Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
7 Extraccion y Separacion de Carotenos de La Zanahoria
7 Extraccion y Separacion de Carotenos de La Zanahoria
Resumen………………………………………………………………..….1
Introducción……………………………………………………………..…2
I.- Lípidos…………………..……………………………………………….….…2
II.-Separación y análisis de glúcidos………………………………….…….…5
III. Terpenos……..………………..……………………………………………...6
IV. Carotenos……………………………..………………………………………7
Objetivos………….……………………………………….……………..…10
Hipótesis………...……………………………………………….……..…..10
Material………………...……………………………………….………...…11
Metodología…………….………………………………………….……..….11
Resultados………………………..…………………………………………..11
Discusión de Resultados………………………………….………… ……….13
Conclusiones…………………………………………….……………………13
Referencias……………………………………………….……………...…….13
RESUMEN:
En esta práctica se podrá encontrar la definición de los lípidos, su composición, tipos y estructuras, además de
algunos de los métodos más utilizados para analizar y separarlos.
También se podrá encontrar la definición y tipos de terpenos que se encuentran en la naturaleza y que en esta
práctica son objeto de estudio así mismo de los carotenos que son un tipo de tetraterpenos que constituyen tanto la
coloración de las zanahorias (que son los vegetales utilizados para esta práctica) como su fuente nutrimental de
aporte en vitaminas.
Para la extracción y separación de los carotenos de la zanahoria, se utilizaron 10 gramos de zanahoria las cuales se
picaron y se les extrajeron los pigmentos vegetales por medio de alcohol al 95% hasta dejar la zanahoria incolora.
Después para separar los carotenos de las xantofilas se utilizó un embudo de separación en el cual se lavó la
solución y en la fase acuosa quedaron las xantofilas y en la orgánica los carotenos.
Después a los carotenos se les realizó una separación para obtener sus 3 tipos de componentes, es decir los alfa,
beta y gama carotenos.
1
INTRODUCCIÓN
2
agua. Las micelas son estructuras esféricas pigmentos biológicos). Otros lípidos “activos” son
relativamente pequeñas en las que intervienen desde cofactores esenciales de enzimas, transportadores
unas cuantas decenas a unos millares de moléculas electrónicos o señales intracelulares.
ordenadas de modo que sus regiones hidrofóbicas se
agregan en el interior excluyendo al agua, y los grupos Los principales grupos de hormonas esteroides son las
de cabeza hidrofílicos están en la superficie en contacto hormonas sexuales masculinas y femeninas y las
con el agua. La formación de micelas está favorecida hormonas de la corteza suprarrenal, el cortisol y la
cuando el área de la sección transversal del grupo de aldosterona. Todas estas hormonas contienen un núcleo
cabeza es mayor que la de las cadenas laterales acilo, esteroide intacto. Se producen en un tejido y se
tal como sucede con los ácidos grasos libres, transportan por el torrente circulatorio a tejidos diana
lisofosfolípidos (a los que les falta un ácido graso) y el donde se fijan a receptores proteicos muy específicos
detergente SDS. desencadenado cambios en la expresión genética y en
el metabolismo. Dada la elevada afinidad de los
Un segundo tipo de agregado lipídico en agua es la receptores hacia la hormona, son suficientes
bicapa, en la que se combinan 2 monocapas lipídicas concentraciones muy bajas de hormona (hasta 10 -9M)
formando una hoja bidimensional. La formación de para producir el efecto sobre los tejidos diana.
