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PRÁCTICA N° 01
BIOSEGURIDAD
DEFINICIÓN:
La bioseguridad es el conjunto de medidas de sentido común a ser adoptadas, con el
fin de reducir o eliminar los riesgos para el personal, la comunidad y el medio
ambiente, que pueden ser producidos por agentes infecciosos, físicos, químicos y
mecánicos.
COMPETENCIAS
En caso de que ocurra un accidente en el ámbito de trabajo, lo ideal es contar con una
guía detallada de actuación, un manual de procedimientos.
Pasos a seguir:
5. Con respecto a la herida, dejar sangrar y lavar con abundante agua y jabón.
1. Las áreas en las que exista riesgo biológico deben estar perfectamente
señalizadas y con avisos de advertencia para el ingreso exclusivo al personal
autorizado.
3. Al iniciar y finalizar las prácticas, el estudiante se lavará las manos con agua y
jabón.
14. Mantener el laboratorio limpio y retirar de este cualquier material que no tenga
relación con el trabajo.
Existen cuatro niveles establecidos según las técnicas utilizadas, los equipos de
seguridad y la estructura del laboratorio.
Nivel 3. Este nivel es adecuado para trabajar con microorganismos de alto riesgo. El
uso de animales de laboratorio siempre implica uso de guantes. Los animales se
desinfectarán antes de desecharlos. El laboratorio debe estar aislado de la circulación
general, existiendo doble puerta de entrada, con una habitación para cambiarse y con
ducha. Debe tener, además, un sistema especial de extracción de aire. Los
microorganismos que deben ser trabajados en el nivel de bioseguridad 3 son
altamente infecciosos, pueden causar graves infecciones sistémicas en seres
humanos inmunocompetentes e incluyen a Mycobacterium tuberculosis, Coxiella
burnetii y las especies de Brucella.
Cuestionario
LAVADO DE MANOS
PRÁCTICA N° 2
INTRODUCCIÓN
COMPETENCIAS
Material de Vidrio
Embudo de vidrio
Es un instrumento empleado para canalizar
líquidos y materiales sólidos granulares en
recipientes con bocas estrechas. Es utilizado en
el filtrado de sustancias.
Vaso de Precipitación
Recipiente cilíndrico de vidrio fino que se utiliza
muy comúnmente en el laboratorio, sobre todo,
para preparar o calentar sustancias y traspasar
líquidos.
Probetas graduadas
Son recipientes cilíndricos, graduados, de vidrio
grueso, de boca ancha, abierta y con pico, y las
hay de distintos volúmenes. Es un instrumento
volumétrico, que permite medir volúmenes
considerables con un ligero grado de inexactitud.
También sirve para contener líquidos.
Matraz de Erlenmeyer
Son recipientes de vidrio de forma cónica, base
ancha y cuello angosto. Tienen muchas
aplicaciones, por ej. En volumetría para hacer
titulaciones, facilitando una mejor agitación del
líquido y evitando pérdidas por salpicaduras.
Para preparar soluciones y medios de cultivo.
Tubos de ensayo
Son tubos de vidrio de diferentes anchos y
longitudes. Tienen forma cilíndrica y es
utilizado para contener muestras líquidas,
realizar reacciones bioquímicas y calentar
sustancias.
Mechero de Alcohol
Los mecheros de alcohol son de uso corriente
en el laboratorio; se emplean para
temperaturas no muy elevadas. Sirve para
calentar sustancias utilizando como
combustible alcohol o ron. Se utiliza para
mantener un ambiente de esterilidad y evitar la
contaminación de los medios de cultivo.
Placas de Petri
Es un recipiente circular, de cristal, con una
cubierta de la misma forma que pero de
mayor diámetro, para un cierre no hermético.
Son de diversos tamaños y se utilizan para
colocar medios de cultivo sólido.
Pipetas graduadas
Son tubos cilíndricos, estrechos con un
extremo terminal cónico graduadas en ml. Se
emplean para medir cantidades variables de
líquido. Pueden ser terminales, cuando la
medición se realiza hasta la punta o no
Frascos gotero
Son frascos de vidrio, transparentes o de color
ámbar. Permite contener sustancias que se
necesitan agregar en pequeñas cantidades.
Matraz aforado
Son recipientes de cuello estrecho y cuerpo
ancho, en el cuello presenta marcada una
señal ó “línea de aforo”, en él se indica el
volumen capaz de contener. Se utiliza para
preparar soluciones y diluir líquidos.
