MicroSnap ™ Total
Prueba rápida de actividad microbiana total
Partes requeridas:
Paso 1: Dispositivo de enriquecimiento total MicroSnap, MS1-TOTAL (CANTIDAD 100)
Paso 2: Dispositivo de detección total MicroSnap, MS2-TOTAL (CANTIDAD 100)
Descripción:
MicroSnap Total es una prueba bioluminógena rápida para la detección y enumeración de la
población total de bacterias aerobias viables en una muestra que proporciona resultados en 7
horas. MicroSnap Total consiste en un dispositivo de enriquecimiento que contiene medios de
crecimiento patentados y un dispositivo de detección que contiene reactivos bioluminógenos
en los que los biomarcadores producidos por bacterias se miden utilizando un pequeño
luminómetro portátil.
El procedimiento de prueba de dos pasos requiere un breve período de incubación que facilita el
crecimiento de bacterias seguido de un paso de detección. Durante la incubación en medios de
enriquecimiento, aumenta el número de bacterias y se reduce la interferencia de la muestra. A
medida que las bacterias crecen, consumen los recursos alimentarios disponibles en los medios
y generan biomarcadores. Cuanto mayor sea el número de bacterias en la muestra, mayor será
la concentración de biomarcadores y mayor emisión de luz. Se transfiere una alícuota de
muestra enriquecida al dispositivo de detección, se activa, se mezcla y se mide en un
luminómetro. La producción de luz es directamente proporcional a la concentración de bacterias
presentes.
Usuario previsto:
El personal de laboratorio capacitado en prácticas microbiológicas estándar está
calificado para usar MicroSnap Total.
Aplicabilidad:
MicroSnap Total es aplicable para la enumeración de bacterias aeróbicas
metabólicamente viables de alimentos, líquidos y superficies. El método fue validado a
través de la AOAC.Métodos de prueba de rendimientoSM (PTM) Programa para varios
alimentos. Consulte el certificado AOAC-RI PTM n.o 031501 para obtener más detalles.
Limitaciones:
El método MicroSnap Total se basa en la medición de ATP como métrica
principal. MicroSnap Total no se ha evaluado con todos los productos posibles.
Consulte Responsabilidad del usuario.
Es importante que las muestras estén a temperatura ambiente (18-25 ° C) antes de su uso en
MicroSnap. Las incubaciones que se inicien a partir de muestras extraídas directamente de la
refrigeración a 4 ° C se detectarán insuficientemente debido al retraso en alcanzar la
temperatura de incubación de 30 ° C.
Es importante que todos los medios o diluyentes utilizados con MicroSnap Total estén libres de
inhibidores de bioluminiscencia. Los inhibidores en los medios y diluyentes son la razón principal
de la mayoría de las detecciones fallidas. Hygiena recomienda los diluyentes que se enumeran a
continuación.
Materiales necesarios (no incluidos):
o Incubadora a 30 ± 0,5 ° C
o Luminómetro ENSURE (No de pieza: ENSURE)
Para muestras de productos:
o Diluyentes
o Agua de peptona tamponada
o Diluyente de máxima recuperación
o Butterfields
o Bolsas de muestra
o Equipo de homogeneización
o Pipeta y puntas para 1 ml
1 INS0126 ABR 2015 Rev. G
Direcciones:
Video instructivo: www.youtube.com/HygienaTV
Paso 1: enriquecimiento
El procedimiento de enriquecimiento se describe a continuación y también se muestra en los
diagramas del Paso 1.
1. Recolecte la muestra y colóquela en el dispositivo de enriquecimiento total MicroSnap
(pieza n.o MS1-TOTAL)
Las muestras pueden ser:
I. Superficie: frote un área cuadrada de 4 x 4 pulgadas (10 x 10 cm) o, para
superficies irregulares, la mayor cantidad de superficie posible para recolectar
