PRCTICA # 5 CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

OBJETIVOS:
Conocer y aplicar la tcnica de cromatografa en capa fina, c.c.f., s s caractersticas y los factores ! e en ella inter"ienen. Calc lar "alores de #f de "arias s stancias. $ed cir, a tra"s del #f la relaci%n ! e e&iste entre la polaridad de las s stancias ! e se anali'an y la de los el yentes tili'ados. (plicar la tcnica de c.c.f. como criterio de p re'a e identificaci%n de las s stancias.

I)T#O$*CCI+):
El ,ot-nico r so .i/0ail Ts1ett esta,leci% las "enta2as de la cromatografa y f e el primero en tili'ar este trmino. Es recordado como el 3adre de la Cromatografa. Ismailo" y Scrai,er tili'aron l-minas de "idrio para colocar capas m y delgadas de al4mina y l ego aplicaron e&tractos "egetales, dando as la primera forma de Cromatografa de Capa 5ina. Egon Sta0l 6789:; dio el nom,re de Cromatografa de Capa 5ina. Estandari'% los procedimientos, e! ipos y adsor,entes dando n a ge a la tcnica simple, a ,a2o costo y eficiente. <a cromatografa es na tcnica de separaci%n e&traordinariamente "ers-til ! e presenta distintas "ariantes. En toda separaci%n cromatogr-fica 0ay dos fases 6s%lida, l! ida o gas; na m%"il y otra estacionaria, ! e se m e"en na con respecto de la otra manteniendo n contacto ntimo. <a m estra se introd ce en la fase m%"il y los componentes de la m estra se distri, yen entre la fase estacionaria y la m%"il. <os componentes de la me'cla a separar in"ierten n tiempo diferente en recorrer cada na de las fases, con lo ! e se prod ce la separaci%n. Si n componente est- la mayor parte del tiempo en la fase m%"il el prod cto se m e"e r-pidamente, mientras ! e si se enc entra la mayor parte en la fase estacionaria, el prod cto ! eda retenido y s salida es m c0o m-s lenta. TI3O <=>*I$O ? S+<I$O I)TE#C(.BIO I+)ICO <=>*I$O @ <=>*I$O A(S ? <=>*I$O 5(SE EST(CIO)(#I( S%lido inerte como gel de slice o al4mina #esina cam,iadora <! ido adsor,ido en n soporte s%lido 3elc la de l! ido adsor,ida so,re n soporte s%lido 5(SE .+VI< disol"entes $isol ciones ac osas <! ido gas

Cromatografa de Capa Fina (TLC CCF)

<a cromatografa de capa fina se conoce normalmente por s s siglas en ingls 6T<C, t0in layer c0romatograp0y;. Es na tcnica m y tili'ada para la identificaci%n y determinaci%n de p re'a de comp estos Tam,in p ede tili'arse como tcnica de separaci%n 6cromatografa de capa fina T<C preparati"a; a m y pe! eBa escala. En esta tcnica la fase estacionaria es na capa fina de gel de slice otro soporte con propiedades adsor,entes 6en n estro caso de C9 mm de espesor; disp esta so,re n soporte de "idrio o al minio ! e denominaremos placa. El el yente o fase m%"il ser- la me'cla de disol"entes adec ada. <a cromatografa de capa fina es n procedimiento ! e se tili'a para separar molc las relati"amente pe! eBas. <a separaci%n de me'clas de molc las mediante la cromatografa de capa fina se ,asa en el principio del reparto entre dos fases. (l ig al ! e otras cromatografas, consiste de na fase estacionaria y na fase m%"il y el principio es el mismo: la s stancia de inters se ad0erir- a la fase estacionaria o se mo"er- con la fase m%"il, "ia2ando na distancia ! e es in"ersamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria. <a fase estacionaria p ede ser "ariada. 3 ede ser de papel, de cel losa o de n gel de silicato 6"idrio molido ,ien fino; nido a na s perficie s%lida 6 na placa de "idrio, al minio, pl-stico o papel;. Esta s perficie s%lida p ede ser rgida o fle&i,le. El tipo de fase estacionaria ! e se tilice en n e&perimento depender- del tipo de molc las ! e se ! ieran separar. Incl so "ienen alg nas placas con indicadores fl orescentes. <a fase estacionaria consiste de n sol"ente ! e p ede ser ag a, n sol"ente org-nico o na me'cla de am,os. El procedimiento es sencillo: Se colocan las m estras a n centmetro del ,orde en no de los e&tremos de la placa, se de2a secar, se coloca la placa en n en"ase 6tan! e de desarrollo; ! e ya contiene na pe! eBa cantidad del sol"ente, se tapa y se de2a correr por n rato. El sol"ente s ,ir- por capilaridad e ir- arrastrando las molc las, las c ales se mo"er-n seg4n la afinidad ! e m estren por la fase estacionaria. Si la me'cla de m estras ! e se est- anali'ando presenta color, se "er-n los distintos colores migrando a distintas "elocidades. Si son incoloras 0ay ! e someter la placa a alg4n tratamiento con na s stancia desarrolladora 6de"eloper; para poder determinar la presencia de s stancias so,re el silicato. El tipo de desarrollador depender- del tipo de molc las ! e se anali'an.

