ANEMIAS HEMOLITICAS AUTOINMUNES

AHAI
Son un cuadro de fenómenos que alteran la vida media de los glóbulos rojos del paciente y en los que se observa
un componente inmune que genera este fenómeno. Dentro de este grupo de patologías se tienden a ser
clasificadas de si existe o no alguna patología subyacente que explique este fenómeno y también de acuerdo a
las características inmunes que presenta este fenómeno. Cuando hablamos de características inmunes se refiere
principalmente al rango térmico del anticuerpo o del componente del sistema inmune que está generando la
destrucción de los eritrocitos o el acortamiento de la vida media.

AHAI: la anemia hemolítica autoinmune se define como el aumento de la destrucción de glóbulos rojos en
presencia de auto anticuerpos anti eritrocitarios con o sin activación del complemento.
Cuando hablamos de AHAI inmediatamente se nos viene a la mente el test de Coombs que a pesar de ser una
técnica sencilla, no es una técnica menos importante porque la realización de dicho test en estas patologías es
el examen diagnostico esencial que nosotros debemos realizar para poder determinar si existe un componente
inmune que está provocando el acortamiento de la vida media de los glóbulos rojos y posterior a esto si nuestro
test de Coombs directo (detecta moléculas de IgG y C3d sobre la membrana del eritrocito) es positivo (poli
específico) posteriormente debemos realizar un test de Coombs directo mono específico para determinar de
forma diferencial que moléculas están sobre la membrana del eritrocito que están provocando su inmunización
y posterior destrucción. Debemos saber si solo existe IgG sobre la membrana, si existe IgG mas C3d, si existe
IgG-IgM-IgA. Por lo tanto, es sumamente importante realizar el test de Coombs directo mono específico para
determinar la proteína o la molécula que esta sobre la membrana del eritrocito y que provoca la destrucción. A
pesar de ser una técnica sencilla, debe ser minuciosa cumpliendo con todos los protocolos para no obtener
resultados falsos positivos que podrían interferir en una correcta realización y posterior interpretación de los
resultados.

DIAGNOSTICO Y LABORATORIO: el diagnóstico se basa principalmente en la prueba de anti globulina

directa (PAD O TCD), que detecta la presencia de anticuerpos fijados o fracciones del complemento in vivo sobre
la membrana del eritrocito.

Técnica de tarjeta de gel: específica para realizar a la muestra

test de Coombs directo de tipo mono específico en el cual se
puede detectar IgG, IgA, IgM, C3c, C3d. Además, trae su control
para validar la técnica. Es de suma importancia la realización
de este screening diferencial del test de Coombs directo
porque no orienta que tipo de patología o qué tipo de anemia
hemolítica estamos enfrentando.