una muestra representativa.
ii. Líquido: muestras líquidas de alimentos, bebidas o agua de 1 ml que se agregan
directamente al dispositivo de enriquecimiento.
iii. Producto: 1 ml de suspensión adecuada, por ejemplo, 10% p / v (peso /
volumen) de homogeneizado de alimentos añadido directamente al dispositivo
de enriquecimiento. El homogeneizado de alimentos debe prepararse pesando
10 go 50 g de matriz de alimentos y agregándolo a una bolsa stomacher que
contenga 90 ml o 450 ml de diluyente (Nota: El diluyente de recuperación
máxima se validó en el estudio AOAC PTM). Para la contaminación de la
muestra desconocida, se deben producir diluciones por debajo del 10% en más
diluyente agregando 10 ml del 10% en 90 ml de diluyente nuevo y repitiendo
para el 1% y el 0,1%. Si se requieren muestras repetidas, se deben eliminar
otros 10 go 50 g de la matriz a granel y se deben repetir las series de
diluciones. La replicación se puede lograr extrayendo múltiples alícuotas de 1
ml de diluciones al 10%, 1%, 0,1% dependiendo de las RLU logradas.
Nota: Al realizar pruebas de comparación, los análisis de muestras deben iniciarse
dentro de los 10 minutos para obtener resultados comparables entre métodos. Las
muestras tomadas se pueden almacenar antes de su uso a 4 ° C durante un máximo
de 2 días, pero deben volver a equilibrarse a temperatura ambiente antes de que las
muestras se procesen en MicroSnap y cualquier método equivalente.
2. Vuelva a colocar el hisopo en el tubo del hisopo. El dispositivo debe tener el mismo aspecto que
tenía cuando se sacó de la bolsa por primera vez.
3. Active el dispositivo de enriquecimiento sosteniendo firmemente el tubo del hisopo y
usando el pulgar y el índice para romper la válvula de presión doblando el bulbo hacia
adelante y hacia atrás.
4. Separe el bulbo y el tubo del hisopo a una distancia de 1 a 2 pulgadas entre sí, aliviando la presión
interna, y apriete el bulbo para descargar todos los medios hasta el fondo del tubo del hisopo.
Asegúrese de que la mayor parte del caldo de enriquecimiento esté en el fondo del tubo de hisopo.
5. Vuelva a colocar el hisopo en el tubo del hisopo firmemente para sellar el
6. dispositivo. Agite el tubo suavemente para mezclar la muestra con el caldo de
7. enriquecimiento. Incubar a 30 ± 0,5 ° C durante 7 horas ± 10 minutos.
Paso 2: detección
El procedimiento de detección se describe a continuación y también se muestra en los
diagramas del Paso 2. Antes de comenzar el Paso 2, encienda el luminómetro EnSURE. Si
se han programado ubicaciones, seleccione la ubicación a probar.
1. Deje que el dispositivo de detección total MicroSnap (pieza n.o MS2-TOTAL) se
equilibre a temperatura ambiente (10 minutos a 22 - 26 ° C). Agite el dispositivo
de prueba dando golpecitos en la palma de la mano 5 veces o moviéndolo con
fuerza hacia abajo una vez. Esto llevará el líquido extractante al fondo del tubo.
2. Transfiera la muestra enriquecida del dispositivo de enriquecimiento al dispositivo de
detección. El hisopo del dispositivo de enriquecimiento se puede utilizar como pipeta para
mayor comodidad.
I. Apriete y suelte el bulbo del dispositivo de enriquecimiento para mezclar y extraer la
muestra en el bulbo.
ii. Retire el hisopo del dispositivo de enriquecimiento del tubo.
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Prueba rápida de actividad microbiana total
Partes requeridas:
Paso 1: Dispositivo de enriquecimiento total MicroSnap, MS1-TOTAL (CANTIDAD 100)
Paso 2: Dispositivo de detección total MicroSnap, MS2-TOTAL (CANTIDAD 100)

