Microbiología

I. OBJETIVOS
3.1 Objetivo general
 Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua de mar de la playa Arenilla,
Chucuito, Callao con base al Estándar Nacional de Calidad Ambiental (ECA).

3.1 Objetivos específicos

 Colectar la muestra de agua de mar de la playa Arenilla, siguiendo la Guía
Técnica “Procedimiento de Toma de Muestra del Agua de Mar en Playas de
Baño y Recreación” elaborado por la Dirección General de Salud Ambiental del
Ministerio de Salud.
 Realizar el análisis microbiológico de las muestras de agua mediante las
pruebas: presuntiva y confirmativa.

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II. MARCO TEÓRICO

MEDICIÓN DEL CRECIMIENTO MICROBIANO: ENUMERACIÓN DIRECTA,

ENUMERACIÓN DE MICROORGANISMOS VIABLES Y NÚMERO MÁS
PROBABLE

La población microbiana mantiene una relación con la calidad del ambiente en el que se
encuentran, por eso es de mucha consideración llegar a conocer los organismos que la
conforman, por lo que la enumeración o el recuento de poblaciones microbianas es parte del
quehacer básico del microbiólogo.

Existen varias técnicas de recuento, unas directas y otras indirectas y la decisión para la
utilización de alguna de éstas depende del tipo de información que se necesite y los recursos con
los que se cuenten. Muchas de estas técnicas forman parte de normas estándares para la
evaluación de la calidad de ambientes, naturales o de recreación, alimentos, fármacos y otros.

1. RECUENTO DIRECTO

Incluye técnicas microscópicas que permiten la visualización directa de los microorganismos, en

algunos casos pueden usarse sondas de ADN acompañadas por colorantes fluorescentes que
permiten además la identificación de taxones. Son muy utilizadas en la industria y en la
evaluación de ambientes naturales. La desventaja es que existen limitaciones para determinar la
viabilidad de los organismos por lo que se recomienda asociar estos recuentos con el uso de
colorantes vitales.

1.1. RECUENTO CON CÁMARA DE NEUBAUER

El recuento se podrá lograr gracias al uso de la cámara de contaje adaptada al microscopio de

campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el
centro, en el fondo de la cual se ha marcado una cuadrícula. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con
una separación entre dos líneas consecutivas de 0.25 mm. El área sombreada y marcada con L
corresponde a 1 milimetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1 mm
respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la
superficie marcada 0.1 milímetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el
cubreobjetos es de 0.1 milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.

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 Microbiología

Esta técnica se utiliza para recuentos celulares sanguíneos y el de microorganismos para la

determinación de dosis de inoculantes, calidad de materia prima y otros usos de interés
industrial; además se puede utilizar para verificar la actividad microbiana en los lodos activados.

Ilustración 1Cámara de Neubauer

Ilustración 2Cuadrículas en la cámara de Neubauer

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Ilustración 3

2. RECUENTO DE MICROORGANISMOS VIABLES

2.1. RECUENTO DE COLONIAS EN PLACA

Este recuento se basa en que cada microorganismo desarrollará una colonia visible. Pero debido
a que una muestra no es totalmente homogénea con respecto a su composición microbiológica,
es posible que una colonia se origine de un microorganismo o de cientos de ellos, dando en este
último caso un recuento menor del real. También es posible que muchas de las bacterias
presentes en la muestra no puedan crecer en las condiciones elegidas (pH, temperatura, medio
de cultivo, tiempo, etc.). En este caso el recuento también será inferior al real. Lo que sí se sabe
es que cada colonia observada se formó a partir de por lo menos un microorganismo.

La colonia es considerada una unidad formadora de colonia (ufc) a los efectos de los cálculos.
Se admite, por lo tanto, que en los métodos de recuento de microorganismos vivos, son
inevitables los errores, especialmente cuando se examinan muestras pequeñas. La técnica se
acompaña con la preparación de diluciones decimales de acuerdo a la calidad de la muestra que
se analiza. El tipo de siembra a utilizar dependerá de la naturaleza muestra.