bicapas se da fácilmente cuando las áreas transversales
del grupo cabeza y las cadenas laterales son similares, El fosfatidilinositol y sus derivados fosforilados son
tal como sucede con los glicerofosfolípidos y componentes de las membranas plasmáticas de todas
esfingolípidos. Las porciones hidrofóbicas de cada las células eucarióticas. Actúan como depósito de
monocapa interaccionan excluyendo el agua. Los moléculas mensajeras que se liberan en el interior de la
grupos de cabeza hidrofílicos interaccionan con las 2 célula cuando ciertas señales extracelulares
superficies de la bicapa. interaccionan con receptores específicos de la
membrana plasmática (Ej. Cuando la vasopresina se
El tercer tipo de agregado lipídico se forma cuando una fija a moléculas receptoras de las membranas
bicapa lipídica se dobla sobre sí misma formando una plasmáticas renales y de vasos sanguíneos, se activa
esfera hueca denominada liposoma o vesícula. Al una fosfolipasa que rompe el enlace entre el glicerol y
formar vesículas las hojas de bicapa pierden sus el fosfato en el fosfatidilinositol-4,5-bifosfato liberando
regiones hidrofóbicas de los extremos, con lo que inositol-1,4,5-trifosfato y diacilglicerol.) El inositol-
consiguen la máxima estabilidad en su ambiente 1,4,5-trifosfato produce la liberación de Ca 2+
acuoso. Estas vesículas de bicapa contienen agua, por secuestrando en los compartimientos celulares
lo que se crea un compartimiento acuoso separado. limitados por membrana, desencadenando la activación
[1,5] de diversas enzimas dependientes de Ca 2+ y respuestas
hormonales. El diacilglierol se fija a una enzima, la
Lípidos con actividades biológicas específicas proteína quinasa C, activándola, lo que conduce a la
transferencia de grupos fosfato del ATP a varias
Los lípidos de membrana representan del 5-10% de la proteínas citosólicas alterando de este modo sus
masa seca de muchas células y los de almacenamiento actividades enzimáticas.[1, 6]
más del 50% de la masa de un adiposito. Estos lípidos
juegan un papel pasivo en la célula; enzimas oxidativas Los icosanoides son derivados de ácidos grasos con
actúan sobre los combustibles y las membranas una diversidad de acciones del tipo hormonal
lipídicas forman barreras impermeables que separan los extremadamente potentes sobre varios tejidos de
compartimientos celulares. Hay otro grupo de lípidos vertebrados. Actúan sobre el tejido en el que se
componentes celulares relativamente minoritarios en producen. Algunas de sus funciones son que
cuanto a masa con actividades biológicas específicas y intervienen en la función reproductiva, inflamación,
esenciales. Entre ellos se encuentran los esteroides, fiebre y dolor asociados a lesiones o enfermedades, etc.
compuestos que comparten el núcleo esteroide de 4
anillos pero son más polares que el colesterol, y gran Todos los icosanoides provienen del ácido
número de isoprenoides que se sintetizan a partir de araquidónico [ácido graso poliinsaturado de
precursores de 5 carbonos relacionados con el 20carbonos, 20:4 (5,8,11,14)] del que toman su nombre
isopreno. general (del griego eikosi, “veinte”). Hay 3 clases de
icosanoides: prostaglandinas, tromboxanos y
Dentro de los isoprenoides se encuentran las vitaminas leucotrienos. Se producen en distintos tipos celulares
A, D, E y K (materiales graso esenciales para el mediante rutas sintéticas diferentes y tienen diferentes
crecimiento normal de los animales y numerosos células diana y acciones biológicas.
3
absorben la luz y se pueden convertir
Todas las prostaglandinas (PG) contienen un anillo de enzimáticamente en vitamina A (por rotura del -
5 átomos de carbono que originalmente formaba parte caroteno) por la mayoría de los animales. La
de la cadena de ácido araquidónico. Su nombre deficiencia de vitamina A produce piel reseca,
proviene del tejido en el que se identificaron (la xeroftalmia, membranas mucosas secas, desarrollo y
glándula prostática). Originalmente se definieron 2 crecimiento retardados, esterilidad en animales
grupos: PGE, soluble en éter y PGF soluble en tampón machos y ceguera nocturna.
fosfato. Cada uno contiene numerosos subtipos
denominados PGE1, PGE2, etc. Actúan en muchos Vitamina D: Derivado del colesterol y precursor de
tejidos regulando la síntesis de la molécula mensajera una hormona esencial en el metabolismo de calcio y
intracelular AMP 3´,5´-cíclico (cAMP). Debido a que fosfato en vertebrados. La vitamina D 3
el cAMP media la acción de muchas hormonas, las (colecalciferol), se forma en piel mediante una
prostaglandinas afectan a una amplia gama de reacción fotoquímica accionada por el componente
funciones celulares y titulares. Algunas prostaglandinas ultravioleta de la luz solar. Abunda en aceites de
estimulan la contracción del músculo liso del útero hígado de pescado y se añade a la leche comercial
durante el parto o la menstruación. Otras afectan al como suplemento nutritivo. Por si misma no es
flujo sanguíneo a órganos específicos, al ciclo sueño- biológicamente activa pero es precursor del 1,25-
vigilia y a la capacidad de respuesta de ciertos tejidos a dihidroxicolecalciferol. Su deficiencia conduce a la
hormonas como la adrenalina y el glucagón. formación defectuosa de huesos (raquitismo).
