INFORME DE LABORATORIO

TICNIÓN DE GRAM

DIEGO A. MERCADO SUÁREZ

YISSA CANCHILA RUEDA
JUAN DIEGO SALAZAR

ASIGNATURA:
Biología

Curso CTU

Mayo/2022

Cartagena de Indias
 TABLA DE CONTENIDO

1. INTRODUCCIÓN 1
2. OBJETIVOS 2
2.1 OBJETIVO GENERAL 2
2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 2
3. LA BALANZA Y SUS PARTES 3
4. PROCEDIMIENTO 6
5. RESULTADOS 6
6. CUESTIOINARIO 8
7. GLOSARIO 9
8. CONCLUSION 11
9. BIBLIOGRAFIA 12
 1. INTRODUCCIÓN

La balanza es un instrumento que mide la masa de un cuerpo o sustancia,

utilizando como medio de
comparación la fuerza de la gravedad que actúa sobre el cuerpo. Dependiendo
del trabajo que se
quiera realizar, se selecciona el tipo de balanza más adecuada en cuanto a
sensibilidad y rapidez en
la pesada. La sensibilidad de una balanza depende de su capacidad: una balanza
diseñada para pesar
kilogramos difícilmente tendrá la sensibilidad necesaria para tener reproducibilidad
en pesadas de
miligramos. En el laboratorio se utiliza la balanza para efectuar actividades de
control de calidad –
con dispositivos como las pipetas-, para preparar mezclas de componentes
en proporciones
predefinidas y para determinar densidad o pesos específicos.
Las balanzas analíticas modernas, que pueden ofrecer valores de precisión de
lectura de 0,1 micras
a 0,1 mg, están bastante desarrolladas de manera que no es necesaria la
utilización de cuartos
especiales para la medida del peso. Aún así, el simple empleo de circuitos
electrónicos no elimina
las interacciones del sistema con el ambiente. De estos, los efectos físicos son los
más importantes
porque no pueden ser suprimidos.
La balanza es un instrumento que mide la masa de un cuerpo o sustancia,
utilizando como medio de
comparación la fuerza de la gravedad que actúa sobre el cuerpo. Dependiendo
del trabajo que se
quiera realizar, se selecciona el tipo de balanza más adecuada en cuanto a
sensibilidad y rapidez en
la pesada. La sensibilidad de una balanza depende de su capacidad: una balanza
diseñada para pesar
kilogramos difícilmente tendrá la sensibilidad necesaria para tener reproducibilidad
en pesadas de
miligramos. En el laboratorio se utiliza la balanza para efectuar actividades de
control de calidad –
con dispositivos como las pipetas-, para preparar mezclas de componentes
en proporciones
predefinidas y para determinar densidad o pesos específicos.
Las balanzas analíticas modernas, que pueden ofrecer valores de precisión de
lectura de 0,1 micras
a 0,1 mg, están bastante desarrolladas de manera que no es necesaria la
utilización de cuartos

1
especiales para la medida del peso. Aún así, el simple empleo de circuitos
electrónicos no elimina
las interacciones del sistema con el ambiente. De estos, los efectos físicos son los
más importantes
porque no pueden ser suprimidos.
La balanza es un instrumento que mide la masa de un cuerpo o sustancia,
utilizando como medio de
comparación la fuerza de la gravedad que actúa sobre el cuerpo. Dependiendo
del trabajo que se
quiera realizar, se selecciona el tipo de balanza más adecuada en cuanto a
sensibilidad y rapidez en
la pesada. La sensibilidad de una balanza depende de su capacidad: una balanza
diseñada para pesar
kilogramos difícilmente tendrá la sensibilidad necesaria para tener reproducibilidad
en pesadas de
miligramos. En el laboratorio se utiliza la balanza para efectuar actividades de
control de calidad –
con dispositivos como las pipetas-, para preparar mezclas de componentes
en proporciones
predefinidas y para determinar densidad o pesos específicos.
Las balanzas analíticas modernas, que pueden ofrecer valores de precisión de
lectura de 0,1 micras
a 0,1 mg, están bastante desarrolladas de manera que no es necesaria la
utilización de cuartos
especiales para la medida del peso. Aún así, el simple empleo de circuitos
electrónicos no elimina
las interacciones del sistema con el ambiente. De estos, los efectos físicos son los
más importantes
porque no pueden ser suprimidos.
La tinción de Gram es una técnica de laboratorio que se utiliza rutinariamente en
los estudios microbiológicos de las bacterias. Fue diseñado por Christian Gram, un
científico danés, en el año 1884. El objetivo de Gram era conseguir una prueba
con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de bacterias para así poder
estudiarlas y clasificarlas. La prueba resulto todo un éxito y pronto se convirtió en
una prueba muy útil no solo para el estudio de las bacterias sino también para
algunos hongos y parásitos.

