Coenzimas metálico ya posee una actividad catalítica primaria, muy

incrementada a su vez por la proteína enzimática.

La actividad de algunas enzimas dependen solamente de su
estructura como proteínas, mientras que otros necesitan, además, Sobre las coenzimas, la mayoría contiene como parte de su
uno o más componente no proteicos, llamados: COFACTORES. El estructura una molécula de alguna vitamina hidrosoluble, estas a su
cofactor, puede ser un ion metálico o bien una molécula orgánica vez son sustancias orgánicas que en cantidades mínimas son vitales
llamada coenzima. para el funcionamiento de todas las células. Las coenzimas actúan
por lo general como transportadores intermediaron de grupos
Algunas enzimas necesitan de ambos cofatores. Son generalmente funcionales de átomos específicos o de electrones, los cuales son
estables frente al calor, mientras que muchas proteínas enzimáticas transferidos en la reacción enzimática global.
pierden la actividad por calefacción. El complejo enzima cofactor
catalíticamente activo recibe el nombre de HOLOENZIMA, cuando Cuando la coenzima se halla unida íntimamente a la molécula de la
este se separa (el cofactor), la proteína restante que por sí misma es enzima recibe el nombre de grupo prostético; sin embargo, en
inactiva catalíticamente, se designa con el nombre de APOENZIMA. algunos casos la coenzima está unida débilmente y actúa como uno
de los sustratos específicos de la enzima.
Ejemplo de iones metálicos:
VITAMINAS:
Zn Mg Fe Na
Alcohol Fosfohidrolasas: Citocromos: ATPasa Se clasifican en hidrosolubles y liposolubles.
Deshidrogenasa: romper enlaces transporte de
interconversion energia Las vitaminas hidrosolubles, como su nombre lo indica, son solubles
entre alcohol y en agua, no se almacenan en el organismo y ayudan a la
aldehidos composición de las coenzimas. (Complejo B, vitamina C)
Anhidrasa Fosfotransferasas Peroxidasa
VITAMIN FUNCION FUENTE DEFICIE ESTRUCTURA
Carbónica
A NCIA
Carboxipeptidasa Catalasa:
Vitamina Energía para Levadura Beri beri
descomposición
B1 la regulación s, (Neuropa
de peróxido de
(Tiamina del sistema Legumin tía
hidrogeno.
) nervioso osas, periférica,
Ferredoxina
carne de anorexia,
cerdo fatiga)
Vitamina Constituye al Cereales, Lesiones
El ión metálico puede actuar como: B2 mantenimien levadura, en la piel,
(Riboflavi to de las hongos, sensibilid
1. Centro catalítico primario na) membranas carnes, ad a la
2. Grupo puente para reunir sustrato y enzima mucosa, la lácteos, luz.
3. Agente estabilizante de la conformación de la proteína piel y el etc.
enzimática en su forma catalíticamente activa. transporte.
Vitamina Mejora Fruta Pelagra
Las enzimas que precisan de un ion metalico se llaman en algunas B3 circulación seca, (Diarrea,
ocasiones: Metaloenzimas, en algunas de ellas el componente (Niacina) de la sangre levadura, demencia
y producción aves, ,
 de carnes dermatitis Vitamina Síntesis de Producto Desorden
neurotransmi sin grasa. ) B12 ADN y ARN s de es a nivel
sores. (Cobala origen del SN.
Vitamina Compone Calabaza Rara mina) animal.
B5 (Ac CoA, ,
Pantotén metabolismo cacahuat
ico) celular, e,
sistema levadura Vitamina Producción Cítricos. Escorbut
nervioso. de C (Ac. de colágeno, o,
cerveza, Ascórbic cicatrización hemorrag
tofu, etc. o) de heridas. ias,
Vitamina Formación Cacahuat Dermatiti anemias,
B6 de globulos e, s, glositis. etc.
(Piridoxin rojos, germen
a) indispensabl de trigo,
COENZIMAS
e para legumino
transporte de sas, Son pequeñas moléculas orgánicas no proteicas que transportan
oxigeno. harina de grupos químicos entre enzimas. No forman parte permanente de la
maíz, estructura enzimática. En el metabolismo las coenzimas están
avena, involucradas en reacciones de transferencia de grupos, reacciones
etc. REDOX. Ellas se reciclan en el metabolismo.
Vitamina Formación Hongos, Depresió
B7 de glándulas coliflor,n, Su principal función es actuar como intermediarios metabólicos. El
(Biotina) sexuales y papa, dermatitis metabolismo conlleva a una amplia gama de reacciones químicas
de la dermis. cacahuat , anemia, pero la mayoría corresponden a unos tipos básicos de reacciones
e, frutas,
nauseas, que implica transferencia de grupos funcionales.
etc. dolores
muscular Cada clase de reacción de transferencia de grupos se lleva a cabo
es. por una coenzima particular, que es el sustrato de un conjunto de
Vitamina Permite Verduras Náuseas, enzimas que la producen y un conjunto de enzimas que la consumen.
B9 (Ac. multiplicació de hoja falta de
Fólico) n celular. verde, apetito, REDOX: Reacción de óxido-reducción. Toda reacción química en la
legumino pérdida que uno o más electrones se transfieren entre los reactivos
sas, de peso, provocando un cambio en el estado de oxidación.
frutos anemia,
secos, etc. Si se reduce, se gana electrones
etc.
Si se oxida, se pierde electrones

Agente reductor cede electrones

Agente oxidante gana electrones

Mecanismos de acción de las coenzimas:
1. Se une a una enzima.
2. La enzima capta su sustrato específico
3. La enzima ataca a dicho sustrato, transfiriendo electrones. La
unión entre sustrato y enzima produce una nueva sustancia,
esta sustancia es inestable lo que provoca su separación en
diferentes partes: enzima producto y la forma reducida de la
coenzima, que se quedó con algunos electrones (al oxidar el
sustrato, esta se reduce) por presentar mayor fuerza de
atracción molecular.
4. La enzima cede a la coenzima dichos electrones provenientes
del sustrato.
5. La coenzima acepta los electrones y se desprende de la
enzima,
6. La coenzima reducida va a la cadena de transporte de
electrones donde se genera ATP y agua. Al dejar sus
electrones vuelve a su estado inicial.
Para ejemplificar un poco se encuentran las DESHIDROGENAS:
Son enzimas capaces de catalizar la oxidación o reducción de
un sustrato por sustracción o adición de dos átomos de hidrógeno
(deshidrogenación), empleando un par de coenzimas que actúan
como aceptores o como donadores de electrones y protones; los
principales coenzimas implicados en estas reacciones redox son los
pares NAD+/NADH, NADP+/NADPH, FAD/FADH2 y FMN/FMNH2; en
cada par, la primera es la forma oxidada y la segunda la forma
reducida del coenzima.
Se conocen como deshidrogenasas Niacin-Flavin dependientes ya
que sin estos cofactores no se podría llevar a cabo dichas
reacciones.
Niacin dependientes:
NAD:
 Isocitrato
 D-beta-Hidroxibutirato
 Gliceraldehido 3-P
 L- Malato
NADP:
 Isocitrato
 Glucosa de fosfato
Flavin dependientes:
FMN:
 NADH deshidrogenasa
FAD:
 Succinato deshidrogenasa
CLASIFICACIÓN DE LAS COENZIMAS SEGÚN SU
PARTICIPACION EN PROCESOS METABÓLICOS:
1. Coenzimas que participan en la transferencia de electrones
 Nucleótidos de nicotinamina (derivado de la piridina)
derivados de la vitamina B3
El dinucleótido de nicotinamida y adenina (NAD+) y el dinucleótido de
nicotinamida, adenina y fosfato (NADP+) así como su formas
reducidad (NADH, NADPH) están involucradas en la mayoría de las
reacciones de deshidrogenacion que ocurren en las mitocondrias,
citosol, RE de la célula.
Son sustancias solubles en aguay usualmente difunden libremente
desde una enzima cuando están en su forma oxidada o reducida para
participar en otra reacción de deshidrogenación catalizada por otra
enzima. No están unidas covalentemente a la enzima y actúan como
aceptores electrónicos durante la eliminación enzimática de átomos
de Hidrogeno procedentes de moléculas de sustratos específicos.
Presentes en procesos de óxido reducción.
El NAD está compuesto por 1 nicotinamida
proveniente del ácido nicotínico, precursor de
la coenzima, 2 ribosas, 1 adenina y grupos
fosfatos.
El NADP está compuesto en casi su totalidad
por los elementos del NAD, pero se sustituirá
un grupo hidroxilo de la ribosa del nucleótido por un grupo fosfato
(PO3)
Un átomo de hidrógeno de sustrato se transfiere en forma de ión
hidruro a la porción NICONTINAMIDA (esta, experimenta una
reducción reversible porque gana electrones) de las formas oxidadas
de las coenzimas. Transformando el N+ a N. El otro atomo de
hidrogeno del sustrato queda libre como ion hidrogeno.
EJEMPLO:
Oxidación de Malato a Oxalacetato
Malato: Ac málico ionizado. POSICIONES 1 Y 4 DEL ANILLO DE
PIRIDINA DEL NAD+ se reducen por transferencia de un ion hidruro
del sustrato.
PD: ésta encima es específica del NAD+ como coenzima.
 Nucleótidos de Flavina derivados de la vitamina B2
Los flavin-nucleótidos actúan como grupos prostéticos de las
enzimas de oxidación- reducción. Funcionan en la
degradación oxidativa del piruvato, de los ácidos grasos y
aminoácidos, así como en el proceso de transporte
electrónico. Se halla fuertemente unido a la enzima pero sigue
siendo no covalente (excepción la succinato deshidrogenasa,
en donde el nucleótido FAD está unido a un resto de
Histidina). Los flavin-nucleótidos presentan una reducción
reversible del anillo de isoaloxacina para rendir a los
nucleótidos reducidos.
Las formas oxidadas de las diferentes flavoenzimas son
intensamente coloreadas debido a fuertes bandas de
absorción en la zona del espectro visible. Cuando se reducen,
las flavoenzimas experimentan decoloración con un cambio
característico en el espectro de absorción. Esto resulta útil
para medir su actividad.
El anillo de flavina puede aceptar dos átomos de hidrógeno a
diferencia del ácido nicotínico. Su deficiencia podría ocasionar
presencia de lengua magenta, fisuras en extremos de la boca,
dermatitis seborreica, vascularización corneal.
Encontramos en su estructura:
El dinucleótido de adenina y flavina (FAD+) compuesto por la
riboflavina (anillo de isoaloxacina y ribito) y el nucleótido de
adenina.
En cuanto al fosfato de riboflavina (mononucleótido de flavina)
(FMN+) no posee el nucleótido de adenina sino que es
reemplazado por grupo fosfato (CH2OPO3)
En el anillo del medio y el último es donde ocurre el
transporte.
Las formas reducidas de FAD Y FMN aceptan dos electrones.
En el primer caso se formara una semiquinona (FADH), en
donde el hidrogeno irá al nitrógeno que se encuentra en el
anillo del medio en la parte superior. Luego , el segundo
electrón ira al tercer anillo, en la parte superior formando la
forma reducida, de en este caso, FAD--FADH2.
Ejemplos de Reacciones:
Oxidación de Succinato a Fumarato
 2. Coenzimas que participan en la transferencia de grupos
carbonados.

 Biotina: Denominado vitamina H (Haut= Piel) Ampliamente

distribuida en diferentes alimentos de origen vegetal y animal.
Sintetizada por bacterias intestinales.

