ACTIVIDAD DE LABORATORIO: CINÉTICA ENZIMÁTICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

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Para realizar esa actividad tenga en cuenta los datos presentados en el documento trabajado en
clase

1. Datos

Registre en una tabla los datos suministrados en el documento trabajado en clase (0.1 punto)

Concentración de enzima (µM)  0,1 0,2 0,5

Concentración de sustrato (µM) ↓ Velocidad (µmol/min)

2. Cálculos y resultados

2.1. Complete las siguientes tablas para cada una de las concentraciones de enzima (0.9 puntos)

Concentración de enzima: 0,1 µM

Concentración de Velocidad
1/V 1/[S] V/[S] [S]/V
sustrato (µM), [S] (µmol/min), V
 Concentración de enzima: 0,2 µM

Concentración de Velocidad
1/V 1/[S] V/[S] [S]/V
sustrato (µM), [S] (µmol/min), V

Concentración de enzima: 0,5 µM

Concentración de Velocidad
1/V 1/[S] V/[S] [S]/V
sustrato (µM), [S] (µmol/min), V

2.2. Para cada de las concentraciones de enzima, realice las gráficas de:

A. Michaelis-Menten (0.6 puntos)

Concentración de enzima: 0,1 µM Concentración de enzima: 0,2 µM Concentración de enzima: 0,5 µM

B. Lineweaver-Burk (0.6 puntos)

Concentración de enzima: 0,1 µM Concentración de enzima: 0,2 µM Concentración de enzima: 0,5 µM
 C. Eadie-Hofstee (0.6 puntos)
Concentración de enzima: 0,1 µM Concentración de enzima: 0,2 µM Concentración de enzima: 0,5 µM

D. Hanes-Woolf (0.6 puntos)

Concentración de enzima: 0,1 µM Concentración de enzima: 0,2 µM Concentración de enzima: 0,5 µM

2.3. A partir de cada uno de los gráficos anteriores, calcule los parámetros cinéticos de la reacción
enzimática, es decir, Vmax y KM

Cálculo: (0.6 puntos)

Deje indicado el cálculo realizado para la determinación de V max y KM para cada uno de los
modelos

Tabule los resultados obtenidos (0.2 puntos):

Modelo Vmax KM
Michaelis-Menten
Lineweaver-Burk
Eadie-Hofstee
Hanes-Woolf

3. Análisis de resultados
3.1. ¿Qué se puede concluir sobre el valor de V max obtenidos por los cuatro modelos? (0.2 puntos)

3.2. ¿Cómo se comporta el parámetro V max al variar la concentración de enzima? Explique (0.2
puntos)

3.3. ¿Qué se puede concluir sobre el valor de K M obtenidos por los cuatro modelos? (0.2 puntos)

3.2. ¿Cómo se comporta el parámetro K M al variar la concentración de enzima? Explique (0.2

puntos)