Prostaglandinas de un tercer grupo elevan la
temperatura corporal (dando lugar a fiebre) y Vitamina E (tocoferoles): Contienen un anillo
produciendo inflamación con el dolor consiguiente. aromático sustituido y una cadena lateral
hidrocarbonada larga. Se encuentran en los huevos
Los tromboxanos se aislaron por primera vez de las de gallina, aceites vegetales y germen de trigo. Su
plaquetas sanguíneas (trombocitos) y tienen un anillo deficiencia produce piel escamosa, debilidad
de 6 átomos que contienen una función éter. Son muscular y esterilidad. Los tocoferoles pueden
producidos por las plaquetas y actúan en la formación experimentar reacciones de óxido-reducción del
de coágulos sanguíneos y en la reducción del flujo anillo aromático. Previenen la destrucción oxidativa
sanguíneo hacia el sitio de un coagulo. de lípidos de las membranas celulares al reaccionar
con las formas más reactivas del oxígeno
Los leucotrienos, encontrados por primera vez en los destruyéndolas y protegiendo a los ácidos grasos
leucocitos, contienen 3 dobles enlaces conjugados. Son insaturados de la oxidación.
señales biológicas poderosas (ej. Inducen la
contracción del músculo que recubre las vías aéreas del Vitamina K: Cofactor lipídico necesario para la
pulmón. La sobreproducción de leucotrienos produce coagulación normal de la sangre. La vitamina K 1
ataques asmáticos. La fuerte contracción de los (filoquinona) se encuentra en las hojas de las plantas
músculos lisos del pulmón que tiene lugar en el shock verdes mientras que la K2 (menaquinona) es
anafiláctico es parte de la reacción alérgica sintetizada por las bacterias que residen en el
potencialmente fatal, en individuos hipersensibles a las intestino de los animales. La vitamina actúa en la
picadas de abeja, penicilina y otros agentes.[1,7] formación de protombina, que es una proteína en el
plasma sanguíneo esencial para la formación del
Las vitaminas son compuestos esenciales para la salud coagulo de sangre. La protombina es una enzima
del hombre y otros vertebrados que no pueden ser proteolítica que rompe enlaces peptídicos
sintetizados por estos animales por lo que deben ser específicos de la proteína sanguínea fibrinógeno,
obtenidos en la dieta. Tipos: convirtiéndola en fibrina, la proteína fibrosa
insoluble que mantiene unidos los coágulos de
Liposolubles: Solubles en disolventes orgánicos sangre. La deficiencia en vitamina K da lugar a una
apolares (Ej. Vitaminas A, D, E y K son coagulación de la sangre más lenta que puede ser
isoprenoides y se sintetizan por condensación de fatal a un animal herido.
unidades de isopreno).
Hidrosolubles: Solubles en disolventes acuosos La warfarina es un análogo sintético de la vitamina K
que actúa como inhibidor competitivo de la formación
Vitamina A (Retinol): Pigmento esencial para la de protombina. Funciona como anticoagulante.
visión. No se presenta en los vegetales, pero muchas
plantas contienen carotenoides, pigmentos que
4
La uboquinona y plastoquinona (derivados Después de homogenizar el tejido en este disolvente
isoprenoides) funcionan como transportadores de para extraer todos los lípidos, se añade más agua al
electrones en la producción de ATP en la mitocondria y extracto resultante que se separa en 2 fases,
en los cloroplastos. En la mayoría de los tejidos de metanol/agua (fase superior) y cloroformo (fase
mamíferos, la uboquinona (coenzima Q) tiene 10 inferior). Los lípidos permanecen en el cloroformo y
unidades de isopreno. La plastoquinona es equivalente las moléculas más polares (proteínas, glúcidos) se
en plantas a la uboquinona. Su papel como sitúan en la fase polar de metanol/agua.
transportadores de electrones pueden aceptar bien uno
o 2 electrones así como 1 o 2 protones reduciéndose a La mezcla compleja de lípidos tisulares aún se puede
la forma hidroquinona. fraccionar más mediante procedimientos
cromatográficos basados en la diferente polaridad de
Durante la formación de los glúcidos complejos de las cada clase de lípido. En la cromatografía de adsorción
paredes celulares bacterianas así como la adición de se empaqueta un material polar insoluble, como el gel
unidades polisacáridas a las glucoproteínas en de sílice (una forma de ácido silícico, Si(OH)4) en la
eucariotas, las unidades glucídicas que se han de columna de vidrio delgada y larga aplicándose la
adicionar están activadas químicamente mediante la mezcla de lípidos (en solución clorofórmica) en la parte
unión a los dolicoles, pertenecientes al grupo de superior de la columna. Los lípidos polares se fijan
isoproenoides. Los dolicoles de animales tienen entre fuertemente al ácido silícico polar mientras que los
17-21 unidades isopreno (85-105 átomos de carbono), neutros pasan directamente a través de la columna y
los dolicoles bacterianos tienen 11 unidades y plantas y emergen en el primer lavado con cloroformo. A
hongos tienen entre 14-24 unidades isopreno. Estos continuación se eluyen los lípidos polares, en orden de
compuestos altamente hidrofóbicos tienen polaridad creciente, lavando la columna con
interacciones hidrofóbicas fuertes con los lípidos de disolventes de polaridad progresivamente más elevada.
membrana, anclando los glúcidos unidos a la Los lípidos polares sin carga (ej. Cerebrosidos) se
membrana, donde participam en reacciones de eluyen con acetona y los lípidos muy polares o
transferencia de glúcidos.[1,8] cargados (ej. Glicerofosfolípidos) se eluyen con
metanol.
