FACULTAD DE INGENIERIA, DISEÑO Y CIENCIAS APLICADAS

BIOQUÍMICA Y LABORATORIO

TALLER CINETICA ENZIMATICA I

1. Para una enzima (5 μM) se reportaron las siguientes velocidades iniciales, según la concentración del
sustrato:

[Sustrato], v0,
mM mM*s-1
0.02 10.83
0.04 18.57
0.07 26.76
0.1 32.50
0.15 39.00
0.2 43.33
0.3 48.75
0.5 54.17
0.7 56.88

1. Dibuje la grá fica de Michaelis-Menten para esta enzima.

2. Dibuje la grá fica de Lineweaver-Burke para esta enzima.
3. Determine la KM y la Vmax
4. Indique en ambas grá ficas (a & b), dó nde se reconocen la Vmax y KM
5. Calcule la constante catalítica y la eficiencia catalítica de esta enzima.

2. Usted está tratando de reproducir los resultados experimentales que obtuvo un estudiante que
trabajó en su laboratorio. El ha reportado que la enzima de interés tiene una k cat de 1875 s-1 y una
eficiencia catalítica de 7.5x107 M-1 s-1.

A. ¿Cuá l es la KM de esta enzima?

En la repetició n de las mediciones, usted quiere obtener una vmax de 10 mM s-1. ¿Cuá nta enzima debe usar?, de el
resultado en μM.

Calcule a qué concentraciones de sustrato en μM usted debe medir la tasa inicial v 0 para obtener los siguientes
valores:

[Sustrato], v0,
μM mM
s-1
2.50
4.50
6.00
9.00

B. Cree una grá fica predictiva de Michaelis-Menten para su enzima.

C. Dibuje una grá ifca predictiva Lineweaver-Burke para su enzima.

3. La catalasa tiene una KM de 25 mM y un kcat de 4.0 * 107 s−1 con H2O2 como sustrato. La anhidrasa
carbónica tiene una KM de 26 mM y una kcat de 4.0 * 105 s−1. ¿Qué enzima es más eficiente y por qué?