FACULTAD DE INGENIERA DE PROCESOS ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS CURSO: Biotecnologa de Alimentos Tema: BIOTECNOLOGA EN PRODUCTOS LCTEOS:

YOGURT DOCENTE: Ing. Jaqueline Zanabria PERTENECE A: Apaza Paricahua, Marisol Amalia Lima Lima, LurdesVanesa Mamani Tuma Sandra Molloco Condori Rocio Murillo Choque, Betty Mirella

AREQUIPA- PER 2013

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ESTUDIO COMPARATIVO DEL EFECTO PRODUCIDO POR LA ADICIN DE LA FIBRA DE NOPAL Y LA ADICIN DE ACEITE ESENCIAL DE SACHA INCHI, SOBRE LOS MICROORGANISMO PRESENTES EN EL YOGURT PROBITICO Apaza Paricahua, Marisol Amalia, Lima Lima, Lurdes Vanesa, Mamani Tuma Sandra, Molloco Condori Rocio, Murillo Choque, Betty Mirella Estudiantes de la Facultad de Ingeniera de Procesos, de la Universidad Nacional san Agustn. Facultad de Industrias Alimentarias de la Universidad Nacional de San Agustn RESUMEN Nos preguntamos si existe inhibicin de los microorganismos pro biticos presentes en el yogurt pro bitico con los diferentes enriquecimiento que se le va agregar como es el caso de nopal aceite esencial de sacha inchi comparndolo con el yogurt pro bitico natural. Por lo que as mismo logramos visualizar, identificar y determinar los efectos que del nopal y del aceite esencial de sacha inchi durante la fermentacin del yogurt. La cual como resultado final se obtuvo que el yogurt con enriquecido con nopal tuvo una adecuada aceleracin de fermentacin mientras que el yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi tuvo inconvenientes durante la fermentacin del yogurt comparndolo con el yogurt pro bitico natural. Todo este resultado se obtuvo a travs de la determinacin de pH y acidez as como visualizacin de la textura de yogurt. Palabras claves: sacha inchi, nopal, pro bitico. I. INTRODUCCIN

La introduccin de microorganismos probiticos ha permitido, no slo mejorar la produccin del yogurt, por disminuir la postacidificacin, sino tambin porque actan como agente teraputico, generando efectos beneficiosos en las personas que los ingieren (Barrante et al., 2004; Demirer et al., 2006). Actualmente estos productos han sido mejorados mediante la adicin de fibra, vitaminas y calcio, entre otros nutrimentos. La fibra presente en el Nopal es un componente muy til y se le considera ya un nutrimento (Daz-Jimnez y col., 2002), en virtud de los efectos benficos que tienen para la salud humana. Las fibras son utilizadas para enriquecer los alimentos, principalmente en productos fermentados como el yogur, que se ha ganado una imagen positiva recomendable para la salud debido a la accin benfica de sus bacterias viables; interacta con otros componentes del alimento durante el proceso. Estas interacciones pueden llevar a cambios en la biodisponibilidad de los nutrientes,

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la textura o el sabor del producto. Las fibras tambin pueden interactuar con las poblaciones microbianas de yogur, ya que por el excedente de aceites esenciales puede inhibir el crecimiento microbiano o componentes como los oligosacridos pueden aumentar el crecimiento. Para ejercer efectos benficos en el husped, es esencial que bacterias cido lcticas y las bifidobacterias estn vivas y abundantes en el momento del consumo (Trumbo y col., 2002). En base a lo anteriormente citado, el objetivo del presente estudio fue elaborar yogurt con cepas pro biticas adicionando la fibra de nopal y aceite esencial de sacha inchi, para posteriormente evaluar el efecto de estos dos sobre los microorganismos presentes (en el yogurt pro bitico). As mismo ofrecer un producto con carcter funcional (capacidad antioxidante y probitico), reforzando en su elaboracin con acite esencial de sacha inchi y fibra de nopal que complementen o realcen sus propiedades. II. MATERIALES Y MTODOS Materiales Leche de vaca pura 2litros Nopal Hidrxido de sodio Aceite esencial de SACHA INCHI Cultivo Muestra de yogurt probiotico 60 ppm Azcar Leche en polvo descremada 500ml Pipetas Vasos Placas petry Ollas Termmetro Probeta Refrigerador Incubadora Cocina Envases de plstico Etiquetado Plumn indeleble Lapicero

