CLASE TEÓRICA N° 2

PROTEÍNAS Y ENZIMAS
Cátedra de Biología
Celular
 RESULTADO DE APRENDIZAJE Y CONTENIDOS
RESULTADO DE APRENDIZAJE
Explica la estructura y funciones de las proteínas, de manera particular el rol de las enzimas para la
homeostasis celular y aplicaciones en el campo médico, a través de clases teóricas, prácticas de
laboratorio y organizadores gráficos .

• PROTEÍNAS.
• Estructura
• Clasificación
• Funciones

• ENZIMAS.
• Cinética enzimática
• Regulación
• Importancia biomédica
AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
 πρώτα "proteios“, "primario" o
del dios Proteo

Cumplen un papel fundamental

para la vida, imprescindibles para
el crecimiento de cualquier
organismo

Las biomoléculas más versátiles y

más diversas.

Macromoléculas cuaternarias (C,H,O,N), algunas también con S y P.

Son compuestos muy complejos (decenas, cientos o miles de aminoácidos unidos entre sí por enlaces
peptídicos)

Las propiedades de cada una de las proteínas al igual que su funcionalidad dependen de la secuencia de
aminoácidos que la formen.

La polimerización de los L-aminoácidos por síntesis de enlaces peptídicos contribuye a la formación

estructural de las proteínas.
AMINOÁCIDOS Monómeros de proteínas, dulces, cristalinos, ácidos (o
anfóteros)

Ig G
Hay más de 300 aminoácidos en la naturaleza. En las
proteínas del ser humano sólo se encuentran 20 (con infinitas
combinaciones).
Cada aminoácido tiene propiedades químicas
distintivas.

La sustitución de un solo aminoácido en la cadena

polipeptídica puede alterar las propiedades de la proteína.
Ejemplo: Anemia falciforme (sustitución de glutamato por
valina).
Aminoácidos alifáticos apolares Aminoácidos polares no cargados Aminoácidos cargados positivamente

Las
Aminoácidos aromáticos Aminoácidos cargados negativamente propiedades
químicas de
un aa
definen su
ubicación y
función.
AMINOÁCIDOS

E senciales
No esenciales
Todos Niños Fenilce- Alanina
V alina en crecimiento prematuros tonúricos
Asparragina
L eucina Arginina Cisteína Tirosina Aspartato
T reonina Histidina Tirosina
T riptófano Cisteína
Metionina Glicina
Isoleucina Glutamato
Fenilalanina
Glutamina
Lisina Prolina
8 esenciales para la vida humana (triptófano, la lisina y la metionina los más Serina
problemáticos por dietas a base de carbohidratos) y 2 resultan "semi
indispensables“ (para niños).
Tirosina
 ESTRUCTURAS PROTEICAS

Los péptidos y las proteínas están formados por la

unión de aminoácidos mediante enlaces peptídico.

Primaria
Secundaria

Cuaternaria
Terciaria
El enlace peptídico es un
enlace covalente entre el
grupo amino (–NH2) de un
aminoácido y el grupo
carboxilo (–COOH) de otro
aminoácido.

El enlace peptídico implica la

pérdida de una molécula de
agua y la formación de un
enlace covalente CO-NH.
 DESNATURALIZACIÓN
Agente
Regiones afectadas
desnaturalizante
Calor Enlaces de hidrógeno
Detergentes Regiones hidrofóbicas
Ácidos Enlaces de hidrógeno,

Bases Puentes salinos

Sales Puentes salinos
Agentes reductores Puentes disulfuro
Metales pesados Puentes disulfuro
Urea 6 M Enlaces de hidrógeno
https://livingwellinthe21stcentury.wordpress.com/2018/04/25/protein-cooking-and-eggs/
MODIFICACIONES
POSTRADUCCIONALES
Fosforilación P
Hidroxilación Agrega un fosfato a serina,
Se une un grupo hidroxilo (-OH) a una treonina o tirosina
cadena lateral de una proteína
Glucosilación G
Metilación PROTEÍNA Agrega azúcar, usualmente a
Agrega un grupo metilo, usualmente a
un N u O en una cadena lateral
residuos de lisina o arginina
de aminoácido

Ubiquitinación
Lipidación Agrega ubiquitina a residuo de
Se une un lípido, tal como un ácido Ub
lisina de una proteína para su
graso, a una cadena peptídica degradación
https://brilliant.org/practice/protein-origami/

Acetilación Puente disulfuro

Agrega un grupo acetilo a Une covalentemente átomos de azufre
extremo N de una proteína
un oa de dos diferentes residuos de cisteína
residuos de lisina Proteólisis
 PROTEÍNAS

Según contenido Número de Forma o Solubilidad Composición

de aminoácidos Cadenas Conformación
Simples u
Completas Monoméricas Fibrosas Solubles
Holoproteínas
Ej. Ej. Ej.
Ej.
Incompletas Mioglobina Queratina Albúmina Albúminas
Globulinas
Oligoméricas o Insolubles
Globulares Histonas
Multiméricas
Ej. Ej.
Ej. Escleroproteínas
Catalasa Colágeno
Hemoglobina Conjugadas o
Heteroproteinas
Intermedias Ej.

