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RESUMEN
En esta práctica del laboratorio se aclaró y observo algunos factores físicos y químicos que
afectan la estructura y crecimiento micro orgánica, y como estos inhiben su proliferación que en
este caso fue con la bacteria Escherichia coli. Siendo agentes físicos como la temperatura y
presión osmótica, y en agentes químicos se vio la concentración de pH y acción de
desinfectantes y antisépticos. Y claro se usó siembras por métodos de difusión realizando
diluciones seriadas, en método del estriado y por cultivo de inoculo en medio líquido. En los
efectos encontrados como en la temperatura, la muerte térmica de los microorganismos tratados
a 65• C durante diferentes intervalos de tiempo dio como resultado una disminución de
organismos resistentes al tratamiento térmico al paso del tiempo; la presión osmótica, se
utilizaron concentraciones de 5, 10, 20 y 40 % de NaCl lo cual se comprobó que el crecimiento
microbiano se afecta a mayores concentraciones debido al estado de crenacion que sufren las
células; con respecto al efecto que químico del pH se utilizaron concentraciones de iones
hidronio de 3, 5, 7, 9, 11, y se observó que el ph optimo para el crecimiento microbiano esta un
medio neutro; y al someter los microorganismo a agentes desinfectantes como lejía, cresol y
pinesol, y agentes antisépticos como alcohol, agua oxigenada, merthiolate y jabón protex, de
todo los nombrados los últimos de cada uno tuvieron los mejores muestra de antimicrobiana al
inhibir el crecimiento microbiano a su alrededor.
ABSRACT
In this lab practice, I clarified and observed some physical and chemical factors that affect the
structure and micro-organic growth, and how these inhibit its proliferation, which in this case
was with the bacterium Escherichia coli. Being physical agents such as temperature and osmotic
pressure, and in chemical agents we saw the concentration of pH and action of disinfectants and
antiseptics. And of course sowings were used by diffusion methods making serial dilutions, in
the fluted method and by inoculum culture in liquid medium. In the effects found as in the
temperature, the thermal death of the microorganisms treated at 65 ° C during different time
intervals resulted in a decrease of organisms resistant to heat treatment over time; the osmotic
pressure, concentrations of 5, 10, 20 and 40% of NaCl were used, which showed that the
microbial growth is affected at higher concentrations due to the state of growth that the cells
suffer; with respect to the chemical effect of the pH hydronium ions concentrations of 3, 5, 7, 9,
11 were used, and it was observed that the optimal ph for microbial growth is a neutral medium;
and by subjecting the microorganism to disinfecting agents such as bleach, cresol and pinesol,
and antiseptic agents such as alcohol, hydrogen peroxide, merthiolate and protex soap, all
named last of each had the best antimicrobial sample by inhibiting microbial growth. your
surroundings.
INTRODUCCION:
Los microorganismos están condicionadas por su ambiente. Modificando este factor, el
microorganismo bien se adapta a las nuevas condiciones o en todo caso muere.
EFECTO DE LA TEMPERATURA
Las bacterias son capaces de una capacidad de sobrevivencia amplia con límites de temperatura
variable, su rango de crecer y ejercer sus actividades esta entre los 0 y 90°.
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Las bacterias pueden vivir en medios tanto hipotónicos como hipertónicos, debido a la
protección de una pared celular rígida y a la membrana citoplásmica semipermeable.
Si un organismo está inmerso en una solución que tenga alta presión osmótica, el agua saldrá de
la célula hasta que establezca un equilibrio entre el interior y exterior celular, lo que ocasionara
que la membrana citoplasmática se contraiga hacia el centro y la célula entre en proceso de
crenación.
Lo contrario ocurre cuando una célula está en un medio con baja presión osmótica, el agua
ingresara a la célula hasta establecer equilibrio en el exterior celular, y si la diferencia de
presión es grande la membrana tendrá a explotar.
A) En medios hipotónicos (con una aw>aw del citoplasma) es la pared celular la que ejerce todo
el papel: su rigidez se opone a la entrada de agua.
