PASANTIA INMUNOLOGIA 4.
Método de ELISA que determina la presencia
1. Para el despistaje de sífilis mencione las
pruebas no treponémicas, treponémicas y
confirmatorias.
• No treponemica: VDRL (veneral disease research
laboratory), prueba de RPR (reagina plasmática
rápida)
• Treponemicas: prueba de inmunofluorescencia
con absorción de anticuerpos treponemicos (FTA-
ABS), Prueba de Nelson,
• Confirmatoria: biología molecular
2. Mencione 4 marcadores tumorales e indique
para que enfermedad es.
CA-125 → Ovario
CA-19-9 → Colon
CA 15-13 → Mama
PSA → Próstata
ALFA-fetoproteinas → Testicular
Calcitonina → Medular de Tiroides
HCG → Testicular
3. Explique el protocolo de despistaje de VIH.
Un paciente sospechoso de VIH, primero se le deben
hacer las pruebas de screening y luego en base a su
resultado se le hacen las pruebas confirmatorias. Para
esto existen diferentes protocolos a aplicar de
acuerdo a los métodos que se utilicen. Existe un
protocolo de tamizaje con dos test rápidos, otro de
tamizaje con dos ELISA O EIA, otro que involucra
un tamizaje con ELISA y con pruebas confirmatorias
y existe un protocolo a parte para diagnosticar a niños
menores de 18 meses. Cada uno de estos protocolos
tienen sus reglas que se deben seguir dependiendo de
los resultados que se tengan.
Se realiza prueba de VDRL como screening y a todo
paciente reactivo para VDRL se le debe realizar
prueba confirmatoria de sífilis FTA-abs
Aca se explica uno de los protocolos de tamizaje que
se pueden realizar, el de los dos test rápidos:
Podemos tomar un tamizaje con dos test rápidos de
protocolos diferentes, podemos hacer un test donde
el individuo aparezca negativo y el paciente sería
negativo para anticuerpos contra HIV-1 Y HIV-2, si
el paciente da positivo le hago otro test rápido
diferente y si el resultado es de un test 1 positivo y
un test 2 positivo entonces el paciente seria de
acuerdo al análisis un paciente positivo presuntivo
para anticuerpos HIV. Si test 1 positivo y un test 2
negativo se dice que el resultado es inconcluso.
de anticuerpo → Método Indirecto.
5. ¿Cuáles son las enfermedades autoinmunes
sistémicas más comunes y que tipo de técnica se
les aplica en el laboratorio para corroboración?
Lupus eritematoso sistémico → ANA, SM
(SMITH), DNA- DS
Artritis Reumatoidea → RATEST, ANA, AC
citrulinados
Esclerosis múltiple → ANA, AG de mielina
6. ¿Cuáles son las técnicas de automatización
para el área de inmunología?
Quimioluminiscencia, citometría de flujo,
Electroquimioluminiscencia.
7. Diga que son las inmunodeficiencias,
clasificación y de dos ejemplos de cada una:
La inmunodeficiencia es la condición médica por la
cual el sistema inmune de una persona no es capaz de
funcionar correctamente o no funciona en absoluto.
El funcionamiento incorrecto del sistema
inmunitario puede favorecer el desarrollo de
enfermedades autoinmunes y alérgicas, o de
neoplasias
Inmunodeficiencia primaria: está clasificada en
especifica y inespecífica.
➢ Inmunodeficiencia primaria – Especifica:
• Agammaglobulinemia o enfermedad de Burton.
• Síndrome de Hiper IgM.
• Deficiencia selectiva de IgA.
• Deficiencias de las subclases de IgG.
• Inmunodeficiencia común variable (IDCV).
➢ Inmunodeficiencia primaria – Inespecífica:
• Neutropenia:
❖ Neutropenia Cíclica.
❖ Deficiencias de opsoninas.
• Defectos de señalización.
• Defectos en la destrucción intracelular de
microorganismos.
• Defectos en la formación y función de los
gránulos polimorfonucleares (PMN):
❖ Defectos en los lisosomas.
❖ Deficiencia de mieloperoxidasa.
• Otras afecciones por fagocitosis:
❖ Síndrome de agregación leucocitaria.
❖ Síndrome de Job.
❖ Síndrome de leucocitos perezosos.
 ➢ Inmunodeficiencia secundaria: son mucho
más frecuentes que las inmunodeficiencias primarias
y suelen ocurrir en personas con un sistema
inmunitario previamente normal, puede estar
causada por un estado grave de desnutrición, terapias
farmacológicas fuertes, tumores (leucemia, linfoma,
mieloma múltiple), VIH, hepatitis viral o ausencia de
bazo (asplenia).
8. Indique la prueba confirmatoria de las
enfermedades de la fila:
Sífilis: FTabs.
Hepatitis A: ELISA, PCR.
HIV: Western blot.
Deficiencia de complemento: CH50.
Enfermedad autoinmune: inmunofluorescencia
indirecta.
9. Explique el fundamento y procedimiento de un
ELISA doble anticuerpo
Fundamento: se fijan anticuerpos específicos al
antígeno que se desean buscar, se realiza un lavado
para eliminar los que no se fijaron, se agrega una
muestra problema que contiene el antígeno que va a
reaccionar con el anticuerpo y se realiza otro lavado
para eliminar a los Ag que no reaccionan.
Posteriormente se añade otro anticuerpo con una
enzima marcadora que se fija a un epítopo diferente
del Ag al que se fijó el primer anticuerpo, se lava y
se agrega el sustrato coloreado para poder visualizar
la reacción o leer en espectrofotometría.
Se trata de un ensayo muy empleado en el que se
recubre el pocillo con un primer anticuerpo anti-
antígeno. Después de lavar el exceso de anticuerpo,
se aplica la muestra problema en la que se encuentra
el antígeno, que será retenido en el pocillo al ser
reconocido por el primer anticuerpo. Después de un
segundo lavado que elimina el material no retenido,
se aplica una solución con un segundo anticuerpo
anti-antígeno marcado. Así, pues, cada molécula de
antígeno estará unida a un anticuerpo en la base que
lo retiene y un segundo anticuerpo, al menos, que lo
marca. Este ensayo tiene una gran especificidad y
sensibilidad debido a la amplificación de señal que
permite el segundo anticuerpo.
10. Mencione 3 diferencia entre aglutinación y
precipitación
La precipitación es semicuantitativa o cuantitativa,
no utiliza látex, se incube 24 horas, determina
concentraciones exactas, es de antígenos solubles.
Mientras que la aglutinación es con antígenos
insolubles, cualitativa, utiliza látex, es rápida y no
determina concentraciones exactas.
11. De la técnica de ELISA diga la utilidad del
conjugado, sustrato y solución de parada
• Conjugado: Ac homólogo marcado con una
enzima.
• Sustrato: revela la interacción Ag-Ac.
• Solución de parada o Stop: detiene la reacción.
12. ¿Cuáles de estas pruebas se determinan por
IFA? Prueba de anticuerpos antinucleares (ANA)
Detección de Ac anti-DNA
Ac. Anti-citoplasma del neutrófilo
13. Pruebas a donantes de sangre:
• Biometría hemática para conocer la cantidad de
células sanguíneas (hemoglobina, leucocitos y
plaquetas).
• Grupo sanguíneo ABO y Rh.
• Rastreo de anticuerpos irregulares. (RAI)
• Determinación de anticuerpos contra VIH 1+2 y
por ELISA de 4ta generación.
• VDRL.
• Determinación de hepatitis A, B y C.
• Determinación de anticuerpos contra Treponema
pallidum (sífilis)
• Enfermedad de Chagas.
14. Que son las hipersensibilidades y diga su
clasificación: Reacción exagerada antes la presencia
de antígenos inocuos, cuando se le da repuesta a
ciertos patógenos se puede producir un exceso de
inmunidad que daña al huésped más que al propio
organismo.
Por sus características clínicas: dependiendo del
tipo de reacción
✓ Inmediatas
✓ Tardías
✓ Retardadas
Por el tipo de respuesta inflamatoria:
✓ Reacción mediada por anticuerpos
✓ Reacción mediada por inmunidad celular
Clasificación (Gell y Coombs):
Hipersensibilidad I → Hipersensibilidad
inmediata (Mecanismo: IgE)
 Hipersensibilidad II → Citotóxica Inmediata La respuesta inmune que se inicia de inmediato al
(Mecanismo: IgG, IgM) primer contacto con un patógeno se conoce como
innata y la que se desarrolla cuando no se logra
Hipersensibilidad III → Complejos Ag-Ac eliminar el agente agresor, o este ingresa por segunda
(tardía) (Mecanismo: IgG) vez, se llama adquirida.
Inmunidad innata: Es el conjunto de mecanismos
Hipersensibilidad IV → Hipersensibilidad que constitutivamente actúan contra todos los
Retardada (Mecanismo: Linfocitos sensibilizados) microorganismos patógenos desde el primer contacto
con ellos. Es inmediata y no específica por cuanto no
15. Diga Marcadores de quimioluminiscencia, diferencia la clase o especie del agresor y no deja
electrouimioluminiscencia, inmunofluorescencia memoria del encuentro con él. Si no logra
Quimioluminiscencia: Luminol, éster de acridina, controlarlo, induce una serie de procesos que llevan
hidróxido de sodio. al desarrollo de la inmunidad adquirida.
electrouimioluminiscencia: complejo de rutenio,
tripopilamina. • Inmunidad innata – Celular: mastocitos,
inmunofluorescencia: fluoresceína, rodamina, células NK, granulocitos.
isotiocrato de fluoresceína, Ficoeritrina. • Inmunidad innata – Humoral: interferón,
citoquinas, sistema de complemento.
16. Utilidad de inmunodifusión radial doble
La inmunodifusión doble de Ouchterlony es un Componentes: barreras naturales, células, factores
método inmunológico sencillo y rutinariamente humorales.
usado en el laboratorio clínico para la detección de Inmunidad Adquirida: se compone de células y
antígenos o anticuerpos en una muestra biológica. Es procesos sistémicos altamente especializados que
considerado el proceso estándar para la detección de eliminan o evitan las amenazas de patógenos.
Antígenos Nucleares Extraíbles (ENA) Consiste tanto en el reconocimiento de un elemento
extraño, o antígeno, como en su eliminación en un
17. Diga 3 diferencias entre turbidimetría y subsecuente encuentro, así como en la generación de
nefelometría la memoria inmunitaria y la tolerancia ante los
propios antígenos.
NEFELOMETRIA TURBIDIMETRIA