Esta técnica se utiliza para el recuento de microorganismos totales en muestras de agua (técnica
normada), suelo y sedimentos. También puede ser utilizada para el análisis microbiológico de
lodos activados; las cuentas totales en placa realizadas en estas muestras están en el orden de
108 UFC/mg de lodo.

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 Microbiología

Ilustración 4 Recuento de colonias de hongos en placa

2.2. RECUENTO DE MICROORGANISMOS CON TÉCNICAS DE FILTRACIÓN

Este método consiste en hacer pasar la muestra de agua a través de filtros de membranas
estériles de 0.45µm de diámetro. Las bacterias quedan retenidas en el filtro. Este se coloca en
una placa de medio PCA y se incuba, de modo que las bacterias crecen sobre la membrana.

Esta técnica es ideal para el análisis de aguas o bebidas con baja turbidez aunque también
existen procedimientos que incorporan diluciones decimales para disminuir la concentración
microbiana y facilitar el filtrado.

Aplicaciones útiles:

 Se puede examinar grandes volúmenes de agua; teóricamente casi cualquier volumen de

agua se puede filtrar a través del disco y los microorganismos de cualquier volumen
quedaran en el disco.
 La membrana se puede pasar de un medio a otro con el propósito de seleccionar y
diferenciar los microorganismos.
 Se obtienen resultados más rápidos, que con los métodos convencionales.
 Se logran estimaciones cuantitativas de ciertos tipos de bacterias como coliformes,
cuando se usan los medios apropiados.

Ventajas del uso del Filtro de membrana para aguas:

 Rapidez en la obtención de resultados.

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 Microbiología

 Ahorro de manos de obra, medios, materiales de vidrios, y coste de los materiales si el

filtro se lava y se vuelve a utilizar.
 Pueden exponerse los organismos a medio de enriquecimiento muy fácilmente durante
un corto tiempo y a una temperatura conveniente.

lustración 6Análisis de aguas usando el filtro de membrana

Ilustración 5 Pasos a seguir al usar este método

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 Microbiología

3. RECUENTO CON ESTIMACIÓN ESTADÍSTICA

3.1. DETERMINACIÓN MICROBIOLÓGICA POR EL MÉTODO DEL NÚMERO MÁS
PROBABLE (NMP)

Es una estrategia eficiente de estimación de densidades poblacionales especialmente cuando una

evaluación cuantitativa de células individuales no es factible. La técnica se basa en la
determinación de presencia o ausencia en réplicas de diluciones consecutivas de atributos
particulares de microorganismos presentes en muestras de suelo u otros ambientes. Por lo tanto,
un requisito importante de este método es la necesidad de poder reconocer un atributo particular
de la población en el medio de crecimiento a utilizarse. El estimado de densidad poblacional se
obtiene del patrón de ocurrencia de ese atributo en diluciones seriadas y el uso de una tabla
probabilística.

Son tres:

 Aerobios mesófilos totales

 Coliformes totales y E.Coli
 Estreptococos fecales

Los grupos coliforme y estreptococo son indicadores de contaminación fecal. Los indicadores
son microorganismos que viven normalmente en el intestino del hombre y de los animales. Su
presencia en el agua indica contaminación fecal, y por lo tanto riesgo de presencia de patógenos
cuyo habitad es también el intestino.

Algunas de las ventajas del NMP son:

 La capacidad de estimar tamaños poblacionales basados en atributos relacionados a un

proceso (selectividad)
 Provee una recuperación uniforme de las poblaciones microbianas de suelos
diversificados Determina sólo organismos vivos y activos metabólicamente
 Suele ser más rápido e igual de confiable que los métodos tradicionales de
esparcimiento en platos de cultivo, entre otros.