Su función está relacionada con la síntesis de ácidos graso,

gluconeogénesis, metabolismo de la leucina. Deriva de la vitamina
B7.
La biotina está combinada con el grupo amino de un resto específico
de lisina de la proteína enzimática llamada BIOCITINA. Realiza el
papel de transportar dióxido de carbono durante la acción de algunas
enzimas carboxilantes y descarboxilantes como:
Acetil-CoA-Carboxilasa, Proponil-CoA-Carboxilasa, Piruvato-
Carboxilasa.
Estructura:
Formada por un anillo de imidazol (Ureido) y tiofeno condensados y
ácido valérico. Presenta 2 núcleos heterocíclicos.
La reacción involucra dos pasos, en el primero el ion de bicarbonato
es activado mediante la reacción con el ATP y se une
covalentemente al N1 del anillo de biotina. Luego, el enlace de la
cadena lateral de la lisina mueve la biotina activada a una región
diferente del sitio activo de la enzima donde el grupo carboxilo es
transferido a la molécula aceptora.
Enfermedad Carencial: consumo de clara de huevo cruda, contiene
avidina que es una proteína que evita la absorción de la biotina.
 Pirofosfato de Tiamina
Grupo prostético necesario para las enzimas que catalizan
reacciones de descarboxilacion de los alfa ceto carboxilácidos y de
las enzimas que transfieren grupos cetona entre moléculas como
transcetolasas. Forma metabólicamente activa de la vitamina B1
(tiamina). Cuya deficiencia ocasiona el Beri beri.

Tiene su función en la ruta principal del metabolismo de los glúcidos

Donde cuando llega la unión con la lisina para formar Biocitina, se
unirán por medio del ac valerico y el grupo amino de la lisina.
Su sitio de unión para el transporte será el grupo amino que se
encuentra en el imidazol.
Ejemplo:
en las que se separan o transfieren grupos aldehídos:
descarboxilacion de los alfa oxoácido: La del ácido pirúvico (enzima
clave en el metabolismo energético de los glúcidos, tras la
glucolisis).La de alfa- cetoglutarato (enzima del ciclo de Krebs). Y
formación o degradación de los alfa cetoles Coenzima de las
transcetolasas para formación de cetosas (vía de las pentosas para
sintetizar NADPH y las pentosas Ribosa y desoxiribosa).
El anillo de tiazol del pirofosfato de tiamina actúa como transportador
transitorio de un grupo aldehído activo unido covalentemente. Se
necesita magnesio como cofactor.

Carboxilacion del acetil CoA Estructrura: Tiamina, grupo fosfato.

Tiazol, de la tiamina es donde se adosaran los compuestos a Su estructura: Pteridina (Donde C6, C7/N5,N8) presentan H+)(6-
transportar (C2) metilpteridina), Acido p-aminobenzoico y ácido glutámico.

Ejemplos:

EJEMPLO DE REACCION DEL PIRUVATO.

La descarboxilacion oxidativa del piruvato: es la etapa previa

al ciclo de Krebs y posterior a la glucólisis en el proceso
de respiración celular.

Durante el proceso el grupo carboxilo del piruvato se libera

como dióxido de carbono (CO2).
A este proceso de descarboxilacion lo acompaña un proceso de
deshidrogenación (oxidación). La molécula de piruvato termina
conformando el grupo acetilo (de dos átomos de carbono) del
acetaldehído.
Una deficiencia crónica de vitamina B1 puede dar lugar a ciertos
problemas de salud graves, como el beriberi humano, que a su vez
puede afectar el corazón, así como el sistema nervioso. La
deficiencia severa puede dañar el cerebro.
El N5, N10-metilen tetrahidrofolato o metileno
tetrahidrofolato (CH2FH4) es formado a partir del tetrahidrofolato con
la adición de grupos metileno de uno de los carbonos
donadores: formaldehído, serina o glicina.
El N5-metil tetrahidrofolato o metil tetrahidrofolato (CH3FH4) puede
ser formado desde el metileno tetrahidrofolato por reducción del
grupo metileno mediante NADH; el N5-formil tetrahidrofolato o formal
tetrahidrofolato (CH3–FH4) resulta de la oxidación del metileno
tetrahidrofolato.

 Ácido Tetrahidrofólico: N5 y N10 seran los sitios de unión para los derivados del ácido
terahidrofolico.
Coenzima F, derivada del ácido fólico (vitamina B9) Es un compuesto
importante en el metabolismo de los aminoácidos y la síntesis de Ejemplo en pizzara.
purinas. El tetrahidrofolato (FH4) actúa como un transportador
intermediario de grupos hidroximetilo (-CH2-OH), formilo (-CHO) o ENFERMEDAD CARENCIAL: espina bífida, anemia megaloblastica,
metilo (-CH3) en gran número de reacciones enzimáticas en las que dermatitis, parálisis, debilidad e irritabilidad.
tales grupos se transfieren desde un metabolito a otro o son
 Coenzima A
interconvertidos.
Coenzima de transferencia de grupos Acilo que participa en diversas
En humanos se sintetiza a partir del ácido dihidrofólico (pteridina con
rutas metabólicas (Ciclo de Krebs, síntesis y oxidación de ácidos
H+ en N1 y N8) mediante la dihidrofolato reductasa. Actúa como
grasos). Coenzima libre derivada de la vitamina B5.
donante de grupos químicos con un átomo de carbono. El átomo de
carbono lo obtiene utilizando el formaldehido producido en otros Su parte reactiva es la función tiol (Sh) de la tioetanolamina.
procesos.
La reacción con un ácido carboxílico forma enlace aciltioester rico en
El fármaco Metotrexato reduce el ácido tetrahidrofólico, se utiliza para energía.
inhibir la síntesis de nucleótidos. (Afectando ADN) Utilizado en
quimioterapia y como antirreumático. Reacción: CoA-SH + R-COOH -> S-CoA-CO-R + H2O
Se forma durante la acción enzimática del piruvato o acido grado,
puede originarse a partir del acetato libre en presencia de la enzima
acetil CoA- sintetasa. ATP+ CoA + Acetato <-> AMP + Acetil CoA +
Pirofosfato
Una molecula de CoA que transporta acetilo se conoce como Acetil-
CoA cuando no lleva grupo acetilo generalmente se denomina
CoASH.
El acetil CoA puede reaccionar entonces enzimáticamente con un
aceptor de grupos acilos tal como la colina : Acetil CoA + Colina ---
Acetilcolina + CoASH (Colinacetilasa)
Grupos Acilo transportadores para el CoA:
Acetil (metabolismo celular), Propionil (Oxidacion Ac grasos),
Acetoacil (Sintesis triacilgliceridos), Cumaril, derivados de acidos
dicarboxilicos: Malonil, Succinil, Pimolil, Hidroximetilglutaril.
Estructura: la CoA está formada por Molécula de Beta
mercaptoetanolamina, ácido pantoténico y un nucleótido.
Un TIOL libre en la porción β mercaptoetilamida es la
parte de la molécula de coenzima que tiene actividad
funcional.
Ejemplo:
Acetil CoA + Oxalacetaro --------- Citrato (Citrato Sintasa) H2O—
CoASH
De piruvato a acetil CoA (TPP, FAD, NAD-NAH y CoA) piruvato
deshidrogenasa
 Ácido Lipoico
Derivado del ácido graso octanoico. Es liposolube e hidrosoluble.
Actúa en la glucólisis y es una coenzima clave en el metabolismo
energético de las células. Actúa como una coenzima de la
descarboxilacion oxidativa del piruvato y de otros alfa-oxoácidos.
Se une covalentemente a un resto especifico de lisina de la enzima
con quien colabora (forma lipoamida) , está presente en dos formas:
la oxidada: disulfuro cíclico y la reducida: dos grupos sulfhidrilo.
Resulta siendo un aceptor y transportador de grupos
acilo. Por acción del TPP y la Piruvato deshidrogenasa.
Los sitios de unión vienen dados por la localización del azufre.
Sintetizada por los animales en cantidades adecuadas.
Ejemplos:
Transferencia de átomos de hidrógeno y de un grupo acetilo del
pirofosfato de tiamina al ácido lipóico. (descarboxilacion oxidativa del
piruvato) EN PIZZARRA.
Descarboxilacion Oxidativa del Piruvato
El piruvato es convertido en Acetil CoA por una reacción de
Descarboxilacion
El complejo multienzimatico Piruvato deshidrogenasa está
formado por múltiples copias de 3 Enzimas:
1. Piruvato deshidrogenasas E1 (PTT)
2. Dihidrolipoamida transacetilasa E2 (Ácido Lipoico)
 3. Dihidrolipoamida Deshidrogenasa E3 (FAD)
En la catálisis intervienen 5 Coenzimas: TPP, Acido Lipoico,
CoA-SH, NAD+, FAD+
Piruvaro + CoASH------ AcetilCoA + CO2
 S-Adenosil Metionina (SAM):
Coenzima que participa en la transferencia de grupos metilo. Las
rutas metabólicas que utiliza son las transmetilación, transsulfuracion
y amino propilación. Se compone de Adenosina trifosfato (ATP) y
metionina mediante la metionina adenosiltransferasa.
En estos pacientes se ha encontrado niveles bajos de SAM en el
líquido cefalorraquídeo y regiones del cerebro. Un efecto positivo de
este medicamento es que los altos niveles de homocisteina se han
asociado con la ateroesclerosis, ataques cardíacos, ACV, daño al
hígado. Se toman estas vitaminas que ayudan a metabolizar la
homocisteina en otros compuestos útiles.
Ejemplo de reacción:

Es un potente agente alquilante (interrupción de la función del ADN y

muerte celular) debido a la presencia del ión sulfonio.

La mayoría de SAM se produce y consume en el hígado.

El grupo metilo (conjunto al S) es químicamente reactivo. Esto

permite la donación de este grupo a un sustrato aceptor.

3. Coenzimas que participan en transferencia de grupos

aminados.
 Fosfato de piridoxal

Derivado de la vitamina B6 son coenzimas muy versátiles se

Reacciones que producen, consumen, regeneran SAM se denominan
ciclo del SAM. Primero las metilasas dependientes de SAM, lo usan
como sustrato y producen S-adenosil homocisteina como producto.
Esta es hidrolizada a homocisteina y adenosina mediante la S-
adenosil homocisteina hidrolasa. Por lo tanto la homocisteina es
reciclada de nuevo a metionina a través de la trasnferencia de un
grupo metilo desde el 5-metil tetrahidrofolato por metionina sintasa.
encuentran en reacciones en donde los aminoácidos o los grupos
amino se transformen o se transfieran. El tipo más común de reacción
enzimática es la trasnominación (transferencia del grupo alfa-amino
de un aminoácido al átomo de carbono alfa de un alfa-oxoácido)
catalizado por las transaminasas o aminotransferasas. Ejemplos de
reacciones:

La metionina puede volver a convertirse en SAM.

La SAM es necesaria para el crecimiento y la reparación celular,

biosíntesis de neurotransmisores y hormonas.

Se vende como suplemento alimenticio y existe evidencia de que Regulación Metabólica