• Inmunidad Adquirida – Natural: activa –
Puede ser realizada en la pasiva.
Requiere un nefelómetro
mayoría de los • Inmunidad Adquirida – Artificial: activa –
especialmente dedicado
espectrofotómetros pasiva.
Sensibilidad
incrementada para • Inmunidad Adquirida – Celular: linfocitos
Sensible para medir TCD4, TCD8, Linfocitos B.
inmunocomplejos
inmunocomplejos
pequeños con el uso de • Inmunidad Adquirida – Humoral:
pequeños
partículas de látex inmunoglobulinas.
sensibilizadas
Menor precisión en la Mayor precisión en la Componentes: Moléculas con papel
determinación de determinación de protector/defensivo, Células con capacidad
inmunocomplejos inmunocomplejos reguladora, células con capacidad efectora.
grandes grandes
19. Que es antígeno y clasificación: son sustancias
18. Que es inmunidad y clasificación con sus que inducen la respuesta inmunitaria. Se clasifican en
elementos correspondientes antígenos exógenos y endógenos.
Es la acción conjunta de células y moléculas que nos
defienden de las agresiones externas por agentes 20. Diga por cual técnica podemos realizar las
infecciosos y de las internas producidas por siguientes pruebas:
infecciones virales y por alteraciones celulares AG SMITH: inmunoflorescencia directa
ocasionadas por el desarrollo de tumores malignos. HIV: western blot, ELISA
CD4 Y CD8: citometría de flujo
21. Explique el esquema para el despistaje de
VIH
Se realiza prueba rápida por inmunocromatografía, si
está resulta reactiva se le realiza otra prueba rápida
de diferente lote, al tener 2 pruebas rápidas reactivas
se le debe realizar HIV de 4ta generación, si este
resulta reactivo se solicita prueba confirmatoria
Western blot.
22. Mencione las pruebas que se realizan para
determinar hipersensibilidades: ANA, RAtest,
Antígeno de Mielina.
23. Mencione las pruebas que se realizan en el
área de epidemiologia: Dengue, Sarampión,
Rubeola, Sífilis
24. Mencione 4 técnicas que se utilizan para
medir la inmunidad celular y 4 para la humoral
Inmunidad celular: Técnica de Ficoll-Hypaque,
Citometría de flujo para la determinación de las
moléculas CD, cuantificación de la población
linfocitaria y prueba de cuantificación de citocinas
Inmunidad Humoral:
25. ¿Cuáles de estas pruebas se determinan por
IFA?
ANTI-DNA, Anticuerpos citrulinicos, Anticuerpos
antinucleares, ANTI-SM, IG, Complemento
26. Mencione las características inmunitarias de
la artritis reumatoidea
✓ Enfermedad por Inmuno-Complejos.
✓ Producida por antígeno soluble (local o
sistémico).
✓ Mediada por IgG, IgM.
✓ Requiere alto título tanto de Ag como de Ac.
✓ Vía clásica de activación del complemento
Involucrada.
✓ Células fagocíticas involucradas.
27. Diga la clasificación de los antígenos
tumorales y defina cada uno
Que son antígenos que solo aparecen en tumores por
tanto son específicos para estas células tumorales y
son aquellos que aparecen tras la expresión in novo
de moléculas como consecuencia a la activación de
genes que previamente estaban inactivos, se dice que
esto ocurre por alteraciones en las actividades de los
factores de transcripción que den cumplir la función
de inactivar a ciertos genes, además de forma alterna
puede ocurrir una mutación en la secuencia de un gen
normal dando lugar a lo que es la expresión de
péptidos mutantes. Los antígenos tumorales se
pueden clasificar de acuerdo a: Antígenos
específicos de tumores (TSA). Por otro lado,
tenemos los Antígenos Asociados a Tumores (TAA)
que pueden ser:
a) Antígenos de origen viral: Estos antígenos son
siempre específicos del tipo de virus que induce el
tumor y es independiente del tipo de célula donde se
dé el desarrollo del tumor.
b) Antígenos procedentes de reactivación de genes
embrionarios: Estos antígenos se producen
normalmente en las células embrionarias y no son
expresados por las células de los adultos y cuando
son expresados en los adultos pueden ser expresados
por células cancerosas, entre ellos tenemos antígeno
carcinoembrionario y la alfa-fetoproteina.
c)Proteínas oncogénicas: Se dice que las
mutaciones celulares que van a inducir a que se
presente el tumor tienen lugar en tres tipos de genes
(proto-oncogenes, genes supresores de tumores y
genes reparadores de ADN, cuando en estos genes se
produce una mutación o son expresados de forma
anómala se puede dar lugar a un producto modificado
que puede llegar a constituir antígenos específicos de
los tumores.
d) Idiotipos formados por la presencia de algunas
interacciones de las BCR y TCR: en este caso se
nombran a él idiotipo de las inmunoglobulinas de
superficie de las neoplasias de células B y el idiotipo
del TCR en los linfomas T frente a estos es posible el
desarrollo de inmunoterapias
28. Explique la patogenia del lupus eritematoso
sistémico
En el Lupus Eritematoso sistémico lo que va a ocurrir
es que se van a producir autoanticuerpos contra
componentes nucleares es decir se va a dar la
presencia de anticuerpos antinucleares. Aunado a
esto los complejos que se forman entre
autoanticuerpos y autoantígenos tienen la capacidad
de provocar daño en los tejidos por medio de la
activación del sistema de complemento y el enlace
que se produce con los receptores de los macrófagos
y otras células inflamatorias.
Los pacientes con esta enfermedad también elaboran
anticuerpos contra plaquetas y eritrocitos por lo que
se puede generar una trombocitopenia y una anemia membrana y su núcleo y pequeñas fracciones de
hemolítica. linfocitos T CD8 tienen función de cooperadoras y su
Se dice que la presencia de los alelos HLA-DR2 y respuesta va a depender de la respuesta de las células
HLA-DR3 están relacionados con mayor riesgo de CD4 que son las que van a proporcionar factores
desarrollar la enfermedad. cooperadores de destrucción para activar y producir
proliferación de las células T citotóxicas.
De tolerancia se desconocen los mecanismos
precisos pero la tolerancia fallida a muchos • Mecanismo inmunitario antitumoral de células
autocomponentes es una de las características NK.
importantes en esta enfermedad. • Mecanismo inmunitario antitumoral de
En esta enfermedad se producen una gran variedad macrófagos.
de anomalías del funcionamiento de las células T y • Mecanismo inmunitario antitumoral
las células B. dependiente de anticuerpos.
Se dice que otro de los riesgos que provoca una 30. Marque cual diagnostico corresponde con
prevalencia alta de esta enfermedad es en los estas enfermedades:
individuos con deficiencia de proteínas C4 del
sistema de complemento y componentes de la fase
temprana de la vía clásica del sistema de
complemento. También va a ser predominante e
mujeres por la presencia de los estrógenos que
incrementan la producción de anticuerpos ANA y
anticuerpos anti-dna y se va a incrementar el riesgo
de enfermedad renal por l presencia de andrógenos.
29. Cuáles son los tipos de mecanismo inmune
contra el tumor y explique uno de ellos:
• Mecanismo inmunitario antitumoral de
linfocitos T: Este mecanismo es el más importante
en el control de células tumorales antigénicas, esto 31. De acuerdo a estos marcadores indique cuales
debido a que va a originar la muerte directa de la enfermedades determina:
célula tumoral y también la activación de otros
componentes del sistema inmunitario. Este
mecanismo va a depender de:
1.-Las células T restringidas por la clase II del
complejo mayor de histocompatibilidad, que va a
estar representada por los linfocitos TCD4, los cuales
van a tener una interacción con las células
presentadoras de antígeno y pro medio de este
mecanismo se va a producir una secreción de
linfocinas que activan a otras células efectoras y se 32. Mencione los mecanismos de evasión tumoral
va a dar una función de ayuda al inducir una • Perdida de antígenos de superficie.
respuesta inflamatoria. • Anticuerpos de bloqueo.
2.- Las células T restringidas por la clase I del • Formación de inmunocomplejos que circulan y
complejo mayor de histocompatibilidad, que van a pueden bloquear la actividad de los linfocitos.
estar representadas por los linfocitos TCD8 • Escape al ataque de las células Nk.
citotóxicos y estos van a secretar citocinas que van a • Producción de IL-10.
provocar una lisis directa de la célula tumoral. • Producción de factores de crecimiento
endoteliales.
En resumen, las células TCD8 citotóxicas pueden • Bloqueo de la expresión de JAK3.
reconocer y matar directamente a las células
• Autofagia (genes supresores): mecanismo de
tumorales blanco por medio de la ruptura de su
reciclaje celular que se cree juega un papel
importante en la resistencia del cáncer a la
quimioterapia.
33. Que son las enfermedades autoinmunes diga
su clasificación y de 5 ejemplos:
Estas enfermedades se producen cuando el propio
organismo reacciona ante el huésped de forma
maligna provocando enfermedades del sistema
inmunológico que provocan afectaciones sistemas u
órgano especificas o una mezcla entre afectaciones
sistemas y órgano específicas. Estas se desarrollan
debido a la existencia de complejos de antígenos-
anticuerpos que van a encontrarse circulando por la
sangre y depositándose en diferentes lugares del
organismo. Estas enfermedades pueden tener
predisposición genética. La clasificación de estas es:
Enfermedades sistémicas o no órgano específicas.
1) Lupus Eritematoso Sistémico.
2) Artritis Reumatoide.
4) Esclerodermia
5) Dermatomiositis
Enfermedades autoinmunes órgano especificas
1) Tiroiditis de Hashimoto.
2) Enfermedad de Gravis
