BIOQUÍMICA

o Semestre-2022
Departamento Académico de Cursos Básicos
 Determinación de la
concentración sérica de
proteínas totales y
fraccionadas

Semana 01
Sesión 04
Contenido
o Generalidades de proteínas
o Procedimiento experimental
o Determinación de proteínas
totales
o Determinación de Albúmina
o Reporte de resultados
o Interpretación de resultados
 Resultado de aprendizaje de la sesión
OBJETIVO INFORME

Al finalizar la sesión, el estudiante

1. Reconoce las técnicas para determinar la
concentración sérica de proteínas totales, albúmina
y globulinas.

2. Explica los fundamentos de dichas técnicas y su https://acortar.link/FHglpJ

significado en diagnóstico.
Siguiendo procedimientos experimentales

https://acortar.link/vwvKOp 03
 Reflexión desde la experiencia
Transporte Hemoglobina
Catalitica Lactasa Participemos en las siguientes preguntas
Estrutural o soporte colageno queratina
Motilidad o movimiento actina y miosina
Defensa inmunoglobulina o anticuerpos
Reserva o almacenamiento caseina ovoalbumina
Hormonal Insulina
¿Cuáles son las unidades que forman las
proteínas? MONOMEROS
Aminoacidos

1 arias
2arias
¿Cómo se clasifican las proteínas? 3 arias
4arias

¿Qué funciones cumplen las proteínas?

¿Qué proteínas que están presentes en la

sangre conoces?
Hemoglobina

N°
 Generalidades de las proteínas
CARACTERÍSTICAS: CLASIFICACIÓN:

o La palabra proteína deriva del griego “proteios”: o Estructura: Primaria, Secundaria, Terciaria y
PRIMORDIAL cuaternaria.
o Son polímeros complejos de aminoácidos que se o Forma: Fibrosa y globulares
producen en las células vivas. o Solubilidad, Composición (Simples y conjugadas)
o Están formadas solo por 20 aminoácidos. o Movilidad electroforética Compuesto
o Constituidas: C, O, H, N, S. mas pesada
adicional al
Electroforesis
o Contenido de N ~ 16%. Esto diferencia las proteínas Con electricidad permite la
proteina ->
migracion o movimiento de proteinas, Glucoproteina
de carbohidratos y de lípidos. mas ligera separarlas en base a peso o tamaño por la visualizacion de bandas.
banda mas gruesa mas concentracion

Energéticamente, las proteínas aportan al

organismo 4 Kcal de energía por cada
gramo que se ingiere.

N°
https://acortar.link/qCNNyI
 Generalidades de las proteínas

Albúmina
Globulinas
α,β,γ

Mantener la Presión
osmótica del plasma.

Contenido de proteínas
depende de:
Estado nutricional
Funcionamiento hepático
Funcionamiento renal
Errores metabólicos

Intolerencia lactosa 07
Perfil electroforético de proteínas séricas deficit lactasa
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Determinación de proteínas séricas totales

Puede ser:
cualitatitiva o
cuantitativa
(Estándar)

https://acortar.link/5WEzZ6
https://n9.cl/w3uur
 Determinación de proteínas séricas totales

FUNDAMENTO Y METODOLOGIA
RANGO REFERENCIA

Hiperoproteinemia

Normoproteinemia

Hipoproteinemia

https://www.valtek.cl/wp-content/uploads/2020/02/Proteina-Total.- 010
Inserto.pdf
 Determinación de proteínas séricas totales
Método de Biuret

Requiere la desnaturalización de las proteínas

para exponer los enlaces peptídicos

FUNDAMENTO:
Se basa en la reacción entre los iones de cobre
del reactivo de Biuret y los átomos de nitrógeno
de los enlaces peptídicos de las proteínas. Se
produce un complejo de color azul que absorbe
entre 535 y 540 nm. La intensidad de coloración
es directamente proporcional a la cantidad de https://n9.cl/rxgh6
enlaces peptídicos.
Intervalos de referencia: 6.0 – 8.3 g/dL

Detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o

más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida. 011

https://www.valtek.cl/wp-content/uploads/2020/02/Proteina-Total.-Inserto.pdf
 Determinación de proteínas séricas totales
Método de Biuret
Procedimiento ¿Cuál sería el material a necesitar de
acuerdo a lo descrito en la técnica?

