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Cuantificación de la cantidad de metahemoglobina formada por nitritos

presentes en embutidos y evaluación del efecto protector del azul de metileno
en ratones y en muestra sanguínea humana.
Autores: De La Barreda, D., De La Barreda, G., Escamilla, D., Maturano, J.
Licenciatura en Farmacia, Laboratorio de Toxicología, Grupo 1702, Eq. 1, 6 de diciembre de 2022.

RESUMEN: En la elaboración de la mayoría de los productos cárnicos se hace necesaria la

utilización de determinados aditivos alimentarios que permitan garantizar su seguridad
microbiológica, entre estos aditivos ocupan un lugar destacable los nitratos y nitritos. Las funciones
de los nitratos y nitritos en los productos cárnicos curados pueden resumirse en las siguientes:
formación y estabilización del color rojo característico de la carne curada, inhibición del crecimiento
de bacterias patógenas, contribución al desarrollo del aroma típico de la carne curada y por último
posee un efecto antioxidante;retardando el desarrollo de la rancidez y aunque son de gran ayuda en
la industria alimentaria su uso también es causa de intoxicaciones,dentro de las manifestaciones
clínicas de la intoxicación con nitratos y nitritos en humanos la más destacable es la
metahemoglobinemia; afección por la que hay una cantidad más alta que lo normal de
metahemoglobina en la sangre, la cual no es capaz de transportar el oxígeno a los tejidos. Para
cuantificar la cantidad de metahemoglobina, se llevó a cabo la administración de nitrato in vitro en
muestras sanguíneas humanas y aquella que se forma en muestras sanguínea de ratones, después
de administrar diferentes muestras comerciales de embutidos a los mismos durante una semana; con
el objetivo de identificar si los conservadores (nitritos y nitratos) provocan cambios en los niveles de
hemoglobina y metahemoglobina, así como demostrar la capacidad como antídoto del azul de
metileno cuando se administra minutos antes a los ratones e in vitro a las muestras sanguíneas
humanas. Los valores de concentración de Metahemoglobina en ratones tratados con azul de
metileno y no tratados con este, observando que las muestras sanguíneas de los ratones a los que
se les administró previamente azul de metileno mostraron un porcentaje de MHbt mucho menor a
comparación con el grupo no tratado con el antídoto, también se observó el comportamiento de los
niveles de Hbt (hemoglobina) y MHbt (metahemoglobina) para los ratones tratados y no tratados con
azul de metileno, en el que se observa que los niveles de Hbt promedio son mayores para los ratones
tratados con azul de metileno minutos antes del análisis sanguíneo a diferencia de los que no fueron
tratados con el antídoto. Aunque no se determinó directamente la presencia de nitritos y nitratos en
embutidos, con los resultados, concluimos que los embutidos si presentan cantidades considerables
de nitritos ya que si hubo un efecto en los niveles de Hbt y MHbt en las muestras de sangre de los
ratones alimentados con embutidos y que el azul de metileno es un tratamiento aceptado como el
mejor para el tratamiento inicial ante la intoxicación por nitritos ya que en ratones a los cuales se les
administró azul de metileno mostraron un % de MHbt mucho menor a comparación con el grupo no
tratado con el antídoto.

Palabras clave: Nitratos, Nitritos, Intoxicación, Hemoglobina, Metahemoglobina, embutidos, azul de

metileno, antídoto

ABSTRACT:In the elaboration of most meat products it is necessary to use certain food additives to
ensure their microbiological safety, among these additives nitrates and nitrites occupy a prominent
place. The functions of nitrates and nitrites in cured meat products can be summarized as follows:
formation and stabilization of the red color characteristic of cured meat, inhibition of the growth of
pathogenic bacteria, contribution to the development of the typical aroma of cured meat and finally
has an antioxidant effect; retarding the development of rancidity and although they are of great help in
the food industry their use is also a cause of poisoning, within the clinical manifestations of poisoning
with nitrates and nitrites in humans the most remarkable is methemoglobinemia; A condition in which