3) Enfermedad de Addison
4) Orquitis autoinmune.
5) Miastenia gravis.
34. La agammaglobulinemia ligada al sexo se
basa en: Mutación de gen BTK
35. Cuáles de las siguientes inmunodeficiencias
pertenecen a las asociadas a anomalías definidas
Déficit de PNP
Síndrome de Wiskott-Aldrich
Aplasia Tímica
Déficit ADA
Ataxia Telangiectasia
IDVC
36. Diga qué tipo de Inmunodeficiencia es y en
que se basa el síndrome de Chediak-Higash
Es una inmunodeficiencia primaria de la inmunidad
inespecífica y es una mutación del gen LYST que
codifica la proteína que regula la formación de
vacuolas y el transporte de proteínas del citoplasma
e impide el funcionamiento de los lisosomas con las
vacuolas.
37. De acuerdo al VIH diga cuáles son sus
características inmunitarias
1.- Infecta a las células CD4 del sistema inmune,
linfocitos T, monocitos-macrófagos, células
dendríticas foliculares y células de Langerhans
2.-Se dan defectos globales progresivos de la
inmunidad humoral y mediada por células.
3.-Reducción de los linfocitos T CD4 que son los
cooperadores.
4.- Se da la activación policlonal de los linfocitos B
con incremento de la producción de
inmunoglobulinas.
5.-La progresión de la enfermedad es otra de las
características y esto a pesar de la respuesta intensa
humoral y celular contra el virus.
38. De acuerdo al Genoma del HIV los genes, las
proteínas de cápside y de núcleo y las enzimas
Proteínas de la capsula: gp120 y gp41 (VIH1) Y
gp36 gp104 (VIH2)
Núcleo: p24, p17, p9 y p7
Genes: pol, gag y env.
Enzimas: p11 (protesa), p32 (integrasa) y p66 y p51
(transcriptasa inversa).
39. El virus del Epstein- Barr algunas
características son:
Evita la respuesta inmune tipo LST-TH1
Produce anticuerpos heterofilos
Las células B son blanco de este virus
Aumenta el número de CD4 y CD8
Reduce la expresión de los CMH clase I
40. Diga que son las inmunodeficiencias y su
clasificación: Es la alteración que se produce como
consecuencia de un efecto grave en las funciones
inmunológicas y se clasifican en primarias y
secundarias.
41. Hay alteración en el cromosoma 6, también
causa disminución en las CD8 y CD4, es la IDP:
Defectos de LT
Defectos de complemento
Defectos de CMH
42. Las inmunodeficiencias que cursan con
deficiencias de IL-21, INF GAMMA, Molécula de
adherencia y CMH es
Deficiencia de complemento
Deficiencia de glucosa 6 fosfato
Defectos de las células NK
Defectos de señalización
43. De acuerdo a los tipos de tolerancia diga sus
mecanismos de acción:
Tolerancia Inducida por linfocitos T:
Tolerancia periférica: Eliminación clonal,
Anergia clonal, Ignorancia inmunológica, Aborto
clonal, Supresión.
Tolerancia central: El principal es por apoptosis
cuando durante el proceso de maduración en el timo
los linfocitos T con capacidad de reaccionar contra
antígenos propios sufren procesos de selección
positiva y negativa.
Tolerancia Inducida por linfocitos B:
Tolerancia periférica: Deleción clonal, edición
del receptor, Anergia clonal, Ignorancia clonal o
inmunológica.
Tolerancia central: Si la y señalización del BCR
excede cierto umbral, los linfocitos B inmaduros
interiorizan el BCR autorreactivo y detienen su ciclo
de maduración. Estos linfocitos no alcanzan a
expresar el receptor de ubicación (homing) CD62L
por lo que no sale de medula ósea ni el receptor para
BAFF (factor activador de la célula B perteneciente
a la familia del TNF) que es una citocina importante
para la supervivencia de los linfocitos B. Si el
linfocito B fracasa en su proceso de edición del BCR,
es eliminado por apoptosis.
44. Seleccione correctamente las características
de los tipos de hipersensibilidades:
45. En que se basa la eritroblastosis fetal y en qué
tipo de hipersensibilidad se encuentra: Es una
enfermedad hemolítica que se da por
incompatibilidad del Rh del feto materno que puede
llevar a su muerte. Esto se da porque cierto volumen
de sangre del feto pasa a la circulación materna y si
el feto es RH+ y la madre RH- la madre va a
desarrollar anticuerpos contra los antígenos D y
luego en un embarazo posterior si el feto RH+ los
anticuerpos que están circulando en la sangre de la
madre que son IgG van a atravesar la placenta y van
a opsonizar a los eritrocitos del feto. Esta enfermedad
se puede prevenir por medio de la inmunización de
la madre con anticuerpos anti D en la semana 28 de
gestación y dentro de las 72 horas del parto. Esta
enfermedad se encuentra clasificada dentro de la
Hipersensibilidad tipo II.
46. La hipersensibilidad es: Trastorno que causa
una respuesta excesiva o no controlada frente a los
antígenos extraños
47. Mecanismo de acción de la hipersensibilidad
tipo I:
Primero se debe dar una primera exposición al
alergeno, cuando ocurre esa primera exposición se
van a activar los linfocitos Th2 y va a ocurrir una
estimulación de cambios de clase de IgE en los
linfocitos B, es decir, a partir de los linfocitos B ser
producen IgE específicas para ese patógeno. Una vez
que ocurre la unión de la IgE a los receptores RFC
épsilon L de los mastocitos ya estos mastocitos van a
tener el anticuerpo para reconocer en una segunda
entrada del antígeno al mismo, lo que van a hacer
estos mastocitos en una segunda exposición va a ser
que se van a activar y van a empezar a liberar sus
mediadores, estos mastocitos se activan porque
ocurre la unión de IgE especifica con su antígeno que
la produjo y en ese momento se pueden liberar los
mediadores que pueden ser preformados o
neosintetizados y se produce una reacción de
hipersensibilidad de tipo inmediata. El
reconocimiento del antígeno se da por dos moléculas
de IgE y luego se da una cascada de señales
intracelulares que va a elevar de forma transitoria el
cAMP y Ca2+ y luego ocurre la liberación de estos
mediadores. Algunos mediadores preformados son:
Histamina, Triptasa, Heparina y Factores
quimiotácticos. Algunos mediadores neosintetizados
son: Prostaglandinas, leucotrienos y Factores
activadores de plaquetas.
48. Diga los receptores que deben estar presentes
en las células para las hipersensibilidades
49. Explique brevemente en que se basa el
mecanismo de tolerancia central:
La tolerancia central se induce en los órganos
primarios como consecuencia del reconocimiento de
antígenos propios por parte de los linfocitos
autorreactivos inmaduros. Esta se da en linfocitos T
y B en timo y medula ósea.
Tolerancia central de los linfocitos T: Se da
durante el proceso de maduración en el timo en el
cual los linfocitos con capacidad de reaccionar contra
antígenos propios sufren un proceso de selección
negativa, gracias a los cuales se destruyen por
apoptosis.
Tolerancia central para los linfocitos B: Se da en
medula ósea este linfocito B en caso de que
reconozca autoantígenos va a sufrir un proceso de
edición de su receptor y si falla en este proceso va a
ser eliminado por apoptosis. Esta información
referente a la tolerancia central de linfocitos T y B.
50. Mencione la clasificación de las
hipersensibilidades tipo IV:
1.-Hipersensibilidad retardada (Tuberculinica).
2.-Hipersensibilidad por contacto.
3.-Hipersensibilidad con granulomas.
4.-Hipersensibilidad por células T citotóxicas.
5.-Enteropatia sensible al gluten.
51. Señale los métodos para cada una de estas
técnicas de laboratorio:
• ELISA: Indirecto, Doble Anticuerpo,
competitivo
• RIA: Competitivo y No competitivo
• IFA: Cuantitativa, Cualitativa (Directo,
Indirecto)
• W. BLOT: Indirecto
• EIA: Homogéneo (Método Competitivo),
Heterogéneo Método Competitivo (ag o ac) y no
competitivo (indirecto y doble anticuerpo).
52. Diga cuales son los marcadores de cada una
de estas técnicas
Quimioluminiscencia: luminol, éster de acridina,
peróxido de sodio
ELISA: fosfatasa alcalina. Beta- galactosidasa y
peroxidasa de rábano
S. BLOT: tinta china
RIA: Yodo 125 – carbono 14 – cromo51 – tritio.
IFA: fluoresceína, rodamina
53. Según la estructura del citómetro de fujo
explique cómo está constituida cada una
mencionando su función.
Sistema de Fluidos: constituido por una cámara de
fluidos, donde las células pasan alineadas hasta ser
incididas por el haz de luz
Sistema Óptico: constituido por láseres y filtros, que
se encargan de emitir un haz de luz para que las
células puedan emitir fluorescencia, y enviarla a los
sensores específicos.
Sistema eléctrico: está constituido por sensores
(fotomultiplicadores y fotodiodo), que tienen la
finalidad de convertir los fotones en electrones y
éstos, a su vez, en corriente eléctrica. De este modo,
la señal eléctrica es recibida por la computadora y
traducida en gráficos e histograma.
54. Mencione 4 diferencias entre la técnica de
ELISA y RIA
a) En RIA se tienen que aplicar medidas de
bioseguridad extremas, en cambio en la técnica de
ELISA no tanto como en los anteriores porque en
RIA existen riesgos para las personas por trabajar
con radiación.
b) Los marcadores que se utilizan en RIA son
isotopos radioactivos y en ELISA enzimas.
c) Elisa utiliza espectrofotómetro, el RIA contador
de centello
d) Para la realización de RIA se necesitan de
laboratorios especiales apartados debido a que se
trabaja con radiación y por lo general involucran
muchos más costos que con las técnicas de ELISA,
además que las técnicas de ELISA no necesitan un
laboratorio con las características que debe tener uno
en los que se practique RIA.
55. Cuáles son las pruebas que se realizan para
determinar el sistema de complemento y explique
cada una de ellas
Elisa, Inmunodifusión Radial, Nefelometría,
Turbidimetría