Ej. Fosfoproteínas
Fibrinógeno Glucoproteínas
Metaloproteínas
Nucleoproteínas
Lipoproteínas
 SEGÚN SU ESTRUCTURA:

a. P.FIBROSA: Son aquellas que están formadas por cadenas polipeptídicas, formando
estructuras compactas llamadas fibras, por ejemplo: colágeno, queratina, elastina, fibroina, fibrina
.
b. P. GLOBULARES: Están formadas por cadenas polipeptídicas, que adoptan una forma esférica
, por ejemplo: enzimas, anticuerpos, interferentes, histonas, tubulinas, albúminas, hemoglobina.

SEGÚN SU COMPOSICIÓN:

Las proteínas pueden ser simples o conjugadas :

a. P.SIMPLES: Son aquellas que al hidrolizarse (degradarse) sólo producen aminoácidos.
b. P.CONJUGADAS: Son aquellas que al hidrolizarse, producen aminoácidos y otros
compuestos orgánicos e inorgánicos .Estas pueden ser: metal proteínas, núcleo proteínas,
fosfoproteínas.
CLASIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS POR SU FUNCIÓN BIOLÓGICA:

1.PROTEÍNAS PROTECTORAS EN LA SANGRE:

1.1 Anticuerpos 4.PROTEÍNAS ESTRUCTURALES:

1.2 Complemento 4.1 Proteínas de recubrimiento viral.
1.3 Fibrinógeno 4.2 Alfa-queratina .
1.4 Trombina 4.3 Esclorotina. 7.PROTEÍNAS
4.4 Fibroina. TRANSPORTADAS:
2.TOXINAS: 4.5 Colágeno. 7.1 Hemoglobina.
2.1 Toxina de clostridium botulinum 4.6 Elastina. 7.2 Mioglobina.
2.2 Toxina difterica 4.7 Mucoproteinas. 7.4 Beta1 lipoproteina.
2.3 Veneno de serpiente 5. ENZIMAS: 7.5 Globulina ligada al hierro.
5.1 Hexoquinasa. 7.6 Ceruloplasmina.
3.HORMONAS: 5.2 Lactato deshidrogenasa.
3.1 Insulina 5.3 Citocromo . 8.PROTEÍNAS
3.2 Hormona adrenocorticotropica . 5.4 ADN-polimerasa. CONTRÁCTILES:
3.3 Hormona de crecimiento . 8.1 Miosina.
6.PROTEÍNAS DE RESERVA: 8.2 Actina .
6.1 Ovoalbúmina. 8.3 Dineina.
6.2 Caseína.
6.3 Ferritina.
 PRINCIPALES FUNCIONES DE LAS PROTEÍNAS
• Proteínas Estructurales
- Proteínas del citoesqueleto
- Colágeno

• Proteínas de Transporte
- Proteínas de transporte pasivo: porinas, canales iónicos
- Proteínas de transporte activo: bombas

• Proteínas de Señalización Celular

- Prot. receptoras de membrana: proteínas G, proteínas
receptoras tirosina kinasa
- Proteínas receptores nucleares
- Prot. de señalización intracelular: proteína kinasa activada
por mitógenos (MAP kinasa, proteína kinasa A (PKA)
http://ecoursesonline.iasri.res.in/pluginfile.php/41043/mod_res
ource/content/1/13.12-Functions_of_proteins-Jul-01-2011.jpg
• Proteínas Cuidadoras del Genoma