Estandar
Material:
Muestra
-Tubos de ensayos 12x75 mm.
-Pipeta automática de 1000 µL
o pipeta serológica de 5 mL
-Pipeta de 20 µL
-Tips
-Gradilla
-Temporizador
-Espectrofotómetro
-Cubetas de polietileno
012
https://www.valtek.cl/wp-content/uploads/2020/02/Proteina-Total.-Inserto.pdf
 Determinación de proteínas séricas totales
Método de Biuret
20 µL
20 µL
Estándar o Patrón
6,1 g /dL B ST M

Suero de
PROCEDIMIENTO Blanco Estándar Muestra paciente
o Patrón (suero de un
paciente)

1 mL de reactivo a
cada tubo de ensayo
12 x75 mm
Mezclar e incubar a TA por 5 ST: Estándar
minutos M: Muestra

Leer (540 nm) 013

Apliquemos lo aprendido

Determine la
concentración de
proteínas totales en el
suero del paciente

https://acortar.link/rSWaoI
 Proteínas: Significado Clínico

INTERVALOS DE REFERENCIA (IR): 6.0 – 8.3 g/dL

Por Por
ARRIBA DEBAJO
de los IR de los IR

HIPOPROTEINEMIA: https://acortar.link/9xxcBN
HIPERPROTEINEMIA: Pérdida proteica, bajo consumo por
Deshidratación, disminución del inanición o mal absorción ¿En qué situación se
consumo o por pérdida (acidosis Síndrome nefrótico encuentra el paciente?
diabética, mal de Addison, diarrea Hemorragias por traumatismos,
grave) quemaduras graves
014
 Determinación en suero de
https://acortar.link/EW2qR7

albúmina

https://acortar.link/Q6VLf4

https://acortar.link/ida09u

https://acortar.link/BZw3JJ

https://acortar.link/lfcwAb
AMARILLO A VERDE cuando hay albumina
 Determinar la concentración sérica
de albúmina
FUNDAMENTO

MECANISMO DE UNIÓN:

A pH 4 las moléculas de albúmina

tienen un carácter catiónico que
permite la unión con el verde de
bromocresol, que tiene un carácter
aniónico y forma un complejo verde
azulado.

Después de la adición de albúmina,

el complejo coloreado de albúmina- https://www.valtek.cl/wp-
BCG da un pico a 625 nm que indica content/uploads/2020/02/Alb%C3%BAmina-
BCG.-Inserto.pdf
la formación del complejo albúmina-
BCG. Rango referencia 3-5 g/dl
017
https://n9.cl/x9p26m
 Determinar la concentración sérica
de albúmina
¿Cuál sería el material a necesitar de
acuerdo a lo descrito en la técnica?
Materiales:
-Tubos de ensayos 13x75 mm.
-Pipeta automática de 1000 µL o
pipeta serológica de 5 mL
Propipeta)
-Pipeta de 10- 20 µL
-Tips
-Gradilla
-Temporizador
-Espectrofotómetro
-Cubetas de polietileno 018
https://www.valtek.cl/wp-content/uploads/2020/02/Alb%C3%BAmina-BCG.-Inserto.pdf
 Determinar la concentración sérica
de albúmina
10 µL
10 µL
Estándar o Patrón
3,1 g /dL
B ST M

Suero de un paciente
Blanco Estándar Muestra (suero de
o Patrón un paciente)
HIPERALBUMINEMIA
1 mL de reactivo a cada
HIPOALBUMINEMIA
tubo de ensayo 12 x75 mm
Mezclar e incubar a TA por 3
minutos
019
Leer (620 nm)
Apliquemos lo aprendido
 Apliquemos lo aprendido

Determine la concentración de
albúmina en el suero del paciente

https://acortar.link/KKQGtO
 ALBÚMINA: Significancia clínica
Determinar la concentración sérica de albúmina

HIPOALBUMINEMIA:

Reducción en producción (afección hepática)

Incremento de la pérdida (Glomerulonefritis o

HIPERALBUMINEMIA: nefrosis, quemaduras)
Deshidratación aguda
Mala absorción (afecciones gastrointestinales)

Disminución en síntesis (analbuminemia, procesos

inflamatorios)

022
 REPORTE DE RESULTADOS

Intervalo de referencia
Proteínas Totales: 6.8 g/dL 2.9 3.5 6.0-8.3 g/dL
Albúminas: 3.5 g/dL 1.19 1.26 3.5-4.8 g/dL

