DETECCION DE LA
RESISTENCIA BACTERIANA
MODULO 7
Detección de la resistencia a
carbapenémicos en Enterobacterias,
Pseudomonas y otros No fermentadores
Edgar Gonzales Escalante
DETECCION DE LA
RESISTENCIA BACTERIANA
MODULO 7
Detección de la resistencia a carbapenémicos:
NO CARBAPENEMASAS
BACTERIAS MECANISMOS
BLEE/AmpC + Pérdida de porinas
Enterobacterias Carbapenemasas
Pérdida de porinas
P. aeruginosa Bomba de eflujo
Carbapenemasas
Cefalosporinasas + Pérdida de porinas
Acinetobacter spp. Carbapenemasas
Modificacion de PBP (Acinetobacter)
Impermeabilidad
Perdida de porinas
Bombas de eflujo
Modificacion enzimatica:
carbapenemasas
Porinas: canales
proteicos de la
membrana externa BGN,
que participan en el
transporte de moléculas
hidrofílicas.
Ej: aminoácidos,
antibioticos, peptidos
Porina OprD (45KD):
Ingreso de aa básicos, peptidos
Oprd-: 70% expresión de oprD
Oprd-: IPM>>>MEN (10:1)
NO dan alto nivel de resistencia
R
Estructuras proteicas
capaces de expulsar del
citoplasma y
periplasma bacteriano
compuestos tóxicos.
Constitutivo
Inducible
Familia RND
P. aeruginosa
CAZ FEP PIP IPM MEN CIP TOB
MexAB-OprM X X X X X
MexCD-OprJ X X X X
MexEF-OprN* x X
MexXY-OprM X X X X X
*Mutaciones que conducen a la hiperexpresión de MexEF (mexT, mexS) determinan
represión de oprD y por tanto resistencia a carbapenemes
R
oprD MexAB-OprM
Ingreso de aa básicos, peptidos Dependiente de la estructura química
Oprd-: 70% expresión de oprD MEN (hidrofóbico)
Oprd-: IPM>>>MEN (10:1) IPM (hidrofílico): no se disuelve en la
NO dan alto nivel de resistencia membrana citoplasmática
IPM
MEM
Carbapenemes en BNF
IMPS
MEROR
Pseudomonas putida
Pandoraea
A. xylosoxidans
B. methylobacterium
R a C3G/C4G
CEFTRIAXONA, CEFOTAXIMA, CEFTACIDIMA, CEFEPIMA
Brev. Diminuta,
S, maltophilia Elizabethkingia Alcaligenes,
Achromobacter
(cefalosporinasa (cefalosporinasa (oxacilinasas,
L2, Clase A) CME, Clase A) Clase D)
INH CLAVULANICO INH IMIPENEM PERFIL INUSUAL
Chryseobacterium: CTX/CRO R > CAZ, FEP.
Myroides: R A C3G/C4G, Ochrobactrum anthropi : PERFIL TIPO AMPC
Polipeptídos: COLISTINA
• Burkholderia
• Sphingomonas
• Ralstonia
paucimobilis-
• Chryseobacterium/
parapaucimobilis
Myroides/Elizabethkingia
• Alcaligenes,
• Sphingobacterium spp
Achromobacter,
• Comamonas spp/
• P. fluorescens,
Delftia acidovorans
• P. putida
• Shewanella algae
• Stenotrophomonas
• Otros:
maltophilia
Pandoraea,Bergeyella,
Mecanismos Combinados
en Enterobacterias
Detección de KPC: THM
E. coli ATCC 25922
0,5 Mc F 1/10
Detección de KPC: THM
Detección de β-lactamasas
Todas productoras de BLEE: CTX-M (4), PER-2 (1), SHV(1)
No se detectaron Carbapenemasas
Estudio de proteínas de membrana externa
kDa
45
31
Mer R Mer S Mer R
Conclusión: BLEE + impermeabilidad R MER, Sd IPM
Escaleras
Fenotipicas
R
6 mm
ETP ETP
10 mm
MEM IPM
20 mm
IPM MEM
30 mm
BLEE + AmpC +
impermeabilidad impermeabilidad
Detección de Carbapenemasas
BLEE tipo CTX-M + impermeabilidad
FENOTIPICAMENTE OBSERVAREMOS:
- Sinergia IPM + APB NEGATIVO
- Sinergia IPM – EDTA – C3G NEGATIVO
- BLEE POSITIVO (halo de CTX < CAZ)
- Escalera fenotípica de los Carbapenemes:
IPM (>21 mm) > MEM > ETP (6mm)
IMP MER ETP
Detección de Carbapenemasas
AmpC (desrreprimido) + impermeabilidad
FENOTIPICAMENTE OBSERVAREMOS:
- Sinergia IPM + APB: POSITIVA
E. cloacae y C. freundii (falso + para carbapenemasa 2f)
- Sinergia IPM + APB: NEGATIVO
M. morganii, Providencia spp., S. marcescens.
- Sinergia IPM – EDTA – C3G: NEGATIVO
- Escalera fenotípica de los Carbapenems:
MEM > IPM (< 22mm) > ETP (6mm)
MER IMP ETP
CONCLUSION: BLEE + IMPERMEABILIDAD
IPM
10
R
CONCLUSION:
AmpC + IMPERMEABILIDAD
Fenotipo combinado
Las escaleras fenotípicas requieren del fenotipo puro para su interpretación, En presencia de múltiples mecanismos de R,
evaluar directamente resultado de las sinergias
E. cloacae
ESAC + SME,
MER IMP ETP imperm. IMP MER ETP IMP MER
IMI, NMC-A ETP
15mm 12mm 9mm
CTXM + KPC, MBL IMP
IMP MER ETP imperm. GES MER
ETP
CTX: 06 Sinergia APB+;
CTC: 12 Hodge +
CAZ: 07
CAC: 11 KPC + CTXM
FEP: 09
FEC: 14
IMP IMP 21 I FOX, AMP, CTN 6R
MER 15 R CAZ / CAC 10 /12
Sospecha carbapenemasa <=22
ERT 8 R CTX / CTC 11/12
C3G FEP / FEC 12/12
R BLEE:
CTX-AMC-CAZ pos
IMP-APB
NEG
IMP-EDTA-CAZ
NEG
Met. Inactivacion del
Escalera
Carbapeneme (CIM)
NEG
+ Fenotipo BLEE
Se aisla K. pneumoniae de hemocultivo de paciente adulto con shock septico
Presenta THM + a IMP
Conclusion: BLEE/impermeabilidad
IMP IMP 10 R FOX 06 R
MER 14 R AMP, CTN 6R
Sospecha carbapenemasa <=22
ERT 6 R CAZ / CAC 6/6
C3G CTX / CTC 6/6
R FEP / FEC 12/12
BLEE:
IMP-APB
CTX-AMC-CAZ Negativo
+
IMP-EDTA-CAZ
NEG
Met. Inactivacion del Escalera
Carbapeneme (CIM)
NEG
AmpC + MER-CLOXA
Se aisla E. cloacae de sangre de paciente con LMA
Conclusion: hiper AMP-C/impermeabilidad