METODOLOGA Para la elaboracin del yogurt con fibra de nopal se utilizo la siguiente metodologa: El proceso se inicia con la seleccin de nopal de mxima calidad con respecto a caractersticas bien definidas largo (28-32 cm), ancho (13-15 cm) y grosor (1-2 cm), calibre E] en las pencas, cumpliendo con la norma CODEX STAND 185-1993 Para el Nopal, los nopalitos seleccionados estn maduros, sin olor o sabor extrao, enteros, limpios, sin daos por plagas, sin humedad anormal, sin espinas o manchas. Luego de haber sido seleccionados, el nopal es lavado y desinfectado cuidadosamente. Despus, con una delgada hoja de bistur (esterilizada) se elimina la piel para obtener la pulpa.

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Luego de hacer extrado escrupulosamente las pencas de tuna, stas se lavaron con abundante agua. La pulpa obtenida se macer y se almacen hermticamente por unas 5 horas para poder confirmar mediante el cambio de color de las antraquinonas la presencia de algn contaminante. En seguida se prepar leche comercial. sta se pasteuriza (90 C/ 7 min) y se enfra hasta 44 C por bao mara. La mezcla se inocula con cultivo lctico de alta densidad y se aade la pulpa extrada previamente (500 ml con la del nopal). Entonces inicia la fermentacin (5 a 7 horas), y regularmente se determina la acidez del fermentado hasta que alcance un pH de 5.2 a 5.4, valor que nos indica el tiempo de cortar el cogulo formado y posteriormente se procede a envasar en botellas plsticas con tapa de rosca con una capacidad de 200 mililitros. Evaluacin organolptica de yogurt pro bitico Se realizo mediante visualizacin ptica. Prueba de determinacin de pH Mtodos cuantitativos: Mediante papeles indicadores universales Determinacin de acidez en cremas y productos lcteos fermentados y acidificados La acidez se mide con base a una titulacin alcalimtrica con NaOH 0.1 N utilizando fenolftalena como indicador. Procedimiento: Medir 9 mL (si se emplea la pipeta estndar de crema) o pesar 18 g de muestra perfectamente mezclada en un matraz Erlenmeyer o una cpsula de porcelana. Si la muestra es medida volumtricamente, enjuagar la pipeta con veces su volumen de agua y adicionar los enjuagues al matraz o cpsula y mezclar bien. Si la muestra es pesada, aadir 2 veces el peso de la misma en agua y mezclar bien. Adicionar 0.5 mL de indicador de fenolftalena y titular con solucin de hidrxido de sodio 0.1 N hasta la aparicin de un color rosa permanente por lo menos 30 segundos (se recomienda emplear siempre una cantidad constante de indicador ya que su concentracin puede influir en los resultados). Si la muestra es obscura o colorida, ser necesario despus de agregar agua, titular con ayuda de un potencimetro a un pH de 8.3. Clculos. % Acidez (expresada como cido lctico) = V x N x 9 M donde: V = mL de NaOH 0.1 N gastados en la titulacin. N = Normalidad de la solucin de NaOH M = Volumen o peso de la muestra.

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DIAGRAMA DE FLUJO DE LA ELABORACIN DEL YOGURT CON FIBRA DE NOPAL

Leche

Pasteurizacin

90 C /7 min

Enfriamiento

Pulpa de Nopal (7.5 ml por medio litro) Inoculacin

44 C (Constante)

Fermentacin

5 6 horas de corte PH (5.2 a 5.4) YOGURT

Evaluacin Fisicoqumica y microbiolgica

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DIAGRAMA DE FLUJO DE LA ELABORACIN DEL YOGURT CON ACEITE DE SACHA INCHI

Leche

Pasteurizacin

90 C /7 min

Enfriamiento

Aceite de SACHA INCHI (30 ml por medio litro) Inoculacin

44 C (Constante)

Fermentacin

5 6 horas de corte

YOGURT

Evaluacin Fisicoqumica y microbiolgica

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DIAGRAMA DE FLUJO DE LA ELABORACIN DEL YOGURT PROBIOTICO

Leche

Pasteurizacin

90 C /7 min

Enfriamiento

Inoculacin

44 C (Constante)

Fermentacin

5 6 horas de corte

YOGURT

Evaluacin Fisicoqumica y microbiolgica

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III.