Globulinas: 3.3 g/dL 1.7 2.24

2.0-3.5 g/dL
R A/G : 1.1 1.2-2.2

https://acortar.link/FSTNtj
La concentración sérica de proteínas totales
fue X,X g/dL y la de albúmina fue de X,X g/dL,
los cuales se encontraban dentro de los
intervalos de referencias.
Calcular globulinas:
Globulinas=Conc. PT - Conc. Albúmina
Globulinas= (6.8-3.5)g/dL=3.3 g/dL
R albúmina/Globulina= Conc. Alb/Conc Glob
R A/G=3.5 g/dL/3.3 g/dL=1.06= 1.1
023
Apliquemos lo aprendido
 Apliquemos lo aprendido

Hallar la concentración de albúmina en

el suero del paciente

https://acortar.link/KKQGtO
Integremos lo aprendido
 Integremos lo aprendido

¿Qué aprendiste en Participemos en las siguientes conclusiones

clase hoy?
• Las proteínas séricas más abundantes son la albúmina y las
globulinas.

• Son importantes entre otras para mantener la presión

osmótica estable.

• Un nivel bajo o elevado de albúmina y proteínas totales

séricas puede ser indicador de enfermedades,
deshidratación aguda, hemorragia, entre otras.
https://acortar.link/pbmr5V
problemas hepaticos y renales
N°
Actividad asincrónica
 Actividad asincrónica
Pautas para realizar informe (trabajo colaborativo). Este informe debe
contener las siguientes partes:

o Carátula (titulo: Determinación de la concentración sérica de

proteínas totales y fraccionadas, nombres de los integrantes del Los estudiantes deben realizar un
grupo, sección-hora-docente) informe e investigar sobre:
o Introducción o Síntomas de déficit de
o Objetivos proteínas.
o Materiales y métodos (Procedimiento experimental) o Riesgos del exceso de proteínas.
o Resultados Enfermedades que producen altos
o Conclusiones niveles de proteínas en sangre.
o Referencias
o Anexos: Síntomas de déficit de proteínas. Riesgos del exceso de
proteínas. Enfermedades que producen altos niveles de proteínas
en sangre.
N°
Fecha y hora de entrega será establecida por el docente.
 Referencias Bibliográficas
DE CONSULTA

Cuadros Trillos, G. (2019). Mapas conceptuales en bioquímica (1.a ed.). El Manual Moderno
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/128368

Melo, V. y Cuamatzi, O. (2019). Bioquímica de los procesos metabólicos. Reverté, S.A. https://elibro.net/es/ereader/ucsur/127790

Müller-Esterl, W. (2020). Bioquímica: fundamentos para medicina y ciencias de la vida. Reverté, S.A.
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/129564

Piña Garza, E., Martínez Montes, F., Riveros Rosas, H., Laguna, J. y Pardo Vázquez, J.P. (2018). Bioquímica de Laguna y Piña (7.a ed.).
El Manual Moderno.

Pulido Villamil, X. C. (2019). Prácticas de bioquímica y estudios de casos en ciencias de la salud. Universidad de Tolima.
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/142510

Simes, L. E. (2020). Introducción a la bioquímica: interpretación de análisis clínicos. Universitas.

N°
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/172171
 Referencias Bibliográficas
OBLIGATORIAS

Bittencourt, J. (2018). The Power of Carbohydrates, Proteins, and Lipids (4.a ed.). CreateSpace, An Amazon.com Company.
https://www.researchgate.net/publication/322473648

Macías Alvia, A., Hurtado Astudillo, J. R., Cedeño Holguín, D. M., Cedeño Holguín, F. A., Scott ÁLava, M., Vallejo Valdivieso, P. A.,
Macías Alvia, M. J., Santana Sornoza, J. W., Espinoza Macías, M. J., Ubillús Saltos, S. P., Arteaga Espinoza, S. X., Torres Macías,
O. E., Pigüave Reyes, J. M., Pigüave Reyes, Chavarría Cedeño, D. I., & Intriago Sánchez, K. J. (2018). Introducción al estudio de la
bioquímica (1.a ed.). Área de Innovación y Desarrollo, S.L https://doi.org/10.17993/CcyLl.2018.28

Nelson, D. L., y Cox, M. M. (2017). Lehninger Pinciples of Biochemistry (7.a ed.). W.H Freeman Macmillan Learning.

Navarro, M., Salazar, J., Salazar, Y. Zarkovic, G. (2022). Manual de prácticas de laboratorio. Bioquímica. Universidad Científica del Sur.

N°