La inmunodifusión radial es una técnica
cuantitativa, basada en la precipitación en gel de un
sistema antígeno-anticuerpo monoespecífico. Esta
técnica se basa en la difusión libre de la muestra en
un gel que contiene anticuerpos contra la Ig que se
desea cuantificar. La formación de los complejos
entre antígenos y anticuerpos da lugar a la formación
de un anillo o círculo de precipitación alrededor del
punto de aplicación, cuya área es proporcional a la
concentración de antígeno en la muestra. 1) En placas
de agar que contienen antígeno contra las Ig, estas
contienen orificios para 12 pacientes. 2) Se va a
agregar 5landas de muestra de suero del paciente que
contiene las proteínas, en posición adecuada con
pipeta. 3) Se dejarán en un periodo de incubación de
18-24h por cada orificio a temperatura ambiente.
Luego con la formación de ese halo de difusión
(complejo formado por el anticuerpo-antígeno) con
una regla se medirá cuantos mm hay, de acuerdo a
una tabla estándar se verá el valor, pues esa área es
proporcional a concentración de antígenos de la
muestra
56. Que significan las siglas ELISA y explique
uno de sus métodos:
ELISA: ensayo por inmunoadsorción ligado a
enzimas.
57. Diga El Significado De Las Siguientes Siglas:
EIA: Enzimoinmunoanalisis
RIA: Radioinmunoanalisis
RPMI: medio Roswell Park Memorial Institute
SBF: suero fetal bovino
58. Son técnicas empleadas en los equipos
automatizados en el área inmunológica:
Quimioluminiscencia
Inmunofluorescencia
Inmunodifusión
Electroquimioluminiscencia
PCR Látex
BLOT
59. Diga 3 diferencias entre las técnicas de
BLOT:
60. Cuáles son las proteínas reguladoras del
sistema de complemento:
CD59
CD4
CR1
Factor H
CD46
C1Q
C3aR
C5aR
61. Proteínas que inician la vía de las lectinas:
MBL, MASP1 y MASP2
62. Mencione las funciones del sistema de
complemento: Lisis, Opsonización, Quimiotaxis,
Inflamación y Eliminación De Inmunocomplejos.
63. Proteínas del sistema de complemento que
están en mayor concentración: C3 (esta es aún
mayor) y C4
64. Las vías del sistema de complemento finalizan
en:
La formación de la C5 convertasa
CAM
Vía común
Lisis celular
C3 convertasa
65. Explique la vía alterna del sistema de
complemento: Primero se efectúa la escisión
espontanea de C3, luego se da la hidrolisis y
activación de C3b en fase liquida, luego C3b se une
de forma covalente a las superficies microbianas rica
en lipopolisacáridos o polisacáridos, posteriormente
a C3b se une el factor B que se va a escindir por
medio de factor D en Ba y Bb, Bb se queda unido a
la C3b y forma la C3 convertasa de la vía la cual es
estabilizada por una properdina y esa C3 convertasa
de la vía escinde muchas moléculas de C3 en C3a y
C3b uniéndose C3b de forma covalente al complejo
C3bBb y formando la C5 convertasa que es
C3bBbC3b.
Resumen: ¿Como se activa la vía? Presencia de
lipopolisacáridos o polisacáridos que se encuentran
en la superficie de microorganismos.
¿Qué proteínas activas la vía?: C3b.
Por cuales proteínas está conformada la vía: C3,
Factor B, Factor D y properdina.
66. Indique cual es la convertasa C3 y C5 de la
vía clásica: C4b2a y C4b2a3b
67. La vía clásica se activa mediante: Interacción
antígeno-anticuerpo.
68. El complejo de ataque a la membrana está
constituido por: C5b6789
69. Que es el sistema de complemento: El sistema
de complemento es un conjunto de proteínas séricas
y de superficie que tienen la función de interactuar
entre ellas y entre otras células para emitir una
respuesta efectora tanto de la inmunidad innata como
de la inmunidad adaptativa. Estas proteínas son
solubles y se activan y se adhieren a las superficies
celulares para eliminar microorganismos patógenos
que sean reconocidos como extraños. El sistema de
complemento al igual que la fagocitosis es la primera
línea de defensa del organismo y actúa en forma de
cascada enzimática. Está conformado por
aproximadamente 30 proteínas séricas (son más) que
ayudan a que se dé correctamente.
70. Son moléculas que se expresan en la
superficie de las células humanas que le presentan
a los leucocitos antígenos que no pueden
procesarse por sí mismos: El complejo mayor de
histocompatibilidad
71. Estructura de la TCR: EL TCR está formado
por la asociación de dos cadenas polipeptídicas α y β
(TCR αβ) o bien, a veces por las cadenas γ y δ
(TCRγδ), aunque de forma muy poco frecuente.
72. Función de los linfocitos que tienen
receptores TCR con correceptoras CD4 Y CD8:
Linfocitos T CD4: ayudan a la activación y
proliferación de otras células como macrófagos y
linfocitos B, para controlar la infección.
Linfocitos T CD8: Están implicados en la
destrucción de células infectadas por microbios y
células tumorales.
73. Las clases de genes de tipo II está conformada
por: HLA-DM, HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP,
HLA-DO.
74. Cuáles son las cadenas CMH que conforman
los CMH que son sintetizadas por los mismos
CMH: la CMH tiene 2 cadenas α y ß, la cadena α es la
que sintetiza la CMH.
75. Función del CMH tipo I: presentar péptidos a
los linfocitos T CD8.
76. Vía de procesamiento que procesa patógenos
intracelulares: vía citosólica.
77. Explique cómo está constituida la estructura
de la molécula del complejo mayor de
histocompatibilidad: Formadas por 2 cadenas
sintetizadas por el retículo endoplásmico rugoso
(RER) y otras cadenas no sintetizadas por el RER.
Todas las moléculas del MHC poseen 4 segmentos:
1. Un segmento de unión al péptido o hendidura
peptídica: se une al Ag para poder ser transportado
(péptido procesado) y a partir de ahí ser presentado.
2. Un dominio tipo Inmunoglobulina (Ig): son los
dominios que se conforman para que se del
doblamiento de la molécula.
3. Un segmento transmembrana: atraviesa la
membrana de la célula.
4. Una porción citoplasmática o
intracitoplasmática carboxi-terminal.
78. Explique la vía exógena del procesamiento
peptídico: Esta vía endocitica (extracelular o
exógena), cuando la endosoma está el péptido pasa
del RER por una vesícula hacia la endosoma, el
CMH-2 con el CLIP que será degradado por el HLA-
DM para que el CMH-2 se pueda unir al péptido
pueda salir por vesícula exocítica y pueda presentar
el péptido antigénico a los linfocitos TCD4 +.
79. Cuales son pruebas de precipitación,
floculación:
Precipitación: C3, C4, transferrina (inmunodifusión
radial), electroforesis de Hb (Inmunoelectroforesis).
floculación: VDRL, Reagina plasmática rápida
(RPR).
80. Procedimiento de ELISA y materiales:
Procedimiento: Elisa Indirecto
1. Tapizado del pocillo con el antígeno o anticuerpo.
2. Adición de la muestra problema con la mezcla de
antígenos o anticuerpos.
3. Unión del antígeno o anticuerpo específico al
anticuerpo o antígeno tapizado en el pocillo.
4. Lavado del pocillo para eliminar el exceso de antígeno
o anticuerpo no unido.
5. Adición del anticuerpo secundario marcado con la
enzima.
6. Unión del anticuerpo secundario al antígeno o
anticuerpo.
7. Lavado del pocillo para eliminar el exceso de enzima
no unida.
8. Adición del substrato.
9. Unión del substrato a la enzima.
10. Desarrollo del color.
Materiales:
• Pocillos: tienen fijado Ag o Ac en fase sólida
(depende del tipo de ELISA).
• Conjugado: Ac homólogo marcado con una
enzima.
• Sustrato: revela la interacción Ag-Ac.
• Solución de parada o Stop: detiene la reacción.
• Buffer o solución de lavado: sirve para eliminar
el exceso Ag-Ac no unido y el exceso de enzima no
unida.
• Calibradores: para realizar la curva de
calibración y saber concentración de la muestra. Si es
cualitativo para saber si está positivo o negativo.
81. Explique el complemento: Conjunto de
proteínas séricas que pueden ser superficiales o de
membrana que tienen la capacidad de unirse a
microorganismos y activarse una vía del sistema de
complemento (dependiendo de cómo sea el caso) que
ayuda a la activación de la inmunidad innata y
muchas veces a la inmunidad adaptativa, que tienen
como función la defensa del sistema inmune”. Está
conformado aprox. por 30 proteínas séricas, dentro
de las cuales hay proteasas (son de causa enzimática
que son las que forman la cascada de las vías del
complemento), inhibidores, inactivadores,
receptoras, y reguladoras.
82. Para que se utiliza PCR: Diagnosticar ciertas
enfermedades infecciosas. Identificar un cambio
genético que puede causar una enfermedad.
Encontrar cantidades pequeñas de células cancerosas
que podrían pasar desapercibidas en otros tipos de
pruebas.
83. Mencione los equipos componentes de la
PCR-ASA:
Lo que trae el kit de la PCR:
1) lamina de nitrocelulosa.
2) Determinantes antigénicos (proteínas de capsula y
proteínas de núcleo).
3) Sustrato.
4) Solución de lavado.
Lo que se necesita para la realización de una
PCR:
1) ADN polimerasas.
2) Cebadores (primers).
3) ADN molde.
4) Solución tampón.
5)Termociclador (aparato que regula la temperatura).
6) Una solución tampón
84. Procedimiento de la PCR:
1.- desnaturalización del ADN de doble cadena (1-9
min) para que pueda iniciar la reacción es preciso que
las moléculas de ADN se encuentren en forma de
cadena simple. Expuestas a una temperatura de 90-
95°c para que ocurra la ruptura de los enlaces de
puentes de hidrogeno.
2.- hibridación (20-40 seg) una vez que estas son
desnaturalizadas, hay que disminuir la temperatura
de la reacción hasta un rango entre 40-60°c para que
se produzca hibridación especifica de los cebadores.
3.-elongacion (5-15 min) la temperatura en la que se
realiza la reacción es a los 72°c ya que la polimerasa
alcanza su máxima actividad.
85. Diga las fases de la PCR-ASA, las
temperaturas y tiempo de cada una:
a) Desnaturalización → se da a una temperatura de
95 ºC por un tiempo de 1 a 9 minutos.
b) Hibridación → se da a una temperatura de 50 –
65 ºC por un tiempo de 20 a 40 segundos.
c) Elongación → se da a una temperatura de 7 ºC por
un tiempo de 5 a 15 minutos
86. Mencione las etapas de la PCR-ASA y
mencione los componentes que intervienen en esta
técnica:
a) Desnaturalización (ADN molde y ADN
polimerasa)
b) Hibridación (cebadores o primers y cadena molde)
c) Elongación (Taq-polimerasa)
87. Cuáles son los tipos de PCR: PCR tiempo real,
PCR digital, PCR-RT (transcriptasa inversa), PCR
múltiple, PCR cuantitativa y PCR anidasa
88. Western Blot que puedes identificar con cada
uno:
89. ELISA que hay adherido en cada poso de los
tipos de ELISA:
ELISA INDIRECTO: antígeno en los pocillos
ELISA COMPETITIVO: antígeno o anticuerpos
en los pocillos.
ELISA SANDWICH: anticuerpos en los pocillos.
90. En que se basan los BLOT: Técnicas basadas
en transferencia. La técnica de transferencia
(blotting) permite identificar la presencia de una
banda concreta en un gel de electroforesis, bien sea
de proteínas o ácidos nucleicos.
Los BLOT se fundamentan en la inmovilización de
proteínas, ARN o ADN en una membrana mediante
transferencia electroforética, para posteriormente
saturar todos los lugares de unión que poseen estas
proteínas o ácidos nucleicos para evitar la unión no
especifica de anticuerpos, luego se pasa a un proceso
de incubación con anticuerpos primarios contra la
proteína de interés o los ácidos nucleicos de interés,
luego se incuban con los secundarios se forma el
conjugado y se procede a realizar su revelación e
interpretar los resultados.
91. De acuerdo a los BLOT indique:
Westhern BLOT: Proteína, electrotransferencia
Sothrern BLOT: ADN, Difusión simple
Nouthern BLOT: ARN, Capilaridad
92. Cuáles son los soportes de la electroforesis en
el Blot: dependiendo de cada tipo de Blot
(WESTERN BLOT, SOUTHERN BLOT,
NORTHERN BLOT).
El soporte de WESTERN BLOT → el gel de
poliacrilamida
El soporte de SOUTHERN BLOT → el Agarosa,
Nylon
El soporte de NORTHERN BLOT → el
Nitrocelulosa, Nylon
93. Que es la transferencia: es el paso de un sitio a
otro en este caso en las técnicas de Blot, el paso de
una proteína, un ADN o de ARN hacia la membrana
94. Equipo de BLOT:
WESTERN BLOT y NORTHERN BLOT →
fotomultiplicador.
SOUTHERN BLOT → Colorimetría
95. Cuáles son los métodos de la
inmunofluorescencia y sus marcadores
Métodos → directo e indirecto.
Marcadores
Inmunofluorescencia Cuantitativos (Método
directo) → samario, europio, tiberio.
Inmunofluorescencia Cualitativas (Método
directo y indirecto) → fluoresceína, rodamina,
isotiocrato de fluoreceina
96. En la quimioluminiscencia la luz se da en
estado: → Basal
97. La electroquimioluminiscencia la reacción se
da en estado → estado excitado.
98. La electroquimioluminiscencia usa como
