IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE SAPONINAS

INFORME DE LA PRÁCTICA DEL LABORATORIO No. 6

ALEJANDRA BOLÍVAR MARTÍNEZ

VALENTINA VALDÉS FONTALVO
DANIELA VERA CAÑAS

UNIVERSIDAD DEL ATLÁNTICO

FACULTAD DE QUÍMICA Y FARMACIA
PROGRAMA DE FARMACIA
BARRANQUILLA

2021
 IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE SAPONINAS

INFORME DE LA PRÁCTICA DEL LABORATORIO No. 6

1. Introducción
Los saponósidos, también conocidos como saponinas, son heterósidos que constan de una parte
glucídica (con uno o más azúcares) y de una genina (parte no glucídica) denominada
sapogenina, que puede ser de naturaleza esteroide o triterpénica, por tanto, de carácter poco
polar. Los azúcares más frecuentes constituyentes de los dos tipos de saponósidos son la
glucosa, arabinosa, ramnosa, galactosa y xilosa, y en los saponósidos triterpénicos también es
frecuente el ácido glucurónico. Los saponósidos tienen un elevado peso molecular y se
hidrolizan mediante ácidos (como todos los heterósidos) o, mediante enzimas, dando la genina
y los diversos azúcares y ácidos urónicos relacionados. Su aislamiento en estado puro es difícil.
Se extraen con alcoholes o soluciones hidroalcohólicas, tras una deslipidación previa. La
concentración de las soluciones se dificulta por la tendencia que tienen éstas a formar espuma,
puesto que al entrar en contacto con el agua producen una espuma persistente, que se forma
debido a que los saponósidos disminuyen la tensión superficial del agua, es decir, son
tensioactivos naturales. Esta propiedad detergente de las plantas con saponósidos fue explotada
muy pronto por el hombre, en todos los continentes. Además, las saponinas tienen la capacidad
de aumentar la permeabilidad de las paredes celulares y destruir los hematíes por hemólisis.
(1)

2. Objetivos de la práctica
● Desarrollar y comprender el ensayo cualitativo utilizado para el reconocimiento de
saponinas en una muestra vegetal.
● Determinar la presencia de saponinas en la especie vegetal Annona muricata.

3. Equipos, materiales y reactivos

-Papel periódico
-Frascos de vidrio
-Papel filtro
-Algodón
-Embudo de vidrio
-Jeringas de 5 ml (10 unidades)

4. Fase experimental

4.1 Preparación de extracto acuoso: Primero se trituró la muestra vegetal fresca (Hojas de
Annona muricata) y se colocó 10 g de la muestra en 50 ml de agua hirviendo, a ebullición
moderada durante 30 minutos. Posteriormente se dejó enfriar y se filtró, luego se agregó el
agua suficiente para volver obtener un volumen de 50 mL.

4.2 Identificación cualitativa de saponinas: se realizó el ensayo de la espuma, para ello se

vertió la decocción en 10 jeringas de 5mL en porciones sucesivas de la siguiente manera:
 Jeringa #1: 0.5 mL
Jeringa # 2: 1 mL
Jeringa # 3: 1.5 mL
Jeringa # 4: 2 mL
Jeringa # 5: 2.5 mL
Jeringa # 6: 3 mL
Jeringa # 7: 3.5 mL
Jeringa # 8: 4 mL
Jeringa # 9: 4.5 mL
Jeringa # 10: 5 mL
Luego se ajustó el volumen del líquido en cada tubo con agua a 5 ml, se taparon los tubos y se
agitaron en un movimiento longitudinal durante 15 segundos. Luego se dejaron reposar durante
15 minutos y se midió la altura de la espuma. Luego para determinar si la prueba era positiva
se procedió a medir la altura de la espuma en cada tubo y para las muestras en las que la altura
de la espuma fue inferior a 1 cm, el índice de formación de espuma se caracterizó como inferior
a 100.

- Evidencias de la preparación de extracto acuoso por decocción

Figura 1. Preparación del extracto acuoso de Annona Muricata por decocción: la imagen A
indica la trituración del material vegetal, las imágenes B y C muestra la ebullición moderada
de la muestra durante 30 minutos y la imagen D muestra el extracto después de ser enfriado y
filtrado.
 - Evidencia del ensayo de formación de espuma.