La tinción requiere cuatro soluciones que son, un colorante o tinte básico, un

mordiente, un decolorante y un segundo tinte o colorante de contraste de color
diferente al inicial.

Se le llama bacterias Gram positivas a aquellas que retienen la tinción azul-violeta,

y se denomina bacterias Gram negativas a las que se decoloran y después se
tiñen con safranina. Esta diferencia de tinciones se debe a la estructura de las
paredes celulares de ambos tipos de bacterias. Las bacterias Gram positivas

2
tienen una pared gruesa compuesta de peptidoglucanos y polímeros, e
impermeable, que hace que resiste la decoloración.
En cambio, las bacterias Gram negativas tienen una capa delgada de
peptidoglucanos más una bicapa de lipoproteínas que se puede deshacer con la
decoloración.
Este trabajo tiene como fin conocer las tinciones gram, identificar y diferenciar los
tipos de tinciones gram y su uso.

3
 2. OBJETIVOS

2.1 Objetivo General

Realizar el método de tinción de Gram

2.2 Objetivos Específicos

Sustraer una muestra para ser observada en el microscopio bajo este

método de tinción.

Identificar el tipo de bacteria de la muestra observada.

Clasificar la muestra según su coloración.

4
 3. MATERIALES

-Cultivo bacteriano.
-Portaobjetos.
-Mechero.
-Asa de laboratorio.
-Agua destilada.
-Cristal violeta.
-Lugol.
-Alcohol acetona.
-Safranina.
-Aceite de inmersión.

5
 4. METODOLOGIA

En un portaobjetos con una pequeña gota de agua destilada previamente se

disolvió una pequeña cantidad de cultivo bacteriano en la que se preparó una fina
extensión de un frotis disolviéndose en el agua, luego con la ayuda de un
mechero encendido se flameó un portaobjetos por la parte de debajo de la
muestra, posteriormente teñimos la muestra de la siguiente manera.:

-El frotis se cubrió con cristal violeta durante 1 minuto y luego se retiró el colorante
mediante un suave lavado con agua deslizándose sobre el portaobjetos para no
desprender la muestra.

-Seguidamente se aplicó lugol a la muestra durante 1 minuto y se realizó un

lavado como en el paso anterior.

-Posteriormente se retiró el colorante de las células con alcohol etanol goteando

sobre el portaobjetos. Las células Gram negativas pierden el colorante violeta y las
Gram positivas seguirán violetas.

-Por último se agregó safranina como colorante de contraste, y se lavó como en

los pasos anteriores con agua. Este colorante solo marcara a las células Gram
negativas. Se realizaron observaciones microscópicas usando aceite de inmersión
para determinar cuáles bacterias observadas eran Gram negativas y cuales eran
Gram positivas.

6
 5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Se pudo observar la morfología de dos muestras de bacterias como se ve en la

figura 1 y 2 que se tiñeron con tinción de Gram, por lo que gracias a ella se puede
apreciar con claridad qué tipo de bacterias son.

La figura 1 corresponde a bacilos gram negativos. Al poseer una capa delgada

de peptidoglucanos estos se tiñeron de fucsia por la safranina.

En cambio, la figura 2 corresponde a cocos gram positivos, y al poseer una

pared celular formada por una gruesa capa de peptidoglucano, se resisten a la
decoloración y quedan con el colorante cristal violeta.

FIGURA 1 FIGURA 2

7
 6. ANEXOS

Materiales Cultivo bacteriano

Muestra 1 Bacilos Gram Muestra 2 Cocos Gram

Negativos Positivos

8
Flameando el portaobjetos Colocando la muestra de
cultivo con el asa, en el
portaobjetos