SEPARACIÓN Y ANÁLISIS DE GLÚCIDOS
La cromatografía en capa fina sobre ácido silícico
Debido a que los lípidos son insolubles en agua, su utiliza el mismo principio. Se distribuye una fina capa
extracción de los tejidos y posterior fraccionamiento de gel de sílice sobre una placa de vidrio a la que se
requieren la utilización de disolventes orgánicos y adhiere. Se aplica una pequeña muestra de lípidos
algunas técnicas poco usadas en la purificación de disueltos en cloroformo cerca del borde de la placa, la
moléculas hidrosolubles como las proteínas y glúcidos. cual se sumerge en un recipiente poco profundo con
En general las mezclas complejas de lípidos se separan disolvente orgánico contenido dentro de una cámara
por diferencia en su polaridad o solubilidad en cerrada saturada con vapor del disolvente. A medida
disolventes apolares. Los lípidos que contienen ácidos que el disolvente asciende sobre la placa por acción de
grasos en enlace éster o amida se pueden hidrolizar la capilaridad, arrastra consigo los lípidos. Después de
(saponificar) tratándolos con ácido o álcali para su separación se pueden detectar los lípidos
analizar sus componentes. pulverizando la placa con un colorante (rodamina) que
presenta fluorescencia cuando se asocia con los lípidos,
Los lípidos neutros (triacilgliceroles, ceras, pigmentos, o bien exponiendo la placa a los vapores de yodo. El
etc.) se extraen fácilmente de los tejidos con éter yodo reacciona con los dobles enlaces de los ácidos
etílico, cloroformo, benceno, disolventes en los que no grasos confiriendo a los lípidos que los contenga un
se produce la agregación de lípidos promovida por las color amarillo o marrón. Para el análisis posterior se
interacciones hidrofóbicas. Los lípidos de membrana se pueden rascar de la placa las regiones que contienen los
extraen mejor con disolventes orgánicos más polares lípidos separados recuperándolos por extracción con un
como etanol o metanol, que reducen las interacciones disolvente orgánico.
hidrofóbicas entre las moléculas de lípidos pero que
también debilitan los puentes de hidrógeno y las La cromatografía gas-líquido separa los componentes
interacciones hidrostáticas que unen los lípidos de volátiles de una muestra según sus tendencias relativas
membrana a las proteínas de membrana. Una solución a disolverse en el material inerte empaquetado en la
extractiva muy utilizada es una mezcla de cloroformo, columna cromatográfica y a volatilizarse
metanol y agua, inicialmente en proporciones desplazándose a través d la columna arrastrados por
inmiscibles produciendo una sola fase (1:2:0,8, v/v/v). una corriente de un gas inerte como el helio. Algunos
5
lípidos son de naturaleza volátil pero la mayoría han de (C5H8), y que se hallan muy difundidos en los reinos
modificarse previamente para aumentar su volatilidad animal y vegetal, sobre todo en forma de derivados
(disminuyendo su punto de ebullición). Para el análisis oxigenados (alcoholes, aldehídos, cetonas, ácidos
de los ácidos grasos presentes en una muestra de carboxílicos y ésteres), denominados también
fosfolípidos, se calientan primeramente los lípidos en terpenoides. Las unidades pueden arreglarse
una mezcla metanol/HCl o metanol/NaOH, que linealmente (como en el escualeno) o cíclicamente
convierte los ácidos grasos que eterificaban al glicerol (como en la limonina). Dentro de los terpenos se
en su ésteres metílicos (tranesterificación). Se cargan a clasifica a los carotenoides que son tetraterpenos muy
continuación estos ésteres metílicos de los acilos grasos importantes en los mamíferos, especialmente el -
en una columna de cromatografía gas-líquido y se caroteno que es precursor de la vitamina A (11-cis-
calienta para volatilizar los compuestos. Aquellos retinal). También las vitaminas liposolubles D
ésteres de acilo graso mayoritariamente solubles en el (colecalciferol) y K son consideradas como terpenos.