Figura 2. Ensayo de formación de espuma para la identificación de saponinas: las imágenes

E y F muestran el vertimiento de la decocción en las 10 jeringas de 5mL en porciones
distintas y la imagen G muestra el resultado de ajustar el volumen del líquido en cada tubo
con agua a 5 ml.
5. Resultados
Se pudo evidenciar que en las muestras de las jeringas con 3, 3.5, 4, 4.5 y 5 mL de extracto
acuoso de Annona Muricata se observan burbujas con un volumen entre 0.8 y 0.9 mL (Ver fig.
4), en cambio en las jeringas con 0.5, 1, 1.5, 2 y 2.5 mL de extracto acuoso de Annona Muricata
al ser agitado se observan burbujas con un volumen entre 0.5 y 0.7 mL (Ver fig. 3).

- Reporte del índice de espuma.

 Figura 3. Registro fotográfico del índice de espuma en las jeringas con 0.5, 1, 1.5, 2 y 2.5
mL de extracto acuoso de Annona Muricata, posteriormente disuelto con agua hasta un
volumen de 5 mL.

Figura 4. Registro fotográfico del índice de espuma en las jeringas con 3, 3.5, 4, 4.5 y 5 mL
de extracto acuoso de Annona Muricata, posteriormente disuelto con agua hasta un volumen
de 5 mL según se consideraba.

6. Discusión
En base a los resultados obtenidos del ensayo cualitativo, se pudo comprender que a medida
que se le adicionaba un mayor volumen del extracto acuoso, la burbuja que se observaba tenía
un mayor volumen, sin embargo ninguna burbuja o espuma tuvo un volumen o altura mayor a
1 cm y por ello el índice de formación de espuma se caracteriza como inferior a 100, lo que
quiere decir que la prueba de identificación de saponinas en el extracto acuoso de Annona
Muricata es negativo y por ende se concluye que no se encuentran saponinas en las hojas de la
especie vegetal llamada guanábana.

7. Cuestionario
7.1 ¿Qué otra prueba cualitativa puede ser utilizada para el reconocimiento de saponinas
en una muestra vegetal?
La prueba de emulsión es otra prueba cualitativa, utilizada para el reconocimiento de saponinas
en una muestra vegetal. Por ejemplo, al realizar un estudio para el reconocimiento de saponinas
en los extractos de T. testudinum se utilizaron 500 mg de cada uno de los extractos de estos,
se disolvieron en 10 mL de agua destilada. Las soluciones se calentaron en un baño de agua en
ebullición y se filtraron. Posteriormente se mezclaron 10 mL de las soluciones filtradas con 5
mL de agua destilada, se agitaron durante 30 s para la formación de espuma. La espuma de
cada uno de los extractos se mezcló con tres gotas de aceite de oliva y se volvió a agitar para
la formación de una emulsión, una característica de las saponinas. (2)
Entonces, esta prueba cualitativa, además de la prueba de espuma, constituyen una buena
opción, al momento de reconocer saponinas en una muestra vegetal.

7.2 ¿Qué ensayo(s) de tipo cualitativo se emplean para la identificación de glicósidos

cardiotónicos? Mencione cual es el fundamento del ensayo o ensayos.
Los glicósidos cardiotónicos poseen una estructura esteroidal que se caracterizan por llevar en
el C-17 un anillo de lactona no saturado, los cardenólidos tienen específicamente un anillo
pentagonal con un doble enlace conjugado con el grupo carbonilo. Además, y como parte de
la denominada glicona, incluyen en la posición 3 moléculas de azúcar como sustituyentes,
siendo las más comunes, la glucosa y los 6- desoxiazúcares (ramnosa, mucosa, digitalosa y
thevetosa.(3)
Es por ello, que en un estudio de identificación de glicósido cardiotónico predominante en
thevetia peruviana, se tomó el extracto vegetal y se realizó inicialmente el tamizaje fitoquímico
mediante las reacciones de Liebermann-Burchnard, Keller Killiani y Kedde para determinar el
núcleo esteroidal, los desoxiazúcares y el anillo lactona respectivamente, característicos de los
glicósidos cardiotónicos. (3)
El análisis fitoquímico del extracto de TP permitió confirmar de forma rápida, sensible y
confiable el núcleo esteroidal, desoxiazúcares y el anillo de la lactona, es decir, la presencia de
glicósidos cardiotónicos mediante la coloración específica registrada para las pruebas
Liebermann-Burchnard (violeta verde), Keller Killiani (anillo pardo y capa azul verdosa ) y
Kedde (rojo-violeta). Por lo que este ensayo de tipo cualitativo, es una buena opción para la
identificación de glicósidos cardiotónicos. (3)

7.3 ¿Qué ensayo(s) de tipo cualitativo se emplean para la identificación de carotenoides?

