Índice

 Introducción I. Indol 1. Géneros bacterianos que identifica 2. Fundamento bioquímico 3. Características generales 4. Interpretación 5. Controles de calidad

II.

Rojo de Metilo 1. Géneros bacterianos que identifica 2. Fundamento bioquímico 3. Características generales 4. Interpretación 5. Controles de calidad

III.

Voges -Proskauer 1. Géneros bacterianos que identifica 2. Fundamento bioquímico 3. Características generales 4. Interpretación 5. Controles de calidad

IV.

Citrato 1. Géneros bacterianos que identifica 2. Fundamento bioquímico 3. Características generales 4. Interpretación 5. Controles de calidad

V.

Conclusión

VI.

Bibliografía

La prueba del Indol PRINCIPIO Estudia la capacidad de degradar el triptófano con producción de Indol y metabolitos indólicos II. Escherichia coli (+). Voges-Proskauer y Citrato. Separación de Escherichia coli (+) de los miembros de los géneros Klebsiella (variables. vulneris (-) y E. amalonaticus y del biogrupo 1. Voges Proskauer Estudia la fermentación butanodiólica con formación de un metabolito intermediario neutro. III. blattae (-). IMVIC El IMVIC se compone de cuatro pruebas: Indol. PRUEBA I. E. agglomerans (-). 4. por lo común negativos. hermanii (+) y E. los cuales. conocida su reacción. Sirven de gran apoyo a la hora de diagnosticar infecciones por bacterias. Citrato Estudia la capacidad de utilizar el citrato como única fuente de carbono. 3. OBJETIVO  Ayuda a diferenciación entre géneros 1. P. Serratia (V-) y una especie de Pantoea. V-). Paenibacillus alvei (+) de otras especies de Bacillus (por lo general -). 1.Pruebas bioquímicas Consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos. koseri (+) y de C. Citrobacter freundii (-) de C. ornithinolytica (+) de otras especies de Klebsiella (V-) . Enterobacter (V-). fergusonii (+) de E. Hafnia (-). I. nos permiten identificar distintos microorganismos presentes. Rojo de Metilo Estudia la fermentación ácido mixta con producción de ácidos estables en el tiempo. Klebsiella oxytoca (+) y K.  Ayuda en la diferenciación de especies junto con otras pruebas bioquímicas. IV. 2. PRINCIPIO PRUEBA DE INDOL Para determinar la capacidad de un microorganismo para separar el indol a partir del triptófano. Rojo de metilo.

La triptofanasa cataliza la reacción de desaminación atacando la molécula de triptófano sólo en su cadena lateral y dejando el anillo aromático intacto como indo. P. algunos microorganismos producen más ácidos que otros. Junto con otras pruebas (ureasa y ornitina) subdivide Haemophilus influenzae a Haemophilus parainfluenzae en biotipos. Septica (V+) Pasteurella multocida (+). Escherichia coli (MR+) Enterobacter cloacae (MR-). 12. Paenibacillus alvei (+) de las especies aisladas con mayor frecuencia P. PRINCIPIO. FUNDAMENTO El triptófano es un aminoácido que puede ser oxidado por ciertas bacterias para formar tres metabolitos indólicos principales: escatol (metil indol) y ácido indolacético (IAA. indolacetato). gallicida (+) y P. Ayudan a la diferenciación entre géneros o la diferenciación de especies dentro de un género de la familia Enterobacteriaceae. Los resultados de rojo de metilo son características valiosas para la identificación de especies de bacterias que producen ácidos fuertes a partir de glucosa. inconstans (+) de otras especies de Proteus (-) 6. dagmatis sbesp. Las diversas enzimas intracelulares involucradas se denominan colectivamente “triptofanasa”. de Enterobacter aerogenes (MR-) y . Pasteurella dagmatis (+). OBJETIVO. Propionibacterium acnes (+) de las especies de Propionibacterium (-) aisladas con mayor frecuencia. II. P. P. pneumotropica (+) de P. 8.5. 9. Proteous vulgaris (+). multocida subesp. macerans (-) y P. P. polymgxa (-). 10. La desaminación y la hidrólisis tienen lugar con el agregado de una molécula de agua en presencia de la triptofanasa y de la conenzima fosfato de piridoxal. 1. haemolytica (-) y de Actinobacillus ureae (-) 7. multocida subesp. alfa. PRUEBA DE ROJO DE METILO Probar la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los productos finales ácidos a partir de la fermentación de la glucosa y para vencer la capacidad buffer del sistema. Prueba de indol en mancha 11. multocida (+). Ésta prueba cuantitativa para la producción de ácido (determinación de pH). Peptostreptococcus asaccharolyticus (+) y P. indolicus (+) de otras especies de Peptostreptococcus (-) que pueden causar infecciones humanas. diferencia entre los aerobios con pigmento negro.y beta-glucosidasas y alfa-fructosidasa. Junto con la sialidasa.