PRUEBA ANTIGLOBULINA DIRECTA-FUNDAMENTO

Técnica diseñada en 1945. Los investigadores diseñaron un anticuerpo que iba dirigido contra las regiones Fc de
las inmunoglulinas, era un anticuerpo anti anticuerpo que detectaba las regiones Fc de los anticuerpos y
fracciones del complemento. Cuando ocurría la detección se generaba na aglutinación de los glóbulos rojos y
podían visualizarlos anticuerpos de tipo IgG que hasta 1945 se conocían como anticuerpos incompletos porque
si bien se demostraba que estaban involucrados en procesos hemolíticos e inmunes, no se podía detectar su
presencia por pruebas de aglutinación normales, frente a esto, gracias a la aparición del reactivo ya se pudo
demostrar la presencia de estos anticuerpos sobre la membrana de los glóbulos rojos y además se permitió
descubrir un sinfín de sistemas y antígenos que permanecían o que tenían naturaleza de tipo IgG.
Para realizar la técnica lo primero que debemos saber es que, si se realiza en tubo los glóbulos rojos a estudiar
deben estar lavados a modo de poder retirar de la muestra anticuerpos, complemento u otras globulinas que
nosotros no necesitemos determinar y que nos podrían estar inactivando nuestro suero antiglobulina humana.
Se deben realizar lavados adecuados antes de proceder a procesar la muestra.
Podemos tener falsos negativos porque el reactivo se puede neutralizar porque el suero antiglobulina humana
tiene mayor afinidad por anticuerpos y complemento libre que por anticuerpos que están fijados sobre la
membrana de los glóbulos rojos, por lo tanto, existe una competencia entre globulinas y complemento libres n
el plasma con los que están adheridos a la membrana del eritrocito.
Luego del lavado, los glóbulos rojos deben ser rápidamente estudiados, no debemos dejar pasar mucho tiempo
ya que se puede producir un fenómeno de elución que es cuando se produce la liberación de los anticuerpos y
de las fracciones del complemento que están sobre la membrana del eritrocito, lo que nos podría dar un falso
negativo. Las muestras a estudiar deben ser en EDTA el cual al ser un quelante del calcio evita la fijación del
complemento in vitro. Es decir, posterior a la toma de muestra evitamos tener un falso positivo por adhesión y
activación del sistema del complemento posterior a la toma de muestra.
La prueba presenta un valor predictivo de 83% en un paciente con anemia hemolítica y 1.4% en pacientes sin
anemia hemolítica (el test toma más importancia y relevancia cuando se le realiza a personas que cursan con
anemia hemolítica). Los pacientes sanos pueden presentar cantidades reducidas de IgG sobre los glóbulos rojos
(5-90) y C3d (5-40), dependiendo de la técnica utilizada el CUT-OFF o umbral de detección (cuanto es capaz de
detectar el reactivo) es de 100-500 moléculas de IgG y 400-1100 moléculas de C3d. Por lo tanto, si sobre la
membrana de los glóbulos rojos hay cantidades mínima de IgG o C3d el reactivo no será capaz de detectarlos
ya que el umbral es para altas concentraciones.

ESTUDIO MUESTRA CON PAD POSITIVA

Un resultado positivo por si solo NO es diagnóstico. Se necesita evaluar junto a antecedentes del paciente:
1- Evidencia de destrucción de eritrocitos in vivo. Evaluar si el paciente tiene algún síntoma o manifestación
que puedan estar relacionados con la destrucción in vivo como aumento de hemoglobina, LDH,
disminución de haptoglobina, hemoglobinuria, aumento de bilirrubina no conjugada, ictericia, aumento
de reticulocitos.
2- Antecedentes transfusionales recientes: descartar que no haya tenido transfusiones previas que
pudieron haber generado una reacción adversa a la transfusión de tipo hemolítica, o sea que se hayan
transfundido glóbulos rojos incompatibles que puedan producir y provocar la sensibilización de los
glóbulos rojos transfundidos y darnos el Coombs positivo.
3- Administración de medicamentos asociados con HI (hemolisis de tipo inmune)
 4- Historia de trasplante de CPH (células progenitoras hematopoyéticas) o trasplante de órganos: para
descartar el síndrome del linfocito pasajero ya que en los órganos o célula se pueden quedar linfocitos
que van a comenzar a secretar anticuerpos que pueden ir dirigidos contra estructuras antigénicas
propias del receptor.
5- Administración de inmunoglobulina endovenosa: la inmunoglobulina de uso clínico es un derivado
obtenido del plasma de donantes por lo tanto en el plasma también pueden ir anticuerpos de tipo IgG o
IgM que puedan reconocer estructuras antigénicas eritrocitarios y dar un TAD positivo.

INVESTIGACION SEROLÓGICA
Dentro de la investigación serológica que posteriormente al test de Coombs se debe realizar debemos:
✓ Estudiar los glóbulos rojos de la muestra PAD positivo con reactivos poli específicos que detecta tanto
IgG como C3d y posteriormente viene el estudio más detallado para determinar específicamente qué es
lo que recubre a los glóbulos rojos con un test de Coombs directo mono específico.
✓ Estudiar el suero o plasma del paciente para detectar e identificar anticuerpos irregulares clínicamente
significativos.
✓ Glóbulos rojos que están con un TAD positivo someterlos a proceso de elución para liberar y separar la
reacción antígeno-anticuerpo presente en los glóbulos rojos dejando libre para el estudio el anticuerpo
o fracción del complemento y determinar su reactividad.