niveles muy bajos de SAM puede desempeñar un papel importante
en el desarrollo del Alzheimer y niveles altos lo pueden contrarrestar.
Cada vía metabólica contiene, habitualmente, una reacción que es
esencialmente irreversible y que se conoce como la reacción que
limita la velocidad de la vía. Las enzimas que catalizan estas
reacciones están sometidas a una estricta y a veces compleja
regulación para asegurar que:
 La velocidad de la vía esté adaptada a las necesidades de la
célula.
 Las vías de síntesis y degradación de cualquier molécula no
estén activas al mismo tiempo (esto daría lugar a lo que los
bioquímicos denominan un «ciclo fútil»).
Las vías metabólicas tienen lugar en distintos compartimentos de las
células, en distintas células y tejidos del organismo al mismo tiempo.
Las vías deben estar reguladas cuidadosamente para asegurar que
no sólo la producción de energía y productos intermedios es
suficiente para satisfacer las necesidades de cada célula en
particular, sino que también se «ajustan» a los requerimientos del
resto de las células del organismo. El control de las vías metabólicas
debe ser también lo suficientemente flexible como para facilitar la
adaptación a los distintos ambientes, por ejemplo, la situación
posprandial en oposición a la de ayuno, períodos de ejercicio, etc.
Estos mecanismos de control deben coordinar las vías de todas las
células del organismo.
Niveles de Regulación Metabólica
1. Nivel: CONCENTRACCIÓN DEL SUSTRATO
En una reacción se puede controlar la velocidad con se da, si se
regula la concentración de un sustrato.
Al nosotros agregar mayor cantidad de sustrato, con más rapidez se
dará la ruta, mientras que si nosotros disminuimos la cantidad de
sustrato, la reacción será más lenta.
Esto se da porque la mayoría de sustratos de una célula se encuentra
a concentraciones por debajo del valor Km de la enzima que los
procesa, haciendo que por lo general las enzimas operen por debajo
de su velocidad máxima. Por tanto una oferta de sustrato elevada
produce un aumento proporcional de la velocidad de la reacción
enzimática y con ello una transformación acelerada del sustrato.
En el interior celular existen varios mecanismos para controlar la
disponibilidad de sustratos:
- Regulación de la entrada al interior celular
La permeabilidad de la membrana plasmática a ciertos compuestos
puede estar sujeta a regulación, como por ejemplo, el caso de la
glucosa en el tejido adiposo este monosacárido requiere de la
presencia de la hormona insulina en sangre para estimular su
incorporación al adipocito, si no hay insulina, no hay entrada y por lo
tanto las vías metabólicas que utilizan glucosa como sustrato están
disminuida.
Esto se debe a que la glucosa circula a través de la corriente
sanguínea para alimentar a cada célula del cuerpo. La presencia de
glucosa estimula las células Beta del páncreas para liberar insulina.
La insulina llega hasta cada célula y actúa como una llave en sus
receptores, con el fin de abrir sus puertas y dejar a la glucosa entrar.
Si no hay insulina o los receptores de las células no funcionan, la
glucosa no puede penetrar en las células, y la persona afectada
sufrirá de carencias de nutrientes.
- Compartimentación celular
En las células eucariotas existen compartimientos celulares, y puede
darse el caso en que el sustrato se forma en un compartimiento
celular y la enzima que debe transformarlo se encuentra en otro. Por
lo tanto, la velocidad de transformación depende, no solo de la
capacidad catalítica de la enzima, sino, además, de la velocidad con
la cual el sustrato puede atravesar la membrana que separa ambos
compartimientos. En ocasiones el control metabólico se ejerce
precisamente sobre el transportador modificando su velocidad y con
ella la vía metabólica implicada.
Es característico que los intermediarios de una ruta queden
atrapados en el interior de un orgánulo, mientras que los
transportadores específicos permiten la entrada de los sustratos y la
salida de los productos.
Así, por ejemplo, una de las formas por las que la hormona insulina
estimula la utilización de los hidratos de carbono es desplazando los
transportadores de glucosa hacia la membrana plasmática, de
manera que pueda producirse con mayor facilidad la captación de
glucosa en las células para el catabolismo o para la síntesis de
glucógeno.
Otro ejemplo lo representa la degradación de ácidos grasos, cuya
regulación se da a nivel del transporte de los grupos acilos a través
de la membrana mitocondrial para su posterior oxidación.
2. Nivel: CONCENTRACIÓN DE ENZIMAS
Otra forma de regulación del metabolismo consiste en la modificación
la cantidad de moléculas enzimáticas, es decir, la concentración de
enzimas.
Los cambios en la concentración de una enzima se pueden conseguir
modulando la velocidad de su síntesis o de su degradación. El primer
mecanismo esta mejor conocido porque es más universal y se ha
estudiado con detalles en los microorganismos. El aumento en la
velocidad de síntesis de una enzima se llama inducción, y este
fenómeno aumenta la velocidad de la reacción. Por ejemplo, cuando
se añade un sustrato utilizable a un medio de cultivo bacteriano, la
abundancia de las enzimas necesarias para procesar el sustrato
puede aumentar, gracias a la síntesis de nueva proteína desde
menos de una molécula por célula a muchos miles de moléculas por
célula.
La disminución en la velocidad de síntesis, es un proceso que se
llama represión. Esto se da porque, la presencia del producto final de
una ruta puede desactivar la síntesis de las enzimas que son
necesarias para generar ese producto final.
Ej.: Enzimas que participan en la formación de aminoácidos arginina
sólo se sintetiza cuando no hay arginina en el medio de cultivo.
Ambos son fenómenos muy complejos que implican, entre otros
procesos, la interacción con la maquinaria genética.
En cuanto al proceso de degradación, conocido como proteólisis que
consiste en la hidrolisis de los enlaces peptídicos catalizado por
enzimas denominadas proteasas, requiere ATP y depende de la
conformación de la enzima que ha de ser degradada, que a su vez
varia con la presencia o ausencia de substratos, coenzimas, iones
metálicos, por lo que estos factores modifican la susceptibilidad de la
enzima a ser degradada.
Durante cierto tiempo se pensó que el control de la concentración
intracelular de una proteína se basaba principalmente en el control de
la síntesis de dicha proteína, es decir, mediante regulación genética.
Actualmente sabemos que la degradación intracelular de las
proteínas es importante también para determinar las concentraciones
de las enzimas.
Cabe destacar que la Las concentraciones enzimáticas en una célula
pueden variar como respuesta a las variaciones de las necesidades
metabólicas.
3. Nivel: REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
La actividad catalítica de una molécula enzimática puede controlarse
de dos formas: mediante la interacción reversible con los ligandos
(sustratos, productos o modificadores alostéricos) y mediante la
modificación covalente de la molécula proteica.
- Mediante la interacción reversible con los ligando
Los ligando a los que se unen las enzimas pueden ser sustratos,
productos o modificadores alostericos. Se dice que se establece una
interacción reversible, ya que está controlada por uniones no
covalentes
Los ligandos que controlan la actividad enzimática pueden ser
polímeros. Así, por ejemplo, las interacciones proteina-proteina
pueden afectar a la actividad enzimática, y hay varias enzimas del
metabolismo de los ácidos nucleicos que se activan mediante la
unión al DNA.
Alosterismo: Es el proceso que se da por la unión de un compuesto
a una enzima, en un sitio topológicamente distinto a del centro activo.
Esta unión afecta la actividad enzimática y también produce un
cambio conformacional.
El efecto de la unión del modulador a la enzima, pueden ser de dos
tipos: unos estimulan la actividad del enzima al unirse al centro
alostérico, reciben el nombre de moduladores positivos o activadores;
otros la inhiben y se llaman moduladores negativos o inhibidores.
 - Modificación covalente de la estructura enzimática
La modificación covalente de la estructura enzimática constituye otra
forma eficaz de controlar la actividad enzimática. Esta consiste en la
interconversión de formas inactivas a activas o viceversa por la
acción de enzimas como las protein quinasa o protein fosfatasas, que
catalizan reacciones de fosforilación y desfosforilación.
Cabe destacar que la fosforilación no es la única forma de
modificación covalente, sino que hay dos tipos más: adenililación y
ADP-ribosilación. Sin embargo, la fosforilación es, con mucho, la
modificación covalente más utilizada para el control de la actividad
enzimática.
Un ejemplo muy conocido de enzima regulada por la fosforilación es
el glucógeno fosforilasa de mamíferos. La enzima cataliza la
liberación de residuos de glucosa a partir del glucógeno. El glucógeno
es un dímero relativamente inactivo en su forma desfosforilada, la
fosforilasa b. Otra enzima la fosforilasa quinasa, cataliza la adición de
sus grupos fosforilo procedentes del ATP al residuo de Ser, sobre
cada subunidad de la fosforilaza b. Esta fosforilación induce cambios
conformacionales en la proteína, que culmina en la formación de la
fosforilasa a, catalíticamente activa. Cuando ya no es necesario
degradar más glucógeno, la fosfoproteína fosfatasa hidroliza los
grupos fosforilo de la fosforilasa a, que revierte a su forma menos
activa, b.
El control a través de la modificación covalente se asocia
frecuentemente con cascadas reguladoras. La modificación activa
una enzima, que a su vez actúa sobre una segunda enzima, la cual
puede activar todavía a una tercera, que finalmente actúa sobre el
sustrato. Dado que las enzimas actúan de manera catalítica, esta
cascada proporciona una forma eficaz de amplificar la señal biológica
inicial.
4. Nivel: REGULACIÓN HORMONAL
La coordinación del metabolismo entre las distintas células que
conforman nuestro organismo es mediada a través del control
hormonal, las hormonas actúan como señales que disparan cambios
en la actividad de las enzimas reguladoras a cualquiera de los niveles
señalados anteriormente, lo cual se traduce en una modificación del
flujo metabólico, el cual es condicionado para que responda a los
estímulos que provocaron la liberación de la hormona.
Reacción limitante
Para que una vía metabólica opere eficazmente las velocidades de
las reacciones químicas implicadas deben ser similares, sin embargo
existe una que es llamada reacción limitante porque posee una
menor velocidad de reacción y esto es lo que le permite regular la
rapidez con que se desarrolla la vía metabólica, ya que una
disminución en la velocidad de esta reacción provoca la caída en la
velocidad de la vía.
Ejm: Dada una vía metabólica A—Z en la cual el sustrato A se
convierte en el producto Z a través de la siguiente secuencia: A – B –
C – D – E – Z, donde el paso de “A” a “B” representa la reacción
limitante, quiere decir entonces que si disminuye la conversión de A
—B, esto se traduce como una disminución en la síntesis de Z.
La Reacción limitante implica que el flujo de las rutas es idéntico a la
actividad intracelular del paso limitante de la velocidad. Sin embargo,
debido a que en un estado estacionario metabólico todos los pasos a
lo largo de una ruta lineal se producen a la misma velocidad, es difícil
o imposible establecer que la velocidad está controlada por un único
paso enzimático.
Las reacciones limitantes representan puntos de control del
metabolismo y suelen ubicarse al inicio de la vía metabólica para así
evitar la acumulación de intermediarios improductivos, además son
catalizadas por enzimas reguladoras de tal manera que si aumenta o
disminuye su actividad, se acelera o decae la velocidad con que
opera la vía.
 Enzimas reguladoras de una vía metabólica:
Las enzimas reguladoras catalizan las reacciones más lentas y fijan
la velocidad de la ruta, estas enzimas muestran una actividad
catalítica mayor o menor en respuesta a ciertas señales y por lo tanto
regulan una reacción específica que posteriormente regula toda la vía
metabólica.
En la mayoría de los sistemas multienzimaticos la primera enzima de
la secuencia de la vía es un enzima reguladora, este es un lugar
excelente para regular una ruta metabólica, puesto que evita la
acumulación de intermediarios improductivos, igualmente, otras
enzimas de la secuencia pueden tener papeles más útiles en la
regulación de flujo a través de la ruta.

La eficiencia de las enzimas reguladoras puede ser controlada por

uniones no covalentes de ligandos específicos a sitios distintos al
centro activo (alosterismo). La mayoría de las enzimas alostericas
son oligomericas y presentan también el fenómeno de cooperatividad.

Otro tipo de control de la eficiencia catalítica lo representa la
modificación covalente de la enzima, la cual consiste en la
interconveccion de formas inactivas a activas o viceversa, por la
acción de enzimas como las proteínas respectivamente.
Una enzima reguladora puede ser sometida a todos estos tipos de
control, respondiendo en cuestión de segundos al control alosterico,
de minutos a la modificación covalente y en horas a cambios en su
concentración.
Estrategias de regulación de las vías Metabólicas
Los mecanismos de la modulación de la efiencia catalítica de
enzimas comprenden, fundamentalmente, la acción de sustancias de
bajo peso molecular que actúan como efectores alostericos. La
actividad de enzimas importantes en el funcionamiento de una vía
puede ser modificada por este tipo de efectores. Cambios en la
concentración de sustratos, coenzimas y productos intermediarios o
finales pueden afectar la actividad de una enzima ya sea por
estimulación o inhibición.
 Activación por sustrato: En este caso cuando hay un
aumento en la concentración de sustrato que alimenta la vía,
la enzima reguladora incrementa su actividad.
En vías ramificadas, en las cuales las bifurcaciones llevan a la
síntesis de productos finales distintos, cada uno de ellos puede actuar
como efector alosterico negativo de la enzima del punto de
ramificación donde se inicia el camino de síntesis de ese producto en
particular.
Inhibición concertada
Requiere la presencia de todos los productos finales de las vias en
que se ramifica la via principal para inhibir el paso limitante.

