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Crecimiento microbiano

Crecimiento Microbiano:
Cambio en el nmero de clulas
por una unidad de tiempo
determinada.

Tiempo de generacin
(duplicacin):

Tiempo requerido para que una


clula se divida en dos.
El tiempo puede ser minutos,
hora o das.

30 aos

30 minutos

Clulas sincrnicas
Mtodo HelmstetterCummings

Nmero de bacterias

Alteracin biolgica
Patgenos
Toxinas

0 1 2 3 4 5 6
Tiempo (horas)

Nmero de bacterias

Favorecido por:
Temperatura
Composicin
Actividad de Agua
Carga microbiana

0 1 2 3 4 5 6
Tiempo (horas)

FASES DE CRECIMIENTO
MICROBIANO:
El crecimiento de un cultivo microbiano se divide en tres
etapas claramente diferenciables:

Fase exponencial:
Etapa en la que las clulas estn dividindose, por lo que
crecen de manera exponencial. La velocidad vara de una
especie a otra y depende de parmetros ambientales como
la temperatura.
Fase estacionaria:
Etapa en la que los nutrientes se agotan y el crecimiento
exponencial cesa.Hay actividad metablica de sntesis y
energa.
Fase de muerte:
Las clulas ya no crecen ni realizan actividades
metablicas. Hay lisis celular.

2
N de microorganismos viables

Fase de latencia:
Etapa en la cual un inculo proveniente de otro medio de
cultivo al ser puesto en un medio fresco no crece.

Tiempo

MEDIDAD DEL CRECIMIENTO

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Nutrientes

Temperatura

pH

Tiempo

Disponibilidad
de agua

Oxgeno

Temperatura

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Temperatura
Cada microorganismo es capaz de crecer en un rango muy determinado de
temperatura. Este rango es conocido como temperaturas cardinales y establece las
temperaturas mnimas, mximas y ptimas de crecimiento en funcin de la
velocidad de crecimiento y la temperatura de incubacin.

La temperatura mnima es a la que el microorganismo ya no se detecta crecimiento


a valores ms bajos de temperatura. La actividad metablica es mnima, las
membranas se hacen ms rgidas y los procesos de transporte son limitados o
inexistentes.
La temperatura optima es cuando el microorganismo registra la mxima velocidad
de crecimiento y las reacciones enzimticas ocurren a la mxima velocidad posible.
La temperatura mxima es en la que el crecimiento no existe y se hace insostenible
todo proceso bioqumico por la desnaturalizacin de protenas y enzimas.

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Acidez y alcalinidad
Al igual que con la T cada microorganismo tiene un rango de pH dentro del que se
puede desarrollar. A diferencia de la temperatura, el pH ptimo de desarrollo suele
ser un valor muy bien definido para cada microorganismo.
Acidfilos. Son los microorganismos que viven a valores de pH por debajo de 2.
En general los hongos tienden a tolerar valores de pH ms cidos que las
eubacterias.
Alcalfilos. Son aquellos microorganismos que viven a valores de pH superiores a
10.
Neutrfilos. Son aquellos microorganismos que viven a valores de pH cercano a la
neutralidad (pH 6.0 a 8.0).
INDEPENDIENTE DEL Ph DEL AMBIENTE, EL INTERIOR DE LA CLULA
DEBE ESTAR CERCANO A UN VALOR 7.

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Actividad del agua (aw).
Para el crecimiento microbiano es fundamental contar con
agua para realizar todas las reacciones bioqumicas y
enzimticas.
El agua difunde siempre desde una zona de alta concentracin
(baja concentracin de solutos) a una zona de baja
concentracin de agua (alta concentracin de solutos).

La actividad de agua depende de la disponibilidad de sta en


el medio ambiente y de la concentracin de solutos presentes
en ella. Por lo que se relaciona bien con las concentraciones de
NaCl.

Actividad de agua
La disponibilidad de agua que se encuentra libre en el mismo y
es necesaria para que las bacterias se multipliquen. Este agua
"no comprometido" con ningn nutriente recibe el nombre de
actividad de agua (Aw). y se indica con un nmero que va desde
0 hasta 1.
Alimento

Aw

Carne
Leche
Harina
Galletas

0.98
0.99
0.70
0.60

Cuanto ms cercano a cero es ese valor, menos disponible est


el agua para las bacterias.

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Actividad del agua (aw).
HALFILOS. Microorganismos que requieren del in sodio
para desarrollarse.
Halfilos discretos (1-6 %)
Halfilos moderados (6-15 %)
Halfilos extremos (15-30 %)

OSMFILOS. Microorganismos que viven en presencia de


altos valores de azcares
XERFILOS. Microorganismos que viven en presencia de
alta sequedad o ausencia de agua.

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Nutrientes.
Los microorganismos que son patgenos son considerados
HETERTROFOS. Esto significa que al igual que un ser
humano, ellos requieren de:
Carbono
Nitrgeno
Azufre
Microelementos
Todos estos elementos estn disponibles para ellos en nuestros
alimentos al igual que para nosotros.

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Nitrgeno
Se requiere en la forma amina y se obtiene de protenas.

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Carbono
Se obtiene de los carbohidratos y protenas.