¿QUÉ ES LA AHAI?
✓ Autoreactividad: es una enfermedad infrecuente (alrededor de un 5% de todas las anemias hemolíticas,
es autoinmune) pero grave en que los anticuerpos generados por un individuo reconocen ags de sus
propios eritrocitos.
✓ Hemólisis: los anticuerpos producen el acortamiento de la vida media de los glóbulos rojos (120 días).
Depende del tipo de anticuerpo y de la gravedad de la patología.
✓ Defecto en los sistemas de control: el organismo y principalmente el sistema inmune tienen sistemas de
control para eliminar las células que detectan o autorreaccionan (linfocitos autorreactivos) con ags que
son propios. Falla el mecanismo de regulación para eliminar estas células autorreactivas.
** hay un grupo de anemias hemolíticas autoinmunes que cursan con Coombs directo negativo. Esto no
quiere decir que no se produzca por proteínas o componentes del sistema inmune, si no que cuando se
estudia no se detectan anticuerpos ni fracciones del complemento sobre la membrana de los glóbulos rojos.
Se ha determinado que este grupo da negativo al test de Coombs porque presentan muy baja concentración
de anticuerpo de tipo IgG lo que está relacionado con el umbral de detección, porque este tipo de anemia
está producida por un tipo de inmunoglobulina diferente a la IgG como IgM o IgA, y también puede ser que
los anticuerpos de tipo IgG tienen baja afinidad por el antígeno, por lo tanto, con los lavados con PBS se
desprenden y no son descubiertos.

CLASIFICACION DE AHAI
✓ ANEMIA HEMOLITICA POR ANTICUERPOS CALIENTES (AHAIC): Son el 70-75% del total de anemias
hemolíticas.
✓ SÍNDROME DE CRIOAGLUTININAS (SCA)
✓ ANEMIA HEMOLÍTICA MIXTA (AHAIM)
✓ HEMOGLOBINURIA PAROXÍSTICA “A FRIGORE” (HPF)

AUTOANTICUERPOS ¿CÓMO SE PRODUCEN?

De acuerdo a algunos estudios, uno de ellos hace alusión al concepto de MIMETISMO MOLECULAR y que se
da cuando el cuadro de anemia hemolítica autoinmune es secundario a algún proceso infeccioso viral o
bacteriano. Debido a que existen epitopes antigénicos presentes en los patógenos que pueden ser de origen
proteico o carbohidratos que son similares a estructuras de epitopes de los glóbulos rojos puede pasar que
los anticuerpos que iban dirigidos hacia los microorganismos sufran una reacción cruzada y reconozcan las
estructuras semejantes que pueden existir sobre la membrana de los glóbulos rojos. Cuadro en donde si
bien los anticuerpos no van dirigidos contra los antígenos propios de los glóbulos rojos, existe similitud de
estos ags con los presentes en microrganismos virales o bacterianos dando paso a una reacción cruzada.

El segundo concepto viene a explicar por qué lo pacientes con cuadros neoplásicos presentan una mayor
prevalencia a tener cuadros de anemia hemolítica autoinmune. Se debe a que las célula s cancerígenas
neoplásicas comienzan a presentar sobre la superficie de los glóbulos rojos neoantigenos que se asocian a
tumores presentes en la superficie de células tumorales necróticas que están siendo atacadas por el sistema
inmune, por lo tanto, al estar presentes los neoantigenos podría también existir alguna similitud entre
neoantigenos y antígenos presentes en los glóbulos rojos. De esta forma esta respuesta inmune de tipo
humoral contra células tumorales tendría una reacción cruzada con algunos antígenos que se asemejan y
están presentes en los glóbulos rojos.