<a separaci%n de me'clas comple2as de prod ctos y el aislamiento y p rificaci%n de los componentes indi"id ales es de gran importancia en la ! mica org-nica. <a cromatografa constit ye na importante 0erramienta en este sentido, complementaria con las tcnicas cl-sicas: cristali'aci%n, destilaci%n, etc. En la act alidad e&iste na gran "ariedad de tcnicas cromatogr-ficas a disposici%n del ! mico, desde alg nas m y simples: Cromatografa de capa fina 6T<C;, cromatografa de col mna a tcnicas m c0o m-s sofisticadas ! e re! ieren e! ipos de ele"ado costo: Cromatografa de gases 6AC;, cromatografa de <! idos 6<C; D3<C, etc. )o o,stante, el f ndamento de la mayor parte de las tcnicas cromatogr-ficas es similar, y s conocimiento facilita la comprensi%n de todas ellas. 3roceso de (dsorci%n: <a m estra aplicada en la capa es adsor,ida en la s perficie del material por la acci%n de f er'as electrost-ticas 6f er'as de Van der Eaals, p entes de Didr%geno, efectos ind cti"os, etc.;. < ego, c ando la capa es e&p esta a n fl 2o por acci%n capilar, se inicia na competencia de enlaces entre los sitios acti"os del adsor,ente y la s stancia con el sol"ente. <os adsor,entes m-s tili'ados en la Cromatografa de Capa 5ina son: Slica gel 6se tili'a en el FGH de las separaciones; +&ido de (l minio % (l4mina 6-cida, ne tra % ,-sica; Tierra Silcea % Iieselg 0r Cel losa 6)ati"a o micro?cristalina; 3oliamidas Estos adsor,entes de,er tener las sig ientes caractersticas: TamaBo de 3artc la Volumen de Poro Dimetro de Poro rea Superficial Domogeneidad 3 re'a

1 !plicacin de la mue"tra
<a introd cci%n de la m estra se reali'a tili'ando n t ,o capilar. 3ara ello se 0a de disol"er na pe! eBa cantidad de la m estra a anali'ar en n disol"ente "ol-til. ( contin aci%n, el e&tremo del t ,o capilar se introd ce en la disol ci%n. <a disol ci%n ascender- por el t ,o por capilaridad. En no de los lados de la placa, apro&imadamente a J mm del ,orde, se 0a de tra'ar a l-pi' na lnea recta, lnea #a"e, y so,re ella nos p ntos de referencia. So,re dic0os p ntos se pinc$a con el t ,o capilar, de modo ! e na pe! eBa cantidad de la disol ci%n pase a la placa. $e esta manera, la m estra ! eda adsor,ida por el soporte s%lido en la placa.

