Índice

 Introducción I. Indol 1. Géneros bacterianos que identifica 2. Fundamento bioquímico 3. Características generales 4. Interpretación 5. Controles de calidad

II.

Rojo de Metilo 1. Géneros bacterianos que identifica 2. Fundamento bioquímico 3. Características generales 4. Interpretación 5. Controles de calidad

III.

Voges -Proskauer 1. Géneros bacterianos que identifica 2. Fundamento bioquímico 3. Características generales 4. Interpretación 5. Controles de calidad

IV.

Citrato 1. Géneros bacterianos que identifica 2. Fundamento bioquímico 3. Características generales 4. Interpretación 5. Controles de calidad

V.

Conclusión

VI.

Bibliografía

La prueba del Indol PRINCIPIO Estudia la capacidad de degradar el triptófano con producción de Indol y metabolitos indólicos II. Voges Proskauer Estudia la fermentación butanodiólica con formación de un metabolito intermediario neutro. blattae (-). IV. vulneris (-) y E. E. amalonaticus y del biogrupo 1. hermanii (+) y E. 2. koseri (+) y de C. PRUEBA I. los cuales. Rojo de Metilo Estudia la fermentación ácido mixta con producción de ácidos estables en el tiempo. 1. Klebsiella oxytoca (+) y K. Hafnia (-). 4. Rojo de metilo. conocida su reacción. agglomerans (-). Paenibacillus alvei (+) de otras especies de Bacillus (por lo general -). Escherichia coli (+).Pruebas bioquímicas Consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos. 3. V-). OBJETIVO  Ayuda a diferenciación entre géneros 1. ornithinolytica (+) de otras especies de Klebsiella (V-) .  Ayuda en la diferenciación de especies junto con otras pruebas bioquímicas. Separación de Escherichia coli (+) de los miembros de los géneros Klebsiella (variables. Voges-Proskauer y Citrato. por lo común negativos. Sirven de gran apoyo a la hora de diagnosticar infecciones por bacterias. Citrato Estudia la capacidad de utilizar el citrato como única fuente de carbono. nos permiten identificar distintos microorganismos presentes. Citrobacter freundii (-) de C. I. III. Serratia (V-) y una especie de Pantoea. fergusonii (+) de E. PRINCIPIO PRUEBA DE INDOL Para determinar la capacidad de un microorganismo para separar el indol a partir del triptófano. IMVIC El IMVIC se compone de cuatro pruebas: Indol. P. Enterobacter (V-).

pneumotropica (+) de P. gallicida (+) y P. multocida subesp. Septica (V+) Pasteurella multocida (+). indolacetato). dagmatis sbesp. haemolytica (-) y de Actinobacillus ureae (-) 7. P. Peptostreptococcus asaccharolyticus (+) y P. Ésta prueba cuantitativa para la producción de ácido (determinación de pH). Paenibacillus alvei (+) de las especies aisladas con mayor frecuencia P. PRINCIPIO. OBJETIVO.5. Escherichia coli (MR+) Enterobacter cloacae (MR-). multocida subesp. 8. Prueba de indol en mancha 11. Pasteurella dagmatis (+). diferencia entre los aerobios con pigmento negro. PRUEBA DE ROJO DE METILO Probar la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los productos finales ácidos a partir de la fermentación de la glucosa y para vencer la capacidad buffer del sistema. Las diversas enzimas intracelulares involucradas se denominan colectivamente “triptofanasa”. La triptofanasa cataliza la reacción de desaminación atacando la molécula de triptófano sólo en su cadena lateral y dejando el anillo aromático intacto como indo. Junto con la sialidasa. polymgxa (-). indolicus (+) de otras especies de Peptostreptococcus (-) que pueden causar infecciones humanas. P. macerans (-) y P. La desaminación y la hidrólisis tienen lugar con el agregado de una molécula de agua en presencia de la triptofanasa y de la conenzima fosfato de piridoxal. alfa. 9. II. Ayudan a la diferenciación entre géneros o la diferenciación de especies dentro de un género de la familia Enterobacteriaceae. 12. P. Proteous vulgaris (+). 10. de Enterobacter aerogenes (MR-) y . algunos microorganismos producen más ácidos que otros. multocida (+). P. 1.y beta-glucosidasas y alfa-fructosidasa. inconstans (+) de otras especies de Proteus (-) 6. Junto con otras pruebas (ureasa y ornitina) subdivide Haemophilus influenzae a Haemophilus parainfluenzae en biotipos. FUNDAMENTO El triptófano es un aminoácido que puede ser oxidado por ciertas bacterias para formar tres metabolitos indólicos principales: escatol (metil indol) y ácido indolacético (IAA. Los resultados de rojo de metilo son características valiosas para la identificación de especies de bacterias que producen ácidos fuertes a partir de glucosa. Propionibacterium acnes (+) de las especies de Propionibacterium (-) aisladas con mayor frecuencia.

