UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

CENTRO DE BIOLOGÍA

PRÁCTICA 3

TEMA:
CÉLULA PROCARIOTA

GRUPO 2
INTEGRANTES:
DEYVID JOSEMIN CUCHIPE PASTUÑA

GABRIEL EDUARDO ANDRANGO ESPÍN

CURSO:

BQF-1

PARALELO:

003

FECHA:

28/11/2023

DOCENTE:
MSc. ISABEL CARRILLO

2023 – 2024

QUITO - ECUADOR
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

BIOQUÍMICA Y FARMACIA

CÉLULA PROCARIOTA
Objetivos:

• Comprender y apreciar las células procariotas que están presentes en diversos

entornos y su importancia alrededor de la naturaleza.

• Identificar las variaciones morfológicas de las bacterias en las diferentes tinciones

realizadas desde el microscopio para identificar si son infecciosas o no.

• Aplicar diferentes sustancias químicas en un orden específico para lograr la tinción

Gram y la tinción Simple y así mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio.

Procedimiento

Figura 1

Procedimiento de una muestra de sarro dental mediante la tinción de Gram.

Figura 2

Procedimiento de una muestra de sarro dental mediante la tinción Simple.

Figura 3

Procedimiento de una muestra de Yogurt mediante la tinción de Simple

Figura 4

Procedimiento de una muestra de bacteria mediante la tinción de Gram

Figura 5

Procedimiento de una muestra de agua de chochos mediante la tinción de Gram

Observaciones

4X 10X 40X 100X

Sarro

(Tinción

simple)

Sarro

(Tinción

Gram)

Yogurt

(Tinción

Simple)

Agua de

Chocho

(Tinción

Gram)
 Bacteria

(Tinción

Gram)

Discusiones

En las primeras observaciones, específicamente en el sarro por tinción simple; por

tinción Gram y el Yogurt, se obtienen resultados prolíficos puesto que experimentalmente se

obtienen resultados semejantes a lo que en principio se buscaba encontrar. En el caso del

sarro, cuando se enfoca con el lente ocular 100X, es posible apreciar cuerpos de forma

alargada que posiblemente corresponden a bacilos o espirilos, mientras que, en la observación

del yogurt, también se observa bacterias lácticas teñidas con el azul de metileno.

Sin embargo, los resultados de la observación de las muestras restantes no son del

todo satisfactorios ya que en ciertos enfoques como 10X o 100X no se pudo observar a los

microorganismos presentes. Posiblemente estos fallos se den por no haber trabajado de forma

correcta en el proceso de tinción Gram.

Cuestionario

1. ¿En qué se diferencia estructuralmente una bacteria Gram positiva

de una Gram negativa?

La principal diferencia estructural entre las bacterias Gram positivas y Gram negativas

radica en la composición de su pared celular. Ambos tipos de bacterias tienen una

membrana plasmática en su capa externa, pero la Gram positiva tiene una capa de
 peptidoglicano mucho más gruesa, mientras que la Gram negativa tiene una capa de

peptidoglicano más delgada.

Además, las bacterias Gram negativas tienen una membrana externa adicional

compuesta por lipopolisacáridos, que las Gram positivas no tienen.

2. Clasifique a las bacterias de acuerdo a su morfología y a la Tinción Gram, realice

un esquema o cuadro

Figura 6
Esquema de la clasificación morfológica de bacterias y las categorías de la Tinción de
GRAM.

3. Explique la función de cada sustancia utilizada en la Tinción Gram

Cristal Violeta:
Función: Es el primer colorante utilizado. Se une a las paredes celulares de todas las bacterias
presentes en la muestra.

Lugol:

Función: Actúa como un agente de fijación. Forma complejos con el cristal violeta, aumentando
su retención en las bacterias.

3. Alcohol o Acetona:
Función: Elimina el colorante de las bacterias que no retienen bien la tinción
 4. Safranina o Fucsina Básica:
Función: Es el contra tiñente. Tiñe las bacterias que han sido decoloradas.

