FACULTADA DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

BIOQUÍMICA I
INFORME N. 2
EXTRACCIÓN DE LA CASEINA Y DETERMINACIÓN
DEL
PUNTO ISOELÉCTRICO

INTEGRANTES:
 ACOSTA VILLALOBOS ELIZABETH ROXANA
 ARECHE CORTEZ
 PERALTA FORONDA, ERIKA.
 RAMOS CELIZ NIDIA

DOCENTE: Mg. CHAVEZ HIDALGO, ELIZABETH LIZ

CICLO: VI
SECCIÓN: FB6N4
I. INTRODUCCIÓN
 II. MARCO TEÓRICO

OBJETIVOS GENERALES Y ESPECÍFICOS:

 III. COMPETENCIAS:
.
 Determinar el punto isoeléctrico de la caseína una vez extraída esta mediante
procedimiento químico de la leche entera liquida

IV. MATERIALES Y EQUIPOS:

 Beaker de 25 mL, 50mL,250mL
 Probeta de 50mL
 Matraz aforado de 50 mL
 Pipetas de 5,0 mL, 1.0mL, 10mL
 Embudo de vidrio mediano
 Papel de filtro
 Termómetro
 Tubos

REACTIVOS:

 Agua destilada
 Acetato sódico 0,1 N
 Ácido acético 0,01 N
 Ácido acético 0,1 N
 Ácido acético 1,0 N
 NaOH 1N
 Éter etílico
 Etanol al 70%

Materiales y reactivos de uso general:

 Soluciones buffer pH 4,0 y 7,0 para calibrar el potenciómetro
 Potenciómetro (pH-metro)
 Leche entera corriente (1 litro)
V.PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

A. AISLAMIENTO DE LA CASEÍNA:

1 2
En un vaso de precipitado se
calienta 150 mL de agua destilada a
38°C, se añadió 50 mL de leche y Se sedimento y se filtro sobre el
luego gota a gota y con agitación papel de filtro usando un embudo
adicione ácido acético 1M hasta que de cristal.
se absorbió hasta formar un
precipitado (la leche se corta).

4 3

Se seco el precipitado colocando Se lavo el precipitado con 20 mL

varios pliegues de papel de filtro. de etanol en el mismo filtro.

5 6

En un vaso de precipitado
pequeño previamente pesado, Se filtró nuevamente.
se adicionó 5 mL/g de éter
etílico.

Se desechó el líquido
quedando un precipitado
blanco de fácil
manipulación que es la
caseína.
B. PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE CASEÍNA:

2
1

Se agregó 20 mL de agua
Se coloco un
destilada y 5 mL de
aproximado de 250 mg
NaOH 1N; agitando
de caseina en un vaso de
hasta lograr un total de
50 mL.
4 caseína.
3

Cuando está disuelta la

La solución es clara y
caseína, se vierte con un
limpia, sino fuera así se
matraz de 50 mL y
filtra.
mezclando bien.
C. DETERMINACIÓN DEL PI DE LA CASEÍNA:

En 10 tubos de 25 mL y secos se adicionó los

volúmenes de los reactivos.
 VI. Resultados
Obtuvimos caseína de muestras de leche que habían sido acidificadas (por filtración) y
luego preparamos soluciones de caseína que ajustamos en tubos de ensayo a
diferentes valores de pH para obtener las diferentes absorbancias que se muestran en
la siguiente tabla.

TUBO pH ABSORBANCIA
resultante(aprox.)
1 3.2 0.14
2 3.6 0.158
3 3.8 0.143
4 4.0 0.267
5 4.2 0.263
6 4.5 0.238
7 4.7 0.477
8 5.1 0.325
9 5.5 0.259
10 6.1 0.154

Representamos de una manera más perceptible la interacción de la caseína en

distintos pH en el siguiente gráfico.
El punto más alto en la gráfica es la absorbancia más alta registrada (0.477)
correspondiente al tubo con un pH de 4.7, la absorbancia aumenta conforme aumenta
el grado de turbidez en cada solución, por lo tanto, el tubo con un pH de 4.7 es el que
tiene mayor grado de turbidez, esté indica que hay un mayor contenido de precipitado.
El punto isoeléctrico es el valor del pH cuando la carga neta de la proteína es 0 , por lo
tanto, ésta no se disocia, en forma de precipitado. Lo cual el pH más cercano al punto
isoeléctrico de la caseína resultante.

VII. Cuestionario

1. ¿Cuál es el punto isoeléctrico de la caseína?

2. ¿Por qué las proteínas tienen solubilidad mínima en el pI?

 La solubilidad de una proteína en el punto isoeléctrico es mínima porque su
carga neta es cero y ha desaparecido cualquier repulsión electrostática que
pudiera impedir la formación de agregados.

VII. CONCLUSIONES

 La separación adecuada de la proteína de la leche (caseína) se logra durante

el proceso de acidificación.
 El punto isoeléctrico experimental (4.7) de la caseína se determina
interpretando el pH y el diagrama de absorción.
 Debido al porcentaje de error alcanza el 10%. Utiliza conocimientos teóricos y
prácticos sobre proteínas.
VIII. BIBLIOGRAFIA

SOLUBILIDAD DE LAS PROTEINAS: EFECTO DE LA FUERZA IONICA [Internet].

Ull.es. [citado el 4 de abril de 2023]. Disponible en:
https://acasti.webs.ull.es/docencia/practicas/8.pdf
Rum D. PRACTICA-CASEINA. 2018 [citado el 4 de abril de 2023]; Disponible en:
https://www.academia.edu/36703078/PRACTICA_CASEINA