Retroinhibición

Un tipo muy común de la regulación es el mecanismo llamado

Retroinhibicion o feed back: Una vía metabólica, que transforma el
precursor A en el producto final D a través de tres etapas catalizadas
por las enzimas a, b y c. El producto final D actúa como inhibidor
alostérico de la enzima a. De este modo, cuando se ha acumulado
una cantidad suficiente de D, esta sustancia detiene su propia
producción bloqueando la conversión de nuevas moléculas de A en
B. De esta forma un producto final de una vía metabólica inhibe a la
enzima responsable de la reacción inicial.
Inhibición secuencial
En donde el producto final de cada vía inhibe a la enzima que cataliza
la primera reacción posterior a la ramificación, y es el último
metabolito común que inhibe a la primera reacción común de ambas
vías.
HORMONA: de ὁρμάω impulsar, excitar, producir movimiento.
Las hormonas son los mensajeros químicos del cuerpo que controlan
numerosas funciones y circulan a través de la sangre hacia los
órganos y los tejidos. Estos componentes químicos intervienen en los
procesos del metabolismo, en el crecimiento, desarrollo y
reproducción.
Este término se estableció en 1904 para describir la secretina, una
sustancia que se libera en la porción superior del intestino delgado y
que actúa en el estómago estimulando el flujo del jugo gástrico como
ayuda para la digestión.
MECANISMOS DE REGULACION HORMONAL
Las señales extracelulares que controlan el metabolismo incluyen no
solo las hormonas, sino también los neurotransmisores, los factores
de crecimiento y las feromonas. Cada uno de estos tipos de
sustancias se sintetiza en una clase de células y se liberan, para
transmitirse a las células diana y controlar sus actividades.
La investigación inicial sobre las hormonas aporto poca información
sobre su forma de acción, pero si mostro unas semejanzas básicas
entre las distintas hormonas.
En primer lugar, se segregan por tejidos específicos, que ahora se
denominan glándulas endocrinas. En segundo lugar, se segrega
directamente al torrente sanguíneo en vez de excretarse mediante
conductos o almacenarse en reservorios. Así pues, la respuesta a
una señal hormonal es una consecuencia directa y rápida de su
secreción.
TIPOS DE HORMONAS
Se puede clasificar según su estructura bioquímica en:
1. Hormonas Lipídicas: son derivadas del colesterol y son altamente
hidrofóbicas. Ejm: Glucocorticoides, Mineralcorticoides, Tiroideas.
2. Hormonas Proteicas: presentan gran hidrosolubilidad. Ejm:
Insulina, Glucagón.
3. Hormonas Amínicas: derivadas del aminoacidoTirosina. Ejm:
Adrenalina, Noradrenalina, Dopamina.
RECEPTORES
El primer paso para que las hormonas desencadenen efectos
fisiológicos en las células diana sobre las que actúan, es su
interacción con receptores específicos, lo que quiere decir que solo
responderán al mensaje enviado por una hormona, aquellas células
que poseen un receptor para la misma. Los recetores son proteínas y
la interacción hormona-receptor puede ser comparada, en ciertos
aspectos, con la interacción enzima-sustrato, ya que ambas son
especificas, saturables, de alta afinidad, pueden ser inhibidas y
reguladas.
A) EN EL INTERIOR CELULAR: para aquellas hormonas
esteroideas y tiroideas que atraviesan la membrana plasmática,
conformando una señal capaz de provocar cambios en la expresión
genética
B) EN LA MEMBRANA PLASMÁTICA: reconocen hormonas
hidrosolubles y por lo tanto incapaces de atravesar la membrana
celular (insulina, epinefrina, glucagon)
Tipos de receptores de membrana:
1. Receptor de canal iónico: cuya estimulación permite la entrada
selectiva de iones. Ej: Receptor de acetilcolina (los mecanismos de
acción de hormonas y NT son similares)
2. Receptores acoplados a proteínas G: Al unirse la molécula señal
al receptor, provoca un cambio de conformación que permite que el
receptor se enlace a la proteína G, y esta pase a una forma activa,
capaz de activar a una enzima diana, que se encuentra también
formando parte de la membrana plasmática. Ej: Glucagon
3. Receptores con actividad catalítica: Son aquellos cuya actividad
catalítica se activa al producirse la interacción hormona-receptor. Ej:
insulina, factores de crecimiento
SEGUNDOS MENSAJEROS
-AMPc: el adenosin monofosfato cíclico es un segundo mensajero
formado a partir de ATP por la Adenilato ciclasa. El cAMP actúa
sobre la protein quinasa A activándola, pues se une a las
subunidades que inhiben esta proteína dejando libres las
subunidades catalíticas capaces de realizar ahora su función
metabólica, como por ejemplo la activación de la glucógeno
fosforilasa b a glucógeno fosforilasa a, su forma activa, para así
activar el proceso de degradación del glucógeno.
El cAMP es degradado por la fosfodiesterasa que lo convierte a su
forma inactiva.
-GMPc: la guanosina monofosfato cíclico es un segundo mensajero
producido a partir de ATP por la enzima receptor Guanosil ciclasa.
Dentro de las acciones de la cGMP esta la activación de la protein
quinasa G la cual esta encargada de fosforilar residuos de Ser y Thr.
A demás dependiendo del tejido donde se encuentre produce
diversos efectos, por ejemplo la apertura de canales de Na+
dependientes de estimulación hormonal en el riñón, o la relajación de
los vasos sanguíneos. Otro importante proceso en el que influye el
cGMP es en la disminución de la fuerza de contracción en el corazón
al estimular la bomba de Ca++ y producir la salida de este catión de
las células miocardicas.
Es degradado por la cGMP fosfodiesterasa que lo convierte a su
forma inactiva.
-Ca++: el calcio actúa como segundo mensajero en las células pero
su mecanismo de acción es diferente en cierta medida al de los antes
tratados, el calcio no se activa ni se cicla para aumentar sus niveles
intracelulares, si no que su concentración aumenta por a) entrada de
Ca++ del medio extracelular o b) liberación de los compartimientos
celulares. El Ca++ interactúa con proteínas que unen Ca++ para
ejercer su función, como la Calmodulina proteína que une 4 iones de
Ca++ o con la troponina para permitir la contracción del musculo
esquelético. Muchas veces la Calmodulina forma parte de una
enzima denominada Protein quinasa dependiente de
Ca++/Calmodulina, que al interactuar con Concentraciones
adecuadas de calcio permite la fosforilacion de sus proteínas diana.
-Diacilgliceridos e inositol 1, 4, 5 trifosfato: estos segundos
mensajeros se producen por acción de la Fosfolipasa C (PLC) la cual
actúa sobre un fosfolipido de la membrana (fosfatidilinositol 4,5-
bifosfato)
El Inositol 1,4,5-trifosfato actúa sobre las bombas de Ca++
permitiendo su entrada a la célula, al aumentar las concentraciones
citosolicas de Ca++ se activa la protein quinasa C, esta activación se
ve favorecida por la acción del diacilglicerido.
PROTEÍNAS G: Existe una amplia familia de PROTEÍNAS G de
membrana, (De las diversas proteínas G conocidas, las dos que
estan mejor caracterizadas son las Gs, una familia de proteínas G
que intervienen en la estimulación de la adenilato ciclasa, y las Gi,
una familia estrechamente relacionada que interviene en las
respuestas que inhiben la adenilato ciclasa.) formadas por
subunidades que constituyen heterotrímeros αβγ. Entre las proteínas
G asociadas a la estimulación de la adenilato ciclasa, se distingue la
subunidad Gα, con capacidad de enlace a los nucleótidos GDP
(difosfato de guanosina) y GTP (trifosfato de guanosina) , así como
las subunidades Gβ y Gγ que actúan como intermedios entre aquélla
y el receptor hormonal.
En ausencia de la hormona, el receptor está libre, Gα se encuentra
unida a GDP y la adenilato ciclasa está inactiva.
Cuando la hormona se une al receptor, los cambios de conformación
de éste y los que se inducen sobre Gβ hacen que las subunidades β
y γ se separen de Gα. Con ello, Gβ deja de inhibir la Gα, lo cual
posibilita que Gα capte GTP del espacio intracelular, sustituyendo al
GDP previamente unido, que se libera. La formación del complejo de
Gα con GTP es responsable de la activación de la enzima adenilato
ciclasa, situada en la membrana y, por tanto, de la producción
intracelular de AMPc, a partir de ATP. En cualquier caso, la respuesta
hormonal está limitada, ya que la subunidad Gα-GTP expresa pronto
una actividad GTPasa que, al hidrolizar el GTP, conduce a la forma
inicial Gα-GDP y, con ello, a la inactivación de las proteínas G y de la
adenilato ciclasa. Esto es muy conveniente para que la acción de una
hormona se acote en el tiempo.
En cuanto al AMPc, generado por la adenilato ciclasa, activa, a su
vez, la enzima tetramérica proteína quinasa dependiente del AMPc,
proteína quinasa A (PKA), de modo que, cuando las subunidades
reguladoras se enlazan a moléculas del AMPc, las subunidades
catalíticas resultan activadas. La PKA activa actúa sobre sustratos
proteínicos importantes en procesos reguladores, catalizando la
fosforilación de los aminoácidos alcohólicos serina y treonina, para lo
que es necesario el suministro de energía y la cesión de un fosfato,
ambas cosas realizadas merced al otro sustrato, el ATP, que se
transforma en ADP.
Figura 12-9. Activación de PKA por AMP cíclico (AMPc). PKA inactiva
es un tetrámero con dos subunidades catalíticas y dos reguladoras.
La unión del AMPc a las subunidades reguladoras disocia el complejo
a dos subunidades catalíticas y un dímero, con las subunidades
reguladoras unidas al AMPc.
ENZIMAS EFECTORAS. (todo proceso de activacion tiene su
correspondiente mecanismo de inactivacion)
QUINASAS: son las proteínas que llevan a cabo las fosforilaciones.
Se han descrito quinasas implicadas en la señalización que fosforilan
específicamente residuos de serina y treonina, de tirosina y
fosfolipidos. prácticamente en cualquier vía de señalización hay una o
varias quinasas implicadas.
FOSFATASAS: cortan los enlaces que mantienen unido el fosfato a
distintas proteínas, con lo que revierten los efectos de las quinasas.
FOSFODIESTERASAS: son enzimas que se encuentran activadas
constitutivamente y se encargan de transformar nucleótidos cíclicos,
en su correspondiente nucleótido monofosfato. De esta forma las
fosfodiesterasas regulan negativamente la señalización de estos
segundos mensajeros. La célula puede decidir la localización de sus
fosfodiesterasas consiguiendo que la señal de AMPc no sea igual en
toda la célula (compartimentalizacion de la señal).
CALMODULINA: es una proteína ampliamente distribuida y muy
conservada. Su función es actuar como un receptor intracelular de
Ca++, no tiene actividad enzimática pero es capaz de unirse al Ca++
lo que dispara un cambio conformacional. esta nueva estructura
permite que la calmodulina se una a distintas proteínas intracelulares
y regule su función. existe un conjunto importante de quinasas cuya
activación depende de la unión con Ca++/Calmodulina; a su vez
estas quinasas fosforilan residuos de serina y treonina, modulando la
función de proteínas diana. Por tanto, la respuesta celular inducida
por el Ca++ dependerá del conjunto de proteínas diana sensibles a
Ca++/Calmodulina presentes en la célula.
Respuesta de la degradación del glucógeno al glucagón en el hígado.
La hormona (primer mensajero) actúa extracelularmente, uniéndose a
receptores de la membrana plasmática. Debido a que la proteína
receptora atraviesa la membrana, en el lado intracelular puede
estimular la formación de un segundo mensajero como respuesta a la
unión extracelular del primer mensajero. Entre las hormonas que
actúan de esta forma se encuentran la mayor parte de las hormonas
polipeptídicas, como el glucagón. Como ejemplo de este tipo de
respuesta, consideremos los fenómenos que conducen a la
degradación de las reservas intracelulares de glucógeno para dar
glucosa-1-fosfato. La movilización del glucógeno, o glucogenólisis, se
controla por el glucagón en el hígado y por la adrenalina en el
músculo. En ambos casos, el segundo mensajero es la AMPc.
Consideraremos aquí la glucogenólisis. El sistema de transducción de
señal es modular, y está formado por tres componentes proteicos: un
receptor, un transductor y un efector. El receptor es una proteína
transmembrana que reconoce y une una hormona específica, en este
caso el glucagón. El transductor es una proteína G, que interactúa
