Traducido del inglés al español - www.onlinedoctranslator.

com

AGAR HIERRO DE KLIGLER (KIA)

USO PREVISTO
Remel Kligler Iron Agar (KIA) es un medio sólido recomendado para su uso en procedimientos cualitativos para la diferenciación de bacilos gramnegativos entéricos
sobre la base de fermentación de dextrosa y lactosa y sulfuro de hidrógeno (H2S) producción.

RESUMEN Y EXPLICACIÓN
En 1918, Kligler describió un medio para la detección de H2S y diferenciación deSalmonelaspp.1Bailey y Lacey modificaron aún más el medio sustituyendo
el indicador rojo de fenol por el indicador de Andrade.2Este medio se hizo conocido como KIA. Es recomendado por Edwards y Ewing para la
determinación de H2Producción de S por bacilos gramnegativos entéricos.3Gilardi también ha recomendado KIA para la detección de H2S producido por
algunas cepas dePseudomonas.4

PRINCIPIO
Las peptonas de caseína y carne suministran compuestos nitrogenados, aminoácidos y vitaminas necesarios para el crecimiento bacteriano. El cloruro de sodio es
una fuente de electrolitos esenciales y mantiene el equilibrio osmótico. La lactosa y la dextrosa son fuentes de carbohidratos. El rojo de fenol es un indicador de la
fermentación de carbohidratos. Las reacciones de fermentación se leen en la parte inclinada y en la base, indicadas por un cambio de color de rojo (alcalino) a
amarillo (ácido). La concentración de dextrosa en KIA es una décima parte de la concentración de lactosa. Esto sirve para distinguir los organismos que fermentan
únicamente dextrosa de los que también fermentan lactosa. La pequeña cantidad de ácido producido en el sesgo durante la fermentación de la dextrosa se oxida
rápidamente, lo que hace que el sesgo se vuelva alcalino (rojo). La reacción del ácido amarillo se mantiene en la culata debido a la ausencia de oxígeno. Los
fermentadores de lactosa dan como resultado inclinados y extremos amarillos porque se produce suficiente ácido en el inclinado por fermentación de ambos
azúcares para mantener un pH ácido en condiciones aeróbicas. Si el organismo no fermenta la dextrosa, la inclinación y el tope permanecen neutrales (rojo). El
citrato de amonio férrico es un indicador de H2producción S. Si H2S se produce a partir de tiosulfato de sodio, reacciona con citrato de amonio férrico para formar un
precipitado negro (sulfato ferroso) en el medio. La producción de gas se indica mediante burbujas, una división del medio o el desplazamiento del medio.

REACTIVOS (FÓRMULA CLÁSICA)*

Peptona de caseína ................................................. ............... gramo Tiosulfato de sodio................................................ ...........0.3 Citrato gramo

10,0 Lactosa................................. .......................................... 10.0 gramo de amonio férrico.................................... ...............0.2 Rojo gramo

Peptona de carne.... .................................................... ............ gramo fenol ............................... .....................................25,0 mg de

10.0 Cloruro de sodio.................................... ............................. gramo agar .......... .................................................... ..................12.5 Agua
gramo

5.0 Dextrosa ............... .................................................... ....... 1.0 gramo Desmineralizada ........................... .......................1000.0 ml
pH 7,4 ± 0,2 @ 25°C
* Ajustado según sea necesario para cumplir con los estándares de desempeño.

PROCEDIMIENTO
1. El rendimiento de este medio depende de una inoculación adecuada.

2. Usando una aguja de inoculación, inocule KIA con un inóculo ligero de un cultivo puro de 18 a 24 horas que crece en un medio sólido. inclinar hacia adelante y Raya el
hacia atrás a través de toda la superficie y apuñalar hasta el fondo de la colilla de agar.

3. Incube el tubo en aire ambiente a 33-37°C durante 18-24 horas y con la tapa floja.

4. Examine las reacciones de fermentación, la producción de gas y H2producción S.

INTERPRETACIÓN DE LA PRUEBA
Fermentación de carbohidratos: Prueba
positiva para reacción inclinada - Prueba Amarillo (ácido)
negativa para reacción inclinada - Rojo (alcalino)
Prueba positiva para reacción a tope - Amarillo (ácido)
Prueba negativa para reacción a tope - Rojo (alcalino)

Reacciones de color KIA:

Rojo sesgado/ amarillo a tope - dextrosa (+), lactosa (-)
Amarillo sesgado/ amarillo a tope - dextrosa (+), lactosa (+)
Rojo sesgado/ rojo a tope - dextrosa (-), lactosa (-)