La mayoría de las tablas de NMP están generalmente limitadas a valores de pruebas que
comienzan con porciones de muestra de 10mL

En caso de no encontrar en las tablas la combinación de tubos adecuada, emplear para los
cálculos la siguiente ecuación:

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 Microbiología

𝑁𝑀𝑃 𝑁𝑟𝑜. 𝑡𝑢𝑏𝑜𝑠 𝑝𝑜𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑜 𝑥 100

=
100𝑚𝐿 𝑚𝐿 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑒𝑛 𝑡𝑢𝑏𝑜𝑠 𝑛𝑒𝑔𝑎𝑡𝑖𝑣𝑜𝑠 𝑥 𝑚𝐿 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑒𝑛 𝑡𝑜𝑑𝑜𝑠 𝑙𝑜𝑠 𝑡𝑢𝑏𝑜𝑠

Ilustración 7Colifomes Totales: técnica por NMP

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE AGUAS

El agua es un medio que vehiculiza fácilmente microorganismos, algunos de ellos con poder
patógeno y otros denotan una clara contaminación fecal.

Mediante las pruebas que se indican es posible determinar si la muestra de agua analizada es
apta para el consumo público.

La muestra a estudiar debe ser representativa, debe obtenerse una cantidad suficiente (250 ml
para alas técnicas basadas en el número más probable NMP o 100ml para las membranas
filtrantes), el agua debe ser tomada en condiciones de esterilidad y ser conservada en
refrigeración hasta el momento de su análisis.

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Ilustración 8 prueba confirmatoria de coliformes totales

MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS EN LA PRÁCTICA

CALDO LAURIL SULFATO

El caldo lauril sulfato se utiliza para la detección de bacterias coliformes en agua y aguas
residuales en un entorno de laboratorio. El caldo lauril sulfato, también denominado caldo lauril
triptosa, se prepara de acuerdo con la fórmula de Mallmann y Darby. Durante su investigación,
el lauril sulfato de sodio produjo los mejores resultados para la inhibición de organismos
distintos de los coliformes. El caldo lauril sulfato, abreviado LSB, se utiliza en la fase
presuntiva de la técnica estándar de fermentación de coliformes totales en el análisis de agua, y
la detección de coliformes en alimentos.

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 Microbiología

Fórmula Litro
Digerido enzimático de caseína 20 g
Lactosa 5g
Cloruro de sodio 5g
Fosfato monopotásico 2.75 g
Fosfato disódico 2.75 g
Lauril sulfato de sodio 0.1 g

CALDO EC

El caldo EC o caldo Escherichia coli es un medio de

cultivo líquido selectivo. Este medio es recomendado
por la Standard Methods para el recuento de
coliformes totales y fecales, por la técnica del número
más probable (NMP) en muestras de agua y alimentos,
donde el principal agente involucrado es la Escherichia
coli.

El caldo EC está compuesto por tripteína, lactosa,

sales biliares, fosfato dipotásico, fosfato
monopotásico, cloruro de sodio y agua. Su fórmula Ilustración 9 Caldo EC en tubos

está estratégicamente diseñada para favorecer el

crecimiento de coliformes totales y fecales e impedir el desarrollo de otros microorganismos
acompañantes.

CALDO AZIDA DE SODIO Fórmula Litro

El caldo azida dextrosa se especifica en la Digerido enzimático de caseína 7.5 g
prueba presuntiva de agua y aguas residuales Digerido enzimático de tejido animal 7.5 g
para los estreptococos fecales por la técnica Extracto de carne de res 4.5 g
de tubos múltiples. Dextrosa 7.5 g
Cloruro de sodio 7.5 g
Azida de sodio 0.2 g

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 Microbiología

CALDO BRILA

El caldo de bilis verde brillante al 2% también se conoce como caldo

de bilis verde brillante, caldo de lactosa verde brillante, caldo de
lactosa bilis verde brillante y caldo lactosa bilis verde brillante al
2%.