% &eali'acin del cromatograma( Correr una placa

El cromatograma se reali'a en na c ,eta ! e contiene el el yente elegido. El ni"el del el yente de,e de ser menor ! e la separaci%n entre el ,orde de la placa y la lnea ,ase el l gar donde se 0a efect ado el pinc$a'o. <a placa se introd ce en la c ,eta y se tapa. El el yente asciende por la placa por capilaridad, arrastrando a s paso a los componentes de la me'cla. )at ralmente los componentes de la me'cla son arrastrados con diferente "elocidad, de ac erdo con s distinta polaridad. C ando el frente del el yente llega casi al ,orde s perior de la placa, esta se e&trae de la c ,eta. Se de,e de tra'ar na n e"a lnea a l-pi' indicando el ni"el 0asta el ! e el 0a ascendido el el yente.

) &e*elado del cromatograma

*na "e' ! e el el yente so,re la placa se 0a secado se 0a de proceder a la "is ali'aci%n del cromatograma. En determinados casos, si los comp estos son coloreados esto p ede reali'arse de forma directa. Sin em,argo, para comp estos incoloros es necesario tili'ar diferentes tcnicas de re"elado. <as placas de cromatografa comerciales portan n agente fl orescente inorg-nico en la fase estacionaria. Ello permite "is ali'ar el cromatograma il minando la placa con na l-mpara de l ' ltra"ioleta *V. <os diferentes comp estos aparecen en la placa como manc$a" circ lares. <as distintas manc0as de,en de marcarse a l-pi' so,re la placa para s est dio posterior. $iferentes reacti"os org-nicos tam,in permiten el re"elado permanente de la placa, o,tenindose manc0as coloreadas en ella. $e entre los mtodos m-s com nes p ede destacarse la tili'aci%n del Iodo. 3ara ello la placa se introd ce en na c ,eta ! e contiene cristales con Iodo y se de2a estar en ella d rante nos min tos. <os "apores de iodo se dis el"en en las manc0as de los comp estos org-nicos tiBndolas de color marr%n.

+ ,nterpretacin( factor de retencin & f

*na "e' ! e la placa 0a sido re"elada nos encontramos con na serie de manc0as circ lares. Si la separaci%n 0a sido , ena cada na de ellas se corresponder- a n 4nico comp esto de la me'cla inicial.

Es importante tener en c enta ! e n mismo comp esto corre siempre de la misma forma en cromatogramas reali'ados en las mismas condiciones 6mismo soporte y mismo el yente;. 3ara descri,ir las propiedades cromatogr-ficas de cada comp esto se define el factor de retencin &f El factor #f es el cociente de la distancia recorrida por el comp esto 6dc; entre la distancia recorrida por el el yente 6de;. O,"iamente el &f toma "alores entre G.G y 7.G. Siempre 0a de indicarse el el yente y el soporte en el ! e se 0a determinado.