Producción de sulfuro de hidrógeno:

Prueba Positiva - Color negro en todo el medio, un anillo negro en la unión de la inclinación y el tope, o un precipitado negro en el tope
Prueba negativa - Sin desarrollo de color negro

Producción de gases:
Prueba Positiva - Burbujas en el medio, agrietamiento y desplazamiento del medio, o separación del medio del costado y del fondo del tubo Sin
Prueba negativa - burbujas y sin separación o desplazamiento del medio

(Continúa al dorso)
CONTROL DE CALIDAD
Todos los números de lote de Kligler Iron Agar (KIA) se han probado con los siguientes organismos de control de calidad y se han encontrado aceptables. Las
pruebas de los organismos de control deben realizarse de acuerdo con los procedimientos de control de calidad de laboratorio establecidos. Si se observan
resultados de control de calidad anómalos, no se deben informar los resultados de los pacientes.

CONTROL INCUBACIÓN RESULTADOS

Escherichia coliATCC®25922 Pseudomonas aeruginosaATCC® Ambiente, 18-24 h a 33-37 °C Inclinado amarillo/ trasero amarillo, H2S (-), Gas (+)
27853 Salmonella entericaserovariedad Typhimurium ATCC® Ambiente, 18-24 h a 33-37 °C Rojo oblicuo/ rojo a tope, H2S (-), Gas (-) Rojo
14028 Ambiente, 18-24 h a 33-37 °C inclinado/ trasero amarillo, H2S (+), Gas (+)

LIMITACIONES
1. Lea e interprete las reacciones de KIA dentro de un período de incubación de 18 a 24 horas. Una lectura de reacción a <18 horas puede interpretarse falsamente como negativa
porque es posible que el carbohidrato fermentado aún no haya producido suficiente ácido para cambiar el indicador de rojo de fenol. Una lectura de reacción a >24 horas
puede ser incorrecta debido a la utilización de peptona, lo que daría como resultado un cambio de pH alcalino.5
2. h2La producción de S en la culata puede enmascarar la acidez producida; sin embargo, si H2S está presente una condición ácida existe, incluso si no es observable.5

3. Este medio no contiene un inhibidor y pueden crecer muchos tipos de organismos. Antes de inocular KIA, asegúrese de que el organismo sea un bacilo
gramnegativo catalasa positivo.5
4. Para mejorar la condición alcalina en la pendiente, se debe permitir un libre intercambio de aire. Si los tubos KIA están bien tapados, una reacción ácida causada únicamente por
la fermentación de dextrosa también involucrará la inclinación. Por lo tanto, los tubos deben tener las tapas sueltas durante la incubación.5
5. La H2Se informa que el indicador S presente en KIA es menos sensible que algunos métodos, como la tira de acetato de plomo; por lo tanto, algunos H2Es posible
que los bacilos gramnegativos positivos no produzcan H2S en KIA.5
6. Antes de la inoculación, puede haber un ligero precipitado en la superficie inclinada. Esto no afectará el rendimiento del medio.6

BIBLIOGRAFÍA
1. Kligler, IJ 1918. J. Exp. Medicina. 29:319-322.
2. Bailey, SF y GR Lacey. 1927. J. Bacteriol. 13:183-189.
3. Ewing, WH 1986. Identificación de Edwards y Ewing deenterobacterias. 4eledición Elsevier, Nueva York, NY.
4. Lennette, EH, A. Balows, WJ Hausler y HJ Shadomy. 1985. Manual de Microbiología Clínica. 4eledición ASM, Washington, D.C.
5. MacFaddin, JF 1985. Medios para aislamiento-cultivo-identificación-mantenimiento de bacterias médicas. vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore,
MD.
6. Murray, PR, EJ Baron, MA Pfaller, FC Tenover y RH Yolken. 1995. Manual de Microbiología Clínica. 6eledición ASM, Washington, D.C.

Consulte el frente de RemelManual Técnico de Medios MicrobiológicosparaInformación generalsobre precauciones, almacenamiento y deterioro del producto,
recolección, almacenamiento y transporte de muestras, materiales requeridos, control de calidad y limitaciones.

ATCC®es una marca registrada de American Type Culture Collection. IFU 61240,
Revisado el 19 de junio de 2012 Impreso en EE. UU.

12076 Santa Fe Drive, Lenexa, KS 66215, EE. UU.

Información general: (800) 255-6730 Sitio web:www.remel.com Correo electrónico: remel@remel.com

Teléfono local/internacional: (913) 888-0939 Fax internacional: (913) 895-4128