Fórmula Litro
Digerido enzimático de gelatina 10 g Ilustración 10 Caldo BRILA en tubos

Lactosa 10 g
Bilis de buey 20 g
Verde brillante 0.0133 g

AGAR BILIS ESCULINA

El agar bilis esculina es un medio de cultivo sólido selectivo y diferencial. Es utilizado como
prueba diagnóstica para determinar la capacidad que posee un determinado microorganismo de
crecer en un medio que contiene bilis y además descomponer el glucósido esculina en esculetina
y glucosa.

Esta prueba diagnóstica se usa para diferenciar especies del género Streptococcus pertenecientes
al grupo D (bilis esculina positiva), de otros grupos de Streptococcus que reaccionan
negativamente frente a esta prueba.

El agar bilis esculina está compuesto por

peptona, extracto de carne, bilis de buey,
esculina, citrato de hierro, agar y agua
destilada. Algunas casas comerciales incluyen
azida sódica dentro de la composición del
medio.

Ilustración 11Placa de agar bilis esculina,

sembrada con una cepa de Enterococcus
(prueba positiva)

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 Microbiología

AGAR EMB

El agar EMB es un medio de cultivo sólido selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento
de bacilos Gram negativos, principalmente de la familia Enterobacteriaceae, y otros bacilos
Gram negativos no exigentes. También se le conoce con las siglas EAM, que significa eosina-
azul de metileno.

Este medio fue creado por Holt-Harris y Teague en 1916. Contiene peptona, lactosa, sacarosa,
fosfato dipotásico, agar, eosina, azul de metileno y agua. Es muy similar al agar MacConkey,
sobre todo si se usa el agar EMB modificado por Levine, que no contiene sacarosa.

Ilustración 12 Agar para detección y

aislamiento de enterobacteriáceas patógenas

III. TOMA DE MUESTRA

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 Microbiología

5.1 Ubicación geográfica

El muestreo se dio en la playa Arenilla, playa pedregosa, que se ubica en Chucuito del
Distrito de La Punta de la provincia del Callao, sus coordenadas geográficas son
12°04′17″S y 77°09′45″O.

5.2 Materiales

 1 frasco de 500ml esterilizado

5.2 Descripción del proceso

Se tomó una única muestra, esta se dio el mismo día, específicamente 2 horas antes que
se empezó a realizar el análisis microbiológico, el día 2 de noviembre a las 2 pm, es por
ello que no se necesitó un cooler y gel refrigerante.

Se tomó en cuenta las consideraciones especifica dadas por el MINSA al momento de

realizar el muestro, como:

 Se toma la muestra en una parte de la playa donde el oleaje es tranquilo.

 La profundidad del agua llegue al 1 metro.
 la muestra debe tomarse a contracorriente del flujo entrante y a 30 cm
aproximadamente bajo la superficie del agua.

Así mismo, al momento de tomar la muestra:

 Aflojar levemente la tapa del frasco y el papel de protección, manejándolos

como una unidad y evitando que se contamine la tapa o el cuello del frasco.
 Introducir el frasco con la boca hacia abajo hasta la profundidad de 30 cm de la
superficie.
 Llenar el frasco hasta que quede 1/3 del frasco del volumen libre y tapar.

IV. DETALLES EXPERIMENTALES

4.1. MATERIALES Y EQUIPOS

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 Microbiología

 Frasco esterilizado (toma de muestra)

 Tubos de ensayo
 Gradilla
 Asa de siembra
 Placas Petri
 Cámara de Neubauer
 Mechero de Bunsen
 Alcohol
 Guantes y mascarillas
 Marcador
 Muestras de agua de mar y agua de bebida
 Microscopio
 Laminillas y cubreobjetos
 Pipetas
 Encendedor
 Filtrador

