LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR

La biología celular y molecular es una disciplina científica en pleno desarrollo en el

mundo entero. El estudio de las estructuras celulares desde el punto de vista de
sus constituyentes moleculares, en particular las moléculas de proteínas y ácidos
nucleicos, ha sido una tendencia de la biología moderna, que ha permitido conocer
el papel de cada organelo en el contexto de la regulación de la expresión genética.

El desarrollo del diagnóstico molecular se ha basado en las pruebas para

enfermedades infecciosas, aunque han surgido nuevas oportunidades en las
áreas de oncología molecular y farmacogenómica, entre otras.

El diagnóstico de estas enfermedades infecciosas se basa en la detección y

amplificación de un región de la secuencia de ADN del agente infeccioso.

Una de las técnicas más usadas en un laboratorio de diagnóstico molecular es la

reacción en cadena de la polimerasa – PCR que puede ser cualitativa o
cuantitativa según el equipo con el que se disponga en el laboratorio.

La técnica de PCR ha sido reconocida mundialmente como uno de los progresos

científicos más importantes de nuestra generación; fue inclusive reconocida con
un Premio Nobel. La gran sensibilidad y especificidad de la técnica de PCR
permite diagnosticar, de forma precoz, los agentes infecciosos o tumores y
monitorear la progresión de la enfermedad y la respuesta al tratamiento.

Un Laboratorio básico de Biología molecular básicamente está conformada por

cuatro áreas principales.
1.- AREA BLANCA: es un área libre de ADN, en la cual se preparan alícuotas de
reactivos de acuerdo con el tipo y número de muestras a analizar.

2.-AREA GRIS

EXTRACCION ACIDOS NUCLEICOS: en la que se realiza la extracción de ADN y

o ARN. Dentro de esta área también se preparan tubos y placas de reacción para
la posterior amplificación del ADN.

CUANTIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS: Existen varios métodos para

cuantificar los ácidos nucleicos: ADN /ARN. El equipo utilizado para este fin se
llama espectrofotómetro.

AREA NEGRA

3.- AREA DE AMPLIFICACIÓN DE ACIDOS NUCLEICOS MEDIANTE TECNICA

DE PCR CUALITATIVA O PCR CUANTITATIVA
Es el área donde se mantienen los termocicladores, equipos en donde se llevan a
cabo las amplificaciones. Este cuarto debe ser acondicionado con temperatura
baja por lo general entre 20 y 24ºC para evitar el sobrecalentamiento de los
equipos. Ademàs deben estar conectados a un regulador de voltaje para evitar su
daño, sobretodo en lugares donde ocurren muchas variaciones de voltaje.

4.- AREA DE DETECCION DE RESULTADOS (AREA DE ELECTROFORESIS):

Es el área donde se realizan las pruebas de electroforesis, las migraciones de las
muestras de ADN amplificadas en un gel de agarosa, que posteriormente deben
ser visualizadas a simple vista mediante una luz de ultravioleta en un equipo
llamado transiluminador de UV. En esta etapa es donde se realizan las
interpretaciones de los resultados o de un diagnóstico. Aquí se determina si existe
o no el patógeno en la muestra.

La electroforesis se realizan en cámaras de electroforesis que consisten en una

fuente de poder separada o incorporada a la cubeta en donde descansa el gel de
agarosa durante la migración, además incluye unas peinetas y una bandeja molde
para el gel

MATERIALES Y ACCESORIOS

-Microtubos de 1.5 mL y 200 µL, viales de 2 mL

-Puntas para pipetas automáticas 1000, 200, 100, 50 y 10 µL, con filtro y sin filtro

Tubos para centrífuga de 50 mL y 15 mL

Porta tubos o rack para microtubos de 1.5 ml y 200 µL

ACCESORIOS

Coolers o enfriadores -20°C

-Pipetas automáticas

EQUIPOS:

Cámara de flujo laminar

Microcentrífugas

Una microcentrífuga es un aparato que tiene la función de rotar muestras de

laboratorio almacenadas en tubos capilares o microtubos , de esta manera separa
sus componentes ya sean líquidos o sólidos de acuerdo a su densidad.
TERMOCICLADORES:
CAMARAS DE ELECTROFORESIS
TRANSILUMINADOR DE ULTRAVIOLETA