marcadores: rutenio y naranja de acridina.
99. ¿Que evalúa la citometría de flujo? o Con
respecto a la citometría de flujo Métodos que se
basan en su determinación: tamaño, complejidad y
marcaje con fluorocromos.
100. El citómetro de flujo está formado por:
Sistema eléctrico, sistema fluidrico, sistema óptico
101. La inmunofluorescencia indirecta utiliza
para su resultado el: Microscopio de
inmunofluorescencia
102. ¿Clasificación de la inmunofluorescencia y
que equipos utiliza cada una?:
Cuantitativa → Fluorometro
Cualitativa → Microscopio De Inmunofluorescencia
103. Fundamento de CH50: la reacción se inicia con
la interacción antígeno (glóbulos rojos de carnero)
con el anticuerpo (hemolisina) al agregar el suero del
paciente cuyos niveles de complemento se desean
investigar, se inicia la activación de la cascada de
proteínas desde C1-C9 con lo cual se obtiene la
destrucción de los glóbulos rojos. El grado de
hemolisis se calcula mediante lectura
espectrofotométrica. Los resultados se expresan en
unidades hemolíticas las cuales representan la
cantidad de complemento requerido para lograr la
hemolisis del 50% de los glóbulos rojos de una
suspensión estandarizada
104. Diga cual es la finalidad de la prueba de CH50
para complemento: esta prueba tiene la finalidad de
medir la vía clásica del complemento.
105. Fundamento inmunodifusión radial: Esta
técnica es de tipo inmunoprecipitación y consiste en
hacer reaccionar un antígeno con su anticuerpo
correspondiente en un medio semisólido. Este medio
puede ser de gel de agar o agarosa, en placa de cristal
o plástico, cuyo espesor sea uniforme y el anticuerpo
esté distribuido en él. El resultado final será la
formación de un anillo de precipitación. Estos geles
suelen estar coloreados para que la lectura se realice
con mayor facilidad. En los geles se hacen unos
pocillos de dimensiones determinadas y dentro de
ellos se dispensa la muestra donde queremos
cuantificar el antígeno.
106. Técnicas para determinar proteínas del
sistema de complemento: capacidad hemolítica 50
(CH50), inmunodifusión radial, inmunodifusión
doble, ELISA.
107. Mencione las técnicas de separación
linfocitaria: adherencia, tamaño y densidad.
108. Tipos de Inmunofluorescencia cuantitativa y
cualitativa:
Inmunofluorescencia cuantitativa: directa y es de
tipo competitivo en fase homogénea.
Inmunofluorescencia cualitativa: directa o
primaria, indirecta o secundaria, Indirecta
amplificada por el complemento.
109. Fundamento de la electroquimioluminis-
cencia: Esta técnica se considera de campo obscuro
ya que consiste en emisión de radiación
electromagnética mediante un infrarrojo producida
por una reacción química, cuando esta emisión
proviene de organismos vivos, se denomina
bioluminiscencia, este fenómeno luminiscente se
identifica tradicionalmente mediante un prefijo, que
identifica la fuente de energía responsable del inicio
de la emisión de radiación electromagnética. Este
inmunoensayo se genera a partir de sustratos
estables, que son productos capaces de emitir fotones
al pasar de un estado intermedio inestable y
energéticamente superior, a uno de energía inferior
más estable; aunque en este caso su origen es
electroquímico y no una reacción enzimática. Dicho
método es no competitivo, el anticuerpo utilizado
recubre unas micropartículas imantadas, que tras la
formación del complejo antígenoanticuerpo, se fijan
a un electrodo por magnetismo, dicho anticuerpo está
conjugado con un marcador (derivado del rutenio)
capaz de emitir fotones cuando se aplica una pequeña
diferencia de potencial sobre el electrodo. En
cualquier caso, la energía lumínica se sigue
detectando en un fotomultilpicador, así como la
intensidad de emisión es proporcional a la
concentración de las especies químicas implicadas en
la reacción QL
110. Función del citómetro de flujo: para
determinar el número de células, el porcentaje de
células vivas y ciertas características de las células
(como el tamaño y la forma) en una muestra de
sangre, médula ósea u otro tejido.
111. Marcadores de la quimioluminiscencia:
luminol, éster de acridina, peróxido de sodio
112. De las técnicas de laboratorio empleadas
para visualizar la interacción primaria de un
complejo ag.ac señale lo siguiente marcador y
sistema de detección: ELISA y RIA
113. De la electroquimioluminiscencia es un
ensayo: inmunoensayo.
114. ¿Qué determinamos en el método directo?:
antígeno
115. Fluorocromos: Sustancia que se emplea para
marcar anticuerpos u otras moléculas, por su
propiedad de emitir luz de una determinada longitud
de onda, cuando se le estimula con un láser o con luz
ultravioleta.
116. Es una de las determinaciones directa ag-ac: 127. Citocinas que tienen acción sobre los
ELISA mastocitos: IL-1, IL-4, IL-5, TNFα (factor de
117. Tipos de ELISA, marcadores reveladores: necrosis tumoral).
ELISA Indirecto, ELISA Competitivo, ELISA
Sandwich 128. Las citocinas actúan de acuerdo a su
marcadores reveladores: Peroxidasa de rábano. secreción en modo: Autocrino, paracrino y
Fosfatasa alcalina. B-galactosidasa. Glucosa endocrino.
oxidasa.
129. De acuerdo a la clasificación cuales de estas
118. RIA marcadores: Yodo 125 – carbono 14 – citocinas actúan en cada una
cromo51 – tritio. IL- FSC- IL- TNF- IL- IL-
3 GM 8 BETTA 12 10
119. Explique En Que Consiste EIA Homogenice: Inmuni-
es una técnica de inmunoadsorción utilizada para dad * * *
detectar antígenos mediante una fase liquida que Adquirida
modula la actividad enzimática de un marcador Hemato-
unido a un anticuerpo que va a reaccionar sin fase de * *
poyéticas
separación con el antígeno. Inmuni-
dad * * *
120. Mencione 3 Diferencias entre el EIA innata
homogéneo y el EIA heterogéneo:
130. Funciones de las citocinas:
EIA homogéneo: Unión de Antígeno-Anticuerpo, hematopoyesis
modula la actividad enzimática, Fase Liquida, No circulación celular del sistema inmune
tiene etapa de separación. inflamación
diferenciación, maduración y activación de células
EIA heterogéneo: Unión de Antígeno-Anticuerpo producción de anticuerpos
NO modula la actividad enzimática, Fase Solida, crecimiento de células
Requiere etapa de separación. estructuración y reparación de tejido.
121. Mencione los métodos de RIA → Competitivo 131. Menciones como está confirmado un kit de
(Directo) y no competitivo (No directo) ELISA y cuál es la función de cada uno
• Pocillos: tienen fijado Ag o Ac en fase sólida
122. EIA marcadores reveladores: fosfatasa (depende del tipo de ELISA).
alcalina. Beta- galactosidasa y peroxidasa de rábano.
• Conjugado: Ac homólogo marcado con una
123. Son citocinas con acción pleiotrópica: enzima.
Acciones biológicas actuando sobre diferentes • Sustrato: revela la interacción Ag-Ac.
células diana
• Solución de parada o Stop: detiene la reacción.
124. Son citocinas que estimulan la • Buffer o solución de lavado: sirve para eliminar
hematopoyesis: IL- 2, 3, 4, 5, 6, 7, 9, 11, 12, 13, 15, el exceso Ag-Ac no unido y el exceso de enzima no
GM-CSF, G-CSF, EPO, OMS, LIF, CDTF, growth unida.
hormona, prolactina.
• Calibradores: para realizar la curva de
calibración y saber concentración de la muestra. Si es
125. Factor inhibidor de la síntesis de citocinas:
cualitativo para saber si está positivo o negativo.
IL-10
132. Mencione como está constituido un kit de
126. Mediador de las respuestas inflamatorias
ELISA:
frente a infecciones y procesos inflamatorios: IL-
a) Anticuerpo de captura.
1
b) Anticuerpo de detección biotinilado.
c) Estándar masa calibrada.
d) Estreptavidina – HRP (enzima conjugado).
e) El protocolo detallado.
133. ¿Qué se determina mediante un RIA no
competitivo? → la presencia de antígenos por
método doble anticuerpo y la presencia de anticuerpo
por método indirecto.
134. ¿Cuál es el marcador utilizado en la técnica
de ELISA? → Enzimas.
135. Método de EIA que no necesita separar sus
fases → Homogéneo.
136. En cuanto a la aglutinación diga los tipos y
que pruebas realizamos con cada una
• Aglutinación directa: grupo y factor sanguíneo,
antígenos febriles
• Aglutinación indirecta: Proteína C reactiva,
Factor reumatoide, ASTO, Mono test, LES
137. Explique el procedimiento para realizar una
prueba de CH50 por ELISA
El enzimoinmunoensayo de CH50 para cuantificar la
actividad total de la vía clásica del complemento en
suero humano se divide en tres procedimientos
básicos: (1) activación del complemento, (2) dilución
de la muestra y (3) ensayo de los complejos de
complemento terminales (CCT).
Para activar la vía clásica del complemento, se
añaden muestras de suero humano sin diluir y los
controles a los pocillos de microensayo o tubos de
ensayo que contienen el activador. Durante la
incubación, se activa la vía clásica del complemento
y se generan los CCT.
En el segundo paso, se diluyen los sueros activados
en pocillos de microensayo o tubos de ensayo y se
aplican, junto con los patrones del kit, directamente
a una placa de microensayo. Los CCT presentes en
las muestras activadas se unen a los anticuerpos
monoclonales que recubren la superficie de los
pocillos de microensayo.
En el tercer paso, la placa de microensayo de CCT se
lava y se carga con un conjugado con peroxidasa de
rábano, que se unirá a los CCT unidos.
Después de lavarla, la microplaca de CCT se carga
con un sustrato de enzima cromogénico. Después de
la incubación, se añade un reactivo para detener la
formación de color.
Las absorbancias generadas con los controles,
patrones del kit y muestras del ensayo se miden
mediante una espectrofotometría. La intensidad del
color de la mezcla de reacción es proporcional a la
concentración de CCT presentes y a unidades de
CH50. Utilizando la curva estándar del kit, los
resultados del ensayo se expresan en equivalentes de
unidades de CH50 por mililitro (CH50 U Eq/mL).
138. Mencione las pruebas que se le realizan a un
paciente con COVID19 para si seguimiento en la
enfermedad
Hematología completa, fibrinógeno, Ferritina,
Dímero D, Procalcitonina, Proteína C reactiva, IL-6,
LDH, Transaminasas TGO y TGP.
139. Mencione las técnicas utilizadas en el área de
inmunología (mínimo 5)
• Aglutinación
• Precipitación
• Ensayo inmunoabsorbente ligado a una enzima
(ELISA)
• Inmunofluorescencia
• Citometría de flujo
140. Explique el procedimiento para determinar
Ig G para toxoplasma por la técnica de ELISA
1. Ajustar una estufa/baño de agua a 37±1ºC.
2. Sacar todos los reactivos 1 hora antes de la
realización del test para que alcancen la temperatura
ambiente, evitando sacar la placa del envase.
3. Agitar todos los componentes.
4. Sacar el número de pocillos necesarios para el
número de muestras que se van a procesar, más otros
cuatro pocillos, uno para el control positivo, uno para
el control negativo y dos para el suero cut off.
Colocar el resto de los pocillos en el sobre y volver a
cerrarlo.
5. Añadir 100 µl de diluyente de muestras a todos
los pocillos que se vayan a emplear. Añadir 5 µl de
las muestras, 5 µl del control positivo, 5 µl del suero
cut off (en duplicado), y 5 µl del control negativo en
los pocillos correspondientes. En el caso de la
realización manual del método, se agitará la placa en
un agitador (2 minutos) para garantizar una mezcla
homogénea de los reactivos. Si no es posible asegurar
esta agitación, debe hacerse una predilución de la
muestra en tubo o placa añadiendo el doble del
volumen de diluyente de muestras y de muestra.
Homogenizar con la pipeta y trasvasar seguidamente
105 µl de cada muestra ya diluida a los pocillos.
 6. Tapar mediante lámina adhesiva e incubar en
estufa/baño durante 45 minutos a 37±1ºC.
7. Retirar la lámina adhesiva, aspirar el contenido
de todos los pocillos y lavar cada uno de ellos 5 veces
con 0,3 ml de solución de lavado, asegurándose que
no quedan restos de solución de lavado.
8. Añadir inmediatamente 100 µl de conjugado
IgG a todos los pocillos.
9. Tapar mediante lámina adhesiva e incubar en
estufa/baño durante 30 min. A 37±1ºC.
10. Retirar la lámina adhesiva, aspirar el
contenido de todos los pocillos y lavar cada uno de
ellos 5 veces con 0,3 ml de solución de lavado,
asegurándose que no quedan restos de solución de
lavado.
11. Añadir inmediatamente 100 µl de solución de
sustrato a todos los pocillos.
12. Incubar a temperatura ambiente durante 20
minutos, en la oscuridad.
13. Añadir inmediatamente 50 µl de solución de
parada a todos los pocillos.
14. Valorar espectrofotométricamente a 450/620
nm, antes de 1 hora de acabado el ensayo