material de la columna se disuelven en el; los menos
solubles son arrastrados por la columna de helio y Los terpenos de bajo peso molecular se encuentran
emergen en primer lugar de la columna. El orden de sobre todo como componentes de los aceites esenciales,
elución depende de la naturaleza del adsorbente sólido los que se obtienen de las flores, hojas o frutos,
de la columna. El orden de elución depende de la mediante destilación con vapor de agua; mientras que
naturaleza del adsorbente sólido de la columna y del los de peso molecular medio o alto, constituyen el
punto de ebullición de los componentes de la mezcla esqueleto de los esteroides, los carotenoides y el
lipídica. Con la utilización de estas técnicas se pueden caucho. [10]
separar completamente mezclas de ácidos grasos con
diferentes longitudes de cadena y diversos grados de Tomando como unidad terpeno la de diez átomos de
insaturación. carbono, se ha desarrollado la siguiente clasificación:
Ciertas clases de lípidos son susceptibles de Monoterpenos: formados por dos unidades de
degradación en condiciones específicas. Por ejemplo, isopreno (diez átomos de carbono). Por ej. el
todos los ácidos grasos unidos por enlace éster en geraniol, el limoneno, el mentol y el alcanfor.
triacilgliceroles, fosfolípidos y ésteres esteriolo se Sesquiterpenos: formados por tres unidades de
liberan mediante tratamiento ácido o alcalino suave isopreno (quince átomos de carbono). Por ej. el
mientras que un tratamiento algo más fuerte libera los guayacol y el farnesol.
ácidos grasos unidos por un enlace amida de los Diterpenos: formados por cuatro unidades de
esfingolípidos. Las enzimas que hidrolizan isopreno (veinte átomos de carbono). Por ej. el fitol.
específicamente ciertos lípidos también son útiles en la Un diterpeno conocido es la vitamina A1 (C20H30O),
determinación de la estructura lipídica. Las fosfolipasas contenida en la leche y en el aceite de hígado de
A, C y D hidrolizan enlaces específicos en los bacalao.
fosfolípidos dando productos de solubilidad y Triterpenos: formados por seis unidades de isopreno
comportamiento cromatográfico característicos. La (treinta átomos de carbono). Por ej. el escualeno y
fosfolipasa C, por ejemplo, libera un fosforil alcohol los esteroides.
hidrosoluble (fosfocolina en la fosfatidilcolina) y un Tetraterpenos: formados por ocho unidades de
diacilglicerol soluble en cloroformo, cada uno de los isopreno (cuarenta átomos de carbono). Por ej. los
cuales puede caracterizarse separadamente para carotenoides y el licopeno. En este grupo son
determinar la estructura del lípido intacto. La abundantes las xantofilas y carotenos, pigmentos
combinación de hidrólisis específica por vegetales amarillo y anaranjado respectivamente.
caracterización de los productos por cromatografía en Dan color a los frutos, raíces (zanahoria) flores etc.
capa fina o cromatografía gas-líquido permite a En la fotosíntesis desempeñan un papel clave
menudo la determinación de estructura de un lípido. absorbiendo energía luminosa de longitudes de onda
Para establecer sin ambigüedades la longitud de 1 distinta a las que capta la clorofila. El caroteno es
cadena hidrocarbonada, o la posición de los dobles precursor de la vitamina A.
enlaces, es de gran valor el análisis por espectrometría El ß-caroteno (C40H56O) tiene una estructura similar
de masas de los lípidos o sus derivados volátiles.[1,9] a la de la vitamina A1; este tetraterpeno es un sólido
rojo, que se puede obtener a partir de las zanahorias
TERPENOS y se emplea como colorante en la industria
alimentaria .
Se denominan así a cada uno de los hidrocarburos
saturados o insaturados que se consideran constituidos
formalmente por unidades sucesivas de isopreno
6
Politerpenos: formados por más de ocho unidades de
isopreno (más de cuarenta átomos de carbono). Por
ej. el caucho y la gutapercha. [11]
7
mayoritario depende de la especie. El -caroteno lo es
La presencia de gran número de dobles enlaces hace a a en el mango y en el caki.
los carotenoides muy sensibles a la oxidación,
especialmente en reacciones de fotooxidación con el
oxígeno singlete. También se oxidan en presencia de
lipoxigenasas, pero no de forma directa, sino por
reacción con los hidroperóxidos. Las reacciones de
oxidación dan lugar en todos los casos a la perdida de
color. Generalmente, existe una gran dependencia entre
la velocidad de oxidación y el ambiente en el que se
encuentran. Dentro de los alimentos, los carotenoides
son mucho más resistentes a la oxidación que en El -caroteno se emplea mucho como colorante
materiales pulverizados y secos, o en extractos. alimentario. Al ser insoluble en agua, no es fácil de
utilizar, por ejemplo para colorear bebidas refrescantes,
También pueden alterarse por isomerización. Salvo una de sus principales aplicaciones. En este caso, se
excepciones, como en algunas algas, los carotenoides utiliza en forma de polvo extremadamente fino, en
naturales se encuentran siempre con todos los dobles partículas de alrededor de 0.4 micras de diámetro, que
enlaces en forma trans. Aunque en principio la se puede dispersar en el agua, con la ayuda de un
configuración trans de los dobles sería la más estable, polisacárido como la goma arábiga. Se obtiene
las repulsiones que inducen los grupos metilos laterales actualmente por síntesis química, o bien por cultivo de
hacen que algunos de los dobles enlaces puedan pasar a Dunaliella salina, un alga microscópica que prolifera
la configuración cis. Esta isomerización puede en aguas con concentraciones muy elevadas de sal.