entonces con el efector, la enzima adenilato ciclasa. En la respuesta
de las células hepáticas al glucagón, esa interacción estimula la
adenilato ciclasa, que cataliza la conversión de ATP en AMP cíclico,
el segundo mensajero intracelular. El cAMP activa una proteína
quinasa. Algunas enzimas se activan por la fosforilación, mientras
que otras se inhiben; de esta forma, se activan las reacciones de la
cascada metabólica que conduce a la glucogenólisis. Así pues, la
unión de la hormona a la superficie celular estimula la síntesis del
segundo mensajero en el interior de la célula, lo que provoca, a su
vez una respuesta metabólica deseable.
Papel del Oxido Nítrico.
El oxido nítrico (NO) es un gas muy toxico y reactivo, por lo que fue
sorprendente descubrir que esta molécula actúa como una señal
intracelular en la regulación de la dilatación de los vasos sanguíneos,
funcione como neurotransmisor e intervenga en la respuesta inmune.
El NO es sintetizado por la enzima NOsintetasa, la cual cataliza una
reacción dependiente de NADPH, en la cual la arginina reacciona con
el O2 para producir NO (y el aminoácido no proteico citrulina). Esta
enzima es activada por el complejo Ca++/Calmodulina, de allí, el
efecto estimulante sobre la vasodilatación de la cascada de los
fosfoinositicos en las células endoteliales.
El NO sintetizado en las células endoteliales difunde rápidamente a
través de la membrana plasmática, al llegar a las células de la
musculatura lisa, cumple su papel fisiológico al activar a la enzima
adenilato ciclasa, la cual cataliza la síntesis de GMPc, el cual provoca
la relajación muscular por fosforilacion de proteínas, catalizada por la
proteína quinasa dependiente de GMPc. El tiempo de vida del NO es
corto, por lo que solo puede alcanzar a las células cercanas de las
células endoteliales donde ocurre su síntesis.
DATO EXTRA (Imagen de viagra en la presentación)
La erección del pene durante la excitación sexual está mediada por la
liberación de óxido nítrico soltado por las terminaciones nerviosas
cercanas a los vasos sanguíneos del pene. La relajación de esos
vasos sanguíneos hace que se acumule sangre en los senos venosos
del cuerpo cavernoso del pene y eso es lo que provoca la erección.
La empresa Pfizer estaba estudiando un nuevo medicamento, el
sildenafilo, precisamente para la hipertensión arterial y la angina de
pecho. Los estudios de fase I de los ensayos clínicos mostraron que
el fármaco tenía un beneficio leve sobre las anginas, pero que
producía notables erecciones. Pfizer lo patentó en 1996 y lo
comercializó en 1998 para su uso en la disfunción eréctil bajo el
nombre de Viagra. Es inhibidor selectivo de la fosfodiesterasa 5, con
lo que evitan que se produzca la degradación del GMP cíclico en el
cuerpo cavernoso. Esta molécula, cuya producción aumenta por la
acción del óxido nítrico, es la responsable de la dilatación de los
vasos sanguíneos.
MODIFICACIONES DE LA EXPRESIÓN GÉNICA.
Hay dos tipos de respuesta metabólica a las hormonas que son
especialmente bien conocidos. La primera, a aquellas hormonas en la
que utiliza la síntesis de segundos mensajeros intracelulares, que
controlan las reacciones metabólicas
La otra respuesta bien conocida es la que se observa con las
hormonas esteroideas, comporta modificaciones de la expresión
génica. Una hormona esteroidea, como un estrógeno, entra en una
célula diana, donde interactúa con un receptor proteico intracelular, y
el complejo hormona-receptor resultante se desplaza a continuación
hacia el núcleo.
Aquí, el complejo se une a lugares específicos del genoma, y activa o
reprime la transcripción de determinados genes. Así pues, las
hormonas esteroideas y otras hormonas relacionadas controlan el
metabolismo mediante la regulación de las concentraciones
intracelulares de proteínas.
DATO EXTRA (Imagen de glucometro en la presentacion)
En la diabetes mellitus, la utilización de la glucosa es también baja,
pero en este caso la razón es que el estímulo hormonal para la
utilización de la glucosa, es decir, la insulina, es deficiente. Como
consecuencia de ello, la glucosa está presente de hecho en
cantidades excesivas. Las consecuencias del déficit de insulina son
comparables a las de la inanición en cuanto a que ponen de
manifiesto aspectos importantes de las relaciones metabólicas entre
los órganos. La diabetes mellitus es la tercera causa de muerte en
Estados Unidos, y afecta a alrededor del 5% de la población. No se
trata de una sola enfermedad, sino más bien de una familia de
enfermedades. La diabetes dependiente de la insulina, denominada
anteriormente diabetes juvenil por su inicio temprano, comporta, a
menudo, una destrucción autoinmunitaria de las células B del
páncreas, que puede deberse a diversos factores, incluyendo la
infección vírica. Algunas formas de diabetes tienen un origen
genético. Las mutaciones de la estructura de la insulina pueden hacer
que la hormona sea inactiva, y otras mutaciones causan defectos de
la conversión de la preproinsulina o la proinsulina en la hormona
activa (véase el Capítulo 5). En estos casos, el tratamiento comporta
la administración de insulina. Sin embargo, algunas formas de la
enfermedad implican mutaciones de la estructura del receptor de la
insulina o de sus actividades intracelulares que promueven la
utilización de la glucosa. Estas últimas formas de la enfermedad se
denominan diabetes resistentes a la insulina, ya que los pacientes no
pueden responder a las dosis terapéuticas de insulina. Sea cual sea
la causa del déficit funcional de insulina, la diabetes mellitus puede
considerarse realmente una “inanición en medio de la abundancia”. El
fracaso de la insulina para actuar normalmente impulsando la
utilización de glucosa, con su consiguiente acumulación en sangre,
priva a las células de nutrientes y promueve unas respuestas
metabólicas similares a las del ayuno (Figura 23.5). Las células
hepáticas intentan generar más glucosa mediante la estimulación de
la gluconeogénesis. La mayor parte de los sustratos proceden de los
aminoácidos, que a su vez proceden en gran parte de la degradación
de las proteínas musculares. La glucosa no puede reutilizarse para
volver a sintetizar aminoácidos o ácidos grasos, por lo que los
diabéticos pueden perder peso aunque consuman lo que en
condiciones normales sería una cantidad de calorías adecuada en la
alimentación. Cuando las células intentan generar fuentes de energía
utilizables, los depósitos de triacilgliceroles se movilizan en respuesta
a las concentraciones elevadas de glucagón. La oxidación de los
ácidos grasos se eleva, con la consiguiente generación de acetil-CoA.
El flujo a través del ciclo del ácido cítrico puede disminuir, debido a la
acumulación de transportadores electrónicos reducidos, a la
limitación del oxalacetato, o a ambas cosas. En el hígado, ambos
efectos aceleran la formación de cuerpos cetónicos, generando unas
concentraciones elevadas de ácidos orgánicos en sangre. Estos
ácidos pueden reducir el pH de la sangre, que pasa del valor normal
de 7.4 a una cifra de 6.8 o inferior. La descarboxilación del
acetoacetato, que se estimula a un pH bajo, genera acetona, cuyo
olor puede detectarse en el aliento de los pacientes en situaciones
diabéticas descontroladas graves. Un peligro especial es que estas
personas pueden perder el conocimiento, y esto, junto con el olor
orgánico dulce del aliento pueda hacer pensar que están bebidos,
cuando en realidad sus vidas están en peligro. Las concentraciones
excesivas de glucosa en los líquidos corporales generan otros
problemas metabólicos, muy distintos de los observados en la
inanición. A concentraciones de glucosa superiores a 10 mM, el riñón
no es capaz de reabsorber toda la glucosa que le llega en el filtrado
de la sangre, y se pierde glucosa en la orina, a veces en cantidades
que se aproximan a los 100 gramos diarios. De hecho, el nombre en
latín de diabetes mellitus significa literalmente “orina dulce como la
miel”. La excreción de glucosa crea una carga osmótica, que causa
también la excreción de grandes cantidades de agua, y en estas
condiciones el riñón no es capaz de reabsorber la mayor parte de
esta agua. De hecho, los primeros signos de una diabetes son con
frecuencia una micción excesiva, combinada con un exceso de sed.
Mucho antes de que la bioquímica fuera una ciencia, la pérdida de
nutrientes, la micción excesiva y la degradación de las grasas y las
proteínas se identificaron como los elementos diferenciales
característicos de la diabetes. En el primer siglo de nuestra era, la
diabetes se describía como “la carne y los huesos corriendo juntos en
la orina”. Cuando la diabetes afecta a los niños (la forma dependiente
de insulina de la enfermedad, que constituye alrededor del 10% del
total de casos), el desequilibrio metabólico suele ser más grave y
difícil de controlar que en la forma adulta más leve y más frecuente.
Esta última puede controlarse a menudo con una restricción de los
hidratos de carbono de la alimentación, mientras que el tratamiento
de la diabetes juvenil suele requerir la autoinyección diaria de
insulina. Durante muchos años esta insulina se purificó del páncreas
bovino, y su alto coste, junto con los problemas ocasionales que
causaban las pequeñas diferencias estructurales entre la insulina
humana y la bovina, condujeron a la incipiente industria de la
biotecnología a intentar producir insulina humana mediante técnicas
de DNA recombinante. A finales de los años 1970, se clonó el gen de
la insulina humana en E. coli en una forma que permitía su expresión,
y en 1982 la insulina humana clonada se convirtió en el primer
producto de la tecnología del DNA recombinante aprobado para su
uso en el ser humano.
Reacciones del ácido cítrico
El ciclo del ácido cítrico es una serie ingeniosa de reacciones que
oxidan al grupo acetil del acetil-Coa a dos moléculas de CO2 de
forma que se conserva la energía libre producida, se almacena en las
coenzimas NADH Y FADH reducidas para luego utilizarlo en la
síntesis de ATP. Este ciclo consta de ocho pasos consecutivos que
son los siguientes:
1-Formacion de citrato: La primera reacción del ciclo es la
condensación de acetil-CoA con oxalacetato para dar lugar a citrato
esta reacción es catalizada por el citrato sintasa. Esta enzima posee
en cada subunidad dos dominios uno de ellos grande y rígido y otro
más pequeño y flexible, el sitio activo se encuentra entre los dos. El
oxalacetato el primer sustrato que se une al enzima induce a un gran
cambio conformacional en el dominio flexible que provoca la aparición
de un sitio de unión para el segundo sustrato, el acetil-CoA, en esta
reacción el carbono metílico del grupo acetilo se une al grupo
carboxílico del oxalacetato, cuando se ha formado en el centro activo
el citril-CoA un intermediario, se produce otro cambio conformacional
que produce la hidrolisis del tioester con liberación de Coa y citrato,
que a continuación abandonan el centro activo. Este encaje inducido
de la enzima, primero con su sustrato y a continuación con su
intermediario, hace más probable la ruptura del enlace tioester del
acetil-Coa. L a gran variación negativa de energía libre estándar
asociada a esta reacción resulta esencial para el funcionamiento del
ciclo debido a que a la baja concentración de oxalacetato
normalmente presente, el Coa liberado en esta reacción es reciclado
para participar en la carboxilacion oxidativa de otra molécula de
piruvato. Esta reacción es irreversible y se debe la hidrolisis del citril-
CoA y su variación libre estándar de esta reacción es de -32,2 KJ/mol
2-formacion de isocitrato vía cis-aconitrato: La enzima aconitasa o
aconitato hidratasa cataliza la transformación reversible del citrato en
isocitrato a través de la formación de un intermediario del ácido
tricarboxilico, el cis-aconitato, la formación de este supone la
deshidratación en la que una base de la enzima captura el protón de
uno de los carbonos del citrato, luego se pierde el grupo OH de otro
carbono para formar el intermediario, que normalmente no se disocia
del centro activo. La acotinasa puede promover la adición reversible
de H2O al doble enlace del cis-aconitato unido al enzima mediante
dos caminos diferentes de los cuales uno conduce a citrato y el otro a
