Clase 6: Homeostasis y tolerancia

Modelos de tolerancia inmunológica

Modelo de rechazo al trasplante (experimento con ratones)

• El trasplante de piel de un ratón A a uno B: existe un período de latencia, pareciera no ser

rechazado
• Al cabo de algunos días, linfocitos activados del ratón B infiltran al trasplante, se vuelve
necrótico y es destruido
• Cuando se realiza un segundo trasplante del donante A al mismo huésped B, los tiempos d
respuesta inmunitaria se aceleran y el rechazo ocurre en un tiempo de 6 a 10 días. Es un rechazo
acelerado, implica que la respuesta inmunitaria del huésped B recuerda la estimulación previa
por los Ag del ratón A
• El rechazo acelerado podría ser inducido en un ratón B si este ratón recibía linfocitos obtenidos
en un segundo ratón B que previamente había sido trasplantado con piel del ratón A

Modelo de tolerancia natural (experimento con vacas)

• A pesar de las diferencias antigénicas, las vacas mellizas no rechazan las células de sus
hermanas en la vida intrauterina ni en la vida adulta
• Adultas, las vacas podían recibir injertos de piel de su hermana melliza sin generar una reacción
de rechazo. Esta reacción de rechazo sí se generaba cuando cualquiera de las dos vacas mellizas
recibía injertos de piel provenientes de una 3er vaca

Modelo de tolerancia adquirida (experimento con ratones)

• Inyectaron a un ratón, antes del nacimiento, linfocitos alogénicos; el ratón pudo luego aceptar un
trasplante del piel de la cepa de la cual provenían los linfocitos inyectados

Células T regulatorias (Treg)

a) Células Tr1
b) Células Th3
c) Células CD4+ CD25+ FOXP3+ o células Treg
• Las células Treg cumplen el papel central en la regulación de la respuesta hacia los Ag’s propios.
Capacidad de inhibir la activación de la respuesta proliferativa mediada por linfocitos T,
linfocitos B y células dendríticas
• Tr1: capacidad supresora es mediada a través de la producción de IL-10
• Th3: capacidad supresora es mediada a través de la producción de TGF-β
• Las células Tr1 y Th3 no expresan FOXP3. Se diferencian en Tr1 y Th3 linfocitos T CD4+
naive. Se originan en la periferia por activación de células T CD4+ naive CD25-, las células Treg
adquieren su fenotipo regulador en el timo o en la periferia

Células Treg (T CD4+ CD25+ FOXP3+)

• CD25 es la cadena α del receptor de alta afinidad de la IL-2

• FOXP3 es el gen regulador del linaje Treg en los ratones, luego también confirmado como
marcador propio de las células Treg humano
• La eliminación de las células Treg no solo conduce a la autoinmunidad, sino además a la
exacerbación de la respuesta inmunitaria dirigida hacia Ag tumorales y microbianos
 • Los animales portadores de tumores suelen tener un exceso de célula Treg, lo que limita el
desarrollo de la respuesta inmunitaria antitumoral. En estos animales, la eliminación de
células Treg permitirá la inmunidad frente al tumor
• La depleción de células Treg en animales portadores de infecciones crónicas suele dar lugar a un
aumento de la inmunidad antimicrobiana que se acompaña de un mayor control de la infección
• La transferencia de células Treg a ratones normales ha mostrado mediar la supresión de
reacciones alérgicas, la adquisición de tolerancia frente a trasplantes de órganos y la prevención
de la enfermedad de injerto contra el huésped luego de un trasplante de médula ósea
• Papel de células Treg en reproducción humana: tanto la madre como el feto controlan la
respuesta inmunitaria antipaterna o antimaterna a través de la expresión de células Treg

Origen tímico de las células Treg

• La timectomía neonatal suprime la producción de estas células, lo que indica que son
producidas naturalmente por este órgano
• Requieren un microambiente similar al involucrado en la ontogenia de las células T
convencionales. Esto incluye las células epiteliales tímicas corticales y medulares y las células
dendríticas
• Interacciones de alta afinidad entre el TCR de las células Treg y el complejo péptido –
CMH presentando por las células estromales tímicas
• Necesaria presencia de los corpúsculos de Hassal, que secretan linfopoyetina estromal tímica
que activa las células dendríticas inmaduras y migrantes presentes en el timo, aumentando la
expresión de moléculas coestimulatorias
• El timo humano produce células T maduras ya en la 13 va semana de gestación