141. Explique en que se basa la técnica de
inmunocromatográfica y cuál es el procedimiento
La inmunocromatografía se basa en la migración
de una muestra a través de una membrana de
nitrocelulosa. La muestra es añadida en la zona del
conjugado, el cual está formado por un anticuerpo
específico contra uno de los epítopos del antígeno a
detectar y un reactivo de detección. Si la muestra
contiene el antígeno problema, éste se unirá al
conjugado formando un complejo inmune y migrará
a través de la membrana de nitrocelulosa. Si no,
migrarán el conjugado y la muestra sin unirse.
La zona de captura está formada por un segundo
anticuerpo específico contra otro epítopo del
antígeno. Al llegar la muestra a esta zona, los
complejos formados por la unión del antígeno y
conjugado quedarán retenidos y la línea se coloreará
en este caso como rosa o azul (muestras positivas).
En el caso contrario las muestras son negativas.
La zona control está formada por un tercer
anticuerpo que reconoce al reactivo de detección.
Cuando el resto de muestra alcanza esta zona, el
anticuerpo se unirá al conjugado libre que no ha
quedado retenido en la zona de captura. Esta línea es
un control de que el ensayo ha funcionado bien,
porque se colorea siempre, con muestras positivas y
negativas.
142. Explique cómo realizar un ELISA para
determinar ANA
1. Retire los componentes individuales del kit del
almacenamiento y permita que alcancen la
temperatura ambiente (20 - 25 °C).
2. Determine el número de micropocillos necesarios.
Calcule seis determinaciones de control o calibrador
(un blanco de reactivo, un control negativo, tres
calibradores y un control positivo) por serie. En cada
prueba se debe analizar un blanco de reactivo.
Compruebe que las configuraciones de controles y
calibrador sean correctas en los requisitos del
programa y del lector. Devuelva las tirillas no usadas
a la bolsa resellable con desecante, séllela y
devuélvala a su almacenamiento entre 2 y 8 °C.
3. Prepare una dilución 1:21 (por ejemplo: 10 µl de
suero + 200 µl de diluyente para muestras) del
control negativo, del calibrador, del control positivo
y de cada suero de paciente.
4. A cada micropocillo se añaden 100 l de cada
control diluido, calibrador y muestra de paciente.
Compruebe que las muestras estén bien mezcladas.
Utilice una punta de pipeta diferente para cada
muestra.
5. Añada 100 µl de diluyente para muestras al
micropocillo A1 como blanco de reactivo.
Compruebe que la configuración del micropocillo
del blanco de reactivo sea correcta en los requisitos
del programa y del lector.
6. Incube la placa a temperatura ambiente (20 - 25
°C) entre 60 y 65 minutos.
7. Lave las tirillas de micropocillos 5 veces.
8. Agregue 100 µl de conjugado a cada micropocillo,
incluido el micropocillo del blanco de reactivo, a la
misma velocidad y en el mismo orden en que se
agregaron las muestras.
9. Incube la placa a temperatura ambiente (20 - 25
°C) entre 30 y 35 minutos.
10. Lave los micropocillos siguiendo el
procedimiento descrito en el paso 7.
11. Agregue 100 µl de TMB a cada micropocillo,
incluido el micropocillo del blanco de reactivo, a la
misma velocidad y en el mismo orden en que se
agregaron las muestras.
12. Incube la placa a temperatura ambiente (20 - 25
°C) entre 30 y 35 minutos.
13. Detenga la reacción añadiendo 50 µl de la
solución para detener la reacción a cada
micropocillo, incluido el micropocillo del blanco de
reactivo, a la misma velocidad y en el mismo orden
en que se agregó la TMB. Las muestras positivas
cambiarán de azul a amarillo. Después de agregar la
solución para detener la reacción, dé unos cuantos
golpes secos a la placa para asegurarse de que las
muestras estén bien mezcladas.
14. Ajuste la longitud de onda del lector de
micropocillos a 450 nm y mida la densidad óptica
(DO) de cada micropocillo con respecto al blanco de
reactivo. Lea la placa en los 30 minutos posteriores a
la adición de la solución para detener la reacción.
143. Cuáles son las células presentadoras de
antígeno → Linfocito B, células dendríticas y
macrófagos.
144. Para que se realiza las poblaciones
linfocitarias → Método para detectar Ag o Ac sobre
la superficie celular utilizando partículas revestidas
de Ag o Ac con el resultado de eritrocitos que forman
un patrón de Rosetas. Permiten medir la inmunidad
celular sobre todo en pacientes que presentan VIH,
Lupus, enfermedades autoinmunes puede utilizarse
para la monitorización del estado inmunológico.
145. Mencione dos convertasas de la vía clásica y
alterna del complemento
Clásica → C4bC2a (convertasa de C3) y
C4bC2aC3b (convertasa de C5)
Alterna → C3bBb (convertasa de C3) y C3bBbC3b
(Convertasa de C5)
146. Mencione el método para separar linfocitos T
de uso preferencial → ficoll-hypaque.
147. Explique cómo está constituida una roseta
EAC y una E:
Roseta E → Constituida por un eritrocito rodeado por
linfocitos T (→ Linfocito T, receptor CD2 o T11 y
más de 3 glóbulos rojos)
Roseta EAC → Linfocitos B con receptor de
complemento y más de 3 glóbulos rojos.
148. Explique en que se basa el método de ficall-
hypaque → Ficoll: es un polímero de sacarosa y
epiclorhidrina muy soluble en agua de alto peso
molecular (400.000 aa). Las moléculas son muy
ramificadas y casi esféricas de baja viscosidad y baja
actividad osmótica. Hypaque: el trizoato de sodio es
una solución sódica de 3,5 dicecitamida, 2,4,5
triyodo, acido benzoico, este produce una densidad
optima y una osmolaridad necesaria para la remoción
de otras células de la capa de linfocitos. Es una
técnica de centrifugación por gradiente de densidad
para separar linfocitos
149. Explique el fundamento de ficoll-hypaque →
la separación al estratificar una muestra de sangre
sobre el ficoll-diatrizoato y centrifugar, las células
mononucleares se separan de las demás debido a
diferencias de densidad. Como se mencionó, el ficoll
aglutina los eritrocitos, por lo que estos pasan a
través del medio y sedimentan al fondo. Los
granulocitos también sedimentan por su tamaño y
densidad, y por su tendencia a formar agregados. Los
mononucleares (linfocitos y monocitos), por su
menor densidad, se quedan en la interfase entre el
plasma y el medio, con una contaminación
relativamente baja de plaquetas y otros tipos
celulares. Al final de la centrifugación, los leucocitos
mononucleares se recogen del anillo blanco que se
forma en la interfase entre el plasma y el ficoll-
diatrizoato
150. Para que se realizan las poblaciones
linfocitarias → permiten medir la inmunidad celular
sobre todo en pacientes que presentan VIH, Lupus,
enfermedades autoinmunes, puede utilizarse para la
monitorización del estado inmunológico.
151. Explique cómo se realiza una inmunodifusión
radial (pasos) a) En placas de agar que contienen
antígeno contra las Igs, estas contienen orificios para
12 pacientes b) Se va a agregar 5 landas de muestra
de suero del paciente que contiene las proteínas, en
posición adecuada con pipeta. c) Se dejarán un
periodo de incubación de 18 – 24 horas por cada
orificio a temperatura ambiente. Luego con la
formación de ese halo de difusión (complejo
formado por el Ac-Ag) con una regla se medirá
cuantos mm hay, de acuerdo a una tabla estándar se
verá el valor, pues esa área es proporcional a
concentración de antígenos de muestra.
152. Describa Los Métodos De La
Inmunofluorescencia: Inmunofluorescencia
Directa: Es útil para hallar antígenos directamente
en la muestra, para lo cual emplea anticuerpos de
gran especificidad contra el determinante antigénico
que se va a estudiar, marcados con la sustancia
fluorescente. Otra aplicación que tiene es la
determinación de linfocitos y sus subpoblaciones
que, en la mayoría de los casos, utiliza anticuerpos
monoclonales marcados. La solución de anticuerpos
fluorescentes se aplica sobre el corte, se incuba y se
lava. Los anticuerpos unidos se revelan después con
un microscopio provisto de lámpara de luz
ultravioleta. La luz ultravioleta se dirige hacia el
corte a través del objetivo, con lo que el campo queda
oscuro y las áreas con anticuerpo presentan
fluorescencia verde. El patrón de fluorescencia es
característico para cada antígeno hístico.
Inmunofluorescencia indirecta: Su utilidad
consiste en encontrar la presencia de anticuerpos
específicos contra un determinado microorganismo.
Este puede ser del tipo M, G y A, y se evidencia
mediante un anti-anticuerpo marcado con la
sustancia fluorescente. Si se tiene en cuenta que con
esta prueba se detecta el isotipo del anticuerpo, los
diagnósticos de enfermedades se pueden realizar con
una sola muestra cuando se está analizando la
presencia de IgM como indicadora de infección
aguda, o con dos muestras seriadas trabajadas
posteriormente para determinar el aumento o
disminución en los títulos de la IgG. El anticuerpo se
aplica sobre el corte; luego, después de lavarlo, con
él se prepara anti inmunoglobulina fluorescinada
añadiendo antisuero. Utiliza un marcador que va a ser
un anticuerpo homologo unido a un fluorocromo.
153. Mencione el procedimiento de un ELISA
DIRECTO (solo es necesario mencionar los
reactivos no cantidades):
Fijación al soporte insoluble (“tapizado”) de
anticuerpos específicos.
Lavado con solución salina como agente tensoactivo
para eliminar los Acs fijados deficientemente o no
fijados.
Adición de Ags marcados (“conjugados”) con una
enzima si los Acs reaccionan quedara solubilizado.
Adición de un substrato sobre el que sea capaz de
actuar la enzima marcadora.
Lectura visual o colorimétrica del producto final
coloreado.
154. Mencione el procedimiento de un ELISA
INDIRECTO (solo es necesario mencionar los
reactivos no cantidades):
Se utiliza para determinar anticuerpos
Se utiliza placas con pozos
Se coloca un Antígenos en fase solida
Se agrega Suero del paciente, que contiene los
anticuerpos
Se incuba a 37 grados (dependiendo de la casa
comercial)
Se realiza un lavado para eliminar el exceso de
antígenos o anticuerpos
Forma la reacción Ag-Ac (No Marcada)
Se adiciona el conjugado (anticuerpo con enzima)
Incubar a 37 grados
Lavado para eliminar exceso de enzima
Reacción Antígeno-anticuerpo (Marcada)
Se le adiciona sustrato (Catalizador para la enzima
produzca color)
Observar cualitativamente y cuantitativamente
(espectrofotómetro)
Interacción emite color, indica presencia de
anticuerpos, (Positivo de la Prueba)
Interacción no emite color, no indica presencia de
anticuerpos, (Negatividad de la Prueba)
Modelos de Preguntas 10mo Semestre
1) haga una dilución seriada con 50 Landas de
suero para obtener un volumen total de 3ml
2) diga el procedimiento de un Elisa indirecto
Se utiliza para determinar anticuerpos
Se utiliza placas con pozos
Se coloca un Antígenos en fase solida
Se agrega Suero del paciente, que contiene los
anticuerpos
Se incuba a 37 grados (dependiendo de la casa
comercial)
Se realiza un lavado para eliminar el exceso de
antígenos o anticuerpos
Forma la reacción Ag-Ac (No Marcada)
Se adiciona el conjugado (anticuerpo con enzima)
Incubar a 37 grados
Lavado para eliminar exceso de enzima
Reacción Antígeno-anticuerpo (Marcada)
Se le adiciona sustrato (Catalizador para la enzima
produzca color)
Observar cualitativamente y cuantitativamente
(espectrofotómetro)
Interacción emite color, indica presencia de
anticuerpos, (Positivo de la Prueba)
Interacción no emite color, no indica presencia de
anticuerpos, (Negatividad de la Prueba)
3) Que son las enfermedades autoinmunes, En estudios
clasificación y diga 3 ejemplos de cada una forenses al
terminar
Estas enfermedades se producen cuando el propio pequeños
organismo reacciona ante el huésped de forma venenos en
maligna provocando enfermedades del sistema el aire Especialmente
inmunológico que provocan afectaciones sistemas u analizando durante la
órgano especificas o una mezcla entre afectaciones especies hibridación del
sistemas y órgano específicas. Usos inorgánicas y ADN Se utilizan
organicas en etiquetas
Enfermedades sistémicas o no órgano específicas. soluciones. electroquimiolumi-
1) Lupus Eritematoso Sistémico. Deteccion y niscentes
2)Artritis Reumatoide. ensayo de
4) Esclerodermia biomoléculas
5) Dermatomiositis durante
ELISA y
Enfermedades autoinmunes órgano especificas Western Blot
1) Tiroiditis de Hashimoto. Luminol,
2) Enfermedad de Gravis Éster de Complejo de
Marca-
3) Enfermedad de Addison acridinio, rutenio y
dores
4)Orquitis autoinmune. Hidróxido de Tripopilamina
5) Miastenia gravis. sodio