isocitrato pero en la célula la reacción transcurre hacia la formación
de isocitrato gracias a la rapidez del consumo de este en el siguiente
paso del ciclo, lo que disminuye su concentración en el estado
estacionario. La acotinasa posee un centro ferro-sulfarado que actúa
tanto en la fijación del sustrato en el centro activo como en la adición
o eliminación catalítica de H2O. La variación libre estándar de esta
reacción es de 13,3 KJ/mol.
3-Oxidacion del isocitrato a alfa-cetoglutarato: En el paso
siguiente la isocitrato deshidrogenasa cataliza la descarboxilacion
oxidativa del isocitrato dando lugar a la formación de alfa-
cetoglutarato produciendo los primeros co2 y NADH del ciclo. Existen
dos formas diferentes de isocitrato deshidrogenasa en todas las
células, una de las cuales participan en el ciclo, se encuentra en la
matriz mitocondrial y utiliza NAD como cofactor, mientras que la otra
se encuentra tanto en la matriz mitocondrial y citosol y utiliza NADP
como cofactor. En esta reacción el isocitrato se une a la enzima, la
enzima que participa en este ciclo es la que depende de NAD, esta
cataliza la oxidación de un alcohol segundario el isocitrato a través
de una transferencia de hidruro al NAD, a una cetona oxalosuccinato
un intermediario. El oxígeno del grupo carbonilo del intermediario
interacción con un el ion mg del centro activo que no abandona
hasta que pasa por descarboxilacion, esta interacción aumenta la
capacidad de eliminación de electrones del grupo carbonilo y facilita
el paso de descarboxilacion, la reacción se completa con el
reordenamiento del intermediario para generar alfa-cetoglutarato. La
variación libre estándar de esta reacción es de -33,5 KJ/mol.
4- oxidación del alfa- cetoglutarato a succinil-CoA y Co2: El paso
siguiente es otra descarboxilacion oxidativa por la que el alfa-
cetoglutarato se convierte en succinil-CoA, liberando los segundos
co2 y NADH del ciclo, gracias a la acción del complejo de la alfa-
cetoglutara deshidogenasa, este es muy parecido al complejo de la
piruvato deshidrgenasa, tanto en estructura como en función. Posee
tres enzimas homologos a E1, E2 Y E3, así como TPP unido al
enzima y también lipoato, FAD, NAD y coenzima A. Las reacciones
individuales catalizadas por este complejo suceden a través de
mecanismos idénticos a la reacción de piruvato deshidrogenasas,
Ambas reacciones incluyen la descarboxilación de un α-cetoácido y la
consiguiente producción de una unión tioéster a alta energía con la
coenzima A, el NAD actúa como aceptor de electrones su función en
general es oxidar alcoholes a aldehídos o cetonas y el CoA es el
transportador del grupo succinilo, la energía de oxidación de alfa-
cetoglutato se conserva gracias a la formación del enlace tioester del
succinil-Coa. Esta reacción es irreversible y su variación libre
estándar -2,9 KJ/mol.
5- Conversión de succinil-Coa en succinato: el succini-Coa tiene
un enlace tioester con una energía libre estándar de hidrolisis
negativa, la energía liberada en la rotura de este enlace se utiliza
para promover la síntesis de un enlace fosfoanhidrido del GTP. La
enzima que cataliza esta reacción es la succinil-Coa sintetasa o
succínico tioquinasa ambos indican la participación de un nucleosido
trifosfato en la reacción, el succinil-Coa reacciona con el P formando
succinil fosfato y Coa, luego el grupo fosforilado de succinilfosfato se
transfiere a un residuo His del sitio activo de la enzima
posteriormente este grupo fosforilo, que posee un elevado potencial
de transferencia de grupo, es transferido al ATD o GDP para formar
ATP o GTP. Las células animales tienen dos isoenzimas de las
succinil-CoA sintetasa, una específico para el ADP Y otro para el
GTP. La formación de ATP o GTP a espensas de la energía liberada
es una fosforilacion a nivel sustrato. El GTP formado por la succinil-
CoA sintetasa puede donar su grupo fosfato terminal ADP para
formar ATP en una reacción reversible catalizada por el nucleosido
difosfato quinasa, así el resultado de la actividad de dos isoenzimas
de la succinil-CoA sintetasa es la conservación de la energía en
forma de ATP. No hay ninguna variación de energía libre en la
reacción del nucleosido difosfato; el ATP y el GTP son enérgicamente
equivalentes. La variación libre estándar de esta reacción es de 2,9
KJ/mol.
6-Oxidacion del succinato a fumarato: el succinato formado a partir
de succinil-CoA es oxidado a fumarato por la flavoproteina succinato
deshidrogenasa, en eucariotas se encuentra unida fuertemente a la
membrana mitocondrial interna, en procariotas a la membrana
plasmática. Esta enzima contiene tres agrupaciones ferro-sulfuradas
y una molécula de FAD el aceptor de electrones en la reacción , este
FAD se encuentra unida covalentemente a un residuo his de la
enzima, su función es oxidar alcanos a alquenos , por lo que esta
oxida un alcano el succinato en un Alqueno fumarato. Los electrones
pasan desde el succinato a través del FAD y los centros ferro-
sulfurados antes de entrar en la cadena de transportadores
electrónicos en la membrana mitocondrial interna, el flujo de
electrones a través de estos transportadores desde el succinato hasta
el aceptor final, el O2, esta acoplado a la síntesis de 1,5 moléculas de
ATP por par de electrones. La variación de energía libre estándar es
de 0 KJ/mol.
7-Hidratacion del fumarato a malato: la hidratación reversible del
fumarato a L-malato esta catalizada por la fumarasa formalmente
llamada fumarato hidratasa, Esta enzima es altamente
estéreoespecifico, cataliza la hidratación del doble enlace en trans del
fumarato para la formación del malato, pero no el doble enlace en cis
del maleato( el isómero cis del fumarato). La reacción tiene lugar a
través de un estado de transición con relación a la formación de un
intermediario carbanion en c3 en donde se da la adición de un grupo
OH y luego un H. En la dirección iversa de L-malato a fumarato , la
fumarasa es igualmente estereoespecifica: el D-malato no es un
sustrato. La variación de energía libre estándar de esta reacción es
de -3,8 KJ/mol.
8-oxidacion del malato a oxalacetato: Es la última reacción del
ciclo de ácido cítrico, la L-malato dehidrogenasa ligada a NAD
cataliza la oxidación del L-malato a oxalacetato lo que ocurre es la
oxidación del hidroxilo del malato a una cetona, en una reacción
dependiente de NAD, en esta reacción el ion hidruro liberado por el
alcohol se transfiere al NAD. El equilibrio de esta reacción se
encuentra muy desplazado a la inversa en condiciones
termoninamicas estándar ya que su variación de energía libres es de
+29,7 es decir es endergonica pero en células intactas el
oxacelacetato es eliminado continuamente por la reacción altamente
exergonica de la citrato sintasa la primera enzima del ciclo debido a la
hidrolisis del enlace tioester del acelti-CoA, esto mantiene la
concentración intracelular de oxalato extremadamente baja lo que
empuja la reacción de la malato deshidrogenasa hacia la formación
de oxalacetato. La variación de energía libre estándar es de 29,7
KJ/mol.
Visión general
Las reacciones del ciclo de ácido cítrico de forma global comienzan
con la acción de la enzima citrato sintasa que cataliza la
condensación de acetil-CoA y oxalacetato para rendir citrato, la
estrategia de las dos etapas del siguiente ciclo es transformar el
citrato en un isómero más fácilmente oxidable y a continuación
oxidarlo la aconitasa el citrato en isocitrato un alcohol fácilmente
oxidable, la secuencia de reacción supone una deshidratación en la
que se produce cis-aconitato en la enzima, seguida de una
hidratación. La isocitrato deshidroginasa oxida el isocitrato a
oxalosuccinato un intermediario con la reducción acoplada de NAD Y
NADH a continuación el oxalosuccinato es descarboxilado rindiendo
alfa-cetoglutarato. Esta es la primera etapa en la que la oxidación se
acopla a producción de NADH y primera etapa en la que se genera
Co2. El complejo multienzimatico alfa-cetoglutarato deshidrogenasa
descarboxila oxidativamente al alfa-cetoglutarato a succinil-CoA .
Esta reacción supone la reducción de una segunda molécula de NAD
Y NADH y la generación de una segunda molécula de CO2. En este
punto del ciclo la oxidación neta del grupo acetilo ya es completa. L
asuccinil-Coa sintetasa convierte al sucinil-CoA a succinato y se da la
formación GTP a partir de GTP +P. Las reacciones restantes del
ciclo sirven para oxidar el succinato en oxacelato, como preparación
para otra vuelta del ciclo. L asuccinato deshidrogenasa cataliza la
oxidación del enlace sencillo situado en el centro de la molécula
succinato, a doble enlace en trans, dando fumarato, con la reducción
de concomitante de la enzima FAD A FADH. La fumarasa cataliza la
hidratación del doble enlace dando malato y finalmente la malato
deshidroginasa regenera oxalacetato con la reducción concomitante
de NAD y NADH.
A pesar de que el ciclo del ácido cítrico en si genera directamente
solo un ATP por vuelta los cuatro pasos de oxidación en el ciclo
proporcionan un gran flujo de electrones hacia la cadena respiratoria
vía NADH Y FDAH y posibilitan de esta forma la formación de ATP.
Cada uno de los pares de electrones del NADH produce tres ATPS,
mientras que el par del FADH produce 2ATS. Así la vuelta del ciclo
genera finalmente 12 ATPS.
Fosforilacion a nivel de sustrato
La fosforilación a nivel de sustrato es un tipo de reacción metabólica
que da como resultado la formación de trifosfato de adenosina o
guanosina trifosfato por la transferencia directa y la donación de un
grupo fosforilo a la adenosina difosfato o difosfato de guanosina a
partir de un intermedio reactivo fosforilada. Consiste en fosforilar
(adjuntar fósforo inorgánico) a cualquier sustrato orgánico quien
posteriormente va a ser utilizado como combustible energético. En
esta reacción el sustrato orgánico (donador de electrones) pasa por
una ruta catabólica y uno de los intermediarios de esa ruta es oxidado
por un coenzima, de manera que se origina un intermediario no
fosforilado con una gran energía de hidrólisis. Dicho intermediario
experimenta enseguida una sustitución con un fosfato, para dar la
correspondiente forma acil-fosfato (siendo este enlace de alta
energía). Finalmente, este acil-fosfato dona su fosfato de alta energía
al ADP, que pasa a ATP.
El succinil-CoA es un tioéster a alta energía (su ΔG°′ de hidrólisis está
en unos -33.5 kJ mol-1, parecido al del ATP que es de -30.5 kJ mol-
1). La citrato sintasa se sirve de un intermediario con tal unión a alta
energía para llevar a cabo la fusión entre una molécula con dos
átomos de carbono (acetil-CoA) y una con cuatro (oxalacetato). La
enzima succinil-CoA sintetasa se sirve de tal energía para fosforilar
un nucleósido difosfato purinico como el GDP.
La energía procedente del tioéster viene convertida en energía ligada
a una unión fosfato. El primer paso de la reacción genera un nuevo
intermediario a alta energía, conocido como succinil fosfato.
Sucesivamente, una histidina presente en el sitio catalítico remueve
el fosfato de la molécula glucídica, generando el producto succinato y
una molécula de fosfohistidina, que dona velozmente el fosfato a un
nucleósido difosfato, recargándolo a trifosfato. Se trata del único paso
del ciclo de Krebs en el que se produce una fosforilación a nivel de
sustrato. El GTP está implicado principalmente en las rutas de
transducción de señales, pero su papel en un proceso energético
como el ciclo de Krebs es, en cambio, esencialmente trasladar grupos
fosfato hacia el ATP, en una reacción catalizada por la enzima
nucleósido difosfoquinasa.
CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES
Las moléculas ricas en energía, como la glucosa, se metabolizan a
través de una serie de reacciones de oxidación que finalmente
producen CO, y agua. Los productos intermediarios metabólicos de
estas reacciones donan electrones a coenzimas específicas
(dinucleótido de nicotinamida v adenina [NAD-] y dinucleótido de
flavina y adenina IFADI) para formár las coenzimas reducidas ricas
en energía, NADH y FADH2. Estas coenzimas reducidas pueden, a
su vez, donar cada una un par de electrones a una serie
especializada de transportadores de electrones, que se denomina
colectivamente cadena de transporte de electrones. A medida que los