iii. Abra el dispositivo de detección girando y tirando para quitar la bombilla. Validación AOAC PTM:
Dejar de lado.
Tabla 2: Correlación de validación de AOAC PTM con ISOMétodo para
un. Inserte la punta del hisopo del dispositivo de enriquecimiento en la parte superior del tubo del
Varias matrices de alimentos
dispositivo de detección (aproximadamente 1 pulgada o 3 cm) y apriete ligeramente la

bombilla del dispositivo de enriquecimiento para que gotee la muestra enriquecida en el tubo
Matriz de alimentos Correlación con el método ISOM (R2)
hasta que el volumen alcance la línea de llenado marcada en la parte inferior del tubo del

dispositivo de detección. Evite agregar un exceso de muestra por encima de la línea de

Carne molida cruda 0,771
llenado, ya que esto puede aumentar la variación de los resultados de la prueba.

Pollo crudo 0,969

iv. La muestra enriquecida restante se puede devolver al dispositivo de enriquecimiento
para realizar pruebas adicionales. Vuelva a armar el dispositivo de enriquecimiento a Lechuga 0,948
su estado original y devuélvalo a la incubadora.
Nota: Cuando se analizan réplicas de la misma muestra enriquecida, todas Tortas de crema 0,987
las réplicas deben realizarse en 10 minutos para obtener resultados
comparables. Leche cruda 0,990
v. Vuelva a montar el dispositivo de detección a su estado original.
3. Active el dispositivo de detección sosteniendo firmemente el tubo del hisopo y usando el Las matrices alimentarias se probaron en su estado natural; sin picos de bacterias

pulgar y el índice para romper la válvula de presión doblando el bulbo hacia adelante y se realizó y todas las muestras presentaron alguna forma de rango contable. Por lo

hacia atrás. Apriete la perilla 3 veces para liberar todo el líquido al fondo del tubo del tanto, el uso de negativos verdaderos es difícil de realizar con muestras de alimentos

hisopo. reales debido a que las bacterias siempre están presentes incluso en niveles bajos. El

4. Agite suavemente para mezclar. uso de un límite inferior de detección de 100 UFC por gramo es aceptable cuando se usa

5. Inserte inmediatamente todo el dispositivo en el luminómetro; cierre la tapa y sostenga la MicroSnap a las 7 horas de incubación.

unidad en posición vertical, presione el botón "OK" para iniciar la medición. Los resultados
Se demostró que el método tiene una buena correlación con el método de
aparecerán después de una cuenta regresiva de 15 segundos.
la Organización Internacional de Normalización (ISO), ISO 4833: 2003,
6. El resultado se mostrará en RLU (unidades de luz relativas). Configure los umbrales de RLU en
Microbiología de alimentos y piensos - Método horizontal para el
el instrumento para que se correspondan con los límites de CFU requeridos. Consulte
recuento de microorganismos - Técnica de recuento de colonias a 30 ° C
"Interpretación de los resultados" a continuación para conocer la correlación.
(ISO 4833) (3) método de referencia para la enumeración de TVC.

Límite de detección: Interpretación de resultados:

Los resultados se muestran en el luminómetro como unidades de luz relativa (RLU). La

El límite de detección es el nivel más bajo de bacterias aeróbicas viables que salida numérica es proporcional al contenido de ATP extraído de bacterias viables en
se pueden detectar por encima de un fondo de matriz alimentaria cuando el crecimiento en el momento de la prueba. Esta concentración de ATP es a su vez
ensayo se realiza de manera correcta y eficiente. El nivel más bajo de proporcional a los inóculos bacterianos iniciales expresados como Unidades
bacterias que se puede detectar disminuye a medida que aumenta el Formadoras de Colonias (UFC). La Tabla 3 muestra los valores de UFC equivalentes para
tiempo de incubación. A las 7 horas, el nivel de detección se acerca a 10 UFC las mediciones de RLU durante 7 horas de incubación solo a 30 ° C. Los datos se
por ml de medio de enriquecimiento; a las 8 horas, esto se reduce a 1 UFC generaron a partir de una variedad de alimentos probados en estudios de validación
por ml. La continuación de esta estequiometría está en línea con el modelo internos y AOAC.
de Baranyi-Roberts de crecimiento bacteriano en los alimentos. A las 7 horas
de tiempo de incubación, la relación CFU a RLU se asemeja a una relación de
Tabla 3: Correlación entre RLU y CFU a 30 ° C
1 a 1 o Y = X. A las 7 horas, el rango dinámico de MicroSnap Total en el
luminómetro EnSURE es proporcional al rango real de RLU factible en el UFC equivalente
instrumento EnSURE. Un límite inferior de 10 RLU (<
Muestra directa, por ejemplo, 1 ml Típico 10%
RLU líquido suspensión de sólido
(Garantizar) (o hisopo de superficie) muestra

