Cambios en la expresión génica

en las gónadas del adulto

de Drosophila melanogaster 

Juan Antonio Alférez Chueco

1
 ÍNDICE
• Introducción
• Objetivos
• Materiales y métodos
• Resultados
• Discusión
• Conclusiones
• Perspectivas futuras

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 INTRODUCCIÓN

CICLO DE VIDA

3
OVARIO

4
TESTÍCULO

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CAMBIOS DE LA EXPRESIÓN GÉNICA EN LA GÓNADA ADULTA
Envejecimiento Genéticos Ambientales

Nrg y HTS

- Daños en el DNA
- ROS
Mecanismos
- Estrés replicativo
- ProtoOncogenes

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NEUROGLIAN (Nrg)

7
NEUROGLIAN (Nrg)

Formas
largas

Formas
cortas

8
HTS

Citoesqueleto

GSCs

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 OBJETIVOS

Estudiar el patrón de expresión espacio-temporal del

gen Nrg en las gónadas de Drosophila melanogaster.

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 MATERIAL Y MÉTODOS

STOCK 13xLexAop-mCD8:GFP; Ptc-LexA; +

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 ANTICUERPOS

Anti-Nrg B104
Experimentales
Primarios Anti-Nrg 1B13
Anti-HTS 1B1 Control positivo

Secundario Anti-mouse Cy3

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 EXPERIMENTO
Inmunofluorescencia sobre

- Macho experimental
- Control positivo
20x 5 GRUPOS 4 TUBOS - Control negativo
- Hembra experimental
- Semana 0
- Semana 1
- Semana 2
- Semana 3
- Semana 4

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 ANÁLISIS

Intensidad ANOVA y Kolmogórov-

Máximos y mínimos Smirnov

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 RESULTADOS
EXPRESIÓN DE LA CONSTRUCCIÓN 13XLexAop-mCD8:GFP; Ptc-LexA; +

Ovariola Testículo
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FUNCIONAMIENTO DE LOS ANTICUERPOS

Anti-HTS

Ovariola Testículo

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FUNCIONAMIENTO DE LOS ANTICUERPOS

Anti-Nrg 1B13 Anti-Nrg B104

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FUNCIONAMIENTO DE LOS ANTICUERPOS

Control negativo

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CAMBIOS EN LA DETECCIÓN DE Nrg

Semana 0
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 CAMBIOS EN LA DETECCIÓN DE Nrg

Semana 2

Semana 1 Semana 3

20
CAMBIOS EN LA DETECCIÓN DE Nrg

Semana 4
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ANÁLISIS DE FLUORESCENCIA

22
ANÁLISIS DE FLUORESCENCIA

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 DISCUSIÓN

13XLexAop-mCD8:GFP; Ptc-LexA; + No se da en machos  Ausencia de Ptc

Anti-Nrg B104  señal débil, escapa a la resolución

Señal de los anticuerpos

Anti-Nrg 1B13  puede detectar varias isoformas

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 DISCUSIÓN

Cambios en el patrón de expresión Diferentes isoformas

INTENSIDAD
Patrón de fluorescencia

(Piper & Partridge, 2018)

TIEMPO
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 CONCLUSIONES

1) Testado el funcionamiento de anti-Nrg 1B13

2) Diferencias en la expresión de HTS y Nrg a lo

largo de la vida del adulto de Drosophila
melanogaster

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 PERSPECTIVAS FUTURAS

- Microscopía confocal.

- Usar otro protocolo de inmunofluorescencia para

realizar el mismo estudio en machos y con anti-Nrg
B104

- Realizar el estudio en otros órganos

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GRACIAS POR SU
ATENCIÓN

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