4) métodos para determinar complemento 7) características de anticuerpo: Neutralización,

C3 C4 Complemento total (también conocido como opsonización, activar la vía del complemento,
CH50 o CH100) Actividad total hemolítica del activación de las células NK y neutrófilos
complemento
8) nombre 5 equipos exclusivo del área de inmuno
Elisa, Inmunodifusión Radial, Nefelometría, serología
Turbidimetría
Nefelómetro, equipo de quimioluminiscencia,
5) procedimiento para despistaje de sífilis microscopio de fluorescencia, lector de ELISA,
La misma respuesta de la pregunta 14 fotomultiplicador

6) Diferencias entre quimioluminicensia y 9) haga un esquema de los donantes y receptores

electroquimioluminicescia y diga el receptor universal y el donador universal
Quimio Elecrtro
El electro es la
La quimio es emisión de luz Puede Donar Puede Recibir
la emisión de debido a una A De
Defini- luz como reacción A+, A-, O+,
ción resultado de electroquímica que A+ A+, AB+
O-
una reacción ocurre en la A+, A-, AB+,
quimica superficie de un A- A-, O-
AB-
electrodo B+, B-, O+,
Ocurren- Reacción Reacción B+ B+, AB+
O-
cia quimica electroquímica B+, B-, AB+,
Necesidad B- B-, O-
AB-
de un AB+
NO SI TODOS LOS
electrodo de (Receptor AB+
superficie GRUPOS
Universal)
 A-, B-, AB-,
AB- AB+, AB-
O- 15. Explique cómo se procesa una prueba de
A+, B+, AB+, toxoplasma IgM
O+ O+, O-
O+
O- (Donante TODOS LOS 1. Ajustar una estufa/baño de agua a 37±1ºC.
O- 2. Sacar todos los reactivos 1 hora antes de la
Universal) GRUPOS
realización del test para que alcancen la temperatura
10) mencione las pruebas que se hacen en ambiente, evitando sacar la placa del envase.
epidemiología 3. Agitar todos los componentes.
Hepatitis, HIV, Chagas, sífilis, rubeola, dengue y 4. Sacar el número de pocillos necesarios para el
sarampión número de muestras que se van a procesar, más otros
cuatro pocillos, uno para el control positivo, uno para
11) 5 pruebas para el seguimiento de COVID el control negativo y dos para el suero cut off.
Hematología completa, fibrinógeno, Ferritina, Colocar el resto de los pocillos en el sobre y volver a
Dímero D, Procalcitonina, Proteína C reactiva, IL-6, cerrarlo.
LDH, Transaminasas TGO y TGP 5. Añadir 100 µl de diluyente de muestras a todos
los pocillos que se vayan a emplear. Añadir 5 µl de
12. Diga 4 pruebas de precipitación, Elisa y las muestras, 5 µl del control positivo, 5 µl del suero
aglutinación cut off (en duplicado), y 5 µl del control negativo en
los pocillos correspondientes. En el caso de la
Precipitación: C3, C4, transferrina (inmunodifusión realización manual del método, se agitará la placa en
radial), electroforesis de Hb (Inmunoelectroforesis) un agitador (2 minutos) para garantizar una mezcla
homogénea de los reactivos. Si no es posible asegurar
Elisa: Insulina, Toxo IgM IgG, troponina, Hepatitis esta agitación, debe hacerse una predilución de la
A, hepatitis B muestra en tubo o placa añadiendo el doble del
volumen de diluyente de muestras y de muestra.
Aglutinación: GS, Factor Rh, Proteína C reactiva, Homogenizar con la pipeta y trasvasar seguidamente
Asto, RATEST 105 µl de cada muestra ya diluida a los pocillos.
6. Tapar mediante lámina adhesiva e incubar en
13. Despistaje de VIH estufa/baño durante 45 minutos a 37±1ºC.
Se realiza prueba rápida por inmunocromatografía, si 7. Retirar la lámina adhesiva, aspirar el contenido
está resulta reactiva se le realiza otra prueba rápida de todos los pocillos y lavar cada uno de ellos 5 veces
de diferente lote, al tener 2 pruebas rápidas reactivas con 0,3 ml de solución de lavado, asegurándose que
se le debe realizar HIV de 4ta generación, si este no quedan restos de solución de lavado.
resulta reactivo se solicita prueba confirmatoria 8. Añadir inmediatamente 100 µl de conjugado
Western blot. IgG a todos los pocillos.
9. Tapar mediante lámina adhesiva e incubar en
estufa/baño durante 30 min. A 37±1ºC.
14. Procedimiento de un VDRL 10. Retirar la lámina adhesiva, aspirar el
contenido de todos los pocillos y lavar cada uno de
PROCEDIMIENTO Tanto los reactivos como la ellos 5 veces con 0,3 ml de solución de lavado,
muestra deben estar a temperatura ambiente antes de asegurándose que no quedan restos de solución de
realizar la prueba. lavado.
11. Añadir inmediatamente 100 µl de solución de
I- PRUEBA CUALITATIVA En cada uno de los sustrato a todos los pocillos.
sectores delimitados de la placa colocar: Muestra o 12. Incubar a temperatura ambiente durante 20
Control Positivo 50 ul Con gotero provisto colocar minutos, en la oscuridad.
13. Añadir inmediatamente 50 µl de solución de
Reactivo A 1 gota: Agitar horizontalmente la placa parada a todos los pocillos.
a 180 rpm durante 4 minutos. Observar 14. Valorar espectrofotométricamente a 450/620
inmediatamente en microscopio con poco aumento nm, antes de 1 hora de acabado el ensayo
(10 X).
16. 5 pruebas que se hagan por 19. Autoinmunidad primaria y secundaria e
inmunofluorescencia ejemplos
ANA, AC Anticitoplasma del neutrófilo, SM (anti- Autoinmunidad Primaria:
Smith, FTABs Artritis reumatoide.
Diabetes tipo 1.
17. 5 técnicas que se realizan en inmunología Enfermedad de Addison.
• Aglutinación Esclerosis múltiple.
• Precipitación Lupus.
• Ensayo inmunoabsorbente ligado a una enzima Miastenia grave.
(ELISA) Síndrome de Guillain-Barré
• Inmunofluorescencia
• Citometría de flujo Autoinmunidad Secundaria:
Tiroiditis de Hashimoto
18 ¿Que es la hipersensibilidad? clasificación y Síndrome de Sjögren
ejemplos de cada una Esclerodermia
Reacción exagerada antes la presencia de antígenos Dermatomiositis
inocuos, cuando se le da repuesta a ciertos patógenos Enfermedad inflamatoria intestinal
se puede producir un exceso de inmunidad que daña
al huésped más que al propio organismo. 20. ¿qué es un cut off?
Por sus características clínicas: dependiendo del Es un punto de corte que se establece para poder
tipo de reacción determinar si una prueba esta positivo o negativo, el
✓ Inmediatas cut off se usa para pruebas infecciosas. Cada inserto
✓ Tardías tiene su propia formula de cut off a partir de un
✓ Retardadas control (se ensaya 3 veces el control) que dará 3
absorbancias se saca el promedio, se suma el
Por el tipo de respuesta inflamatoria: promedio de las absorbancias con el valor estándar
✓ Reacción mediada por anticuerpos de la casa comercial de la prueba, así se obtiene el cut
✓ Reacción mediada por inmunidad celular off (Forma General de obtenerla la mayoría de las
Clasificación (Gell y Coombs): pruebas). NOTA: Luego de obtener el cut off se
Hipersensibilidad I → Hipersensibilidad divide con la absorbancia del paciente y ese sería el
inmediata (Mecanismo: IgE) Anafilaxis Sistémica, valor real del paciente.
Inflamación local, rinitis alérgica, asma bronquial,
alergia alimentaria. Corte (Cut-off): el punto de respuesta al ensayo por
debajo del cual se determina que el resultado de un
Hipersensibilidad II → Citotóxica Inmediata ensayo cualitativo y cuantitativo es negativo y por
(Mecanismo: IgG, IgM) Anemia hemolítica encima de este valor se considera que el resultado es
autoinmune, Púrpura trombocitopénica, Fiebre positivo.
reumática aguda, Miastenia gravis, Enfermedad de
Graves y Diabetes insulinoresistente Calculo del valor de corte:
CN + 0,125 – Valor de Corte (Co)
Hipersensibilidad III → Complejos Ag-Ac
(tardía) (Mecanismo: IgG) Vasculitis arteritis, Interpretación de Resultados
glomerulonefritis, artritis, reacción de Arthus, Rash Menor a 1 es NEGATIVO
cutáneo, Pulmón de granjero Mayor a 1 es POSITIVO