RESULTADOS Y DISCUSIN:

1. DETERMINACIN DE TEXTURA DE YOGURT PRO BITICO Cuadro N1: observacin de textura de yogurt probiotico. Muestras de yogurt pro bitico Observaciones segn apariencia de contextura Yogurt probiotico puro Presento una textura semilquida Yogurt probiotico enriquecido con Presenta una contextura aceite esencial de sachainchi. espesa. Yogurt enriquecido con nopal. Presenta una contextura de un espesamiento alto Fuente, elaboracin propia. Discusin: o Los aceites esenciales se introducen a travs de los lpidos de la membrana celular y mitocondrial alterando su estructura y hacindola ms permeable, como consecuencia hay una fuga de iones y de otros componentes celulares, y llega hasta la muerte celular (Zekaria, 2003). Por lo que se observo una una textura suave en relacin a la textura de yogurt enriquecido con nopal asi como el yogurt natural pro bitico. o En cuanto a la adicin de nopal se realizo para poder observar la textura del yogurt se observa que la textura aumento comprobando as lo que la bibliografa nos a conocer que La fibra del nopal puede interactuar con otros componentes del alimento durante el proceso de la elaboracin del yogurt. Estas interacciones pueden llevar a cambios en la biodisponibilidad de los nutrientes, la textura o el sabor del producto. Las fibras tambin pueden interactuar con las poblaciones microbianas de yogur, ya que por el excedente de aceites esenciales puede inhibir el crecimiento microbiano o componentes como los oligosacridos pueden aumentar el crecimiento.

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2. DETERMINACIN DE PH DURANTE EL PROCESO DE INCUBACIN YOGURT PROBIOTICO a. Despus de una hora de incubacin Cuadro 1: determinacin de pH despus de una hora de la incubacin de yogurt pro bitico Muestra pH Yogurt con Nopal 6.5 Yogurt con aceite esencial de sacha inchi 6.5 Yogurt pro bitico 6.5 Fuente: elaboracin propia, 2013. Grafica N1: Determinacin de pH despus de una hora de incubacin de yogurt pro bitico Determinacion de pH despues de una hora de incubacion
8 6 4 2 0 Yogurt Yogurt con con Nopal aceite esencial Yogurt de sacha pro inchi bitico Yogurt con Nopal Yogurt con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico

Fuente: elaboracin propia, 2013 b. Despus de dos horas de inoculacin Cuadro 2: determinacin de pH al inicio de la incubacin de yogurt pro bitico Muestra Yogurt con Nopal Yogurt con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico Fuente: elaboracin propia, 2013 pH 6.5 6.5 6.5

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Grafica N2 : Determinacin de pH despus de una dos horas de incubacin de yogurt pro bitico

Determinacion de pH depues de dos horas de incubacion

7 6 5 4 3 2 1 0 Yogurt con Nopal Yogurt con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico Yogurt con Nopal Yogurt con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico

Fuente: elaboracin propia, 2013 c. Despus de tres horas de inoculacin Cuadro 3: determinacin de pH despus de tres horas de la incubacin de yogurt pro bitico Muestra pH Yogurt con Nopal 6.0 Yogurt con aceite esencial de sacha inchi 6.0 Yogurt pro bitico 6.3 Fuente: elaboracin propia, 2013 Grafica N3: Determinacin de pH despus de tres horas de incubacin de yogurt pro bitico Determinacion de pH despues de tres horas de incubacion de yogurt probiotico
6.4 6.3 6.2 6.1 6 5.9 5.8 Yogurt con Nopal Yogurt con aceite Yogurt pro bitico esencial de sacha inchi Yogurt con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico Yogurt con Nopal