ANEMIA HEMOLITICA AUTOINMUNE POR ANTICUERPOS CALIENTES (AHAIC)

Es producida por anticuerpos calientes, es decir la inmunoglobulina que se encuentra relacionada con este
cuadro es la de tipo IgG y en algunos casos puntuales se ha descrito también IgM e IgA. Tiene un rango
óptimo de reacción a 37° C y se ha logrado demostrar en algunos casos que la especificidad del anticuerpo
involucrado es un auto anti-e del sistema Rh. Anticuerpos dirigidos contra antígenos eritrocitarios propios
con especificidad ampliamente reactiva.
¿Cómo se produce la hemólisis? Tenemos
anticuerpos de tipo IgG dirigidos contra algún
antígeno que está en los glóbulos rojos de
nuestro paciente. Tenemos dos tipos de
hemolisis, una mediada por el complemento y
otra por anticuerpos. Los anticuerpos de tipo IgG
también tienen la capacidad de activar el
complemento y permitir que hasta C3b quede
adherido sobre la membrana del eritrocito. Uno
de los fenómenos de destrucción de los
eritrocitos es a través de la citotoxicidad celular
dependiente de anticuerpos (CCDA) que se
produce principalmente en el bazo y se debe a que algunas células presentan sobre su membrana receptores
para la región Fc como macrófagos, linfocitos Tc, natural killer, por lo tanto, cuando un glóbulo rojo pasa por
el bazo va a ser detectado por alguna de estas células y produce la destrucción del eritrocito.
El otro tipo de hemólisis por complemento ocurre en el hígado, los macrófagos tienen receptores específicos
para el complemento y en este caso lo que sucede es que el complemento es reconocido y ocurren dos
mecanismos, uno se puede destruir el glóbulos rojos por completo o se captura y se extrae parte del glóbulos
rojos que está siendo reconocido y se comienza a disminuir el volumen eritrocitario apareciendo algunos
hallazgos que pueden ser descubiertos en el frotis como los esferocitos o microesferocitos que son los
glóbulos rojos de menos tamaño.

En un frotis de paciente con AHAIC

podemos encontrar esferocitos y
presencia de glóbulos rojos inmaduros
nucleados en circulación como una forma
de compensar la destrucción de glóbulos
rojos.

ETIOLOGÍA
La mayoría de los casos está asociada a síndromes linfoproliferativos, en particular pacientes que sufren de
leucemia linfocítica crónica, LES, neoplasia de células B. en estos fenómenos se ha visto con mayor
prevalencia la presencia de AHAIC.
Cuando realizamos el estudio mono específico para determinar las características de los componentes del
sistema inmune que están recubriendo los glóbulos rojos, lo normal es que se encuentren un IgG+ y en
menor grado la presencia de C3d.

CARACTERISTICAS SEROLOGICAS
 Se ha observado que el test de Coombs directo mono específico da positivo en un 67% (2 de cada 3 pacientes
estudiados) para IgG y C3d. Un 20% solo para IgG y un 13% solo para C3d.
En un 35% de los casos se acompaña con detección de anticuerpos irregulares positivos, al ser identificado
aglutina con todas las células con igual intensidad (panaglutinina).

Tenemos autoanticuerpos fijados a los

hematíes y el objetivo es separarlos para
dejar libres los autoanticuerpos y poder
estudiarlos. Generalmente cundo estudiamos
el autoanticuerpo nos da el panel de
screening positivo y pasamos a la etapa de
identificación. Existe aglutinación de la misma
intensidad en todos los tubos y autocontrol
positivo también. El gran problema de eta
reacción es que si el paciente presenta una
aloinmunizacion para un anticuerpo
clínicamente significativo no podremos
evidenciarlos porque la panaglutinina podría
estar enmascarando la reacción de cualquier
anticuerpo. Es un problema para cuando nos
piden transfusión para estos pacientes.

AHAIC producida por IgM posee un mal diagnóstico. El título para descartarla de otras patologías es que a
4° C tienen un título inferior a <64. El problema de estos anticuerpos es que tienen una gran capacidad
fijadora y activador del complemento.

TERAPIA TRANSFUSIONAL
Los pacientes con AHAIC no deben ser transfundidos, salvo que el paciente presente riesgo vital debido al
cuadro anémico. Cuando se transfunde, de forma paralela se debe administrar:
✓ Terapia con corticoesteroides a dosis de 1-2 mg/kg/día para disminuir la actividad inmune y permitir que
la transfusión sea bien recibida. Son efectivas en la mayoría de los caos.
✓ Un problema es que autoanticuerpo (panaglutinina) puede estar enmascarando a un anticuerpo
clínicamente significativo y se podría generar una reacción adversa de tipo hemolítica.
✓ Se ha descrito que no es recomendado transfundir a este tipo de pacientes porque este evento
transfusional aporta nuevos ags que van a estimular la producción de un aumento del autoanticuerpos
lo que vendría a empeorar el cuadro hemolítico. No es recomendable hasta que no haya compromiso
cardíaco y cerebral.