Material de porcelana
Mortero y pilón
Son utensilios hechos de diferentes materiales
como: porcelana, vidrio o ágata, los morteros de
vidrio y de porcelana se utilizan para triturar
materiales de poca dureza y los de ágata para
materiales que tienen mayor dureza.
Malla de asbesto
Material de Metal
Gradillas
Trípode
Se utiliza cuando no se tiene el soporte universal
para sostener objetos con firmeza. Su principal uso
es como herramienta de sostén a fin de evitar
el movimiento. Sobre la plataforma del trípode se
coloca una malla metálica para que la llama no dé
directamente sobre el vidrio y se difunda mejor
el calor.
Mechero Bunsen
Utilizado para esterilizar, calentar muestras y
sustancias químicas. Constituido por un tubo
vertical que va enroscado a un pie metálico con
ingreso para el flujo de gas, el cual se regula a
través de una llave. En la parte inferior del tubo
vertical existen orificios y un anillo metálico móvil
o collarín también horadado, los cuales permiten
regular el flujo de aire que aporta el oxígeno
necesario para llevar a cabo la combustión
.
Espátulas
Es una lámina plana angosta que se encuentra
adherida a un mango de madera o metal. Se utiliza
para tomar pequeñas cantidades de sustancias o
compuestos químicos que van a ser pesados.
Asas Bacteriológicas
Están constituidas por una base que puede estar hecha de platino,
acero, aluminio y un filamento que puede ser de nicromo, tungsteno o
platino que termina o en aro o en punta, este instrumento de laboratorio
nos ayuda transportar o trasplantar microorganismos de un medio a
otro, así como para la realización de frotis.
Asas Micológicas
Está formada de una base que puede estar hecha de platino, acero,
aluminio y un filamento más grueso que el asa bacteriológica termina en
un ángulo de 45º o forma de “L”, este instrumento de laboratorio nos
ayuda transportar o trasplantar hongos de un medio a otro medio para
su adecuado desarrollo, así como para la realización de frotis.
Equipos de Laboratorio
Microscopio
Es un equipo constituido básicamente por un conjunto de lentes
superpuestos que nos permite visualizar directamente, por el aumento
de la imagen, cuerpos no visibles al ojo humano.
Balanza analítica
Son instrumentos de precisión, utilizados para pesar los medios de
cultivos y reactivos que se preparan en un laboratorio de Microbiología.
Baño María
Equipo de laboratorio de Clínico, fabricado en acero inoxidable, utilizado
para conferir temperatura uniforme a una sustancia líquida o sólida o
para calentarla lentamente, sumergiendo el recipiente que la contiene
en otro mayor con agua llevar con el fin de mantener una muestra a una
temperatura específica. Por regla general se utilizarán 37°C para
reacciones enzimáticas.
Incubadoras
Equipos indispensables en la sección de bacteriología, por lo general
son de acero inoxidable. Se utilizan a una temperatura de 37ºC para
realizar cultivos de bacterias, hongos a una temperatura similar a la del
cuerpo humano.
Horno esterilizador
También llamado “Horno Pasteur” o “estufa Poupinel”; es un equipo
utilizado para esterilización a calor seco (por corrientes de aire caliente).
El vapor saturado es el método de esterilización por excelencia y la
opción de referencia para esterilizar material inerte que tolera las altas
temperaturas.
Tabla de relación Temperatura-Tiempo en el Horno Pasteur
Autoclave
Equipo fijo de acero inoxidable, que se emplea para la esterilización de
material de laboratorio empleando calor húmedo. Es un medio en el que
se emplea vapor saturado para producir hidratación, coagulación e
Contador de colonias
Equipo utilizado para el recuento de colonias bacterianas y mohos en
placas de cultivo con agar. Se utilizan para estimar la densidad de
microorganismos en un cultivo líquido. Una dilución adecuada, o varias
diluciones en serie dentro del rango estimado apropiado, los cuales han
sido propagados mediante técnicas de siembra estériles a una placa
con medo de cultivo.
Conservadoras y congeladoras
Equipos de refrigeración, cuya utilidad es la mantención o conservación
de los medios de cultivos a temperaturas para de entre 4 – 8 °C. La
temperatura ideal de congelación para conservación es a -20°c.
Cabinas de bioseguridad
Equipo para manipular muestras biológicas bajo una atmósfera
microbiológicamente controlada. Gabinete de seguridad biológica con
ventana frontal deslizable y alarma que indica el nivel de apertura de la
ventana. Flujo de aire vertical y recirculación de aire filtrado. De acero
inoxidable. Con filtros absolutos de eficiencia del 99.99% (HEPA) y
retención de partículas de 0.3 micras. Con llave para toma de oxígeno.