Rf =

dc de

5(CTO#ES >*E I)5<*KE) E) <( SE3(#(CI+) 3O# C#O.(TOA#(5=(: Polaridad <a mayor o menor "elocidad de despla'amiento a lo largo de la col mna depende directamente de la estr ct ra de cada molc la as como de los gr pos f ncionales ! e p eda poseer. El moti"o principal es s diferente polaridad. .olc las m-s polares ! edan m-s retenidas en la fa"e e"tacionaria, es decir Lcorren menosL, mientras ! e las molc las menos polares se "en menos retenidas y a"an'an a mayor "elocidad arrastradas por el yente. -leccin del elu.ente <a polaridad de la me'cla de disol"entes ? elu.ente ? tili'ado es cla"e para o,tener na , ena separaci%n. El yentes m-s polares arrastran m-s f-cilmente a los comp estos, es decir los comp estos Lcorren m-sL en el yentes m-s polares. 3or el contrario, me'clas de disol"entes con poca polaridad despla'an los comp estos a tra"s de la col mna con mayor lentit d. <a polaridad relati"a de los disol"entes m-s s ales se enc entra relacionada en na ta,la denominada Lserie el otr%picaL 6polaridad creciente de i'! ierda a derec0a;: 0e&ano, ciclo0e&ano, tol eno, ter, cloroformo, diclorometano, TD5, acetato de etilo, acetona, etanol, metanol, ag a. $e n e"o, es importante recordar ! e en la elecci%n adec ada de la me'cla de disol"entes radica el &ito de la separaci%n en la cromatografa de re"elado. <as placas de cromatografa comerciales portan n agente fl orescente inorg-nico en la fase estacionaria. Ello permite "is ali'ar el cromatograma il minando la placa con na l-mpara de l ' ltra"ioleta *V. <os diferentes comp estos aparecen en la placa como manc$a" circ lares. <as distintas manc0as 3or s simplicidad y rapide', la cromatografa de capa fina es na 0erramienta m y "aliosa en el an-lisis en el la,oratorio de ! mica org-nica. (lg nas de s s aplicaciones son: <a identificaci%n de comp estos conocidos en na me'cla por comparaci%n del cromatograma de la me'cla con el del comp esto conocido. <a determinaci%n del final de na reacci%n ! mica: la desaparici%n de la manc0a correspondiente al prod cto de partida indica la concl si%n de la reacci%n. Criterio de p re'a: la e&istencia de na o "arias manc0as en el cromatograma indica la presencia de no o "arios prod ctos.

M 3(#TE EN3E#I.E)T(<M /!T-&,!L C!0T,D! D 3lacas pOcromatografa 6portao,2etos; : .atraces erlenmeyer de 7G ml o 9 "iales C 3ipeta grad ada de 7G ml /!T-&,!L C!0T,D! D 3ro,eta de C9 ml 7 5rasco c-mara 9 (gitador de 7 "idrio P Capilares 7 Esp-t la

S1ST!0C,!S p?0idro&iacetanilida m? nitrocloro,enceno ,en'oina 0e&ano metanoletanol acetona

acetato de etilo yodo s lfato de an0idro nipagin nipasol

sodio

3#OCE$I.IE)TO:
E&perimento 7. 3olaridad de las s stancias. Es n e&perimento comparati"o en el ! e se desea sa,er c al s stancia es m-s polar y c al menos polar. 3ara ello se le proporcionar- a sted las sol ciones 7 y C. 3repara tres cromatoplacas y apli! e estas sol ciones en cada na de ellas. El ya la primera cromatoplaca con 0e&ano, la seg nda con (cOet y la tercera con .eOD. En cada caso, de2e e"aporar el el yente y re"ele con l ' ltra"ioleta, o,ser"e y anote s s res ltados, l ego re"ele con yodo, o,ser"e n e"amente E&perimento C. 3 re'a de las s stancias. Se desea sa,er c -l s stancia es p ra y c -l es imp ra. 3ara ello se le proporcionar- a sted las sol ciones J y P. 3repare na cromatoplaca y apli! e en ella am,as sol ciones por separado, como en el e&perimento anterior. El ya entonces con (cOEt. #e"ele con l ' *.V. y l ego con yodo. (note s s o,ser"aciones. E&perimento J.Infl encia de la concentraci%n. Se desea sa,er c -l es el efecto de la concentraci%n de na s stancia en c.c.f. 3ara ello se le proporcionar- a sted la sol ci%n 9. 3repare na cromatoplaca y en ella 0aga tres aplicaciones de esta sol ci%n en orden creciente de concentraci%n El ya entonces con (cOEt. #e"ele con l ' *.V. y l ego con yodo en cada caso o,ser"e la intensidad de la coloraci%n de las manc0as. Con ,ase en lo anterior, ded 'ca la relaci%n ! e e&iste entre la intensidad de la coloraci%n de las manc0as y la concentraci%n de la s stancia en cada caso. E&perimento P. <a c.c.f. como criterio parcial de identificaci%n. Se desea identificar los componentes de na me'cla, por medio de s comportamiento en c.c.f. y compar-ndolo con el de la s stancia est-ndar ,a2o las mismas condiciones e&perimentales. 3ara esto, se le proporcionar- a sted las sol ciones :( y :B. En este caso son sol ciones de nipagin y nipasol, respecti"amente. 3repare dos cromatoplacas y en am,as 0aga las sig ientes aplicaciones: sol ci%n, sol ci%n me'cla 67:7; de :Q y sol ci%n. < ego, el ya na de las cromatoplacas con (cOEt re"elando con l ' *.V. y l ego con yodo. <a otra cromatoplaca el4yala "arias "eces 6P por lo menos; con n el yente menos polar, por e2emplo na me'cla de 0e&ano?(cOEt 6P:7;, de2ando secar la placa entre na el ci%n y otra. O,ser"e la placa a la l ' *.V. desp s de la c arta el ci%n. Si desp s de la c arta el ci%n la me'cla no se separa, sig e el yendo 0asta lograr la separaci%n. 5inalmente re"ele con yodo.

