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CLINICA DE TUBERCULOSIS HOSPITAL GENERAL DE MEXICO OD. DRA. MA. ERNESTINA RAMREZ CASANOVA DRA. LAURA ESCOBEDO J.
tuberculosis MT2
BAAR
5,000-10,000
50-80 %
1-10 1-10
80-90 % 97 %
- VENTAJAS:
- Los BK se ven fluorescentes --> M. menos aumentos (200-400)
- Menor tiempo de observacin (2-3 minutos para BK-)
- INCONVENIENTES:
- Equipo tcnico y materiales ms costosos y complejos
- Necesidad de un aporte elctrico continuo. - La tincin Z-N debe confirmar. Observa mejor los BK
Aunque es igual de eficaz que Z-N, slo est indicada en laboratorios que procesan + de 25-30 BK por tcnico
BACTEC 460 TB
tuberculosa
Lquidos Middlebrook Bactec 7H12B Ac. Palmitico marcado con C14 se capta y se transforma en una camara de iones leida por sensor Sensibilidad antimicrobiana(HRSE) Resultado a los 8-15 das
LIMITACIONES Costos elevados Utilizacin isotopos radiactivos Procesar un gran nmero de muestras Equipo semiautomatizado que requiere de personal especializado Debe ser utilizado en laboratorios de 3 nivel
Caractersticas comunes:
No invasivos No radioistopos Totalmente automatizados. Lectura continua Identificacin y antibiograma de M. tuberculosis sin necesidad de hacer subcultivos. - Sensibles y rpidos. - Muy costoso
Otras
Tipificacin Confirmacin de fracaso Susceptibilidad a antuberculosos
Tb extrapulmonar Tb SIDA Pobre carga bacilar Priorizar el uso de acuerdo a los factores de riesgo
Detecta y amplia una secuencia genmica DNA o RNA (Gen.probe MTD o AMPLICOR, otros) Permite identificar al Complejo M. tuberculosis en secuencia IS6110 de otras micobacterias ( MNT) Gran sensibilidad puede detectar muestras con carga bacilar baja (1-10 bacilos) Especfica ya que reconoce gnero y especie en unas cuantas horas En muestras de esputo y liq pleural sensibilidad del 90100%
Inconveniente problemas de contaminacin ambiental con fragmentos libres de DNA o RNA (falsos positivos)
GENMA DE LATUBERCULOSIS
LECTURA DE PCR
123pb
358pb
- TB Pulmonar BK+:
Sensibilidad y Especificidad > 98%, tanto ADN como ARN
- TB Pulmonar BK-:
ARN: ADN: Sensibilidad: 83-85% (aumentan 2-3.000 la diana de amplif. Respecto a ADN) Sensibilidad: 50-60% (Su diana est presente en pocas copias en el genoma Micobacteria.
- TB Extra-Pulmonar:
ARN: ADN: Sensibilidad: 65-77% (aumentan 2-3.000 la diana de amplif. Respecto a ADN) Sensibilidad:
PCR: <30-40% (no son eficazmente eliminadas subst. Inhibidoras de l muestra) LCR: 71-78% (S consigue eliminar eficazmente las subst. inhibidoras)
Digestiones con BstEII y HaeIII de productos de PCR del gene de la protena hsp65 de aislados de M. tuberculosis y M. intracellulare.
MT2
El bcilo es identificado por hibridacin molecular en sondas de DNA marcadas con ester acrinidina y RNA ribosomal Resultado 2 a 3 hrs. En muestras repiratorias:
Journal of. Clinical Microbiology 1996 Pag.834-841 JAMA feb2 20 02 VOL283pag 639-645
LUMINOMETRO
PRUEBA DE MT2
M. terrae
M intracellulare
M. tuberculosis
CONCLUSIONES
Las pruebas moleculares pueden ser un apoyo importante en el diagnstico de la tuberculosis. En la clnica, la PCR es una herramienta, valiosa pero no definitiva para el diagnstico. Desde el punto de vista epidemiolgico, la informacin que las pruebas moleculares aportan es nica e invaluable. En otros aspectos identificacin de aislados y deteccin de resistencia, se requieren mas estudios. Todava existen problemas para que las pruebas moleculares puedan usarse a nivel general.
Utilidad diagnstica
Sensibilidad 1. TBP+ 2. TBP 3. EXTRAPULMONAR 4. TB SEROSA 5. TB INFANTIL Especificidad 1. TB Residual 2. Micobacteriosis 3. Infectados TB 4. Sanos % 65-85 <50 <25-40 <20 <20 >50 >30 >10 >10
Son pruebas para pases ricos La Tuberculosis aun es una patologa de la pobreza El Z/N y el Cultivo L-J siguen siendo las estandares de oro en Mxico Los nuevos mtodos deben considerarse como accesorios y no sustituir a los convencionales
Con Sensibilidad y espeficidad altas con referencia al cultivo estandar de oro 98% Costo de la prueba debe ser barata y fcil de llevar al cabo Que permita la deteccin de Complejo M Tuberculosis en esputo La diferenciacin entre bacterias vivas o muertas Pruebas de deteccin/identificacin de M tuberculosis