Mencione cual es el fundamento del ensayo o ensayos.
Los pigmentos carotenoides son compuestos responsables de la coloración de gran número de
alimentos vegetales y animales, como zanahorias, zumo de naranja, tomates, salmón y yema
de huevo. Los carotenoides son pigmentos isoprenoides poliénicos muy hidrofóbicos,
derivados del licopeno. (4)
La zanahoria presenta concentraciones altas en carotenoides especialmente β-caroteno, α-
caroteno, luteína/zeaxantina, la naranja y el maíz contienen concentraciones menores que otras
frutas. Como se observa, existe disponibilidad de carotenoides en verduras, y en un grado
mínimo, en las frutas. (4)
Por eso, en un estudio realizado se realizó la determinación cualitativa de carotenoides en jugo
de zanahoria fresca. Para ello, se utilizaron materiales, equipos y sustancias tales como: papel
filtro, acetona, matraz quitasato, alcohol isopropílico, embudo buchner, jugo de zanahoria,
bomba de vacío, balanza granataria y vaso de precipitado. (4)
Se procede a utilizar 200 ml de jugo de zanahoria fresca cuyo proceso se describe:
1) El papel filtro a utilizar se pesa antes de proceder con el filtrado, cada uno tiene un peso de
0.58 g.
2) Colocamos el embudo de vidrio sobre el matraz quitasato y colocamos el papel filtro.
3) Se repite dos veces el filtrado para separar los sólidos más grandes.
4) Se realiza un filtrado más utilizando embudo buchner lo cual nos permitirá separar la parte
acuosa de los pigmentos del jugo, conectamos con la bomba de vacío.
5) Una vez teniendo la mayor proporción de pigmentos sobre embudo procedemos a medir su
conductividad colocándolos en portaobjetos.
6) Se deja secar el papel filtro en condiciones ambientales de 48% de humedad y 23.5 ºC de
temperatura en el laboratorio.
7) Una vez seco se pesa en la balanza granataria y se obtiene pesos de 0.112 g y 0.115g
respectivamente
8) Se realiza un lavado con acetona y alcohol isopropílico utilizando 5 ml de cada reactivo
9) Se analizan las muestras obtenidas del lavado en el espectrofotómetro. Su espectro de
absorbancia se muestra en la gráfica 5. (4)
 Figura 5. Espectro de absorbancia de los pigmentos extraídos de la zanahoria.

Debido a la estructura conjugada de los carotenoides, en la gráfica 5 se observa la curva de

absorbancia con una longitud de onda en un rango de 380 a 510 nm, aquí se da la máxima
interacción iónica de sus moléculas localizadas en 452 nm, este comportamiento es resultado
de la actividad de los dobles enlaces conjugados ya que eso le da la apariencia anaranjada del
jugo de zanahoria. (4)
8. Referencias bibliográficas
1. LÓPEZ LUENGO T. Saponósidos [Internet]. Elsevier.es. 2001 [citado el 21 de septiembre
de 2021]. Disponible en: https://www.elsevier.es/es-revista-offarm-4-articulo-saponosidos-
13015492

2. García-Granados RU, Cruz-Sosa F, Alarcón-Aguilar FJ, Nieto-Trujillo A, Gallegos-

Martínez. ME. ANÁLISIS FITOQUÍMICO CUALITATIVO DE LOS EXTRACTOS
ACUOSOS DE Thalassia testudinum BANKS EX KÖNING ET SIMS DE LA LOCALIDAD
DE CHAMPOTÓN, CAMPECHE, MÉXICO, DURANTE EL CICLO ANUAL 2016-2017.
Polibotánica [Internet]. 2019 Jul 1;(48). Available from:
http://polibotanica.mx/pages/es/a8dndice/41-50/naordmm.-48/artashyculo-12.php

3. Amaringo Villa, Fredy, Hormaza. A, Angelina, Arias Z., Mario, Thevetin B: glicósido
cardiotónico predominante en thevetia peruviana. Scientia Et Technica [Internet].
2011;XVI(49):298-303. Recuperado de:
https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=84922625048
4. Flores JA, Olivares A, Fuentes I, Gómez R. Obtención y caracterización de carotenoides
como material fotosensible [Internet]. 2005. Available from:
https://inaoe.repositorioinstitucional.mx/jspui/bitstream/1009/1579/1/FloresRJA.pdf