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there is a higher than normal amount of methemoglobin in the blood, which is not able to carry oxygen
to the tissues. To quantify the amount of methemoglobin, in vitro nitrate was administered in human
blood samples and that formed in blood samples from mice, after administering different commercial
samples of sausages to them for a week; In order to identify whether preservatives (nitrites and
nitrates) cause changes in hemoglobin and methemoglobin levels, as well as to demonstrate the
antidote capacity of methylene blue when administered minutes before to mice and in vitro to human
blood samples. The values of concentration of Methemoglobin in mice treated with methylene blue
and not treated with it, observing that the blood samples of mice that were previously administered
methylene blue showed a much lower percentage of MHbt compared to the group not treated with the
antidote, the behavior of Hbt (hemoglobin) and MHbt (methemoglobin) levels was also observed for
mice treated and not treated with methylene blue, in which average Hbt levels are seen to be higher
for mice treated with methylene blue minutes before blood testing than those that were not treated
with the antidote. Although the presence of nitrites and nitrates in sausages was not directly
determined, with the results, we conclude that sausages do have considerable amounts of nitrites
since there was an effect on the levels of Hbt and MHbt in the blood samples of mice fed with
sausages and that methylene blue is a treatment accepted as the best for the initial treatment of nitrite
poisoning since in mice given methylene blue showed much lower MHbt compared to the group not
treated with the antidote.

Keywords: Nitrates, Nitrites, Intoxication, Hemoglobin, Methemoglobin, sausages, methylene

blue, antidote

INTRODUCCIÓN

Los embutidos consisten en partes se descomponen en óxido nítrico (NO)

comestibles cárnicas a las cuales se les siguiendo las siguientes reacciones:
adicionan sales de curado, compuesta por:
− −
cloruro de sodio, especias, nitritos y nitratos 𝑁𝑂3 → 𝑁𝑂2
(Villamil-Galindo, E., Piagentini, M.A., 2021). − +
Sin embargo, el uso indiscriminado de los 𝑁𝑂2 + 𝐻 ↔ 𝐻𝑁𝑂2
conservadores hace que consideremos estos 2𝐻𝑁𝑂2 ↔ 𝑁2𝑂3 + 𝐻2𝑂
alimentos poco saludables; pero eso no priva 𝑁2𝑂3 ↔ 𝑁𝑂 + 𝑁𝑂2
de su consumo (Soto López I., et. al., 2017).

Los nitratos se emplean como aditivos en la
fabricación de productos cárnicos curados;
éstos tienen otros efectos sobre los alimentos:
retrasa el proceso de oxidación de los lípidos,
con la consecuente disminución del olor
característico de enranciamiento, produce
mayor firmeza en la textura, y provee a los
alimentos de un importante efecto
antimicrobiano. Además de proporcionar color
adecuado a la carne (Soto López I., et. al.,
2017).
El uso de nitratos y nitritos como aditivos
presenta incuestionables ciertos riesgos,
como es la toxicidad aguda (Soto López I., et.
al., 2017).
Durante el desarrollo de color, los nitritos
(NO2-) adicionados a los productos cárnicos,
(Villamil-Galindo, E., Piagentini, M.A., 2021)
El óxido nítrico generado a partir del nitrito es
el compuesto clave de los productos curados.
Sin embargo, es altamente reactivo con el
oxígeno y ciertos radicales libres
(Villamil-Galindo, E., Piagentini, M.A., 2021).
Los nitritos provocan la oxidación del hierro
ferroso de la hemoglobina en hierro férrico
(metahemoglobina) (Lauwerys, R., 1994); lo
cual genera metahemoglobinemia que se
manifiesta como cianosis (provoca la
inhibición de la capacidad de unión del
oxígeno a los eritrocitos), generalmente como
consecuencia de una excesiva exposición a
los nitritos (Villamil-Galindo, E., Piagentini,
M.A., 2021).
De los nitratos ingeridos, una fracción es
absorbida mediante transporte activo en la