4. Describa los pasos para realizar una Tinción Gram

1. Recoger la muestra de las bacterias que vamos a estudiarlos y observarlos.

2. Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar.
3. Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol).
4. Aplicar el colorante primario que es el tinte violeta de genciana sobre el portaobjetos y
esperar un minuto.
5. Enjuagar la muestra con agua para eliminar el resto del colorante.
6. Aplicar un fijador del violeta de genciana llamada Lugol por un minuto.
7. Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante 15
segundos.
8. Añadir el colorante secundario que es la safranina para distinguir las gram negativas que
aparecerán bajo el microscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o rojo.
9. Lavar con agua para eliminar el resto del colorante.
10. Fijar la muestra en el mechero
11. Por último, ya se puede observar la muestra al microscopio con 4,10, 40 y 100X donde se
visualizarán de color violeta las gram positivas y de color rosa-rojizo las gram negativas.

5. Qué significa los términos frotis y fijación dentro de la Tinción Gram

Frotis se refiere a la muestra que se extiende sobre la superficie del portaobjetos y se lo realiza
para que las bacterias estén dispersas para un análisis.

Fijación es el `proceso que asegura que estas células permanezcan en su lugar para
esto nos podemos ayudar mediante un mechero.

Estas dos etapas son importantes en el proceso de preparación de muestras antes de

aplicar la tinción.
 6. Porqué se debe esterilizar el asa de inoculación antes y después de
tomar la muestra

Esterilizar el asa de inoculación antes y después de tomar una muestra es fundamental

ya que ayuda a prevenir la introducción de contaminantes externos en la muestra. Esto
es crucial para garantizar que las bacterias o microorganismos observados sean realmente los
que estaban presentes en la muestra original y no el resultado de contaminación externa.
Y es importante esterilizar el asa después de tomar la muestra para evitar que cualquier
residuo de la muestra anterior se transfiera a la siguiente.

Conclusiones

• En conclusión las células procariotas, en particular las bacterias, son omnipresentes en

diversos entornos y desempeñan un papel crucial en la naturaleza. Su comprensión y

apreciación son esenciales para entender la biodiversidad y el funcionamiento de los

ecosistemas.

• Así pues, la variación morfológica de las bacterias se puede identificar mediante

diferentes tinciones microscópicas. Estas tinciones, como la de Gram y la Simple,

ofrecen una visión detallada de la estructura celular, permitiendo discernir entre

bacterias infecciosas y no infecciosas.

• Finalmente la aplicación secuencial de sustancias químicas, como el cristal violeta,

lugol, alcohol o acetona, y safranina, en el proceso de tinción de Gram, mejora el

contraste en la imagen y revela diferencias en la composición de la pared celular. Este

método es fundamental para la clasificación de bacterias en Gram-positivas y Gram-

negativas.

.Recomendaciones

• Se recomienda seguir estrictamente las prácticas estándar de laboratorio al realizar

procedimientos microbiológicos. Esto incluye el uso adecuado de equipos, la

esterilización adecuada y la documentación de los procedimientos.

 • Se sugiere la exploración continua de diversos entornos y fuentes para ampliar la

comprensión de la diversidad de las células procariotas. Esto podría implicar la

aplicación de técnicas de tinción en diferentes muestras para un análisis exhaustivo.

Anexos
Bibliografía:

MedlinePlus en español [Internet]. Bethesda (MD): Biblioteca Nacional de Medicina (EE.

UU.)Tinción de Gram;[actualizado 28 ago. 2019; consulta 27 oct. 2023]. Disponible

en: https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/tincion-de-

gram/#:~:text=La%20tinci%C3%B3n%20de%20Gram%20es%20de%20color%20p%C3%BArpu

ra.,rosadas%20o%20rojas%2C%20son%20gramnegativas.