colonias lactosa (+): rosa/rojo ladrillo rodeadas de un halo de sales biliares precipitadas. E. coli (rosa/roja), E. aerogenes (rosa y mucosa)

Agar salmonella y shigella

Agar

altamente selectivo que se utiliza para el aislamiento de salmonella y de alguna especies de shigella.

Agar Sabouraud
Es

un medio diferencial, recomendado para el cultivo y crecimiento de hongos. Para que ocurra el crecimiento selectivo de hongos sobre bacterias en las muestras a analizar, este medio tan solo depende de la reaccin cida (pH 5,6).

Agar sal y manitol

Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de estafilococos. Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de muestras clnicas, alimentos, productos cosmticos y otros materiales de importancia sanitaria.

Agar mueller-hinton
Especfico

para la realizacin de antibiogramas, existen dos variantes, Agar Mueller-Hinton/Sangre y Agar MuellerHinton/Chocolate , estas variaciones se realizan para obtener la sensibilidad antimicrobiana de ciertos microorganismo, St. Pneumoniae y Haemophilus spp. Respectivamente.

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