4.2. PROCEDIMIENTO

Para la muestra de agua de mar se realizó dos análisis; colimetría y enterometría, en

cada uno de ellas se dio la prueba presuntiva y confirmativa
A. COLIMETRÍA
Método de tubos múltiples
1. Prueba presuntiva
 Se preparó 15 tubos de ensayo en donde a 5 de ellos se les puso 10 ml de
caldo lauril de una concentración de 2x a los 10 tubos restantes se les
coloco caldo lauril a concentración de x.
 Se rotuló de la siguiente manera: los 5 primeros tubos de concentración 2
X con el numero 10, 5 tubos de concentración X con el valor 1 y los 5
tubos restantes con el valor -1.
 Después se le añadió la muestra del agua de mar de la siguiente forma:
 A los 5 tubos rotulados como 10 se les puso 10 ml de agua de mar
 A los 5 tubos rotulados como 1 se les puso 1ml

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 Microbiología

 A los 5 tubos restantes, rotulados como -1 se les puso 1 ml de una

dilución de la muestra que tenía 90ml de solución salina con 10 ml de
la muestra de agua de mar.
 A los tubos se les colocó en una incubadora a 37°c por 48 horas.
2. Prueba confirmativa
Este paso depende de la prueba presuntiva; en nuestro caso se obtuvo 3 tubos
positivos rotulados como 10, 0 rotulados como 1 y 0 rotulados como -1, de
las cuales se utilizaron los tres tubos positivos para realizar la prueba
confirmativa.
 Para coliformes totales
 Se preparó 3 tubos de ensayo, donde se añadió 10 ml de caldo brila.
 Se rotularon como 10
 Se agregó 1ml de cada tubo que en la prueba presuntiva salió
positivo.
 Se incubo por 48 horas de 44.5 a 45.5 °C.
 Para coliformes fecales

PRIMERA PARTE

 Se preparó 3 tubos de ensayo, donde se añadió 10 ml de caldo EC.

 Se rotularon como 10
 Se agregó 1ml de cada tubo que en la prueba presuntiva salió
positivo.
 Se incubo por 48 horas.

SEGUNDA PARTE

 Se preparó la placa con el agar EMB.

 Se sembró los dos tubos positivos del caldo EC, por el método del
estriaje, en una placa dividida en dos.

TERCERA PARTE

 Como en la segunda parte salió positivo, se hace una prueba IMVIC

que consta de siembra en tres diferentes agares.
1. Agar Indol, la siembra es adentro del agar puesto que en este se
analizará la motilidad de la bacteria, por los rastros de su flagelo.

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 Microbiología

2. Agar RM-VP, la siembra se hizo normalmente

3. Agar citrato, donde la siembra se realizó de costado
B. ENTEROMETRÍA
1. Prueba presuntiva
Método de tubos múltiples:
 Se preparó 15 tubos de ensayo en donde a 5 de ellos se les puso 10 ml de
caldo Azida de una concentración de 2x a los 10 tubos restantes se les
coloco caldo Azida a concentración de x. (se repitió los mismos pasos
que colimetría)
 Se rotuló de la siguiente manera: los 5 primeros tubos de concentración 2
X con el número 10, 5 tubos de concentración X con el valor 1 y los 5
tubos restantes con el valor -1.
 Después se le añadió la muestra del agua de mar de la siguiente forma:
 A los 5 tubos rotulados como 10 se les puso 10 ml de agua de mar
 A los 5 tubos rotulados como 1 se les puso 1ml
 A los 5 tubos restantes, rotulados como -1 se les puso 1 ml de una
dilución de la muestra que tenía 90ml de solución salina con 10 ml de
la muestra de agua de mar.
 A los tubos se les colocó en una incubadora a 37°c por 48 horas.
Método de recuento heterotrófico:
 Se colocó 9 ml de solución salina a cada uno de los 5 tubos de ensayo
rotulados como -1,-2,-3,-4,-5.
 Se añadió 1 ml de muestra al tubo rotulado con -1 obteniéndose un total
de 10 ml, posteriormente se retiró 1 ml de solución de éste tubo para
añadirlo al tubo rotulado con -2. Este procedimiento se realizó en la
totalidad de tubos de forma consecutiva hasta el tubo rotulado con -5.
 Se extrajo dos veces 0,1 ml de dilución del tubo rotulado con -3 y se
añadieron a dos placas con agar PC (Plate Count Agar). Se repite el
procedimiento en los tubos rotulados con -4 y -5.
2. Prueba confirmativa
En la prueba presuntiva se obtuvo 2 tubos positivos rotulados como 1, 0
rotulados como 10 y 0 rotulados como -1, de las cuales se utilizaron los dos
tubos positivos para realizar la prueba confirmativa.