Hipersensibilidad IV → Hipersensibilidad ¿Qué condiciones pueden producir alteraciones

Retardada (Mecanismo: Linfocitos sensibilizados)
Hipersensibilidad retardada, por contacto, con
granulomas, por células Tc y Enteropatía sensible al
gluten (enfermedad celiaca)
en las proteínas del sistema de complemento?
DISMINUCIÓN: Los componentes del
complemento pueden encontrarse disminuidos por
déficits hereditarios (relativamente raros) o debido a
un exceso de consumo. Los déficits hereditarios en
una o más proteínas del complemento suelen
conllevar una alta frecuencia de infecciones
bacterianas recurrentes o enfermedades
autoinmunes. Los niveles de C3 y C4 generalmente
están disminuidos en el lupus, mientras que C3 sólo
es bajo en septicemia e infecciones causadas por
hongos o parásitos como la malaria. Si el déficit se
debe a un trastorno subyacente agudo o crónico, los
niveles del complemento volverán a la normalidad
una vez resuelto dicho trastorno.
• Infecciones microbianas recurrentes (generalmente
bacterianas)
- Deficiencia de C5, C9, factor B, el factor D, o
properdina: susceptibilidad a las infecciones por
Neisseria
ampliamente solicitada que es la proteína C reactiva
(PCR).
También se puede observar una mayor actividad del
complemento en los siguientes casos:
• Cáncer (leucemia, linfoma de Hodgkin, sarcoma)
• Colitis ulcerosa
• Tiroiditis
• Infarto agudo del miocardio
• Sarcoidosis
• Artritis reumatoide Juvenil

- Deficiencia en C1, C2, C3, MBL, serina

proteasa asociada a MBL (MASP-2), factor H, factor
I, o el receptor 2 del complemento (CR2): provoca
susceptibilidad a infecciones bacterianas recurrentes

• Enfermedades autoinmunes, como LES o artritis

reumatoide.

- Defectos en C1, C4 y C5: lupus eritematoso

sistémico

• Angioedema hereditario o adquirido

• Diversas enfermedades renales, entre ellas:
glomerulonefritis, nefritis lúpica, nefritis
membranosa, nefropatía por IgA, así como el
rechazo del trasplante de riñón.

• Cirrosis
• Hepatitis
• Malnutrición
• Septicemia, shock

• Enfermedad del suero (enfermedad por

inmunocomplejos)

AUMENTO:
Las proteínas del complemento suelen encontrarse
elevadas juntamente con otras proteínas conocidas
como proteínas de fase aguda, durante una
inflamación crónica o aguda. Todas estas proteínas
volverán a niveles normales una vez se haya resuelto
el trastorno subyacente. Sin embargo, no es habitual
medir las proteínas del complemento en estas
circunstancias, en comparación con la prueba más