EFECTO DEL pH
Respecto del margen normal de pH a los que crecen las bacterias, éstas se pueden clasificar en:
La mayor parte de las bacterias son neutrófilas. Muchas bacterias neutrófilas modifican el pH
del medio, y resisten entornos relativamente ácidos o alcalinos. Por ejemplo, algunas bacterias
fermentativas excretan ácidos, mientras otras alcalinizan el medio.
Biocida: Agentes químicos nocivos que causan lesiones irreversibles y matan a los
microorganismos.
Biostáticos: Agentes químicos nocivos que causan lesiones reversibles y
determinan la inhibición de la actividad, crecimiento y proliferación de los
microorganismos, sin causar la muerte de los mismos. Con base en el tipo de
aplicación por la que se usan los diferentes antimicrobianos, estos se pueden
clasificar de la siguiente manera:
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El efecto antimicrobiano que se evaluó con los diferentes agentes químicos en este práctica,
se llevó a cabo con la utilización de las cepas Eshcerichia Coli y Staphylococcus aureus.
MATERIALES Y METODOS
Efecto de la temperatura
Tabla 1: UFC/ml
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Dt: tiempo en minutos para reducir el 90%el número de microorganismos de una población a
una temperatura dado.
Figura 4: Estriado
Efecto de los diferentes pH en los microorganismos
+ = poco crecimiento
++ = regular crecimiento
RESULTADOS
Figura 1.a: Placa con agar nutritivo sembrada con E. coli e incubada a 28°C por 48 horas. El
microorganismo fue previamente expuesto a 65°C durante 60 minutos
30 8.6 × 109
65°C
60 4.6 × 1010
100 7.3 × 1010
Donde:
Dt = 30/log(3.88/0.86)
Dt =45.8 min
5
(10 ^ 10)
UFC/m L
0
0 20 40 60 80 100 120
Tiem po (min)
Figura 2.a: Placa con agar nutritivo y concentración de NaCl al 5%. Se observó un mayor
crecimiento del E. coli, y la formación de colonias.
Figura 2.b: Placa con agar nutritivo y concentración de NaCl al 10%. Se observó un buen
crecimiento del E. coli, y la formación de colonias. El crecimiento microbiano fue menor que en
la placa anterior.
Figura 2.c: Placa con agar nutritivo y concentración de NaCl al 20%. El crecimiento
microbiano se vió inhibido a esta concentración de NaCl.
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Figura 2.d: Placa con agar nutritivo y concentración de NaCl al 40%. Al igual que el caso
anterior, el crecimiento microbiano se vió inhibido a esta concentración de NaCl.
Figura 3.a: De izquierda a derecha, resultados de la inoculación de E. coli en los tubos con
caldo nutritivo a pH 3, 5, 7, 9 y 11.
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Tabla de resultados:
Escala:
Agua oxigenada (esquina superior izquierda), merthiolate (esquina superior derecha), alcohol al
70% (esquina inferior izquierda) y jabón Protex (esquina inferior derecha). Se observó un mayor
tamaño en el anillo de inhibición (1mm) para el merthiolate. El resto de antisépticos presentaron
anillos de menor tamaño.
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DISCUSION DE RESULTADOS
EFECTO DE LA TEMPERATURA
Cuando el medio es muy hipertónico, estos mecanismos ya son incapaces de evitar la salida de
agua desde el citoplasma, lo cual lleva a la crenacion. Es decir que hay una salida o
deshidratación del citoplasma, lo que conlleva la detención del crecimiento.
Sin embargo, las bacterias pueden crecer a osmolaridades superiores a la máxima teórica, si en
el medio existen determinados compuestos llamados osmoprotectores. La bacteria bombea esos
compuestos a su interior, usándolos como solutos compatibles.
EFECTO EL PH
Existen ciertas sustancias químicas que influyen negativamente sobre las bacterias, pudiendo
ejercer dos tipos de efectos diferentes. Bacteriostáticos, cuando impiden el crecimiento
bacteriano y bactericidas, cuando destruyen (matan) las bacterias.
