INFORME DE LABORATORIO N°5

AISLAMIENTO DE LA CASEINA DE LA LECHE

Fecha: 28/04/21
Carrera: Ingeniería Ambiental Asignatura: Bioquímica Grupo: 1654012 - A

Hora: miércoles 2:00 pm

Integrantes:

I. OBJETIVOS
 Aislar la caseína de la leche a partir de su punto isoeléctrico

II. INTRODUCCIÓN
La caseína se encuentra en la leche como un complejo soluble de calcio y fósforo.
Los cuatro componentes más importantes de la leche son:
• Componentes lípidos esenciales de las grasas (triglicéridos)
• Proteínas: caseínas, proteínas del suero, proteínas menores
• Carbohidratos: esencialmente lactosa
La caseína se obtiene por precipitación a partir de leche previamente desnatada
mediante fermentos (quimosina en las queserías) o ácidos fuertes (H2SO o HCl).
A un pH de 4,6, la precipitación ácida es casi completa ya que este es el punto
isoeléctrico de la caseína. La caseína es un sólido de color blanco amarillento,
insípido e inodoro, insoluble en agua y varios disolventes orgánicos. Puede tener
un ligero olor a leche. Se dispersa bien en un medio alcalino como una solución
acuosa de hidróxido de sodio: NaOH y forma caseinatos de sodio.

III. MATERIALES
100ml de leche
Agua destilada
0.2n hcl
Bureta de 50ml
Agitador magnético
Ph-metro
Nota: la leche debe ser fría para grasa se vaya hacia arriba.
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IV. PROCEDIMIENTO
1. Los 100ml de leche se van a centrifugar para que se separe la grasa de
la parte liquida de la leche, es un proceso de 20 a 25 minutos a
temperatura ambiente.

Nota: La grasa es menos densa por eso queda arriba, y la parte acuosa
es más pesada por eso queda abajo.

2. Se retira la grasa con una espátula y se inserta en una caja de Petri (ya
que no la utilizaremos para este procedimiento).
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3. La parte acuosa se vierte en un vaso precipitado de 500ml y en este

mismo se agrega la misma cantidad en agua destilada de la que nos
quedó de la leche descremada.
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4. Se toma la bureta y se llena de acido clorhídrico 0.2N, esta será

sostenida por el soporte universal, agitador, el ph-metro, tubo de ensayo
y agitador magnético.
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5. Se coloca un imán dentro del vaso precipitado que contiene la leche

acuosa y el agua, es decir, está en permanente agitación. Este vaso
precipitado se coloca encima del agitador magnético.
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6. Se llena la bureta de Ácido Clorhídrico hasta que alcance el cero de

arriba.
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7. Se toma el electrodo que está previamente calibrado, este se lava y se

seca
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8. El electrodo se coloca dentro del vaso precipitado con la leche acuosa y

se mide su pH.

Resultado: Nos da un pH de 6.60

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9. Se coloca la bureta en el soporte universal, al abrir la llave de la bureta

va a dejar caer gotas de HCl en el vaso precipitado, el ph va a ir
cambiando hasta que empieza a precipitar la caseína en 4.8 a 4.6

Nota: Al final se muestra un ph de 4.60 indicando que estamos cerca del

punto isoeléctrico.

V. RESULTADOS
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 Se observa en el vaso precipitado en la parte de abajo es la caseína

precipitada, en la parte del medio el liquido de la leche y en la parte de
arriba está el suero de la leche.
SE FILTRA
 Se filtra, se coloca un papel filtro con forma de embudo un recipiente y
se va vertiendo el contenido del vaso precipitado, esto es para separar la
caseína del líquido, luego se lava con agua, etanol y éter dietílico.
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 Se lava primero con agua para quitar el acido

 Se lava también con éter dietílico para quitar los restos de la
grasa.

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 Lo que se observa arriba en el papel filtro es la caseína ya separa del

líquido, y lo que se observa en el Erlenmeyer es el liquido que quedó de
leche con los lavados de etanol, agua, éter dietílico.

 Esta ya es la separación de la caseína de la leche, lo que se observa en

la caja de Petri es la caseína y en el Erlenmeyer el liquido que quedo de
la leche con los lavados.

AL PESAR LA CASEINA
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 Se puede dejar la caseína en el horno toda la noche y al otro día

amanece seca como se puede observar en la imagen
Se pesa la caseína para saber el rendimiento:

 Como podemos observar de los 100ml de leche se obtienen 3.50g de

caseína.

VI. CONCLUSIONES
  La caseína se precipita cuando se acidifica la leche a pH 4.6, el
cual corresponde a su puto isoeléctrico, debido a que la carga negativa de
la superficie de la micela se neutraliza (los grupos fosfato se protonan ), las
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micelas pierden su carga y su capacidad de repelerse, y la proteína

neutra(caseína) se vuelve insoluble.

VII. BIBLIOGRAFIA
https://drive.google.com/file/d/1i8XrndiZBk1lONybenavlpG-
om3wtn2s/view