Fuente: elaboracin propia, 2013

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d. Despus de cuatro horas de inoculacin Cuadro 4: Determinacin de pH despus de cuatro horas de la incubacin de yogurt pro bitico Muestra pH Yogurt con Nopal 6 Yogurt con aceite esencial de sacha inchi 5 Yogurt pro bitico 5 Fuente: elaboracin propia, 2013 Grafica N4: Determinacin de pH despus de cuatro horas de incubacin de yogurt pro bitico Determinacion de pH despues de cuatro horas de incubacion de yogurt ptobiotico
6.2 6 5.8 5.6 5.4 5.2 5 4.8 4.6 4.4 Yogurt con Nopal Yogurt con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico

Yogurt con Nopal Yogurt con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico

Fuente: elaboracin propia, 2013 e. Determinando la correlacin existente de pH en las diferentes muestras Cuadro N5: Correlacin de la determinacin de pH Tiempo (horas) pH de yogurt enriquecido con nopal pH yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi 6.5 6.5 6 5 pH yogurt pro bitico

1 2 3 4

6.5 6.5 6 6

6.5 6.5 6.3 5

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Fuente: elaboracin propia, 2013

Relacion de pH durante la incubacion de yogurt probiotico

7 6 5 5 4 pH 3 2 1 0 1 2Tiempo (horas) 3 4 5 6.5 6.5 6.5 6.5 6.5 6.5 6 6 6.3 6 pH de yogurt enriquecido con nopal pH yogurt enriquesido con aceite esencial de sacha inchi

Fuente: elaboracin propia, 2013 Graficas: variacin de pH durante seis horas correspondiente a la cepa lactococcus lactis, streptoccus salvarius.

Fuente: extrado caracterizacin tecnolgica de cepas de bacterias acido lcticas aisladas de la leche, autor Jorge Olivera Licenciatura en bioqumica.

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Se puede observar en las graficas que se obtuvo de las muestras de yogurt ya sea fortificado con nopal, aceite esencial y puro que el pH va descendiendo a medida que el tiempo de incubacin va pasando, la diferencia no es muy significativa pero se est comprobando que a medida que la fermentacin se va dando entonces este parmetro va disminuyendo. Durante la fermentacin los cidos orgnicos resultantes se acumulan y se producen un gradual descenso del pH, el bajo pH(menos a 4.5 5.0) combinado con alta concentracin de cidos orgnicos. Principalmente acido lctico, inhibe el crecimiento de microorganismos patgenos y de la mayora de los microorganismos que alteran el producto de esta forma adems de lograr que el producto sea seguro desde el punto de vista microbiolgico se extiende su tiempo de vida til. (Extrado caracterizacin tecnolgica de cepas de bacterias acido lcticas aisladas de la leche, autor Jorge Olivera Licenciatura en bioqumica ). En cuanto a las tres muestras estudiadas se pudo obtener resultados similares pero a la tercera hora de incubacin se pudo obtener resultados similares entre yogurt enriquecido con nopal y el yogurt enriquecido con aceite esencial, mientras que el yogurt pro bitico natural tuve en pH 6.3 (se puede observar en la grafica N 3), esto debido a que los microorganismo presentes interactan rpidamente con la fibra del nopal as como con el aceite esencial. El acido lctico producido favorece el desarrollo de la textura del producto ya que la disminucin de pH provoca la desestabilidad de las micelas de casena principalmente por solubilizacion del fosfato de calcio asociada a estas al descender el pH hasta 4.64.7 se alcanza al punto isoelctrico de las casenas y estas precipitan con lo cual se produce la coagulacin de la leche. (Extrado caracterizacin tecnolgica de cepas de bacterias acido lcticas aisladas de la leche, autor Jorge Olivera Licenciatura en bioqumica), Segn bibliografa nos indica que la disminucin de pH es favorable a la formacin de la textura adecuada del yogurt. 3. DETERMINACIN DE GRADOS DORNIC DURANTE LA INOCULACIN DE YOGURT PRO BITICO a. Grados dornic inicial antes de la incubacin Cuadro N6: determinacin de Dornic antes de la incubacin de yogurt pro bitico Muestra Dornic Yogurt enriquecida con Nopal 20.34 Yogurt enriquecida con aceite esencial 17.4 de sacha inchi Yogurt pro bitico 20.25 Fuente: elaboracin propia, 2013