#ES*<T($OS:
E&perimento 7. 3olaridad de las s stancias. El yentes:

a; .eOD

,; (cOet

c; De&ano

) e"a posici%n del comp esto a; 7C.R K C C.:

5rente del disol"ente: J.G

,; 7C.R y C C.9 c; 7 G.7 y C G.7

3osiciones relati"as de los p ntos:

C.R9 G.9

2.7 2.6 = 0.9; R f a 2 = = 0.8666 3.0 3.0 2.7 2.5 R f b1 = = 0.9818; R f b 2 = = 0.9091 2.75 2.75 0.1 0.1 R f c1 = = 0.2; R f c 2 = = 0.2 0.5 0.5 R f a1 =
Con ,ase en los res ltados o,tenidos, conteste: a. SC -l es el el yente adec adoT Spor ! T -l /etanol tiene una polaridad ma.or . como la" "u"tancia" tienen polaridade" "imilare" en un elu.ente ma" polar "e podr o#tener la "eparacin ma" notoria2 adem" de 3ue el di"ol*ente m" polar e" el 3ue arra"tra me4or a lo" componente" de la me'cla2 adem" de 3ue lo" me4ore" elu.ente" "on lo" 3ue tienen la po"icin relati*a media al "er comparado S C -l es la s stancia m-s polarT Spor ! T La % .a 3ue la "lica gel al "er polar ad"or#e al componente m" polar . fue el elu.ente 3ue alcan'o menor di"tancia SC -l es la s stancia menos polarT S3or ! T La 1 .a 3ue a*an'o a tra*5" de la "lica

,. c.

E&perimento C. 3 re'a de las s stancias. Se reali'% C "eces:

a; El yente: (cOet

,; El yente: De&anoO (cOet 6P:7;

) e"a posici%n del comp esto a; J C.R P C.R ,; J7.J P 7.9

5rente del disol"ente: J.G 7.8

SC -l es la s stancia p ra y c -l es la imp raT -l e6perimento como .a "e o#"er*o "e reali' % *ece"2 "in em#argo en ninguna de la" % mue"tra" "e o#"er*aron manc$a" adicionale"2 por lo 3ue "e le" con"iderara 7pura"82 pero como "a#emo" de anterioridad una de la" % "e encontra#a impura por lo cul "e con"idero 3ue el e6perimento no tu*o 56ito E&perimento J.Infl encia de la concentraci%n. El yente: (cOet

) e"a posici%n del comp esto 7AOT( M C.F JAOT(S M C.8 : AOT(SM C.8

5rente del disol"ente: J.7

E&perimento P. <a c.c.f. como criterio parcial de identificaci%n. . M :( U :B

a; El yente: (cOet

,; El yente: De&ano O(cOet 6F:C;

(cOet :Q . C.F C.C C.9 C.R ? ?

:B C.G C.F ?

