Cinética Enzimática

Cinética enzimática
Ecuación de Michaelis-Menten
Cinética enzimática
Cinética enzimática
Parámetros cinéticos

Km: 0,017 M

Vmax: 3,7 M/min

Parámetros cinéticos
 Parámetros cinéticos

Significado de Km

Constante de equilibrio de disociación del complejo ES

Medida inversa de la afinidad de la enzima por el sustrato

Km grande: complejo ES débil
Km pequeña: ES más estable

Concentración de sustrato para la cual la velocidad se hace

igual a la mitad de la máxima.
Se define para una pareja E-S

Se mide en unidades de concentración.

Parámetros cinéticos
 Parámetros cinéticos

Constante catalítica (kcat): permite describir la velocidad límite

para cualquier reacción catalizada por una enzima a saturación.

K cat = Vmax / [ET]

NUMERO DE RECAMBIO

Número de moléculas de sustrato convertidas en producto en una unidad

de tiempo, por una molécula de enzima cuando la enzima está saturada
de sustrato.
Ecuación de Lineweaver-Burk

La ecuación de Michaelis es difícil de usar para

determinar la Vmax a partir de datos experimentales.

Una alternativa es usar la ecuación de Lineweaver-Burk

que entrega una gráfica lineal.
Ecuación de Lineweaver-Burk
Resumen parámetros cinéticos
 Ejercicios propuestos

1.- A partir de los siguientes resultados determine:

•el valor de Km:
•el valor de Vmax:

[s] (mM) Vo (M/s)

0,2 5,0
0,4 7,5
0,8 10,0
1,0 10,7
2,0 12,5
4,0 13,6
 Ejercicios propuestos

2.- A partir de los siguientes resultados determine:

•el valor de Km:
•el valor de Vmax:

[S] mM V (mmol/ml/min)
0,1 3,33
0,2 5,0
0,5 7,14
0,8 8,0
1,0 8,33
2,0 9,09
 Ejercicios propuestos

3.- La penicilina se inactiva por la enzima penicilinasa, que también se conoce

como β-lactamasa). Se determinó la cantidad de penicilina hidrolizada por minuto,
en una solución que contiene 10-9 g de penicilinasa, y los valores se expresaron
en función a la concentración de penicilina:

•Determine por regresión lineal los valores de Km y Vmax de la enzima:

•Determine la velocidad de la reacción si la concentración de sustrato es 0,18 M.

[S] (M) Velocidad

(mol/min)
1,25 1,72
1,67 2,04
2,5 2,63
5,0 3,33
10,0 4,17
7.- La penicilina se inactiva por la enzima penicilinasa, que también se conoce
como B-lactamasa). Se determinó la cantidad de penicilina hidrolizada por
minuto, en una solución que contiene 10-9 g de penicilinasa, y los valores se
expresaron en función a la concentración de penicilina:

•Determine por regresión lineal los valores de Km y Vmax de la enzima:

•Con los valores obtenidos por regresión lineal para Km y Vmax y la ecuación de
Michaelis Mentel, determine la velocidad de la reacción si la concentración de
sustrato es 0,18 M.

[S] (M) Velocidad

(mol/min)
1,25 1,72
1,67 2,04
2,5 2,63
5,0 3,33
10,0 4,17
Cinética Enzimática