El volumen transfundido es la cantidad mínima para mejorar el aporte tisular de oxígeno.

 ALGORITMO DE COMO DEBEMOS TRATAR ESTE TIPO DE MUESTRAS

Lo primero son las pruebas pretransusionales en donde tenemos un test de Coombs directo positivo en donde
podemos tener: IgG por sí solo, IgG mas C3d o solo C3d. El eluido, es decir la proteína liberada sobre la
membrana da una panaglutinina. De igual manera la presencia de anticuerpos irregulares detectados a través
del screening nos da una panaglutinina cuando se identifica.

Tenemos dos situaciones:

✓ Existe urgencia transfusional cuando tenemos una hemolisis aguda fulminante y existe compromiso de
la función cardiaca y cerebral. En este caso solo nos queda seleccionar hematíes de acuerdo con los
resultados serológico disponibles.
 ✓ No existe urgencia en casos de pacientes con anemia estable y no existe compromiso cardiaco ni
cerebral. Se debe evaluar si el paciente ha sido transfundido durante los últimos 3 meses ya que, si el
paciente no ha sido transfundido vamos a realizar un fenotipo extendido y vamos a determinar C, c, E,
e, Kell, Kidd, Duffy, MNS principalmente, es decir anticuerpos y sistemas antigénicos de mayor
importancia clínica. Además, vamos a intentar de retirar el autoanticuerpo que nos podría incomodar,
lo hacemos utilizando lo propios los glóbulos rojos del paciente previamente liberado del
autoanticuerpo, por lo tanto, vamos a realizar una autoadsorción, se intenta dejar libre el posible
aloanticuerpo. Si detectamos aloanticuerpos ocultos vamos a tener que identificar y transfundir glóbulos
rojos antígenos negativo para el anticuerpo detectado. En el caso de que no tengamos aloanticuerpos
ocultos seleccionamos glóbulos rojos ABO Rh D compatibles.
Pero si el paciente ha sido transfundido en los últimos 3 meses deberíamos realizar Genotipo extendido
y adsorción alogénica, es decir con células diferentes a las del paciente. Si detectamos aloanticuerpo
oculto seleccionamos glóbulos rojos que sean antígeno negativo para el anticuerpo detectado. Y en el
caso de que no determinemos presencia de un aloanticuerpo transfundimos glóbulos rojos ABO Rh D
compatibles.
FENOMENO DE ADSORCION ALOGENICA
en el cual, en el caso de la imagen tenemos
un paciente que tienen una mezcla de
autoanticuerpo mas Kidd a que es un
anticuerpo clínicamente significativo, y al
momento de identificar nos da una
panaglutinina, por lo tanto, cuando
hacemos la aloadsorcion debemos utilizar
células, ir mezclándolas hasta dejar libre el
anticuerpo de importancia clínica. Al fin y
al cabo, mezclamos partes iguales de
plasma más glóbulos rojos previamente
seleccionados, se incuban durante 30
minutos a 37° C y damos las condiciones
para que el autoanticuerpo se fije al
eritrocito, quedando libre en el suero el
aloanticuerpo.

SINDROME DE CRIOAGLUTININAS (SCA)

Es alrededor de un 20% de estas patologías.
Es una anemia hemolítica caracterizada por presentar destrucción eritrocitaria por anticuerpos que
reaccionan preferentemente en frio, IgM que presenta un elevado título de >1000 a 4° C. Es menos
frecuente que AHAIC y podemos tener cuadros agudos y crónicos.