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parte superior del intestino delgado y otra
puede ser biotransformada por la microflora
en el conducto gastrointestinal. Los nitritos se
absorben por difusión a través de la mucosa
gástrica y la pared intestinal. Los nitratos y
nitritos son rápidamente distribuidos a través
de los tejidos. Los nitratos absorbidos son
rápidamente excretados por los riñones. De
acuerdo, a un estudio en ratas, el 42 y 90% de
nitratos administrados se excreta en la orina
dentro de las ocho horas de administración;
en seres humanos el nitrato se excreta
rápidamente en la orina en un porcentaje
cercano al 65-70%, después de la absorción y
el equilibrio en los fluidos corporales (Huanca
Sucasaire, D.A., Solís Medina, R.P., 2010).
Las manifestaciones clínicas de la intoxicación
con nitratos y nitritos en humanos son la
vasodilatación, metahemoglobinemia,
hipotensión moderada, taquicardia, acidosis
metabólica, hipoxia debida a la
metahemoglobinemia, taquipnea y cianosis,
convulsiones (Ciencia e Investigación, 1999).
metileno como tratamiento a 3 de ellos, se
obtuvo una muestra sanguínea de los 6
sujetos de estudio, se centrífugo y se
determinó su absorbancia por
espectrofotometría a 630 nm (A1); se adicionó
cianuro de potasio y nuevamente se
determinó su absorbancia por medio de
espectrofotometría a 630 nm (A2); se agregó
hidróxido de amonio, solución de ferricianuro
de potasio, solución de cianuro de potasio y
se determinó nuevamente su absorbancia por
espectrofotometría a 540 nm (A3). Se
obtuvieron tres diferentes muestras
sanguíneas de humano, se les adicionó de
manera in vitro nitratos, a una de ellas se le
agregó azul de metileno y se les realizó el
mismo tratamiento para la determinación de
las absorbancias A1, A2 y A3.
RESULTADOS
Tabla 1. Sujeto de estudio, tratamiento y
fuente de nitritos y nitratos utilizados por cada
equipo.

Una de las pautas para el tratamiento de las Eq. Sujeto Tratamiento Fuente de
intoxicaciones por nitratos y nitritos es la de nitritos y
acción del Azul de Metileno, la cual es reducir estudio nitratos
la metahemoglobina a hemoglobina (Ciencia e
Investigación, 1999). 1 Ratón Azul de Salchicha
metileno Chimex
De acuerdo a lo anterior, y a la posible acción
2 Humano Azul de Nitratos
del Azul de Metileno como reductor de la metileno
metahemoglobina, en la presente práctica se
buscó cuantificar la cantidad de 3 Humano — Nitratos
metahemoglobina que se forma mediante la
administración de nitrato in vitro en muestras 4 Ratón — Jamón
sanguíneas humanas y aquella que se forma
5 Ratón Azul de Salchicha
en muestras sanguínea de ratones, después
metileno Aurrera
de administrar diferentes muestras
comerciales de embutidos a los mismos; con 6 Humano — Nitratos
el objetivo de identificar si los conservadores
(nitritos y nitratos) provocan cambios en los 7 Ratón Azul de Salchicha
niveles de hemoglobina y metahemoglobina; metileno
así como demostrar la capacidad reductora
8 Ratón — Salchicha
del azul de metileno cuando se administra Granel
minutos antes a los ratones e in vitro a las
muestras sanguíneas humanas. 9 Control Control

MATERIALES Y MÉTODOS 10 Ratón — Salchicha

Granel
Se alimentó durante una semana con * Nota: Los equipos a los que se les colocó
embutidos a 6 ratones, se administró azul de “Nitratos” con fuente de nitrito y nitratos se refiere a

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la adición de nitratos in vitro en la muestra ➔ Ejemplo del cálculo de Hbt, MHbt y

sanguínea. %MHbt para el equipo 1

Tabla 2. Lectura de las absorbancias 1, 2 y 3 Paso 1. Cálculo del valor de Hbt (g/100 mL)
de las muestras sanguíneas de diferentes
sujetos de estudio. 𝐻𝑏𝑡 ( 𝑔
100 𝑚𝐿 ) = 𝐴3𝑋37. 4
Eq. A1 A2 A3 𝐻𝑏𝑡 ( 𝑔
100 𝑚𝐿 ) = 0. 386 𝑋 37. 4 = 14. 4364
1 0.073 0.125 0.386
La cantidad de Hbt es de 14. 4364 g/100 mL
2 0.603 0.575 0.357
Paso 2. Cálculo del valor de MHbt (g/100 mL)
3 0.522 0.119 0.334
𝑀𝐻𝑏𝑡 ( 𝑔
100 𝑚𝐿 ) = (𝐴1 − 𝐴2) 𝑋 23. 4
4 0.026 0.086 0.214