El factor de transcripción FOXP3 controla el desarrollo y la funcionalidad de las células Treg

• Papel crítico en el desarrollo y funcionalidad de las células Treg

• La mutación del gen FOXP3 causa la enfermedad autoinmune IPEX
• El ARN mensajero de FOXP3 se expresa solo en las células T CD4+ CD25+, presentes tanto en
el timo como en la periferia
• Dota a estas células de una funcionalidad reguladora similar a la de las células Treg naturales y
les permite suprimir las respuestas de las células T efectoras in vitro y prevenir el
desarrollo de enfermedades autoinmunes in vivo
• Induce el aumento en la expresión de CD25 y CTLA-4
• Una pequeña proporción de células T CD4+; CD25 - pueden comenzar a expresar FOXP3 luego
de activarse

Marcadores de células Treg

 • Las células Treg tienen una respuesta proliferativa y aumentan la expresión de FOXP3
• Mueren a los pocos días de activación
• La capacidad de autorrenovarse (proliferación homeostática) podría también contribuir al
mantenimiento del pool de células Treg
• La expresión de CD39 permite diferenciar dos poblaciones Treg. Ambas poblaciones pueden
suprimir la respuesta proliferativa a la producción de IFN-γ por las células T activadas. Sin
embargo, solo las células Treg CD39+ manifiestan la capacidad de suprimir la producción de IL-
17 por las células Th17

IL-2 cumple un papel crítico en el mantenimiento de las células Treg

• El número de FOXP3+ se encuentra bajo en ratones que carecen de CD25+ o IL-2

• La deficiencia de Stat5a y b, que es el mediador de la señal entre la cadena β del IL-2R y el
núcleo celular, inhibe el desarrollo de las células Treg
• La administración de un anticuerpo anti-IL-2 a ratones recién nacidos disminuye el número de
células Treg y compromete su capacidad supresora
• IL-2 es vital e irremplazable para el desarrollo, la supervivencia y la funcionalidad de las
células Treg

Tráfico y localización de las células Treg

• Las células Treg se localizan en los ganglios linfáticos y también en los tejidos periféricos
• Expresan CCR7 y L-selectina
• Además:
a) CCR4
b) CCR5
c) CCR6
d) CCR8
e) CXCR4
f) CXCR5
• Diferentes subpoblaciones de células Treg expresan distintos patrones de receptores y moléculas
de adhesión y por lo tanto, presentarán patrones de migración distintos
• Treg CCR5+: lesiones cutáneas infectadas por el parásito Leishmania major
• Treg CCR6+: se acumulan en forma preferencial en las articulaciones inflamadas en modelos de
artritis reumatoidea

Activación, proliferación y diferenciación de células Treg

• La activación de las células Treg suele requerir concentraciones de Ag mucho menores que las
requeridas para activar las células T naive convencionales
• Las células Treg podrán ser activadas por las células dendríticas inmaduras, cuyos niveles de
expresión de moléculas coestimulatorias (CD80/CD86) y moléculas de clase II son muy bajos
• El hecho de ser más fácilmente activadas contribuye al efecto supresor dominante que ejercen
las células Treg sobre las células autorreactivas y, en consecuencia, a la prevención de la
autoinmunidad
• Las células Treg pueden expandirse clonalmente en respuesta a la estimulación antigénica,
manteniendo su funcionalidad supresora. En ocasiones, se expanden por activación de los TLR
2, 4, 5 y 8

Mecanismos de acción de las células Treg

• Inhiben la activación, la expansión clonal, la producción de citocinas y la diferenciación en

células efectoras de los linfocitos T y B, células NK, macrófagos y células dendríticas
 • Sufren un proceso de cebamiento con su Ag específico en el timo, con lo cual migran
funcionalmente maduras a la periferia
• Son competentes para ejercer su función supresora y prevenir las enfermedades autoinmunes

I. Mecanismo que requiere el contacto físico entre las células Treg y las células dendríticas o los
linfocitos T respondedores