Tabla 1: Rango dinámico a las 7 horas de incubación <10 <10 <100 / g

Tipo de ejemplo Rango de UFC <20 <20 <200 / g

Superficie 10-10.000 (UFC / hisopo) <30 <30 <300 / g

1 ml de líquido 10-10 000 (UFC / ml) <50 <50 <500 / g

10% p / v de suspensión de sólidos 100-50.000 (UFC / g) <100 <100 <1000 / g

<1000 <1000 <10,000 / g

Para las muestras en las que la contaminación está fuera de los rangos detallados en la
Tabla 1, se deben realizar las siguientes diluciones en serie para poder leerlas en el
luminómetro:
  1% de suspensión será de 1,000 - 500,000 CFU
  0.1% de suspensión será de 10,000 - 5,000,000 CFU
  Nota: Al probar múltiples diluciones en serie, todas las diluciones deben
prepararse y probarse simultáneamente para obtener resultados lineales.
> 5.000 TNTC TNTC
Cuando se preparan y analizan varias diluciones para muestras con contaminación
desconocida, la UFC / go mL se calcula multiplicando el resultado de UFC por el
factor de dilución correspondiente. Hygiena ofrece una práctica calculadora de
Microsoft Excel® para calcular las conversiones de RLU a CFU.

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Prueba rápida de actividad microbiana total
Partes requeridas:
Paso 1: Dispositivo de enriquecimiento total MicroSnap, MS1-TOTAL (CANTIDAD 100)
Paso 2: Dispositivo de detección total MicroSnap, MS2-TOTAL (CANTIDAD 100)

Responsabilidad del usuario:

Calibración y controles:
1. Los dispositivos MicroSnap no se han probado con todos los posibles productos
Es aconsejable realizar controles positivos y negativos de acuerdo con las Buenas
alimenticios, procesos alimentarios, protocolos de prueba o con todas las posibles
Prácticas de Laboratorio. Hygiena ofrece el siguiente control de instrumentos:
cepas de microorganismos.
  Kit de control de calibración (pieza n.o PCD4000) 2. No utilice esta prueba para el diagnóstico de enfermedades en humanos y
animales.
Almacenamiento y vida útil: 3. Ningún medio de cultivo recuperará la misma cepa o enumerará una cepa en

Conservar entre 2 y 8 ° C. Los dispositivos tienen una vida útil de 12 meses. Verifique la particular de la misma manera que otro medio. Otros factores externos, como el

fecha de vencimiento en la etiqueta. método de muestreo, el protocolo de prueba y la manipulación, pueden influir en
la recuperación.
4. Es responsabilidad del usuario, al seleccionar un método de prueba,
Disposición:
evaluar una cantidad suficiente de muestras.
Desinfectar antes de desechar. Los dispositivos MicroSnap se pueden desinfectar en autoclave 5. El personal debe estar capacitado en las técnicas de prueba adecuadas.
o sumergiéndolos en lejía al 20% durante 1 hora. Luego, se pueden tirar a la basura.
Alternativamente, los dispositivos MicroSnap pueden desecharse en una instalación de
Responsabilidad de Hygiena:
eliminación de desechos de riesgo biológico.