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Grafica N6: Determinacin de Dornic antes de la incubacin de yogurt pro bitico

Dornic de la muestra

21 20 19 18 17 16

Dornic
Yogurt enriquecido con Nopal Yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi

15 Yogurt Yogurt enriquecido enriquecido concon Nopal aceite esencial Yogurt de pro sacha bitico inchi Yogurt pro bitico

Fuente: elaboracin propia, 2013 b. Grados Dornic a una hora de despus de la incubacin Cuadro N7: determinacin de pH al inicio de la incubacin de yogurt pro bitico Muestra Dornic Yogurt enriquecida con Nopal 17.5 Yogurt enriquecida con aceite esencial 16.5 de sacha inchi Yogurt pro bitico 17.0 Fuente: elaboracin propia, 2013 Grafica N7: Determinacin de Dornic despus de una hora de incubacin de yogurt pro bitico
17.6

Dornic
Yogurt enriquecido Nopal Yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi

Dornic de la muestra

17.4 17.2 17 16.8 16.6 16.4 16.2

16 Yogurt Yogurt enriquecido enriquecido Nopal con aceite esencial Yogurt pro de sacha bitico inchi

Fuente: elaboracin propia, 2013.

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c. Grados dornic a dos horas despus de la incubacin Cuadro N8: Grados Dornic a dos horas despus de la incubacin del yogurt pro bitico Muestra Dornic Yogurt enriquecida con Nopal 16.7 Yogurt con aceite esencial de sacha inchi 17.0 Yogurt pro bitico 17.5 Fuente: elaboracin propia, 2013 Cuadro N 9: Grados dornic a dos horas despus de la incubacin del yogurt pro bitico

Dornic
17.6 17.4 Dornic de la mustra 17.2 17 16.8 16.6 16.4 16.2 Yogurt enriquecido con Nopal Yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico Yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico Yogurt enriquecido con Nopal

Fuente: elaboracin propia, 2013 d. Grados dornic a tres horas despus de la incubacin Cuadro N10: Grados dornic a tres horas despus de la incubacin del yogurt pro bitico Muestra Dornic Yogurt enriquecido con Nopal 21 Yogurt enriquecido con aceite esencial 20 de sacha inchi Yogurt pro bitico 19.5 Fuente: elaboracin propia, 2013

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Grafica N 10: Grados dornic a tres horas despus de la incubacin del yogurt pro bitico

Dornic
Dornic de la muestra 21.5 21 20.5 20 19.5 19 18.5 Yogurt Yogurt enriquecido enriquecido con con Nopal aceite esencial Yogurtde pro sacha bitico inchi Yogurt enriquecido con Nopal Yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico

Fuente: elaboracin propia, 2013. e. Grados dornic a cuatro horas despus de la incubacin Cuadro N 11: Grados dornic a cuatro horas despus de la incubacin de yogurt pro bitico Muestra Dornic Yogurt enriquecido con Nopal 31.3 Yogurt enriquecido con aceite esencial 29 de sacha inchi Yogurt pro bitico 30.5 Fuente: elaboracin propia, 2013 Grafica N11: Grados dornic a cuatro horas despus de la incubacin de yogurt pro bitico

Dornic
Dornic de la mustra 31.5 31 30.5 30 29.5 29 28.5 28 27.5 Yogurt Yogurt enriquecido con enriquecido con Nopal aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico Yogurt enriquecido con Nopal Yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico

Fuente: elaboracin propia, 2013

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f. Grados dornic a cinco horas despus de la incubacin Cuadro N 12: Grados dornic a cinco horas despus de la incubacin Muestra Dornic Yogurt enriquecido con Nopal 47.8 Yogurt enriquecido con aceite esencial 40 de sacha inchi Yogurt pro bitico 45 Fuente: elaboracin propia, 2013 Grafica N 12: Grados dornic a cinco horas despus de la incubacin

Dornic
50 Dornic de la muestra 48 46 44 42 40 38 36 Yogurt Yogurt enriquecido con enriquecido con Nopal aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico Yogurt enriquecido con aceite esencial de sacha inchi Yogurt pro bitico Yogurt enriquecido con Nopal