• Proteínas Hormonas: Insulina • Proteínas Enzimas metabólicas

ENZIMAS
ENZIMAS Y TIPOS ESPECIALES
Estructura Holoenzima
básica
Tipos especiales Proteína Cofactor
Apoenzima
Apoproteína Coenzima
-Nucleotidos
Grupo Prostético -Comp. Vit. B
Ribozimas
RNA Enzimas de
Abzimas restricción
Granzimas
Anticuerpos Actividad citotóxica
(apoptosis)
 Enzimas y reacción enzimática básica
• Función E + S [ES] [EP] P+E
• Viabilizar la Estado de transición
actividad celular por
su participación en
todas las reacciones Energia de activación sin enzima
biológicas
Energia de activación con
• Naturaleza química
S enzima
• Proteinas globulares
P Formular ahora un concepto de enzima
•RNA con propiedades basado en la figura
catalíticas: Ribozimas
Las enzimas
Reacción disminuyen la energía
de activación para
superar el estado de
Y si no hubiera alguna enzima, la reacción continuaría?. Justifique transición
 Modelo llave - cerradura
G + ATP G, 6P + ADP
Hexocinasa/Glucocinasa
Ecuación de Michaelis-Menten Transformación de Lineweaver - Burk

v = Vmax [S]
v Km
v = Vmax

Vmax
2

Km [S]
Constante de Michaelis y Menten

¿Cuando se alcanza la velocidad máxima?

Transformación de Lineweaver - Burk
REVISIÓN Sitio
Glucosa Fructosa catalítico
Sustrato
4 Enzima
1 (sacarosa)
(sacarasa)
Productos son
liberados
Enzima disponible
con sitio catalítico
libre

E+S [ES] [EP] P+E

[EP}
Sustrato es
convertido a
productos 3
2

[ES]
Sustrato se une a
Además de incrementar la velocidad de las la enzima
reacciones, las enzimas proveen un medio
para regular las velocidades de las vías
metabólicas en el cuerpo.
FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
1. Temperatura 5. Moduladores
• Positivos
2. pH • Activadores
• Inductores
3. Concentraciones
• Enzima
de: • Negativos
• Sustrato • Inhibidores Regulación
• Represores de
• Producto actividades
(retroalimentación • Especiales
• Alostérica
4. Localización
negativa)
• Covalente
• Zimógenos
 FACTORES BÁSICOS
TEMPERATURA
pH
 ORES BÁSICOS
CONCENTRACIÓN DE ENZIMA

CONCENRACIÓN DE SUSTRATO • Al aumentar, inicialmente

incrementa la reacción, se
Su aumento, también incrementa la actividad enzimática, estabiliza y luego disminuye por
alcanzan su velocidad máxima cuando la enzima se satura, agotamiento de sustrato e
luego disminuye por sobrtesaturación inhibición por producto
REGULACIÓN DE ACTIVIDADES: Moduladores

TIPOS DE INHIBICIÓN
 INHIBIDORES POR SU MECANISMO
Irreversibles Inhibidores suicidas

Forman enlaces covalentes o Sufren una reacción parcial y forman

extremadamente fuertes con
Inhibidores son compuestos grupos funcionales en el sitio
catalítico
que disminuyen la tasa de
reacción enzimática
Ejem. Diisopropilfosfofluoridato
(organofosforado) es el prototipo
del sarin, forma enlaces con Serina
inhibición irreversible
en el sitio catalítico
Ejem. Penicilina, forma un compuesto
que no puede disociarse de
glucopeptidil transpeptidasa bacteriana
🡪 inhiben síntesis de pared bacteriana

Ejem. El Acido acetilsalicílico

(aspirina) forma enlaces por Ejem. Alopurinol, inhibe a la xantina
acetilación de Serina en el sitio
catalítico de prostagañlndin oxidasa
endoperoxido sintasa (Ciclo
oxigenasa, COX)
 CINÉTICA DE INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
I Competitiva I
No-competitiva I
Acompetitiva
V V V
P max max max
vo vo
l V
max
’
V ’
o I I max
I
t
e
o
d Km Km’ [S], mM K m = K m’ [S], mM K ’
Km [S], mM
i m
Vmax no se altera Vmax disminuye
r Vmax & Km disminuye
Km se incrementa Km no se altera
e
c
t
o