ETIOLOGIA
✓ Cuadros agudos: son secundarios a infección por Mycoplasma pneumoniae (anti-I) y Virus Epstein Barr
(anti-I) con títulos <64 a los 4°C. Los anticuerpos tienen afinidad contra el antígeno I que es uno que
tienen presentes la gran mayoría de los pacientes en el mundo.
 ✓ Cuadros crónicos: asociada frecuentemente a pacientes de tercera edad, pacientes con linfomas y
macroglobulinemia de Waldenstrom (anti-I) con títulos >512 a 4°C. Los anticuerpos también tienen
afinidad por el antígeno I.
En algunos casos las muestras se tienden a confundir, ya que cuando llegan al laboratorio pueden llegar
coaguladas, pero esta pseudocoagulación es un agregado debido que al bajar l temperatura las
crioaglutininas tienden a formar redes y agregan los glóbulos rojos. Debemos tener cuidado con estas
muestras porque podríamos identificarla como aglutinación, pero en verdad no lo es. **Característica
de aglutinación a temperatura ambiente a tal punto que pareciera que la muestra estuviera coagulada.
Si incubamos la muestra a 37° C la muestra debería volver a tener su estado de fluidez normal. En cambio,
si la incubamos a 4° C se observa claramente el coagulo.

CARACTERISTICAS SEROLOGICAS

Lo que detectamos al realizar un test de Coombs directo mono específico es la presencia de IgM, C3c y
C3d sobre los glóbulos rojos.
Si se realiza en tarjeta es más fácil ver la aglutinación, en cambio si la realizamos en tubo como debemos
lavar los glóbulos rojos previamente lo más seguro es que vamos a dejar libre la IgM y solo tendremos
fracciones del complemento sobre la membrana del eritrocito (complemento es lo único que se detecta
en PAD).
Cuando queremos determinar el título de anticuerpo es muy importante que la muestra venga a 37° C y
se separe rápidamente o que se incube a 37° C y luego separemos la muestra para evitar la activación
de las crioaglutininas y que se adhieran a los glóbulos rojos y esto sucede al momento de determinar el
título de anticuerpo ya que estaríamos con problemas ya que podríamos obtener un título menos al
esperado no porque no se esté cursando con la patología sino porque se adsorbieron IgM sobre la
membrana de los glóbulos rojos al bajar la temperatura. Para determinar amplitud térmica y verdadero
título de la crioaglutinina la muestra debe ser extraída y mantenida de manera estricta a 37° C hasta separar el
plasma de los glóbulos rojos. Evitar adsorción in vitro.
Las crioaglutininas rara vez enmascaran aloanticuerpos clínicamente significativos si los estudios se
realizan a 37° C.
Si realizamos la prueba en tubo solo encontramos complemento, pero si lo hacemos en tarjeta
encontraremos el patrón de IgM mas complemento.
 ¿Cómo se produce la hemolisis? Hay que recordar que
estamos hablando de crioaglutininas o anticuerpo frío
que necesitan de bajas temperaturas para activarse y
adherirse a los glóbulos rojos. Estas condiciones se
dan principalmente en épocas fría so climas fríos y en
circulación distal como las manos, punta de la nariz.
La IgM se adhiere al eritrocito y produce la activación
del complemento hasta C3b, posteriormente cuando
el eritrocito vulva a circulación y toma temperatura la
crioaglutinina se libera. En condiciones más graves la
activación del complemento continua hasta C5 dando
paso a una hemolisis de tipo intravascular por
complejo de ataque a la membrana, es raro.
Cuando el eritrocito vuelve a circulación, las crioaglutininas se liberan y como los glóbulos rojos van
revestidos de C3b van a ser reconocidos por los macrófagos que tienen receptores para el complemento
y van a producir una hemólisis de tipo extravascular. En el caso de que los glóbulos rojos no sean
destruidos por lo general ocurre una escisión de c3b a c3d en su forma inactiva por lo que no son
destruidos ni fagocitados y los glóbulos rojos tiene supervivencia. Es más común que ocurra una
hemolisis de tipo extravascular porque las temperaturas a nivel central son más elevadas y no se logra
activar completamente el complemento para pasar a C5 y generar un a hemólisis de tipo
intravascular/osmótica.