Fuente: elaboracin propia, 2013 Cuadro N13: correlacin de los grados dornic en las muestras de yogurt Tiempo Dornic del yogurt enriquecido con nopal 0 1 3 4 5 6 20.34 17.5 16.7 21 31.3 47.8 Dornic del yogurt Dornic del yogurt enriquecido con aceite pro bitico esencial 17.4 20.25 16.5 17 17 17.5 20 19.5 29 30.5 40 45

Fuente: elaboracin propia, 2013

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Grafica N13: correlacin de los grados Dornic en las muestras de yogurt

Correlacion de los Dornic en las muestras

60 Dornic en la muestra 50 40 30 20 10 0 0 1 3 4 5 6 Tiempo(horas) Dornic del yogurth enriquecido con nopal Dornic del yogurt enriquecido con aceite esencial Dornic del yogurt probiotico

Fuente: elaboracin propia, 2013

Grafica N 14: curva de crecimiento y acidificacin de una bacteria lctica.

Fuente: extrado de tecnologa de les llets fermentades, autor: Jos Antonio Mateos Al comparar la grafica N 13 con la grafica N 14 se puede observar que las muestran la fase logartmica (crecimiento activo)pero significativamente est aumentando su ndice de acidez (dornic), en este caso se pudo obtener que el yogurt enriquecido con nopal aumentaba ascendentemente (grafica 6,7,8,9,10,11) en comparacin con el yogurt probiotico enriquecido con aceite esencial y natural. En cuanto al yogurt nopal se dio esta diferencia ya que segn bibliografa se dice que la fibra del nopal puede interactuar con otros componentes del alimento durante el proceso de la elaboracin del yogurt. Estas interacciones pueden llevar a cambios en la

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biodisponibilidad de los nutrientes, la textura o el sabor del producto. Las fibras tambin pueden interactuar con las poblaciones microbianas de yogur, ya que por el excedente de aceites esenciales puede inhibir el crecimiento microbiano o componentes como los oligosacridos pueden aumentar el crecimiento. Para ejercer efectos benficos en el husped, es esencial que bacterias cido lcticas y las bifidobacterias estn vivas y abundantes en el momento del consumo (Trumbo y col., 2002). Durante los ltimos aos, ha aumentado el inters en los alimentos que constituyen efectos positivos sobre la salud, ms all de su valor nutricional. Entre estos alimentos funcionales, la atencin se ha centrado en los productos probiticos. Los alimentos pro biticos contienen microorganismos o componentes de clulas microbianas que resultan benficos para la salud y el bienestar de los consumidores (Salminen y col., 1999). En cuanto al yogurt probiotico enriquecido con aceite esencial de sacha inchi se obtuvo los grados dornic bajos esto debido a que segn bliografia Los aceites esenciales se introducen a travs de los lpidos de la membrana celular y mitocondrial alterando su estructura y hacindola ms permeable, como consecuencia hay una fuga de iones y de otros componentes celulares, y llega hasta la muerte celular (Zekaria, 2003). En la concentracin de 60 ppm existi una considerable accin antimicrobiana.

IV.

CONCLUSIN: Se logro diferenciar la velocidad de crecimiento bacteriano con la ayuda de otros compuestos como la fibra del nopal y aceite esencial de sacha inchi. La elaboracin de lcteos fermentados adicionados con fibras dietticas, como en el caso del yogur, es una buena opcin para el consumidor en general, ya que posee efectos benficos para la salud. La concentracin de aceite esencial de yogurt no ayudo a corroborar lo que en bibliografa nos indica. BIBLIOGRAFA

V.

Alatriste, K. Efecto de la adicin de fibra y calcio en un yogur con sabor. Universidad de las Amricas-Puebla. Puebla. Tesis de licenciatura 2002. Aportela, A. Estudio de las propiedades fsico-qumicas y sensoriales en un yogur saborizado enriquecido con fibra y calcio. Universidad de la AmricasPuebla, Puebla, Tesis de licenciatura, 2003 Anthos Proyecto, Avena sativa, Plantas tiles: Linneo. Real Jardn Botnico. 2009.

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