Precauciones de seguridad:
1. Los componentes de los dispositivos MicroSnap no presentan ningún riesgo para la salud cuando
se utilizan correctamente. Los dispositivos usados que confirmen resultados positivos pueden ser
un riesgo biológico y deben desecharse de manera segura de acuerdo con las Buenas Prácticas de
Laboratorio y las Regulaciones de Salud y Seguridad. El dispositivo de detección está diseñado
para un solo uso. No reutilice. No use dispositivos después de la fecha de vencimiento.
2.
3. El muestreo debe realizarse de forma aséptica para evitar la contaminación cruzada. Asegúrese
4. de que la dilución de la muestra esté dentro del rango dinámico del luminómetro. Asegúrese de
Como ocurre con cualquier medio de cultivo, los resultados de MicroSnap Total no constituyen
una garantía de calidad de los alimentos, bebidas o procesos que se prueban con estos
dispositivos. Hygiena no será responsable ante el usuario u otros por cualquier pérdida o daño,
ya sea directo o indirecto, incidental o consecuencia del uso de estos dispositivos. Si se
demuestra que este producto es defectuoso, la única obligación de Hygiena será reemplazar el
producto o, a su discreción, reembolsar el precio de compra. Notifique de inmediato a Hygiena
dentro de los 5 días posteriores al descubrimiento de cualquier defecto sospechoso y devuelva el
producto a Hygiena. Llame al Servicio de atención al cliente para obtener un número de
autorización de devolución de mercancías.

5. que la temperatura y el tiempo de incubación sean adecuados, como se describe en las

Información del contacto:
Instrucciones.

6. Al probar múltiples diluciones en serie, todas las diluciones deben prepararse y

Si necesita más información, visítenos en www.hygiena.como
probarse simultáneamente para obtener resultados lineales.
contáctenos en:
7. Cuando se analizan réplicas de la misma muestra enriquecida, todas las réplicas deben Hygiena Estados Unidos Hygiena International Ltd
realizarse dentro de los 10 minutos para obtener resultados comparables. Al realizar Teléfono: 805.388.8007 Teléfono: +44 1923 818821 Fax: +44
8. pruebas de comparación, los análisis de muestras deben iniciarse dentro de los 10 Fax: 805.388.5531 1923 818825 Correo electrónico:
minutos para obtener resultados comparables entre métodos. Correo electrónico: info@hygiena.com enquiries@hygiena.com

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Partes requeridas:
Paso 1: Dispositivo de enriquecimiento total MicroSnap, MS1-TOTAL (CANTIDAD 100)
Paso 2: Dispositivo de detección total MicroSnap, MS2-TOTAL (CANTIDAD 100)

MicroSnap Total

Paso 1 Enriquecimiento de muestras de hisopos de superficie ambiental, líquidos y sólidos

Superficie Liquidos Muestras sólidas

1 2

O O

I. Superficie: Limpie un área de 10x10 cm ii. Líquidos: Agregue 1 ml de muestra líquida iii. Muestras sólidas: Agregue 1 ml de la 2. Vuelva a insertar el bulbo de la válvula a presión

con un dispositivo de enriquecimiento. de alimentos, bebidas o agua directamente al dilución adecuada de muestras sólidas en el tubo del hisopo.

dispositivo de enriquecimiento. directamente al dispositivo de

enriquecimiento.

3 4 5 6

3. Activar dispositivo. Doble el bulbo,
rompiendo la válvula de presión.
4. Levante el bulbo (aproximadamente de 1 a 2 5. Agite el tubo suavemente para mezclar 6. Incubar a 30 ± 0,5 ° C durante 7
pulgadas) y apriete el bulbo para liberar la muestra con el líquido. horas ± 10 minutos. Continúe con el
líquido en la parte inferior del tubo. paso 2.
Reemplace la bombilla en el tubo.
Ahora debe haber líquido en
el fondo del tubo.

Paso 2 Detección / Medida

1 2 3 4

1. Permita que el dispositivo de detección 2. Transferir asépticamente 3. Active el dispositivo de detección 4. Después de la activación, agite suavemente

se equilibre en la habitación la muestra enriquecida de rompiendo Snap-Valve. Apriete la el tubo para mezclar la muestra con el líquido.
la temperatura. Agite para que el líquido Dispositivo de enriquecimiento para pera para liberar líquido en el tubo.
del tubo llegue al fondo del tubo. Dispositivo de detección. Ahora debe haber líquido en el fondo
del tubo.

5 6
Video instructivo:
www.youtube.com/HygienaTV

5. Inserte el dispositivo de 6. Registre los resultados como RLU

detección en un luminómetro e y consulte la Tabla 2 para
inicie la medición. interpretar los resultados.

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