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 Microbiología

 Se preparó el agar bilis esculinas en dos placas.

 Se sembró la muestra de los tubos que dieron positivos en la prueba
presuntiva por el método del estriaje.
 Se incubo a 37° por 48 horas.

C. METODO DE RECUENTO (FILTRACIÓN)

 Colocamos 100 ml de muestra de agua de mar al embudo de filtración del
sistema.
 Después se puso en el sistema de filtración la membrana con cuadrículas
empleando una pinza estéril para una correcta manipulación.
 A continuación, se procedió a abrir la bomba de vacío para inicio del flujo de
la muestra a través de la membrana de nitrocelulosa con cuadrículas (0.45
µm).
 Finalmente, se retiró la membrana y se colocó en una placa con medio de
cultivo agar Hektoen (reconoce Salmonella y E. Coli).
 Se realizó el mismo procedimiento pero utilizando agar TBX (reconoce E.
Coli)

D. METODO DE RECUENTO DIRECTO EN CÁMARA DE NEUBAUER

(levaduras)
 Usando una pipeta extraemos la muestra, jugo de manzana.
 Añadimos en la zona “H” de la cámara y posteriormente colocar la laminilla
en la zona central de la misma.
 Colocar la lámina en la platina del microscopio, enfocar correctamente y
anotar los valores obtenidos del recuento de 5 cuadrículas.

VII. RESULTADOS

PRUEBA PRESUNTIVA PRUEBA CONFIRMATIVA

Medio de Respuestas Medio de Respuestas NMP
cultivo positivas cultivo positivas

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 Microbiología

En los 5
En los 5 tubos de 10:
tubos de 10: 2
3 tubos En los 5 4,5
positivos. tubos de 10: NMP/100
Caldo Brila 0 mL.
En los 5
tubos de 10:
En los 5
tubos de 1:
0
Colimetría Caldo Lauril
En los 5
0 tubos tubos de 10:
positivos.
2
Caldo EC
En los 5 4,5
En los 5 tubos de 10: NMP/100
tubos de -1: 0 mL.
0 tubos En los 5
positivos. tubos de 10:
0

PRUEBA PRESUNTIVA PRUEBA CONFIRMATIVA

Medio de Respuestas Medio de Respuestas NMP/100ml
cultivo positivas cultivo positivas
En los 5 En los 5
tubos de 10: tubos de 10:
0 0
En los 5 En los 5
tubos de 1: Agar bilis tubos de 1: 0 NMP/100
Enterometría Caldo Azida
Esculina mL.
2 0
En los 5 En los 5
tubos de -1: tubos de -1:
0 0

Método Medio Respuesta UFC/100ml

Agar PCA Conc. Colonias 55 x 104

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 Microbiología

(-3) 55
Método de
(-4) 1
placa difusa
(-5) 2

Recuento
heterotrófico en
Agar Hektoen 64 colonias 64
placas
Método de
filtración por
membrana
Agar TBX 8 colonias 8

Concentración
METODO RESULTADOS
celular
Cuadricula Conteo
1 20 células
RECUENTO
2 27 células
DIRECTO DE
CAMARA DE 3 29 células 6350 células/
LEVADURAS
NEUBAUER 4 26 células μL
5 25 células
Total 127 células
Promedio 25.4 células/cuadricula

VIII. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

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 Microbiología

1. En el recuento heterotrófico de placas, en el método de placa difusa solo se

eligieron aquellas placas que muestren entre 30 y 300 colonias, por lo que las
placas con las diluciones 10-4 y 10-5 no cumplieron con este requisito, por lo que
no se tomó en cuenta y solo se trabajó con la placa con dilución 10-3, puede que
esto nos haya desviado del verdadero resultado.
2. Vemos que el resultado 4.5 NMP/100ml es demasiado bajo, tanto para
coliformes fecales como totales, para ser una playa limeña.