producirse por calentamiento, exposición a la luz o de
forma espontánea en ciertos disolventes o en presencia El caroteno, como todos los carotenoides, puede
de superficies activas.[13] sufrir isomerizaciones en condiciones de procesado
drásticas, como en el caso del enlatado. Dependiendo
-caroteno del producto y de las condiciones concretas, puede
llegar a isomerizarse entre el 30% y el 40% del todo-
El -caroteno fue el primer carotenoide purificado. En trans caroteno presente, fórmándose sobre todo los
1831, Wackenroder lo aisló en forma cristalina a partir isómeros 9-cis y 13-cis.
de la zanahoria, dándole el nombre que lleva, derivado
de la denominación latina de este vegetal (Daucus La isomerización reduce el valor como vitamina A del
carota). -caroteno. La forma 13-cis tiene aproximadamente la
mitad de valor como vitamina A que a forma todo
trans, mientras que la forma 9-cis tiene un valor
vitamínico del orden del 40% de la todo trans. Sin
embargo, esta pérdida se ve compensada en general
muy sobradamente por la mucha mayor
biodisponibilidad del -caroteno, al desnaturalizarse en
este proceso las proteínas a las que se encuentra unido
Aunque su valor vitamínico es solamente de alrededor en muchos alimentos, especialmente en los vegetales.
de un sexto del valor del retinol (la “vitamina A” en su [14]
forma metabólicamente activa), su abundancia en los
vegetales y también en algunos alimentos animales, El alfa caroteno es 38% más potente como
como la leche, hace de él una fuente fundamental de antioxidante que el beta caroteno y 10 veces más
vitamina A para muchísimas personas. Incluso en efectivo inhibiendo el cáncer de hígado, piel y pulmón
dietas relativamente pobres en productos vegetales, (siendo potenciado este efecto cuando se consume
como es la estadounidense, los carotenoides combinado junto con vitamina E y selenio). Pero
representan alrededor del 30% de la ingesta total de presenta menos actividad provitamínica a su vez. Lo
vitamina A. Son ricas en b caroteno la zanahoria, que encontramos en la zanahoria y la calabaza.
contiene entre 70 y 140 mg/kg, los vegetales verdes
como la espinaca y algunas frutas. En los vegetales El gamma caroteno posee actividad de vitamina A,
verdes el b caroteno se encuentra en los cloroplastos, aunque inferior a la de los carotenos alfa y beta. Los
junto con xantofilas, y suele ser el carotenoide estudios preliminares demuestran una actividad
mayoritario. En las frutas, en cambio, el carotenoide
8
antioxidante del gamma caroteno, aunque menor que La astaxantina es el carotenoide más común en los
los demás carotenos. Se obtiene de las algas.[15] animales. Es el principal pigmento responsable del
color rosa de la carne del salmón o de la trucha, y
Licopeno también de las huevas de algunos peces. El músculo
del salmón del Atlántico contiene entre 4 y 10 mg de
El licopeno es el carotenoide más abundante en el astaxantina por kilogramo, mientras que el salmón del
tomate. Aunque el contenido depende mucho del grado pacífico, más intensamente coloreado, contienen entre
de maduración (aumenta con ella), exposición a la luz 14 y 40 mg/ kg. Junto con la astaxantina se encuentran
(también aumenta), tipo de suelo, y de la variedad, cantidades menores de cantaxantina y de astaceno.
puede considerarse representativa la cifra de 40 mg de
licopeno por cada 100 gramos. Como los demás animales, estos peces no pueden
sintetizar los carotenoides “de novo”, por lo que
Una diferencia fundamental entre la estructura del dependen de los contenidos en la dieta, que si pueden
licopeno y la del -caroteno es que los anillos de los transformar unos en otros, con ciertas limitaciones.
extremos se encuentran abiertos. De hecho, el licopeno Esto es importante en acuacultura, ya que si se quiere
es el precursor biosintético del -caroteno en el tomate. obtener el color habitual en los animales salvajes,
El licopeno no tiene actividad como vitamina A, pero deben incluirse carotenoides precursores en los
es un antioxidante muy eficiente frente al oxigeno piensos.
singlete, el que más de todos los carotenoides comunes.