Frotis típico de un síndrome de

crioaglutininas. Para trabajar la muestra
de un paciente con este síndrome, la
muestra debe incubarse a 37° C al igual
que el extensor y porta objetos, ya que es
la única manera de que los glóbulos rojos
no se recojan y poder visualizarlos de
forma normal. Se observa el efecto
ROULEAUX.
 ANEMIA HEMOLITICA DE TIPO MIXTO
Corresponde a un grupo de cuadros anémicos que cursan con anemia hemolítica de anticuerpos
calientes y además presentan crioaglutininas capaz de reaccionar a 30° C.
- Pacientes con alto título de crioaglutininas y de amplio rango térmico (AHAI+SCA).
- Pacientes con títulos de crioaglutininas normal y amplio rango térmico.

CARACTERISTICAS SEROLOGICAS

Tenemos positivo para IgG, IgM y c3d. Lo ideal es ojalá siempre trabajar con tarjetas de gel porque cuando lavamos
podemos remover las IgM y nos daría un patrón distinto.

Generalmente son detectables en PAD IgG mas c3d, pero pueden ser detectables de manera individual IgG, C3d o IgA.

El eluido demostrara la actividad de un anticuerpo de tipo IgG con las células. La especificidad de los autoanticuer pos
son anti-I o i (IgM) y en el caso del IgG especificidad ampliada y casos de auto anti-e.

TERAPIA TRANSFUSIONAL
Si la transfusión es necesaria las consideraciones para exclusión de anticuerpos y selección de hemocomponentes son
exactas a las descritas en AHAIC y SCA.

HEMOGLOBINURIA PAROXISTICA A FRIGORE (HPF)

Cuadro hemolítico poco habitual caracterizado por la presencia de anticuerpos denominados Donath-Landsteiner o una
hemolisina bifásica. El anticuerpo es de tipo IgG, pero es un anticuerpo poco habitual porque tiene la capacidad de
activarse a bajas temperaturas y adherirse a los glóbulos rojos (lo común es que reaccione a levadas temperaturas). Como
actúa a bajas temperaturas, se activa el complemento y cuando vuelvan a la circulación central los glóbulos rojos como ya
no están las condiciones optimas de bajas temperaturas, la IgG se libera de los glóbulos rojos y quedan solo con C3d, pero
el eritrocito que retorna a circulación central se hemolisa y se tendrá hemoglobina en la orina (hemoglobinuria). Este
anticuerpo de tipo de IgG cundo se estudia y se titula a bajas temperaturas se tiene un titilo <64 por lo que no entra dentro
de la clasificación de crioaglutinina.

Fenómeno que se da en alrededor un 30% de los niños que cursan con anemias hemolíticas autoinmunes y es secundaria
a infecciones respiratorias agudas.
CARACTERISTICAS SEROLOGICAS

Es positivo solo en c3d a menos que antes de la centrifugación dejemos la muestra 4°C con lo que la reacción
antígeno-anticuerpo no se revierte y podríamos detectar IgG también.

DIAGNOSTICO
- Se realizar la prueba de DONATH-LANDSTEINER.

Trabajamos con la muestra del paciente y su suero,

incubamos a 4°C en donde ocurre activación del
complemento y se activa el C3, la incubación es de 60
minutos. El mismo tubo se saca y se incuba a 37°C
durante 30 minutos, en este caso el IgG se libera,
pero favorecemos la hemolisis, por lo que si después
de los 30 minutos vemos que el sobrenadante esta
rojo decimos que es positivo.

Caso reportado de paciente con patología. Se observa

satelitismo, rosetas que están cerca del neutrófilo.

- Especificidad del anticuerpo es anti P.

- PAD con especificidad solo a c3d, si el lavado se realza con PBS a 4°C es posible detectar IgG sobre la
membrana de los glóbulos rojos.
- El eluido no presenta reactividad.
TERAPIA TRANSFUSIONAL
Rara vez necesitan transfusiones. No existe inconvenientes en realización de pruebas pre transfusionales ni
en la selección de hemocomponentes. Sangre a transfundir previo a la introducción al organismo del
paciente, debe ser temperada a 37°C para evitar que sean reconocidos por los anticuerpos bifásicos y así
impedir la hemolisis.

• ALGORITMO DE ESTUDIO
SE HA VISTO ANEMIA HEMOLITICA EN PACIENTES CON COVID-19.