Ahora bien, para una misma sustancia química, la línea de demarcación entre un efecto
microbiostático y otro microbicida depende muchas veces de la concentración de dicha
sustancia y del tiempo durante el que actúa.
CONCLUSIONES
-En esta práctica se observaron errores en los resultados ya que mientras más tiempo estaba el
inóculo en baño María se debió de observar más muerte bacteriana debido al efecto de
temperatura con el medio por coagulación de las proteínas.
-Tomamos por conclusión lo siguiente, no se trabajó de forma adecuada, pues quizás el error se
dio en un mal tomo de muestra o una mala medición de tiempo pues estos 2 factores son
importantes para la práctica en el laboratorio.
Referencias Bibliográficas
ANEXO
Cuestionario:
Cuando no hay mucho sustrato disponible para un microrganismo, este genera estructuras para
mantener su perpetuidad, llamadas esporas, las que pueden permanecer en un estado de
senescencia por mucho tiempo y cuando el sustrato sea disponible nuevamente los
microorganismos surgirán de nuevo. Estas esporas son resistentes a los tratamientos térmicos a
temperaturas muy altas y también a temperaturas muy bajas.
Algunas de las bacterias que deterioran los alimentos sí pueden multiplicarse en refrigeración.
Es la razón por la cual los alimentos refrigerados finalmente, después de un periodo, se
deterioran y tienen que ser desechados. La mayoría de los microorganismos patógenos no puede
multiplicarse al estar a temperaturas de 4 °C o menores. Muchas de las bacterias que sólo
causan deterioro en los alimentos también detienen su crecimiento a dicha temperatura.
La forma de detener por completo el deterioro de los alimentos por efecto de los
microorganismos, es sometiéndolos a congelación, específicamente a -18 °C. La congelación no
destruye a los microorganismos, sólo inhibe su crecimiento.
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Fuente: http://www.enfoquealimentos.com/blog/2017/11/02/la-temperatura-y-su-relacion-con-
el-crecimiento-de-los-microorganismos/
Es de rápida acción, incluso desde los 15 segundos. Aunque no tienen efecto químico de
persistencia sus efectos biológicos de daño microbiano permanecen por varias horas. Respecto a
la concentración, la más utilizada es al de 70% ya que aparte de producir menos sequedad e
irritación de la piel y es de menor costo.
tóxicos para los tejidos vivos. Son sustancias de uso estrictamente externo y deben responder a
un doble criterio de eficacia e inocuidad. Su objetivo debe ser eliminar o destruir los
microorganismos presentes en la piel sin alterar las estructuras.
9. Defina:
Desinfectante
Son aquellos productos o elementos naturales que sirven para desinfectar, limpiar, evitar la
presencia de bacterias, virus y otro tipo de microorganismos peligrosos para la salud.
Dependiendo del tipo de producto o elemento del que se hable, podemos estar haciendo
referencia a mayor o menor agresividad, mayor o menor peligrosidad para el ser humano, mayor
o menor poder de efectividad, duración, etc.
Antiséptico
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Son sustancias antimicrobianas que se aplican a un tejido vivo o sobre la piel para reducir la
posibilidad de infección, sepsis o putrefacción.
Bactericida
Es aquel que produce la muerte a una bacteria y está provocado por alguna sustancia
bactericida. Los organismos secretan sustancias bactericidas como medios defensivos contra las
bacterias.
Bacteriostático
Agente que inhibe el desarrollo de las bacterias y se basa en los mecanismos de defensa del
huésped para la erradicación final de la infección.
Plasmólisis
En células vegetales este fenómeno puede provocar que la membrana plasmática se separe de la
pared vegetal, siendo esta separación irreversible. A este tipo de plasmólisis se le llama
plasmólisis permanente, y se produce cuando la célula no puede volver al estado normal.
También existe la plasmólisis incipiente que es el caso en el que la célula vegetal pierde agua,
pero puede volver al estado natural o vegetal.