electrones van descendiendo a través de la cadena de transporte
de electrones pierden mucha de su energía libre. Parte de esta
energía puede capturarse y almacenarse mediante la producción
de ATp a partir de ADP y fosfato inorgánico (Pi). Este proceso se
denomina fosforilación oxidativa. El resto de la energía libre no
atrapada como ATP se usa para impulsar reacciones
complementarias como el transporte de Ca2* hacia las mitocondrias,
y para generar calor.
Objetivo de la cadena respiratoria: Formar un gradiente de protones
(H+) que se utilizará en la síntesis de ATP.
MITOCONDRIA
Es el lugar del metabolismo oxidativo eucariótico. Contiene, como
Albert Lehninger y Eugene Kennedy demostraron en 1948, los
enzimas que median este proceso incluyendo la piruvato
deshidrogenasa, los enzimas del ciclo del ácido cítrico, los enzimas
que catalizan la oxidación de los ácidos grasos y los enzimas y
proteínas redox implicados en el transporte electrónico y la
fosforilación oxidativa. Es pues con razón que se describe a la
mitocondria como la “central productora de energía” de la célula.
El descubrimiento de Eugene Kennedy y Albert Lehninger en 1948 de
que las mitocondrias son el sitio en donde se realiza la fosforilación
oxidativa en las eucariotas marcó el inicio de la fase moderna de los
estudios sobre las transducciones biológicas de energía.
Las mitocondrias varían de manera considerable en tamaño y forma,
dependiendo de su origen y de su estado metabólico. Típicamente,
son elipsoides de 0,5um de diámetro y 1um de longitud (alrededor
del tamaño de una bacteria).
La mitocondria está formada por cuatro subregiones diferentes: la
membrana externa, la membrana interna, el espacio intermembrana,
y la matriz situada dentro de la membrana interna.
- La membrana mitocondrial externa: es lisa, fácilmente
permeable a pequeñas moléculas e iones, los cuales se mueven
 libremente a través de canales transmembrana compuestos por
una familia de proteínas integrales de membranas llamadas
porinas (una proteína que forma poros no específicos, que
permiten la libre difusión de moléculas de hasta 10 kD.).
La membrana mitocondrial externa se caracteriza por la presencia
de diversas enzimas, entre ellas la acil-CoAsintetasa y
glicerolfosfatoaciltransferasa.
- La membrana mitocondrial interna: es impermeable a la
mayoría de moléculas pequeñas e iones, incluido el (H+), las
únicas especies que cruzan la membrana interna son aquellas
para las que existen transportadores específicos. La membrana
interna aloja a los componentes de la membrana respiratoria y a
la ATP sintasa.
La membrana interna, que contiene 75% en peso de proteínas, es
considerablemente más rica en proteínas que la membrana
externa. Está formada por aproximadamente 70% proteínas y
30% lípidos, lo cual hace que tal vez sea la membrana biológica
con mayor abundancia de proteínas. Sólo es completamente
permeable al O2, C02 y H2O y contiene, además de las proteínas
de la cadena respiratoria, numerosas proteínas de transporte que
controlan el paso de metabolitos como ATP, ADP, piruvato, Ca2+
y fosfato. Esta impermeabilidad controlada de la membrana
mitocondrial interna a la mayoría de iones, metabólitos y
compuestos de masa molecular pequeña permite la generación
de gradientes iónicos a través de esta barrera y da lugar a la
compartimentación de funciones metabólicas entre el citosol y la
mitocondria.
La membrana interna es extensamente invaginada. El número de
invaginaciones, denominadas crestas, varía con la actividad
respiratoria del tipo particular de célula. Ello es debido a que las
proteínas que median el transporte electrónico y la fosforilación
oxidativa están unidas a la membrana mitocondrial interna, de
modo que la tasa de respiración varía con el área de la superficie
de la membrana. El hígado, por ejemplo, que tiene una tasa de
respiración más o menos baja, contiene mitocondrias con
relativamente pocas crestas, mientras que las células del músculo
cardiaco contienen muchas. No obstante, el área total de las
membranas mitocondriales internas en una célula hepática es 15
veces mayor que la de su membrana plasmática.
- La matriz mitocondrial: el espacio acotado por la membrana
interna de apariencia gelatinosa, contiene el complejo de la
piruvato deshidrogenasa y los enzimas del ciclo del ácido cítrico,
de la ruta B-oxidacion de los acidos grasos y de las rutas de
oxidación de los aminoácidos, es decir, todas las rutas de
oxidación de combustibles excepto la glucolisis, que tiene lugar en
el citosol. Debido a que la membrana interna tiene una
permeabilidad selectiva, separa los intermediarios y enzimas de
las rutas metabólicas citosólicas de los procesos metabólicos que
se producen en la matriz. Sin embargo, el piruvato, los ácidos
grasos, y los aminoácidos o sus derivados α-ceto son llevados por
transportadores específicos a la matriz para poder acceder a la
maquinaria del ciclo del ácido cítrico. El ADP y el Pi son
transportados específicamente a la matriz al mismo tiempo que el
recién sintetizado ATP es transportado al exterior.
En el proceso de transporte electrónico, la energía libre de la
transferencia de electrones del NADH y del FADH, al O2 a través de
centrosredox unidos a proteínas, esta acoplado a la síntesis de ATP.
La mitocondria se considera la fábrica de la célula, porque por medio
de la fosforilación oxidativa producen la mayor parte del ATP que esta
requiere. Cumplen la función adicional de almacenar Calcio
intracelular junto con el retículo endoplásmico y también desempeñan
un papel importante en la muerte celular programada o apoptosis.
COMPONENTES DE LA CADENA RESPIRATORIA
La cadena respiratoria mitocondrial consta de una serie de
transportadores electrónicos que actúan secuencialmente, la mayoría
de los cuales son proteínas integrales con grupos prostéticos
capaces de aceptar y donar uno o dos electrones.
Las flavoproteínas: son enzimas que catalizan reacciones de
oxidación reducción utilizando el flavinamononucleótido (FMN) o el
flavina adenina nucleótido (FAD) como coenzima (fig 13-18). El
nucleótido de flavina (FMN o FAD) está unido fuertemente en la
mayoría de flavoproteínas. Estas coenzimas fuertemente unidas se
denominan propiamente grupos prostéticos. No transfieren electrones
difundiendo desde un enzima a otro; en lugar de ello, proporcionan un
medio por el que la flavoproteína puede retener temporalmente
electrones mientras cataliza la transferencia de electrones desde un
sustrato reducido a un aceptor de electrones.
El nucleótido de flavina oxidado puede aceptar un electrón (un átomo
de hidrógeno), dando la forma semiquinona (abreviada FADH y
FMNH) o puede aceptar dos átomos de hidrógeno produciendo las
formas completamente reducidas FADH2 y FMNH2.
Citocromos: son hemoproteinas con capacidad para aceptar
electrones. El átomo de hierro del hemo capta un electrón, pasando
del estado oxidado (fe3+) al reducido (fe2+). Se han identificado
varios tipos de citocromos en la cadena respiratoria, dos citocromos a
(a y a3), dos b (b566 y b562) y dos c (c y c1). Se distinguen por su
potencial de reducción y espectro de absorción de la luz. En el caso
de los citocromos b, el subíndice que los identifica corresponde a la
longitud de onda a la cual tienen su máxima absorción.
Los cofactores hemo de los citocromos a y b están unidos muy
fuertemente, aunque no de manera covalente a sus proteínas
asociadas; los grupos hemo de los citocromos de tipo c están unido
de forma covalentes a través de residuos de Cys.
Al igual que en las flavoproteínas, el potencial de reducción estándar
del átomo de hierro en el hemo de un citocromo depende de su
interacción con las cadenas laterales de la proteína, por lo que es
diferente para cada citocromo.
Los citocromos b y c1 integran un complejo llamado ubiquinona-
citocromo c reductasa. Desde el complejo ubiquinona-citocromo c
reductasa, los electrones pasan al citocromo c.
El citocromo c es una proteína soluble que se asocia mediante
interacciones electrostáticas con la parte externa de la membrana
mitocondrial interna. El citocromo c es un transportador móvil que
recibe electrones de la ubiquinona-citocromo c reductasa y los
transfiere de uno en uno al complejo citocromo oxidasa, responsable
de la última etapa del sistema.
Coenzima Q: recibe también el nombre de ubiquinona por su
naturaleza química y su ubicuidad en los sistemas biológicos. Es una
benzoquinona con una larga cadena formada por diez unidades
isopreno (en total 50 carbonos).
Este aceptor es el único de la cadena respiratoria no unido a
proteínas. Actúa como un portador móvil de electrones.
La ubiquinona puede aceptar un electrón y un protón
transformándose en el radical semiquinona (QH) o dos electrones y
dos protones formando ubiquinol (QH2) (fig 19-2), al igual que las
flavoproteínas transportadoras es por tanto, capaz de actuar como
puente entre un dador de dos electrones y un aceptor de un electrón.
Debido a que la ubiquinona es al mismo tiempo pequeña e
hidrofóbica puede difundir libremente dentro de la bicapa lipídica de la
membrana mitocondrial interna y puede hacer de lanzadera de
equivalentes de reducción entre otros transportadores electrónicos de
la membrana menos móviles. Además, debido a que transporta tanto
electrones como protones, juega un papel central en el acoplamiento
del flujo electrónico al movimiento de protones.
Nota: la Coenzima Q10 estimula la producción de energía en las
células cutáneas y rejuvenece la epidermis. Ralentiza de manera
considerable el envejecimiento cutáneo evitando el aumento de los
radicales libres y desencadenando un proceso de desoxigenación por
el cual se evita la destrucción de las células. Las sardinas,las carnes,
los mariscos, los frutos secos y las legumbres, atún y el arenque
contienen cantidades altas de coenzima Q10.
Centros Fe-S: los centros ferro-sulfurados o sulfo-ferricos poseen
hierro no hemínico, es decir no asociado a hemos, unido a azufre.
Estos centros ferro-sulfurados (Fe-S) van desde estructuras sencillas
con un solo átomo de Fe coordinado con cuatro residuos de Cys
mediante el azufre de sus cadenas laterales hasta centros Fe-S más
complejos con dos o cuatro átomos de Fe.Cada átomo de hierro
capta un electrón y pasa del estado férrico al ferroso en forma
reversible (fe3+<---> fe2+).
Las proteínas ferro-sulfuradas de Rieske (nombradas así
porsudescubridor John S Rieske) son una variante de las anteriores,
en las que un átomo de Fe está coordinado con dos residuos de His
en lugar de con dos de Cys. Todas las proteínas ferro-sulfuradas
participan en transferencias de un electrón en las que se oxida o se
reduce uno de los átomos de Fe de la agrupación ferro-sulfurada. En
la transferencia de electrones mitocondrial actúan como mínimo 8
proteínas ferro sulfuradas.
COMPLEJOS
La membrana mitocondrial interna puede descomponerse en cuatro
complejos proteicos separados, llamados complejos l, ll, lll y lV.
Cada complejo acepta o dona electrones de transportadores
relativamente móviles (que no están estrechamente unidos a la
membrana) y pasan los electrones a otro transportador móvil. Cada
portador de la cadena de transporte de electrones puede recibir
electrones de un dador de electrones y puede donarlos
posteriormente al siguiente portador de la cadena. Por último, los
electrones se combinan con oxígeno y protones para formar agua.
La energía liberada por las acciones de los complejos I, III Y IV
impulsa la síntesis de ATP por el complejo V, que se denomina
complejo ATP sintetasa. Esta necesidad de oxígeno convierte al
proceso de transporte de electrones encadena respiratoria, la cual
da cuenta de la mayor porción del uso de oxígeno por parte del
organismo.
Con la excepción de la coenzima Q, todos los miembros de esta
cadena son proteínas, que pueden funcionar como enzimas, como
es el caso de las deshidrogenasas.Los electrones pueden
transferirse como iones hidruro (:H-) al NAD*, como átomos de
hidrógeno ('H) al FMN, a la coenzima Q y al FAD, o como electrones
(e-) a los citocromos.
Complejo I: NADH a ubiquinona. EL complejo I también llamado
NADH: ubiquinonaoxidorreductasa o NADH deshidrogenasa, es
una enzima enorme compuesto por 42 cadenas polipectidicas