Dobl
e 1/vo 1/vo 1/vo
I I I
Reci
proc
Ruptura proteolítica de
zimógenos o pro enzimas
Ruptura proteolítica de
zimógenos o pro enzimas
CLASIFICACIÓN DE ENZIMAS
 Según la reacción que catalizan (IUB)
1. Oxidorreductasas transfieren electrones (e-, H+)
2. Transferasas transfieren grupos funcionales, tal como glicosilo,
metilo, fosforilo (no agua)
3. Hidrolasas catalizan reacciones hidrolíticas (con adición de agua), separa
C-O, C-S, C-N, y otros
4. Liasas al lisar sustratos generan dobles enlaces, o catalizan la adición
de un sustrato a un doble enlace de un segundo sustrato.
5. Isomerasas transfieren grupos dentro de las moléculas C-S, C-O y C-N
para generar diversos isómeros
6. Ligasas catalizan formación de enlaces C-C, acopladas a
hidrólisis de energía, por ejemplo ATP
Catalizan reacciones que implican la ruptura hidrolítica de enlaces químicos, tales
como C=O, C-N, C-C. Sus nombres comunes se forman añadiendo el sufijo -asa al
nombre de substrato. Ejs.: lipasas (hidrolizan los ésteres de ácidos grasos),
peptidasas, amilasa, maltasa, pectinoesterasa, fosfatasa (hidrolizan los ésteres
fosfóricos de muchos compuestos orgánicos, como, por ejemplo, glicerofosfatos,
almidones), ureasa. También pertenecen a este grupo la pepsina, tripsina y
quimotripsina.
Transforman sus substratos de una forma isomérica en otra. Ejs.:
Epimerasas, racemasas y mutaras.
Catalizan la formación de enlace entre C y O, S, N y otros átomos. Generalmente,
la energía requerida para la formación de enlace deriva de la hidrólisis del ATP. Las
sintetasas y carboxilasas están en este grupo.
 USOS FUNDAMENTALES
Marcadores enzimáticos
Uso en • Enzimopatías Ejm anemia
hemolítica (G, 6PDH, Pyr cinasa)
• Marcadores tumorales Ejm
diagnóstico enolase neuroespecífica

Otras enzimas
Algunas enzimas blanco de fármacos
Agentes se usan como
son
• Cox, Xantina oxidasa,
•fármacos
Factores de la
terapeúticos coagulación, lactasa ECA,
inversa
transcriptasa

Herramientas Glucosa oxidasa

(Reactivos) de (glicemia), ELISA, LDH,
CK
diagnóstico
CARACTERÍSTICAS DE LOS MARCADORES ENZIMÁTICOS

Secretorias Intracelulares

Actúan
Producido por Ejem. Hígado
intracelularmente y
tejidos/órganos, Lipoprotein lipasa
carecen de acción en
actuan en plasma (LPL)
plasma

Se localizan en: membrana

(ALP, γGT), citosol (ALT,
AST, LDH, MDH),
Mitocondrias (AST),
lisosomas (ACP)
Otros son producidos por
tejidos/organos específicos
Hígado (G, 6Pasa),
Pancreas (amilasa),
Corazón (LDH1)
ISOENZIMAS: LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)
Estudiar más
ejemplos de HHHH NADH+ NAD+
interés médico LDH
HMMM
Piruvato Lactato

HHMM

HHHM MMMM
ISOENZIMAS: CREATIN KINASA (CK)

MM
MB
BB
INFARTO AL MIOCARDIO HEPATITIS
LDH ALT(GPT)
AST(GOT) AST (GOT)
CK γ GT
 MARCADORES ENZIMATICOS DE DAÑO O DISFUNCIÓN DE TEJIDO
ESPECÍFICOS U ÓRGANOS
ENZIMAS Y TEJIDOS
Las enzimas intracelulares
aparecen en el plasma como
consecuencia de un
intercambio normal
Las enzimas intracelulares se
incrementan a nivel
plasmático debido a daño o
proliferación celular
Adaptado de:
https://www.clinicalkey.es/#!/content/book/3-s2.0-B9780702072987000259
• Alanina aminotransferasa
(ALT), o Glutamato piruvato
transaminasa (GPT).
• Amilasa y lipasa.
• Aspartato aminotransferasa
(AST), o Glutamato oxalacetato
transaminasa (GOT)
• Creatina kinasa (CK).
• Fosfatasa alcalina (ALK).
• Gamma-glutamil
transpeptidasa (GGT)
• Lactato deshidrogenasa
(LDH)
ENZIMAS-FÁRMACOS CON APLICACIÓN MÉDICA
COMPETITIVA NO COMPETITIVA
FÁRMACOS FÁRMACOS

• AINEs Ejem: Aspirina • Tipranavir

• Inhiben a la ciclooxigenasa • inhibidor de la
• Β lactámicos Ejem. Penicilina proteasa del VIH)
• Inhiben síntesis de pared bacteriana uniéndose a
la PBP • Nevirapina
• inhibidor de transcriptasa
• Revisar su mecanismo inversa
• Sulfas (~PABA)
🡪 VIH
• IECAs (Captopril, enalapril)
• Alopurinol
• Fluorouracilo
• Estatinas BUSCAR OTROS EJEMPLOS
BUSCAR USAN EJEMPLOS USANDO LADO
OTROS LA LITERATURA
LITERATURA ADECUADA
ADECUADA
Preguntas Deben revisar los materiales,
realizar las tareas y subirlas en la
plataforma.

Gracias por su
atención………..