Los organismos en estudio se incubarán por lo menos 2 días a 35- . el rojo de metilo. variable. cuando un microorganismo fermenta glucosa. 5. terrigena (V) de otras especies o subespecies de Klebsiella. Los diferentes patrones de fermentación se deben a las variaciones en las enzimas relacionadas con el metabolismo del ácido piruvico en el organismo.2. Buttiauxella agrestis Las pruebas de rojo de metilo y Voges-Proskauer identifican: o Aeromonas veronni o Especies de Listeria o Vibrio metschnikovii o Aeromonas hydrophila o Aeromonas subesp. (MR+) Budvicia aquatica (MR+) de otros miembros de familia Enterobacteriaceae con resultados KIA/TSI Ácido/Ácido. 3. por lo común +) de otros bacilos gramnegativos no entéricos (MR-).3-butanodiol + H2O + 2 CO2 2. La concentración del ion Hidrógeno depende de la relación de gases (CO2 y H2). Especies de Yersinia (V. pneumoniae subesp. Pneumoniae (ambas V. lo que a su vez es un índice de las diferentes vías metabólicas de la glucosa exhibidas por los diversos microorganismos. por lo común MR-) y K. HS2. Otros microorganismos que son rojo de metilo positivos. grimontii (MR+). tarda del biogrupo 1 (MR+) 4. salmonicida La prueba de rojo de metilo (MR) es una prueba cuantitativa basada en el uso de un indicado de pH. Reacción global del metabolismo de:  E.3-butanodiol) Glucosa + ½ O (Acetoìna La validez de la prueba de RM depende de un tiempo de incubación suficiente como para permitir que se produzca la diferencia en el metabolismo de la glucosa.masoucida FUNDAMENTO.coli 2 Ácido láctico + ácido acético + etanol + 2 CO2 + 2 2Glucosa + H2O  H2 (Ácido fórmico  H2 + CO2) Klebsiella-Enterobacter  2. Diferenciar Edwardsiella ictaluri (MR-) de E. Diferenciar Leminorella richardii (MR-) de L. Diferenciar Klebsiella oxytoca y K.  Aerococcus urinae  Todas las especies Shigella  Ewingella americana  Especies Kluyvera  Lecrercia adecarboxylata  Especies Citrobacter. para determinar la concentración del ion Hidrógeno. hoshinae (MR+) y E.

3) Calentar con suavidad la solución. 1) Pesar la cantidad exacta como indica el rótulo. vencimiento. las bacterias pueden seguir muchos caminos metabólicos. la producción de acetoína es una de las vías metabólicas de la degradación de la glucosa en las bacterias. mientras que todos los que tienen relaciones altas de gas (MR-) mostraran una concentración del ion H más baja. 121°C. MEDIO DE CULTIVO UTILIZADO. En esta prueba se determina la vía de fermentación del butanodiol descrita anteriormente en la prueba rojo de metilo. Los productos de las diferentes compañías pueden presentar leves variaciones. MR-negativo (-)/VP positivo(+): Enterobacter aerogenes III.  Fórmula Polipeptona o peptona de carne tamponada O digerido pancreático de caseína Y digerido péptico de tejidos animales Glucosa (dextrosa) Buffer fosfato dipotásico (K2HPO4) Agua desionizada MÈTODO DE PREPARACIÒN. 4) Fraccionar alrededor de 5ml por tubo(26x125mm) Método de esterilización: autoclave. Inoculación. Enfriar antes de usar y refrigerar para la conservación (4-10°C). a las 6-8 semanas. 15lb. un producto final neutro derivado del metabolismo de la glucosa. MR-positivo (+)/VP negativo(-): Escherichia coli B. PRUEBA DE VOGES. La prueba de Voges-Proskauer para la acetoína se utiliza sobre todo para separa Escherichia coli de los grupos KlebsiellaEnterobacter.37°C. • MICROORGANISMOS UTILIZADOS PARA EL CONTROL DE CALIDAD ATCC 25922 ATCC 13048 Medio de Clark y Lubs A. El acetil-metil-carbinol o acetoína es un producto intermediario en la producción de butanodiol esta se forma por la . lo que permite que todos los organismos con baja proporción gaseosa(MR+) muestren su limite en la concentración de iones H limitante.aunque otros miembros de la familia Enterobacteriaceae pueden producir un resultado positivo de VP. Incubación. 2) Rehidratar con agua destilada o desmineralizada.PROSKAUER La prueba de Voges-Proskauer (VP) se basa en la detección de acetoína. 15min. La glucosa es metabolizada a ácido pirúvico.

las cuales pueden ser aerobias o anaerobias.descarboxilación de dos moléculas de ácido purúvico.6 ml de alfa naftol al 5% en alcohol etílico absoluto y 0.5 ml de cultivo.  Escherichia coli ATCC 11775 CONCLUSIÓN Las pruebas IMViC son suma importancia dentro de la búsqueda de un agente patógeno causal. es decir y comparten una característica importante. Voges Proskauer Fermentación butanodiólica con formación de un metabolito intermediario neutro.3-butanodiol son productos neutros en la fermentación de la glucosa. Acidificación del medio. Rojo de Metilo. Agitar vigorosamente el tubo.  Reactivos VP de Coblentz Añadir 0.2 ml de hidróxido de potasio al 40% a 2. La prueba de Indol Degradación de Triptófano con producción de Indol. VP positivo (+) color rosado-rojo en la superficie del medio (acetoína presente)  Enterobacter cloacae ATCC 13047 VP negativo (-) color amarillo en la superficie del medio. Citrato Como única fuente de carbono BIBLIOGRAFÍA . De acuerdo a sus vías metabólicas.2ml de alfa naftolal 5% en etanol al 95%. éstas identifican enterobacterias en su mayoría. Observar el color de la superficie del medio. y dejar a temperatura ambiente durante 10-15 minutos. creatina al 0.3% en KOH al 40%. puede formarse un color cobrizo pero es un resultado negativo. tanto la acetoína como el 2. Cada una denota su fundamento. En medio alcalino y en presencia de oxígeno la acetoína es oxidada a diacetilo este se revela en presencia de α-naftol dando un color rojo-fucsia. Reactivos empleados:  Reactivos VP de Barrit Añadir 0.

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