5 0.026 0.115 0.384

𝑀𝐻𝑏𝑡 ( 𝑔
100 𝑚𝐿 ) = (0. 073 − 0. 125) 𝑋 23. 4 = − 1. 2168

6 0.475 0.326 0.273 La cantidad de MHbt es de -1.2168 g/100 mL

7 0.026 0.071 0.238 Paso 3. Cálculo del valor de %MHbt

8 0.037 0.075 0.388 𝑀𝑒𝑡𝑎𝐻𝑏 𝑒𝑛 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 % = ( 𝑀𝐻𝑏𝑡

𝐻𝑏𝑡 ) 𝑥 100
9 0.29 0.52 0.442
𝑀𝑒𝑡𝑎𝐻𝑏 𝑒𝑛 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 % = ( −1.2168
14.4364 ) 𝑥 10 =− 8. 3853
10 0.234 0.251 0.169
La cantidad de % MHbt es de -8.3853
Tabla 3. Resultados obtenidos del cálculo de
Hbt, MHbt y %MHbt obtenidos por cada
equipo.

Eq. Hbt MHbt %MHbt

(g/100 mL) (g/100 mL)

1 14.4364 -1.21 -8.3853

2 13.3518 0.6552 4.98

3 12.4916 9.4302 75.4923

4 8.0036 -1.404 -17.54 Esquema 1. Resumen de la metodología para

entender las especies identificadas en las
5 14.3616 -2.0826 -14.501
determinaciones de absorbancia A1, A2, y A3.
2

6 10.21 13. 33.69 Tabla 4. Promedio de Hbt, MHbt (g/100 mL) y

%MHbt para cada grupo de ratones tratados y
7 8.9012 -1.053 -11.829 no tratados con azul de metileno

8 14.5112 -0.8892 -6.1277 Azul de metileno Sin azul de metileno

9 16.5308 -5.382 -32.557 Eq Hbt MHbt % Eq Hbt MHbt %

4 MHbt MHbt

10 6.3206 0.3978 -6.2952 1 14.4 -1.21 -8.38 4 8.00 -1.40 -17.5

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364 53 36 4 4

5 14.3 -2.08 -14.5 8 14.5 -0.88 -6.12

616 26 012 112 92 77

7 8.90 -1.05 -11.82 10 6.32 0.397 -6.29

12 3 9 06 8 52

𝑥 12.5 -1.44 -11.57 𝑥 9.61 -0.63 -9.98

664 85 18 18 18 76

Tabla 5. Promedio de Hbt, MHbt (g/100 mL) y

%MHbt para cada grupo de muestras
sanguíneas de humano tratados y no tratados
con azul de metileno

Azul de metileno Eq Sin azul de

Eq metileno

Hbt MHbt % Hbt MHbt %

MHbt MHbt

2 13.3 0.655 4.98 3 12. 9.43 75.49

518 2 491 02 23
6 DISCUSIÓN

6 — — — 6 10. 3.43 33.69 Para la cuantificación de metahemoglobina

21 98 por nitritos, se expuso a cierta cantidad de
13.3 0.655 4.98 11. 6.43 54.59
este tóxico a ratones y de manera in vitro a
𝑥 𝑥
518 2 350 5 11 muestras de sangre humana para demostrar
8 su toxicidad al ser capaz de producir
metahemoglobina. Los sujetos de estudio, así
como las fuentes de nitritos y nitratos
utilizados por cada equipo se registran en la
Tabla 1 de resultados.

Segurondo Loza Romina y colaboradores,

2020, describen en su artículo que los nitritos
y nitratos son frecuentemente utilizados para
la conservación de embutidos ya que su
efecto es evitar la presencia de
microorganismos, estabilizar el color y
favorecer el desarrollo de aromas (Segurondo
Loza, R., et. al., 2020).

El procedimiento consistió en evaluar, en tres

diferentes determinaciones de absorbancias
por espectrofotometría, dos complejos; uno a
630 nm que corresponde a la
metahemoglobina y a 540 nm que permite
calcular la concentración de hemoglobina total
transformada a cianohemoglobina (Otto, C. N.,
2020).