V. RECOMENDACIONES

1. El análisis realizado usando diferentes técnicas y métodos deben hacerse en total

esterilización utilizando guantes, mascarilla, bata y recogerse el cabello, también
mantener el mechero bunsen prendido para evitar una contaminación cruzada.
2. Cuando se esteriliza el asa de siembra con el mechero bunsen tener mucho
cuidado, se debe esperar enfriar el asa para su posterior siembra, porque al estar
muy caliente podríamos matar a la bacteria.
3. Los tubos y placas deben rotularse bien y con letra legible, para evitar
inconvenientes.
4. La muestra de jugo, debe ser fermentada máximo 4 días posterior a eso lo que
vamos encontrar ya no sería levaduras sino bacteria.
5. Tener en cuenta la temperatura y tiempo de incubación de cada método o técnica
del análisis realizado.
6. La toma de muestra debe seguir las consideraciones de la Guía Técnica
“Procedimiento de Toma de Muestra del Agua de Mar en Playas de Baño y
Recreación” elaborado por la Dirección General de Salud Ambiental del
Ministerio de Salud.

VI. CONCLUSIONES

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 Microbiología

1. Según los Estándares Nacionales de Calidad Ambiental (ECAs), para aguas

superficiales con fines recreacionales debería haber como máximo 1000
NMP/100ml de coliformes totales y de coliformes fecales 200NMP/100ml, para
nuestro caso salió para los dos 4.5 NMP/100ml, indicándonos que las aguas de
la playa Arenilla son aptas para fines recreacionales.

VII. BIBLIOGRAFÍA
Sanz Cervera S. (2011) “Prácticas de Microbiología” 2da edición. Universidad de
La Rioja. España. Recuperado de
https://dialnet.unirioja.es/descarga/libro/100835.pdf
Guía de laboratorio
Redacción Marielsa Gil (s.f.).Agar bilis esculina: fundamento, preparación y usos.
Recuperado de https://www.lifeder.com/agar-bilis-esculina/

Redacción Marielsa Gil (s.f.). Agar EMB: fundamento, preparación y uso

: fundamento, preparación y usos. Recuperado de https://www.lifeder.com/agar-emb/

Camacho, A. “Método para la determinación de bacterias coliformes, coliformes

fecales y Escherichia coli por la técnica de diluciones en tubo múltiple (Número más
Probable o NMP)” 2ª ed. Facultad de Química, UNAM. México. Recuperado de
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/TecnicBasicas-Colif-tot-fecales-Ecoli-
NMP_6529.pdf

http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni_02
/58/texthtml/cap805.htm

VIII. ANEXO

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 Microbiología

Figura n° : Resultados de la Figura n° :Resultados de la siembra

siembra en agar Hektoen después en agar TBX después de la filtración,
de la filtración, nos dio 64 dándonos 8 ufc/100ml de E. Coli
ufc/100ml de coliformes

Figura n°: Siembra de los tubos Figura n°: Agar bilis esculina,
positivos de la prueba presuntiva en donde se sembró los dos tubos que
caldo Brila y caldo EC, para la dieron positivos en la prueba
prueba confirmativa de colimetría. presuntiva de enterometria.

Figura n° : Prueba confirmativa para

coliformes fecales, siembra en el agar
EMB, de los tubos que dieron positivos
de la siembra en el agar Brila y EC.

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Microbiología

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Universidad Nacional Mayor de San Marcos
Informe de Laboratorio Microbiología