La astaxantina es también la causa del color rojo de la
Cantaxantina mayoría de los crustáceos. En los crustáceos muchas
veces el color de la cantaxantina está enmascarado,
La cantaxantina se encuentra en la seta Cantharellus dado que se encuentra unida muy fuertemente a
cinnabarinus , de donde se extrajo por primera vez, y proteínas, hasta el extremo de que esta unión modifica
de cuyo nombre latino procede el del carotenoide. sus propiedades ópticas. En el caso del bogavante, por
También aparece la cantaxantina, generalmente ejemplo, la cantaxantina está formando parte de un
asociada a otros carotenoides, como pigmento en los complejo multimérico llamado crustacianina, que es de
crustáceos y en la carne de salmón. color azulado. La desnaturalización de la proteína, por
calentamiento, hace que aparezca el color del
La cantaxantina se utiliza extensamente como aditivo carotenoide sin modificaciones en su espectro.
en los piensos destinados a los salmónidos, para dar
color a su carne, y en el destinado a las gallinas y Beta-criptoxantina
pollos, para dar color a la yema del huevo, a la piel y
carne. El color se obtiene por depósito directo o por La -criptoxantina es el carotenoide predominante en
transformación de la cantaxantina en otros las naranjas. También se encuentra presente en otras
carotenoides. frutas de color amarillo o anaranjado, como la papaya o
el melocotón, en el boniato y, acompañando a la
La cantaxantina se utiliza como “bronceador químico”, zeaxantina, en algunas variedades de maíz.
dado que se deposita en la piel y permine obtener un
tono dorado sin necesidad de sol. Ahora bien, las dosis Capsantina
elevadas utilizadas (algunos fabricantes recomiendan La capsantina es el principal carotenoide del pimiento
más de 100 miligramos al día, y algunas consumidoras común (Capsicum annuum), en el que representa hasta
tomaban incluso más). Dado que en su utilización el 60% del total de los carotenoides presentes. Tambiés
como bronceador aparecieron en los usuarios es el más abundante en otras especies del mismo
problemas de salud asociados con la deposición del género y, naturalmente también en el pimentón,
pigmento en la retina, su utilización está limitada, tanto utilizado extensamente en España (y en Hungría, con el
en alimentos para uso humano como en piensos con nombre de paprika) como especia, por su color y
efecto “colorante”. La ADI para humanos fijada aroma.
actualmente es de 0,03 mg/kg de peso. En Internet se
venden actualmente “suplementos bronceadores” con La capsantina es un carotenoide bastante raro,
dosis que cantaxantina superan con mucho el límite de entendiendo como tal en primer lugar que
seguridad, y que pueden resultar peligrosos. prácticamente no se encuentra en otros vegetales.
Además su estructura tiene la particularidad de que el
Astaxantina anillo de uno de sus extremos es solamente de cinco
eslabones Su biosíntesis se produce a partir de la
9
zeaxantina, que se transforma en anteraxantina (un Tanto los pigmentos del azafrán como los principales
epóxido), y después en capsantina. componentes del aroma y del sabor se forman por la
oxidación biológica de la zeaxantina. A partir de la
En el pimiento y en sus extractos (polvo, oleorresina) zona central con dobles enlaces conjugados se forma la
aparecen otros muchos carotenoides, del orden de 50, crocetina. Este tipo de estructuras derivadas se conocen
una buena parte de los cuales no se conoce con detalle. como “apocarotenoides”. Primeramente se produce una
El segundo más importante es la capsorrubina. Tanto oxidación a dialdehido, y luego a diácido. Una vez
ésta como la capsantina están mayoritariamente en producida, la crocetina se une de forma sucesiva a
forma esterificada. También contiene cantidades unidades de glucosa, dos en cada extremo (el
significativas de -caroteno disacárido gentobiosa) formando la crocina, que es el
principal pigmento del azafrán. Debido a la presencia
Zeaxantina de los grupos de azúcar en los extremos de la cadena,
la crocina es soluble en agua.
La zeaxantina se encuentra bastante distribuida entre
los vegetales, acompañando a otros carotenoides. Es el A partir de los extremos de la estructura de la
carotenoide típico del maíz, y de ahí procede su zeaxantina se forma primeramente el hidroxi--
nombre. También se encuentra en muchas bacterias. ciclocitral. Esta sustancia se une por una reacción
enzimática a una unidad de glucosa, mediante un
Luteína enlace glicosídico, dando lugar a la picrocrocina. La
picrocrocina es la responsable del sabor ligeramente
La luteína se encuentra en muchos vegetales, como las amargo del azafrán. A partir de la picrocrocina se
judías verdes, las espinacas o el broculi, aunque su forma, durante el secado de la especia, el safranal, uno
color está enmascarado por el de la clorofila. Junto con de los componentes fundamentales del aroma del
la zeaxantina, es el carotenoide responsable del color azafrán.
de la yema de huevo. Se utiliza precisamente para
añadirla al pienso de pollos y gallinas, para colorear la Pigmentos de la bija
piel, carne y huevos.