De& O(cOet 6F:C; :Q . :B 7.F 7.8 7.F C.7 C.C C.C ? ? C.:

5rente del disol"ente J.7 C.F

$ISC*SI+) $E #ES*<T($OS: En el e&perimento 7 se determino la polaridad de las s stancias pro,lema y as mismo el el yente m-s adec ado sonde se o,ser"% ! e de las J placas el me2or el yente sera el metanol ya ! e es el disol"ente m-s polar y arrastra m-s f-cilmente a los comp estos y adem-s de ! e al 0acer la comparaci%n entre placas es el ! e ! ed% a la mitad. Esto en comparaci%n con el menos polar ! e f e el 0e&ano ya ! e este casi no arrastro a los componentes. K la s stancia m-s polar f e la C ya ! e a"an'% menos ya ! e la slica gel atrae a la s stancia m-s polar de,ido a ! e esta es m y polar y 0ace ! e el comp esto ! ede retenido en ella, adem-s de ! e las molc las m-s polares ! edan retenidas en la fase estacionaria, es decir, corren menos mientras ! e las molc las menos polares 6como la s stancia 7; se "en menos retenidas y a"an'an a mayor "elocidad arrastradas por el el yente. En el e&perimento C se pretenda determinar la p re'a de na de las C s stancias o,ser"ando la e&istencia de na o m-s manc0as en el cromatograma ! e indicara la presencia de no o "arios prod ctos indicando si se encontra,a n 4nico comp esto s p re'a, sin em,argo se reali'aron C pr e,as tili'ando distintos el yentes y en ning na de las C pr e,as se o,ser"o na manc0a adicional a n! e como ya sa,amos ! e de,era 0a,er salido na, y no salio, determinamos ! e el e&perimento no f e satisfactorio. El e&perimento J se reali'% na pr e,a de c%mo infl ye la concentraci%n en la pigmentaci%n ya ! e el comp esto m-s concentrado se 0ace m-s grande y se aprecia me2or ! e en este caso f e el tercero ! e contena : gotas de la s stancia y f e el ! e se o,ser"% la manc0a m-s grande. 3ara el e&perimento P se reali'aron J el siones repetiti"as para separar las me'clas de el yentes de ,a2a polaridad, o,ser"ando como conforme a"an'a,a la reacci%n las manc0as ya no aparecan indicando as la concl si%n de la reacci%n y agotando as al prod cto. 3ara el el yente (cOet solo se o,ser"aron C capas de manc0as, por lo ! e en la tercer el ci%n ya se 0a,a agotado el prod cto. 3ara el De& O(cOet solo en la s stancia :B se o,ser"% na tercera capa ya ! e en esta a4n no se 0a,a agotado la reacci%n y por lo tanto la s stancia.
C*ESTIO)(#IO: 7. En el e&perimento 7, SC -l de las s stancias, la m-s polar o la menos polar, recorre mayor distancia en la placa a partir del p nto de aplicaci%nT S3or ! T La meno" polar recorre ma.or di"tancia de#ido a