• FOXP3 representa un elemento central. Su expresión es suficiente para conferir actividad

supresora a las células T
• FOXP3 ha demostrado controlar en forma directa a los genes que codifican CTLA-4 y CD25
• CTLA-4, una proteína central en la actividad supresora de la célula Treg
• CTLA4, expresada (constitutivamente) por las células Treg, con las moléculas CD80 / CD86,
expresadas por las células dendríticas inmaduras o maduras, disminuye la expresión de CD80 /
CD86
• La interacción de CTLA-4 – CD80 / CD86 induce la síntesis dela enzima IDO, que ejerce un
potente efecto inmunosupresor sobre la respuesta T
• Por último, promueve la apoptosis de las células dendríticas. Es importante destacar que el
bloqueo de la moléculas CTLA-4 en las células Treg disminuye en forma notable su capacidad
supresora
• En ciertos contextos, las células Treg han matado células dendríticas a través de un mecanismo
citotóxico mediado por granzimas y perforinas
• Las células Treg incrementan los niveles de AMPc en las células T respondedoras, inhibiendo su
expansión y producción de IL-2

II. Mecanismo mediado por factores solubles

• FOXP3 promueve un aumento en la expresión de CD25+ en las células Treg, a la vez que
reprime la de IL-2
• Capacidad de capturar IL-2 y de inhibir su producción, modifican su entorno inmediato
transformándolo en un entorno muy pobre de IL-2. Así suprimen la expansión clonal T
• IL-10, TGF-β, galectina-1
• IL-10 restringe en mucosa intestinal
• TGF-β restringe en distintas localizaciones. Puede estar como citocina secretada o en la
superficie de la célula Treg
• Galectina-1 inhibe la expansión clonal T y promueve la apoptosis de células T respondedoras

Resolución del proceso inflamatorio

Dos mecanismos:

• Suprimir el influjo de neutrófilos

• Eliminar neutrófilos ya reclutados

En ambos casos, la fagocitosis de neutrófilos apoptóticos por los macrófagos tisulares parece desempeñar
un papel central

Luego de extravasarse, mueren a las pocas horas por un mecanismo apoptótico. La apoptosis de los
neutrófilos cumple un papel fundamental en la resolución del proceso inflamatorio

En primer lugar

• Los neutrófilos mantienen la integridad de la membrana celular y evitan así que las distintas
moléculas con capacidad citotóxica contenidas en sus gránulos se liberen al medio extracelular
En segundo lugar

• Los neutrófilos apoptóticos expresan tempranamente en su membrana la molécula

fosfatidilserina. Este permite su rápida fagocitosis por los macrófagos, que expresan una batería
de receptores especializados en su reconocimiento

En tercer lugar

• La fagocitosis de células apoptóticas suprime, en el macrófago, la producción de citocinas y

quimiocinas inflamatorias, y promueve la producción de dos citocinas antiinflamatorias: el TGF-
β e IL-10, que contribuyen a silenciar la producción de mediadores antiinflamatorios

Distintos tipos celulares como neutrófilos, monocitos y células endoteliales producen PGD 2, lipoxinas y
resolvinas que contribuyen a la resolución

Regulación del Complemento

Mecanismos de acción de las proteínas reguladoras de la actividad del complemento

Regulador Modo de acción

Inhibidor de C1 Se une a C1r y C1s activados, inhibe la actividad
proteasa de C1s
Proteína de unión a C4 (C4BP) Se une a C4b y bloquea la formación de la
convertasa de C3 de la vía clásica. Promueve la
escición e inactivación de C3b por el factor I
Factor H Se une a C3b y bloquea la formación de la
convertasa de C3 de la vía alterna. Promueve la
escición e inactivación de C3b por el factor I
Factor I Serinoproteasa que esciende e inactiva C4b y C3b.
A tal efecto, requiere como cofactor C4BP, el
factor H, C1R o MCP
Proteína S Se une al complejo C5bC6C7 y priva su inserción
en la membrana de la célula diana y la progresión
del complejo de ataque lítico
Clusterina Símil proteína S
Inactivador de anafilotoxinas Esciende los residuos arginina terminales de C3a y
C5a, reduciendo 100 a 1000 veces su actividad
biológica