La bija o achiote Bixa orellana, es un árbol de tamaño
La luteína tienen dos grupos hidroxilo, pero en los pequeño que crece en Sudamérica, De la pulpa que
alimentos (como los indicados anteriormente) se envuelve sus semillas se extrae un colorante, la bija,
encuentra generalmente en forma no esterificada. En utilizado para colorear alimentos y también en otras
los pétalos de algunas flores, como el llamado industrias. Las sustancias presentes en este pigmentos
“clavelón de la India”, Tagetes erecta (oriundo de son principalmente dos apocarotenoides, la bixina y la
Méjico, a pesar del nombre), en los que es muy nor-bixina.
abundante, se encuentra como mono o di ésteres de los
ácidos palmítico o mirístico. Esta flor es interesante La bixina se encuentra en forma cis, pero se transforma
porque precisamente de ella se extrae gran parte de la en la forma trans con los tratamientos térmicos
luteína comercializada (generalmente como utilizados habitualmente en la extracción del pigmento,
oleorresina) como suplemento para piensos, y también con aceite caliente. También puede extraerse con
la utilizada en el mercado de los mal llamados disolventes como al acetona. La nor-bixina tiene una
“suplementos dietéticos” para humanos. estructura semejante, pero con los dos grupos ácidos
libres. La nor-bixina es soluble solamente en medio
Aunque no tienen actividad como vitamina A, la alcalino, y se utiliza como sal sódica, de modo que al
luteína y la zeaxantina se encuentran presentes en la mezclar el colorante con los alimentos, que tienen pH
retina humana, donde absorben la luz de la zona azul ácido, precipita la forma no ionizada. Esto tiene la
del espectro. Aunque se ha indicado que podrían ventaja de que el alimento queda coloreado, pero no
proteger de la enfermedad conocida como “destiñe”.[16]
degeneración macular, y se venden extensamente como
“suplementos dietéticos” con este fin, no existe OBJETIVOS
ninguna prueba de que ese supuesto efecto protector
sea cierto. Extraer por medio de disolventes orgánicos
los pigmentos naturales de la zanahoria.
Pigmentos del azafrán Separar los carotenos de las xantofilas que
se encuentran en las zanahorias.
10
Por medio de la técnica de cromatografía disolventes orgánicos y después al obtener estos se
separar los 3 tipos de carotenos que existen e realiza una separación de los pigmentos constituyentes
identificarlos. por medio de lavados, entonces se podrán extraer los
carotenos de la zanahoria y después a estos por medio
HIPÓTESIS de cromatografía de adsorción en columna se podrán
separar en sus tres tipos de terpenos.
Si a una zanahoria se le extraen sus pigmentos
naturales que le dan coloración por medio de
MATERIAL enfriar a temperatura ambiente (agregar 9 ml de
H2O).
Bisturí 4. Agitar la solución en un embudo de separación con
Probeta 10, 50ml 25 ml de éter de petróleo, permitir reposo para que
3 matraces erlenmeyer 250ml se separe en 2 capas, la superior de éter que lleva los
1 agitador de vidrio carotenos y la inferior las xantofilas.
1 espátula 5. Separar y guardar la capa superior.
Pinzas de 3 dedos 6. Volver la capa inferior al embudo y lavar con 2
Soporte universal porciones sucesivas de 10 ml c/u de éter de petróleo.
Columna para cromatografía 7. Combinar los extractos de éter de petróleo y lavados
Vidrio de reloj con 10 ml de alcohol al 85% para quitar las
Pipeta volumétrica 10ml xantofilas.
3 vasos de precipitados de 150ml 8. Evaporar el éter de petróleo calentando a menos de
Embudo de separación 40° C usando al vacío (manipule con cuidado).
Pipeta pasteur 9. Disolver el residuo en 2 ml de éter de petróleo antes
Vial ámbar de pasar a columna.
Parrilla de calentamiento
Rotavapor
METODOLOGÍA
A) EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN DE
CAROTENOS
11
Evaporación del éter de petróleo en el rotavapor
Extractos de la zanahoria
Preparación de la columna
-caroteno (4.6ml)
Carotenos
-caroteno (2.7ml)
12
determinar cualitativamente los 3 tipos de carotenos
que existen: , y . Y como estos se contienen en
diferentes proporciones.
REFERENCIAS
13
Relación entre los pigmentos carotenoides rojos y
amarillos. Grasas y Aceites 3 5(1):4- 1 0.
14