3ue el elu.ente utili'ado la arra"tro a ma.or *elocidad de#ido a 3ue e" meno" polar . fue de"pla'ada por la fa"e m*il . no "e 3uedo retenida en la fa"e e"tacionaria C. En el mismo e&perimento calc le los "alores de #.f. y contestar SC -l de las dos s stancias tiene #.f.mayor y c -l menorT &f ma.or( la 1 . &f menor la % a) &f "u"tancia 1 9 : ; &f "u"tancia % 9 : <=== #) &f "u"tancia 1 9 : ;<1< &f "u"tancia % 9 : ;:;1 c) &f "u"tancia 1 9 : % &f "u"tancia % 9 : % J. En el e&perimento J SC -l es la relaci%n ! e e&iste entre la concentraci%n y la intensidad de la coloraci%n de la manc0a de na s stancia en na c.c.f.T /ientra" ma" concentrada "ea la "olucin ma.or "er la inten"idad de la manc$a . m" grande "er e"ta e" decir e" directamente proporcional P. En el e&perimento P, SC -l de las dos formas de el si%n permiti% mayor separaci%n de la me'claT, S( ! se de,e estoT. -n la concentracin => con !c de -tilo?@e6ano "e logro o#tener una me4or o#"er*acin de la" tre" fa"e" de#ido a 3ue el di"ol*ente me'clado di"ol*i cada una de la" fa"e" por "eparado .a 3ue con un mi"mo di"ol*ente "olo "e logro *i"uali'ar una fa"e de#ido a la" polaridade" de la" "u"tancia" 9. S3or ! la c.c.f. es n criterio parcial y no total de identificaci%nT Por 3ue la c c f "olo indica la cantidad de "u"tancia" 3ue "e encuentran en la mue"tra inicial2 o "u" impure'a"2 adem" de de indicarno" la polaridad de dic$a" "u"tancia" 4unto con nue"tro elu.ente demo"traremo" "i "e trata de "u"tancia" mu. "imilare" en cuanto a "u" propiedade" :. SC -l ser- el res ltado de los sig ientes errores en cromatografa en capa finaT a; (plicaci%n de sol ci%n m y concentrada: La mue"tra "e mo"trara con ma.or coloracin a la $ora de o#tener lo" re"ultado" de la cromatografa e" por e"o 3ue de#emo" tener una mue"tra con una concentracin media para 3ue "ea *i"i#le pero no dema"iado como para 3ue no podamo" di"tinguir "u" fa"e" ,; *tili'ar el yentes de alta polaridad: La polaridad del elu.ente no" indica el de"pla'amiento 3ue nue"tra" mue"tra" pueden alcan'ar en la placa de e"tudio ("lica gel) e" por e"o tam#i5n 3ue de#emo" cuidar el elu.ente para poder anali'ar correctamente nue"tra mue"tra c; Emplear na gran cantidad de el yente en la c-mara de cromatografa: e"to pro*ocara 3ue nue"tra mue"tra "e dilu.a dema"iado lo 3ue generara un error con"iderando el tamaAo de nue"tra placa de#emo" con"iderar una cantidad moderada para e*itar el de"pla'amiento innece"ario de la mue"tra R. *na serie de colorantes es separada por cromatografa en capa fina. Calc lar los "alores de #f de cada colorante de ac erdo a la sig iente ta,la. Colorantes $istancia recorrida por el colorante $istancia recorrida por el el yente 6mm; 6mm; #o2o de 9:.G RG metilo #odamina JF.G :9 #o2o Congo G.9 RC #f &o4o de /etilo :< &odamina : B<+= &o4o Congo : ::=; F. S> tratamiento es necesario darle a la slica gel para re tili'arlaT La "ilica gel (Di6ido de Silicio) tiene la propiedad de a#"or#er la" $umedad o la" "u"tancia" me4or conocido como de"$idratador e" por e"o 3ue e" nece"ario "ometerlo a un calentamiento para 3ue e"te e6pul"e la $umedad 3ue "e encuentra dentro de e"to . a" utili'arlo nue*amente

CO)C<*SIO)ES: En esta pr-ctica logramos conocer y aplicar la cromatografa por capa fina, s s caractersticas y los factores ! e infl yen en la separaci%n por cromatografa, adem-s de aprender a calc lar los "alores del factor de retenci%n de las s stancias para poder ded cir la relaci%n ! e e&iste entre la polaridad de las s stancias ! e se anali'an con la de los el yentes ! e se tili'an con ellas y as mismo poder aplicar n criterio para identificar la p re'a de s stancias de ac erdo con la pigmentaci%n 6es; ! e estas presenten al reali'ar la cromatografa. BIB<IOA#(5=(:
0ttp:OO111. prm.ed O,iologyOprofsO"ele'Ocromatografias.0tm68OoctOCGG:; 0ttp:OO111.f!. 0.c OdptoO!iO(imeeOsintesisVinorV1e,OconfVJ.0tm 6CFOagoOCGG:;

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