El esquema 1 muestra de manera resumida

las especies que se determinaron en cada

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absorbancia reportadas en la tabla 2. La
primera determinación de absorbancia (A1)
corresponde a la primera lectura de
metahemoglobina ya que durante esta
determinación no se ha agregado algún
agente químico que la transforme; la segunda
determinación de absorbancia (A2)
corresponde a la segunda lectura de
metahemoglobina, en este punto, su gran
mayoría ha sido transformada en
cianometahemoglobina al agregar cianuro de
potasio; la última absorbancia (A3)
corresponde a la lectura de hemoglobina total,
pues después de la adición de ferricianuro de
potasio, éste oxida a toda la hemoglobina
presente en la muestra a metahemoglobina, la
cual se convierte después rápida y
cuantitativamente a cianohemoglobina con la
adición de cianuro de potasio (Sepúlveda,
Rodrigo A, 2020).
De acuerdo a lo anterior, es indispensable la
adición de ferricianuro de potasio a la muestra
sanguínea analizada ya que este es un agente
oxidante que permite la conversión completa y
cuantitativa de la hemoglobina a previamente azul de metileno mostraron un %
metahemoglobina para la determinación de
hemoglobina total. Con él es posible
cuantificar a la hemoglobina a 540 nm, pues la
hemoglobina no oxidada puede reaccionar
solamente con el cianuro de potasio pero de
una manera lenta, no espontánea y no
cuantitativa; de esta forma, el ferricianuro de
potasio acelera el proceso de oxidación y
complejación con el cianuro de potasio para
facilitar la determinación de hemoglobina en la
muestra (Ware, A. D., 2020).
Los nitritos presentes en el organismo, tanto si
son ingeridos directamente como si provienen
de la reducción de los nitratos, en el caso de
las muestras de sangre humana, una vez
absorbidos y presentes en la sangre son
capaces de transformar la hemoglobina en
metahemoglobina y pueden causar
metahemoglobinemia.
Sin embargo, en la literatura de Katabami, K. y
colaboradores, 2016, reportan que el azul de
metileno está indicado como antídoto de
primera línea para pacientes con
metahemoglobinemia grave cuya función es
junta con la metahemoglobina reductasa
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NADPH dependiente presente, reducir a azul
de leucometileno, que a su vez reduce a la
metahemoglobina a hemoglobina ayudando
de esta manera al paciente (Katabami, K.,
Hayakawa, M., & Gando, S., 2016).
Para demostrar la capacidad reductora del
azul de metileno cuando se administra
minutos antes a ratones y a la muestra de
sangre humana, se analizaron en conjunto los
grupos de ratones tratados y no tratados con
azul de metileno; así como la muestra de
sangre humana tratadas a las mismas
condiciones y se obtuvo un promedio, valores
reportados en la tabla 4 y 5. Se realizaron los
gráficos correspondientes para evaluar y
comparar visualmente el efecto de este
antídoto en los sujetos y en la muestra de
estudio.
La gráfica 1 muestra la comparación del % de
Metahemoglobina en ratones tratados con
azul de metileno y no tratados con este,
observando que las muestras sanguíneas de
los ratones a los que se les administró
de MHbt mucho menor a comparación con el
grupo no tratado con el antídoto.
Por otro lado, el gráfico 2 muestra la
comparación del % de Metahemoglobina en
las muestras de sangre de humano tratados
con azul de metileno y no tratados con este,
de igual manera, se identifica que la muestra
de sangre tratada con azul de metileno
muestra significativamente un menor % de
MHbt a comparación con el grupo no tratado
con el antídoto.
Lo anterior demuestra que el azul de metileno
es un excelente antídoto para el tratamiento
de la metahemoglobinemia provocada por
nitritos presentes en embutidos u obtenidos
por la administración in vitro de nitratos a la
muestra sanguínea humana.
Prashant R. Ginimuge y SD Jyothi, 2020, en
su artículo reportan que el principal
mecanismo de acción que ejerce el azul de
metileno es que actúa reaccionando dentro de
los glóbulos rojos para formar azul de
leucometileno, que es un agente reductor de
la hemoglobina oxidada que convierte el ion
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férrico (Fe+++ ) de nuevo en su estado ferroso
portador de oxígeno (Fe++) (Prashant R. y SD
Jyothi, 2020).
Por otro lado, la literatura reporta que el
volumen de hemoglobina en g/100 ml en
ratones es de aproximadamente 10-17
(Brigitte, M. R., et. al., 2022). El promedio de