Factores ambientales y crecimiento


microbiano.
Oxgeno.
AEROBIOS. Microorganismos que viven en ambientes con
tensiones normales de oxgeno (21 % de O2).
MICROARFILOS. Microorganismos que viven en presencia
de niveles de oxgeno que estn bajo la concentracin presente
en el aire (<21 %).
ANAEROBIOS FACULTATIVOS. Microorganismos que
pueden vivir en ausencia de oxgeno o en su presencia.
ANAEROBIOS. Microorganismos incapaces de crecer en
presencia de O2.

Esterilizacin y Desinfeccin
o Dentro del rea de la salud pblica, controlar el crecimiento
bacteriano es fundamental para prevenir la transmisin de
enfermedades infecciosas e intoxicaciones alimentarias.
o El crecimiento microbiano puede ser controlado aplicando
procedimientos que limiten dicho crecimiento (inhibicin), o que
maten los microorganismos de un ambiente particular.
o Estos procedimientos pueden ser fsicos o qumicos.
o En trminos generales, ellos comprenden la esterilizacin, la
desinfeccin y el uso de antimicrobianos.

Desinfeccin: tiene por objeto la destruccin


de los microorganismos con el fin de disminuir
su nmero a niveles mnimos. Esto se logra
mediante el uso de agentes qumicos
denominados desinfectantes.
Asepsia:
trmino
aplicado
a
los
procedimientos utilizados para prevenir que
los microorganismos progresen en un
ambiente
determinado,
por
ejemplo:
quirfanos, lneas de procesamineto de
alimentos, lneas
de conservacin de
alimentos.
Antispticos: agentes desinfectantes que
pueden aplicarse sobre las superficies
corporales con el fin de reducir la microbiota
normal y los contaminantes microbianos de
carcter patgeno. Tienen un menor grado de
toxicidad que los desinfectantes y en general,
menor grado de actividad.

Esterilizacin: es un proceso (fsico o qumico), que destruye toda


forma de vida microbiana, incluidas las esporas.

Mtodos
FISICOS

Tipos

Procedimiento

Condiciones de uso

Horno a presin que consiste en una cmara en la que el aire puede


ser sustituido por vapor de agua a presin. til para esterilizar medios
de cultivo o soluciones.

121C a 1 atmsfera de presin


por 15 a 20 min.

Tindalizacin

Se somete el producto que se desea esterilizar, a calentamientos


intermitentes entre 56 y 100C. En los intervalos se deja a 37C o a
temperatura ambiente.

56 a 100C por 30 min. Intervalo


a 37C. Repetir el ciclo.

Flameado

Exposicin de un objeto pequeo al efecto de una llama hasta


incandescencia (ej. asa de cultivo a la llama del mechero).

Alta temperatura

Autoclave

Calor hmedo

Calor seco

Incineracin

Horno Pasteur

Radiaciones

Aplicacin de alta temperatura a aquellos productos en los que no


importa se destruccin (ej. desechos como apsitos, basura, etc.).
Horno en el que se aplica aire caliente, que, al tener menor eficacia
que el calor directo, se aplica a altas temperaturas por largo tiempo.
Eficaz para esterilizar material de vidrio y metales (ej. instrumental
odontolgico).

Luz ultra violeta

til en la preparacin de vacunas, esterilizacin de reas hospitalarias


crticas (quirfanos, salas de prematuros, etc.).

Ionizantes

Se usan principalmente en procesos industriales para esterilizar


dispositivos quirrgicos (guantes, jeringas).

Filtracin

til para esterilizar lquidos. Los microorganismos quedan retenidos en


el filtro.

QUIMICOS

Gas inflamable eficaz en la esterilizacin de sustancias termolbiles:


prtesis, catteres, etc. Despus de aplicar se debe airear el material
debido al carcter mutagnico del gas.

Oxido de etileno

Formaldehdo

Glutaraldehdo

En forma gaseosa y en cmara cerrada se usa en la esterilizacin


hospitalaria y en la industria farmacetica. Tambin se usa como
desinfectante ambiental en salas altamente contaminadas, que una vez
tratadas deben airearse.
Se emplea sobre todo en oftalmologa y otorrinolaringologa. En la
esterilizacin de instrumentos pticos y los usados en terapia
respiratoria.

Alta temperatura

180C por 2 h.

Se expone el material a 5-10% de


xido de etileno en anhdrido
carbnico a 50-60C con humedad
controlada por 4-6 h.

Se usa disuelto en agua al 40%.

Se aplica sumergiendo el material


en una solucin al 2%.

Esterilizacin: es un proceso (fsico o qumico), que destruye toda


forma de vida microbiana, incluidas las esporas.

Antimicrobianos:
sustancias
qumicas
producidas
por
microorganismos (antibiticos) o sintetizadas qumicamente
(agentes quimioterapeticos), los cuales a bajas concentraciones
son capaces de inhibir, e incluso de destruir, microorganismos sin
producir efectos txicos en el husped. En relacin al
microorganismo que inactivan se clasifican como antibacterianos,
antivirales, antifngicos y antiprotozoarios.
Los antimicrobianos ejercen su accin en forma especfica sobre
alguna estructura o funcin microbiana. Poseen una elevada
potencia biolgica, es decir, que inhiben o destruyen las bacterias
a muy baja concentracin.
Presentan una toxicidad selectiva, es decir, una mnima toxicidad
para las clulas del organismo husped. Esto es una diferencia
fundamental con los antispticos y desinfectantes, que tambin
poseen alta eficacia antimicrobiana a bajas concentraciones, pero
que son muy txicos para las clulas humanas.