Se utiliza para la manipulación de muestras biológicamente infecciosas,
evitando la contaminación de la misma así como de operador.
pH metro
Es un sensor utilizado en el método electroquímico para medir el pH de
una disolución. La determinación de pH consiste en medir el potencial
que se desarrolla a través de una fina membrana de vidrio que separa
dos soluciones con diferente concentración de protones.
Vortex
El agitador vórtex para tubos está diseñado para mezclar de modo
intenso células de bacterias y hongos, permitiendo la homogenización
de suspensiones celulares.
Centrífugas
Son equipos rotatorios, utilizados en los laboratorios clínicos y otros,
para la separación de los solutos y sus solventes mediante el
aprovechamiento de la fuerza centrífuga.
Microscopio compuesto
Cada uno de los equipos deberá contener en lugar visible las correctas
instrucciones de encendido y uso del equipo.
Cuestionario
1. ¿Cuantos tipos de cabinas de Bioseguridad existen y cuál es la aplicación de
cada una de ellas?
2. Defina: Limpieza, Desinfección, Esterilización, Descontaminación, Eliminación y
establezca la importancia de cada una de ellas.
3. Realice un esquema de la adecuada distribución de los ambientes un
laboratorio de Microbiología.
4. Indique qué equipos de microbiología automatizados y semiautomatizados
existen en la actualidad en el laboratorio de microbiología y en qué consiste su
funcionamiento.
5. Mencione otros equipos de uso en el laboratorio de Microbiología,
PRÁCTICA N° 3
INTRODUCCIÓN
A. Sistema Mecánico
Pie o base
Brazo o columna
Tubo óptico
Revólver
Platina
Tomillos macro y micrométrico
COMPETENCIAS
MATERIALES Y EQUIPOS
Material Biológico
Muestras de orina, leche, fermentos
Láminas montadas de tejidos animales, Bacterias, Parásitos.
Material de Laboratorio
Microscopio compuesto
Láminas portaobjetos y laminillas cubreojetos.
Aceite de cedro
Colorante Azul de metileno.
Equipos
Microscopio Compuesto.
PROCEDIMIENTOS
SISTEMA ÓPTICO: Comprende los lentes oculares, los lentes objetivos y los
dispositivos de iluminación.
• Oculares: El microscopio binocular, tiene dos lentes oculares; el aumento puede ser
de 6x, 10x, 15x y 20x; para determinar la magnificación de la imagen que se
observa a través del microscopio, multiplica la magnificación de los oculares por la
del objetivo en uso.
• Objetivos: Lentes principales del microscopio; son parafocales, pues al cambiar de
un objetivo a otro, la imagen queda casi en foco y sólo es necesario un leve ajuste;
en este caso, hay tres objetivos:
- Rastreo: cuatro magnificaciones o 4x
- Baja potencia: 10x
- Alta potencia: 40x
- Objetivo de inmersión: son aquellos que usan aceite de cedro entre la lente frontal y
el objeto a observar. Son los más poderosos y hacen que la imagen de los objetos
se vea 100 veces más grandes
El microscopio es un equipo óptico de alta precisión y como tal debe ser tratado con
mucho cuidado tanto en el aspecto mecánico como óptico.
Las partes ópticas y las lentes deben limpiarse cuidadosamente con un trapo de
lino fino o piel de gamuza que no desprenda pelusa. Nunca debe friccionarse el
papel o gamuza sobre la lente.
El objetivo de inmersión debe limpiarse después de su uso con papel especial para
limpieza de lentes (Lens Cleaning llssue 105,10 x 15 cm) humedecido con tolueno
o bencina para eliminar el aceite de inmersión. Por ningún motivo la lente de
inmersión quedará sin limpiarse, caso contrario el aceite se secaría y ocasionaría
la inutilización del objetivo.
Utilizar alcohol etílico 95° para la limpieza de lentes de los oculares, filtro y todos los
elementos y lentes de condensador.
Para la limpieza diaria del microscopio se requiere disponer del siguiente material: -
Trapo de lino fino. - Papel lente o bien papel absorbente tipo pañuelo descartable.
También una piel de gamuza o trapo del tipo que no desprenda pelusa. - Tolueno o
bencina para limpiar los objetivos. - Pequeña pera de goma. - Pincel fino. - Una
bolsa conteniendo no menos de 0,5 kg. de Silicagel.
Cuestionario