Hbt en ratones tratados con azul de metileno
es de 12. 5664 g/100 mL, valor que entra
dentro de los valores normales de
hemoglobina reportados en la literatura, lo
cual no sucede con los ratones a los que no
se les aplicó un tratamiento con azul de
metileno ya que se obtuvo un promedio de
este parámetro de 9.6118 g/100 mL.
El gráfico 3 muestra de manera visual el
comportamiento de los niveles de Hbt y MHbt
para los ratones tratados y no tratados con
azul de metileno, en el que se observa que los
niveles de Hbt promedio son mayores para los
ratones tratados con azul de metileno minutos
antes del análisis sanguíneo a diferencia de
los que no fueron tratados con el antídoto. De
manera similar, se observa que la cantidad de
MHbt es menor para el grupo de ratones
administrados con azul de metileno.
La literatura reporta que los niveles de
hemoglobina varían para los adultos, de entre
12 a 18 g/100 mL de sangre (Khan, Z.,
Nawaz, M., Khan, A., Bacha, U., 2013). El
valor promedio para la sangre tratada con azul
de metileno fue de 13. 3518 g/100 mL, valor
que entra dentro de los límites normales
reportados en la literatura; caso diferente para
la sangre sin tratamiento del antídoto ya que
se obtuvo un promedio de 11. 3508 g/100 mL,
valor ligeramente menor a lo reportado.
El gráfico 4 muestra visualmente el efecto del
azul de metileno en los niveles de Hbt y MHbt
en sangre de humano, en el que se observa
gran diferencia en los niveles de Hbt y MHbt
para la sangre tratada con el antídoto,
mostrando niveles mayores y menores
respectivamente a diferencia del grupo de
sangre a los que no se les agrego in vitro azul
de metileno.
Debido a que la alimentación con embutidos a
los ratones de estudio no fue mayor a una
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semana, no se observaron signos o síntomas
que indicaran intoxicación por nitritos; sin
embargo, la literatura reporta que algunos de
los síntomas en animales son dificultad para
respirar, incoordinación para caminar,
temblores y el animal orina frecuentemente
(Pirugina y Banchero, 1992).
Aunque no se determinó directamente la
presencia de nitritos y nitratos en embutidos,
el análisis realizado muestra que los
embutidos presentan cantidades
considerables de nitritos ya que si hubo un
efecto en los niveles de Hbt y MHbt en las
muestras de sangre de los ratones
alimentados con embutidos. Es importante
mencionar que en México, la Norma Oficial
NOM-213-SSA1-2002, Productos y servicios.
Productos cárnicos procesados.
Especificaciones sanitarias. Métodos de
prueba, indica que el límite máximo de
nitratos/nitritos en productos curados no debe
de superar las 156 ppm. La determinación de
este tóxico en los diferentes embutidos
utilizados puede ser una gran contribución en
el estudio de este tóxico, así como un gran
apoyo para la fundamentación de los
resultados obtenidos en la presente práctica
(Secretaria de Salud, 2005).
Este tipo de estudio toxicológico es de gran
interés puesto que Martinez Cabrera J. y
Velazquez, R., 1998, reportan que algunas de
las manifestaciones clínicas de la intoxicación
por nitratos y nitritos en humanos son la
vasodilatación, metahemoglobinemia,
hipotensión moderada, taquicardia, acidosis
metabólica, hipoxia debida a la
metahemoglobina, convulsiones, entre otras
(Martínez Cabrera, J., & Velázquez Ogando,
R., 1998), signos y síntomas que pueden
llegar a ser considerablemente perjudiciales si
las concentraciones de nitrato/nitritos superan
los límites máximos establecidos en
embutidos.
CONCLUSIONES
Acorde con los resultados, concluimos que los
embutidos si presentan cantidades
considerables de nitritos ya que si hubo un
efecto en los niveles de Hbt y MHbt en las
muestras de sangre de los ratones
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alimentados con embutidos. De acuerdo a los
resultados obtenidos y a las gráficas
analizadas, el azul de metileno es un
tratamiento aceptado como el mejor para el
tratamiento inicial ante la intoxicación por
nitritos ya que en ratones a los cuales se les
administró azul de metileno mostraron un %
de MHbt mucho menor a comparación con el
grupo no tratado con el antídoto.
La comparación también se realizó en sangre
humana contaminada con nitratos de manera
in vitro, teniendo como resultados que la
muestra de sangre tratada con azul de
metileno muestra una menor cantidad de %
MHbt a comparación con el grupo no tratado
con el.
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