Diferenciar Edwardsiella ictaluri (MR-) de E. grimontii (MR+).  Aerococcus urinae  Todas las especies Shigella  Ewingella americana  Especies Kluyvera  Lecrercia adecarboxylata  Especies Citrobacter. por lo común MR-) y K.3-butanodiol + H2O + 2 CO2 2. lo que a su vez es un índice de las diferentes vías metabólicas de la glucosa exhibidas por los diversos microorganismos. Reacción global del metabolismo de:  E. Diferenciar Klebsiella oxytoca y K. cuando un microorganismo fermenta glucosa. Los diferentes patrones de fermentación se deben a las variaciones en las enzimas relacionadas con el metabolismo del ácido piruvico en el organismo. Los organismos en estudio se incubarán por lo menos 2 días a 35- .coli 2 Ácido láctico + ácido acético + etanol + 2 CO2 + 2 2Glucosa + H2O  H2 (Ácido fórmico  H2 + CO2) Klebsiella-Enterobacter  2.2. salmonicida La prueba de rojo de metilo (MR) es una prueba cuantitativa basada en el uso de un indicado de pH. Otros microorganismos que son rojo de metilo positivos. 3. pneumoniae subesp. por lo común +) de otros bacilos gramnegativos no entéricos (MR-). el rojo de metilo. (MR+) Budvicia aquatica (MR+) de otros miembros de familia Enterobacteriaceae con resultados KIA/TSI Ácido/Ácido. Diferenciar Leminorella richardii (MR-) de L. 5. Pneumoniae (ambas V. para determinar la concentración del ion Hidrógeno. tarda del biogrupo 1 (MR+) 4. HS2. terrigena (V) de otras especies o subespecies de Klebsiella. hoshinae (MR+) y E. Buttiauxella agrestis Las pruebas de rojo de metilo y Voges-Proskauer identifican: o Aeromonas veronni o Especies de Listeria o Vibrio metschnikovii o Aeromonas hydrophila o Aeromonas subesp. La concentración del ion Hidrógeno depende de la relación de gases (CO2 y H2). variable.3-butanodiol) Glucosa + ½ O (Acetoìna La validez de la prueba de RM depende de un tiempo de incubación suficiente como para permitir que se produzca la diferencia en el metabolismo de la glucosa. Especies de Yersinia (V.masoucida FUNDAMENTO.

4) Fraccionar alrededor de 5ml por tubo(26x125mm) Método de esterilización: autoclave.PROSKAUER La prueba de Voges-Proskauer (VP) se basa en la detección de acetoína. En esta prueba se determina la vía de fermentación del butanodiol descrita anteriormente en la prueba rojo de metilo. La glucosa es metabolizada a ácido pirúvico. La prueba de Voges-Proskauer para la acetoína se utiliza sobre todo para separa Escherichia coli de los grupos KlebsiellaEnterobacter. mientras que todos los que tienen relaciones altas de gas (MR-) mostraran una concentración del ion H más baja. PRUEBA DE VOGES. MR-positivo (+)/VP negativo(-): Escherichia coli B. un producto final neutro derivado del metabolismo de la glucosa. Enfriar antes de usar y refrigerar para la conservación (4-10°C). El acetil-metil-carbinol o acetoína es un producto intermediario en la producción de butanodiol esta se forma por la . 3) Calentar con suavidad la solución. lo que permite que todos los organismos con baja proporción gaseosa(MR+) muestren su limite en la concentración de iones H limitante. 1) Pesar la cantidad exacta como indica el rótulo. las bacterias pueden seguir muchos caminos metabólicos. 121°C. • MICROORGANISMOS UTILIZADOS PARA EL CONTROL DE CALIDAD ATCC 25922 ATCC 13048 Medio de Clark y Lubs A. a las 6-8 semanas. Los productos de las diferentes compañías pueden presentar leves variaciones.37°C.  Fórmula Polipeptona o peptona de carne tamponada O digerido pancreático de caseína Y digerido péptico de tejidos animales Glucosa (dextrosa) Buffer fosfato dipotásico (K2HPO4) Agua desionizada MÈTODO DE PREPARACIÒN.aunque otros miembros de la familia Enterobacteriaceae pueden producir un resultado positivo de VP. la producción de acetoína es una de las vías metabólicas de la degradación de la glucosa en las bacterias. 2) Rehidratar con agua destilada o desmineralizada. 15min. Incubación. 15lb. MR-negativo (-)/VP positivo(+): Enterobacter aerogenes III. vencimiento. Inoculación. MEDIO DE CULTIVO UTILIZADO.

2ml de alfa naftolal 5% en etanol al 95%. La prueba de Indol Degradación de Triptófano con producción de Indol. Voges Proskauer Fermentación butanodiólica con formación de un metabolito intermediario neutro.  Reactivos VP de Coblentz Añadir 0.descarboxilación de dos moléculas de ácido purúvico. Acidificación del medio. creatina al 0. puede formarse un color cobrizo pero es un resultado negativo. Observar el color de la superficie del medio. Rojo de Metilo.3% en KOH al 40%.2 ml de hidróxido de potasio al 40% a 2. Agitar vigorosamente el tubo. Reactivos empleados:  Reactivos VP de Barrit Añadir 0. Citrato Como única fuente de carbono BIBLIOGRAFÍA . De acuerdo a sus vías metabólicas. En medio alcalino y en presencia de oxígeno la acetoína es oxidada a diacetilo este se revela en presencia de α-naftol dando un color rojo-fucsia.3-butanodiol son productos neutros en la fermentación de la glucosa. VP positivo (+) color rosado-rojo en la superficie del medio (acetoína presente)  Enterobacter cloacae ATCC 13047 VP negativo (-) color amarillo en la superficie del medio. tanto la acetoína como el 2. Cada una denota su fundamento. y dejar a temperatura ambiente durante 10-15 minutos.  Escherichia coli ATCC 11775 CONCLUSIÓN Las pruebas IMViC son suma importancia dentro de la búsqueda de un agente patógeno causal.6 ml de alfa naftol al 5% en alcohol etílico absoluto y 0. las cuales pueden ser aerobias o anaerobias. es decir y comparten una característica importante. éstas identifican enterobacterias en su mayoría.5 ml de cultivo.

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