diferentes, incluyendo una flavoproteina que contiene FMN y como
mínimo 6 centros ferro-sulfurados. La microscopía electrónica de alta-
resolución muestra que el Complejo I tiene forma de L, con un brazo
de la L en la membrana y el otro prolongándose hacia la matriz. El
complejo I cataliza dos procesos simultáneos forzosamente
acoplados: (1) La transferencia exergónica hacia la ubiquinona de un
ion hidruro del NADH y un protón de la matriz, y (2) la transferencia
endergónica de cuatro protones de la matriz hacia el espacio
intermembrana. Por lo tanto, el complejo I es una bomba de protones
impulsada por la energía de la transferencia electrónica, que cataliza
una reacción vectorial,: mueve los protones hacia una dirección
específica desde una localización (la matriz, que se carga
negativamente con la salida de protones) hacia otra (el espacio
intermembrana que se carga positivamente)
NADH + Q + 5H*matrizNAD + QH2 + 4H*espacio
intermembrana
Complejo II: succinato a ubiquinona. También llamado succinato
deshidrogenasa, es el único enzima del ciclo del ácido cítrico ligado
a membrana(transmembrana). Aunque más pequeño y más sencillo
que el complejo I, contiene cinco grupos prostéticos de dos tipos y
cuatro subunidades proteicas diferentes. Las subunidades C y D son
proteínas integrales de membrana, cada una de ellas con tres hélices
transmembrana. Contiene un grupo hemo, hemo b1 y un sitio de
unión para la ubiquinona que es el aceptor final de electrones en la
reacción catalizada por el complejo II. Las subunidades A y B se
extienden hacia la matriz (o el citosol de una bacteria); contiene tres
centros 2Fe-2S, FAD unido y un sitio de unión para el sustrato
succinato.
Otros sustratos de las deshidrogenasas mitocondriales también
pasan electrones a la cadena respiratoria a nivel de la ubiquinona,
pero no a través del Complejo II. El primer paso en la B-oxidación de
los acil graso- CoA, catalizado por la flavoproteínaacil- CoA
deshidrogenasa, implica la transferencia de electrones desde el
sustrato al FAD de la deshidrogenasa, y a continuación, a la
flavoproteína transferidora de electrones (ETF) que a su vez, pasa
sus electrones a la ETF: ubiquinonaoxidorreductasa. Este enzima
pasa electrones a la cadenarespiratoria al reducir la ubiquinona. El
efecto de este enzima transferidor de electrones es contribuir a la
reserva de ubiquinona reducida.
Complejo III: ubiquinona a citocromo c. También llamado
complejo citocromo bc1 o ubiquinona: citocromo
oxidorreductasa, acopla la transferencia de electrones desde el
ubiquinol (QH2) al citocromo c con el transporte vectorial de protones
de la matriz al espacio intermembrana. La ubiquinona cuando tiene
un electrón se llama semiubiquinona, cuando tiene dos electrones se
llama ubiquinol.
Un donador de dos electrones, la CoQH2 resultante, transfiere los
electrones a los citocromos que son aceptores de un electrón. En
este proceso que se denomina Ciclo Q, la CoQH2 transfiere en
primer lugar un electrón a un centro hierro-azufre, el cual se transfiere
directamente al citocromo c1 y luego al citocromo c. La
semiquinonaCoQ resultante transfiere a continuación otro electrón al
hemo b566 componente del citocromo b (este hemo tiene un máximo
de absorción de luz a 566nm), y este electrón pasa a continuación al
componente hemo b562 y luego reduce una molécula de CoQ
oxidada a la semiquinona. Este proceso se repite con una segunda
molécula de CoQH2, pero esta vez el electrón del hemob 562 reduce
a la semiquinonaCoQ a CoQH2 . El resultado es que dos moléculas
de CoQH2 se oxidan y una molécula de CoQ se reduce, para una
transferencia neta de dos electrones que se emplean para reducir dos
moléculas de citocromo c. Dado que las reacciones que consumen
protones se producen dentro de la matriz, mientras que la liberación
de protones tiene lugar en el espacio intermembrana, el ciclo Q ayuda
a mantener el gradiente de protones necesario para impulsar la
síntesis de ATP.
El ciclo Q adapta el cambio entre el transportador de dos electrones,
la ubiquinona y los transportadores de un electrón, los citocromos
b562, b566, c1 y c, y explica la estequiometria medida de cuatro
electrones que pasan del complejo III al citrocromo C. Aunque la vía
de los electrones por este segmento de la cadena respiratoria es
complicada, el efecto neto de la transferencia es simple: QH2 se
oxida a Q al tiempo que se reducen dos moléculas de citrocromo c.
Luego de que el grupo hemo del citrocromo c, acepte un electrón del
complejo III, el citocromo c se desplaza hacía el complejo IV para
ceder el electrón a un centro binuclear.
Complejo IV
En el último paso de la cadena respiratoria, el Complejo IV, también
llamado citocromo oxidasa, transporta electrones desde el
citocromo c al oxígeno molecular, reduciéndolo a H2O. El complejo IV
es una enzima muy grande de la membrana mitocondrial interna (13
subunidades). Tres unidades son esenciales para la función.
La subunidad II mitocondrial contiene dos iones Cu que forman
complejo con los grupos –SH de dos residuos de Cys en un centro
binuclear que se parece a los centros 2FE-2S de las proteínas
ferrosulfuradas. La subunidad I contiene dos grupos hemos
designados a y a3, y otro ion cobre (CuB). El hemo a3 y CuB forman
un segundo centro binuclear que acepta electrones del hemo a y los
transfiere a O2 unido al hemo a3.
La transferencia de electrones a través del Complejo IV va del
citocromo c al centro CuA, al hemo a, al centro hemo a3- Cub y
finalmente al O2. Por cada cuatro electrones que pasan a través del
complejo, el enzima consume cuatro H+ “sustrato” de la matriz (lado
N) convirtiendo el O2 en 2H2O. También utiliza la energía de esta
reacción redox para bombear un protón hacia el espacio el espacio
intermembrana (lado p) por cada electrón que pasa, añadiéndose al
potencial electroquímico producido por el transporte del protón
impulsado por el potencial redox a través de los Complejos I y III.
En esta reducción del O2 por cuatro electrones intervienen centro
redox que transportan un único electrón al mismo tiempo y ésta se ha
de dar sin la liberación de los intermediarios reducidos
incompletamente tales como el peróxido de hidrógeno o los radicales
hidroxilo libres, especies muy reactivas que dañarían los
componentes celulares. Los intermediarios se mantienen fuertemente
unidos al complejo hasta que se convierten completamente con agua.
Resumen.
En el complejo I el NADH le cede un electrón a la ubiquinona, y lo
transporta al complejo II, en el complejo II; recibe otro electrón del
FADH, y ahora transporta dos electrones al complejo III, en este
complejo III la ubiquinona se oxida y le cede los electrones al
citocromo c, el citocromo c los transporta al complejo IV, y los dona al
citocromo a, el citrocromo a se los dona al citrocromo a3 y el a3 se
los da al oxígeno.
Esta reacción es exergonica, toda esta energía liberada no se puede
perder, por lo tanto se acopla a una reacción endergonica, al bombeo
de protones hacia el espacio intermembrana, de donde hay menos
concentración de protones a donde hay más concentración.
El complejo I y III bombean 4 protones y el complejo IV bombea 2
protones, el complejo II no bombea protones porque no es
transmembrana, en total se bombean 10 protones cada vez que hay
un ciclo en la cadena respiratoria, para que siempre haya más
protones en el espacio intermembrana y regresen de manera pasiva
por la ATPasa, generando un giro de ella y así sintetizar ATP.
Potencial Redox Estándar
Es una medida de la tendencia de un par redox particular (Por
ejemplo: NAD+ y NADH, o FAD y FADH2) para perder electrones.
Cuanto más negativo es el valor de Eo, mayor es la tendencia a
perder electrones (es decir, afinidad electrónica baja), mientras que
cuanto más positivo sea, es más probable que el par redox acepte
electrones (mayor afinidad electrónica) cada una de las reacciones de
oxidorreduccióndel transporte electrónico es exergónica en
condiciones estándar y loselectrones fluyen de manera continua
desde los transportadores de potencial bajo a los transportadores de
potencial alto.
En efecto, dado que hablamos de sustancias capaces de aceptar y
donar electrones, el transporte de electrones no sería posible a
menos que dichos transportadores estén situados en orden de
potencial redox de electronegatividad decreciente. Por consiguiente,
basta conocer el potencial redox estándar de cada uno de los
componentes de la cadena respiratoria para poder determinar el
orden exacto en que éstos deben ir situados. Este ha sido uno de los
criterios básicos utilizados para la determinación de la secuencia ya
mencionada. Sin embargo, la determinación de los potenciales redox
estándar de los componentes de la cadena respiratoria presenta
serias dificultades experimentales. En primer lugar, los potenciales
redox estándar solo pueden determinarse con exactitud en sustancias
altamente purificadas, lo que resulta difícil en gran parte de los
citocromos y flavoproteínas, al tratarse de sustancias íntimamente
unidas a la membrana mitocondrial. En segundo lugar, el potencial
redox de una sustancia en un momento dado no sólo depende de las
concentraciones de la forma oxidada y reducida en cada momento,
sino también de la posible influencia del medio que le rodea sobre el
propio potencial redox estándar.
Los cambios en los potenciales estándar de reducción de un par
electrónico, mientras atraviesa sucesivamente los complejos I, III y IV
equivalen, en cada paso, a suficiente energía libre para propulsar la
síntesis de una molécula de ATP.
La reacciónredox del complejo II no libera suficiente energía libre
para sintetizar ATP; funciona solo para introducir los electrones del
FADH2 en la cadena de transporte electrónico.
Cambios en el estado redox de los componentes de la cadena
respiratoria
Si la formulación consecuente con los potenciales redox estándar de
los componentes de la cadena respiratoria es cierta, el estado redox
de los intermediarios corresponderá de una manera lógica con el
estado metabólico de la mitocondria. Así, si a una suspensión de
mitocondrias en aerobiosis se le suministrara un sustrato NAD
(malato, por ejemplo), la NADH- oxidasa, primer aceptor de la cadena
se reducirá proporcionalmente más que las flavoproteínas y estas, a
su vez, más que el citocromo b y éste que el citrocromo c, y así
sucesivamente. Si por el contrario, mantenemos la suspensión de
mitocondrias en anaerobiosis y les suministramos malato, todos los
componentes estarán reducidos. Si ahora hacemos accesible el
oxígeno, el primero en oxidarse sería el citocromo a . a3 seguido del
citrocromo c, b ,flavoproteínas, etc. En efecto, estos hechos pueden
comprobarse experimentalmente, lo que sugiere que la formulación
expuesra en la figura 10.1 es posiblemente cierta.
INHIBIDORES DE LA CADENA RESPIRATORIA
Son compuestos exógenos que actúan inhibidores como donadores o
aceptores electrónicos artificiales.
En una confirmación definitiva, se han utilizado agentes que inhiben
el flujo de los electrones a través de la cadena en combinación con
medidas del grado de oxidación de cada transportador. En presencia
de 02 y un dador electrónico es de esperar que los transportadores
que funcionan antes del paso inhibido queden totalmente reducidos,
mientras que los que funcionan después del bloqueo deberían estar
completamente oxidados. Mediante la utilización de diversos
inhibidores que bloquean diferentes puntos de la cadena se ha
deducido la secuencia completa; es la misma que la predicha según
los métodos anteriores.

Compuestos que inhiben la cadena respiratoria:

1- Antimicina A: Inhibe el flujo de electrones desde el citocromo
b562 reducido hasta el citocromo c1 (complejo III), evitando por
tanto la bomba de protones. Los electrones no pueden pasar al
citocromo b al c1, todos los transportadores previos quedan
reducidos mientras que los transportadores posteriores quedan
totalmente oxidados.
2- Rotenona: Un producto vegetal que es utilizado frecuentemente
como insecticida, inhibe la transferencia de electrones dentro de
la NADH deshidrogenasa (complejo I).
3- Monóxido de Carbono y Cianuro: Inhibe la transferencia de
electrones en el citocromo oxidasa (complejo IV). Y en
consecuencia, pueden suspender por completo la respiración.